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一.A1.1mL200ul、l在0.1%DEPC2.配制C水C水l雙蒸水lC入℃3.配制C水配置入℃4.醇℃注意:C的%C二、提取1.有1mlTrizol的l無(wú)菌無(wú)酶置n入l預(yù)冷的l勻,靜置n。2.的lP入l蕩n置n(℃n)3.(中層白(下層紅。酶Pl。4.加入等體積的異丙醇(l,混勻,用力震蕩,冰上靜置n,離心g4,n)5.入l%心g4℃n)6.重復(fù)步驟5洗滌7.內(nèi)P使8.根據(jù)A量C,l9.測(cè)定A濃度三、A電泳鑒定A很容易講解使A標(biāo)準(zhǔn)的A電泳圖用a試劑盒在1.組A反應(yīng)數(shù)+2制MasterMix試劑使用量5Ar試劑使用量5Arr 0A0l*1eepo0:24℃*1:0μl反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系中,BGreenR法最多可使用1μg的,探針qPCR分析法用2μg的lA。2.試劑使用量步驟10tTexI0試劑使用量步驟10tTexI0Tr05×tr2(rle)0r10μlee00*2:℃58℃5℃*2注意有Al加A量相同有AA于℃度保存。成M在R℃保存。的A做普通R,R普通R試劑使用量2×5℃ dr(10M)0.4℃ er(0M)0.4℃ c A模板1℃ dd2O3.2℃ 104℃配制21g瓊脂糖粉+lE1×)微波爐內(nèi)加熱至完全溶解,加入l染料搖勻,倒入制膠板內(nèi)冷卻凝固(20-點(diǎn)樣R加Agr,點(diǎn)樣前)電泳n左右成像據(jù)Ar用a試劑盒在應(yīng)用0m法:a——A模板0)*2110試劑使用量終濃度BA模板0)*2110試劑使用量終濃度BnxxqI(iHs2)51×Rdr(10)0.441Rer(10)0.441滅菌水3.2預(yù)混液*1通常引物終濃度為0.4μM可以得到較好結(jié)果。反應(yīng)性能較差時(shí),可以在0.11.0M*2在0l,A在0g類的A適的A2.進(jìn)行l(wèi)eR反應(yīng)。法R行R預(yù)變性℃ 0秒鐘(pe/秒)1R℃ 5秒鐘pe/秒)℃ 30鐘pe/秒,ne:0℃ 5秒鐘pe/秒)℃ 1分鐘pe/秒)℃pRate0.11℃/秒,AcquisitionMode:Continuous,Acquisitions:51降溫℃ 30鐘pe/秒)1認(rèn)leR

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