高效液相色譜分析操作條件選擇

高效液相色譜儀操作條件選擇組員：魏鵬翔、崔建哲、張龍、韓守印、李淼、孫磊。指導(dǎo)教師：姜洪文2021/5/91目錄實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理儀器與試劑實(shí)驗(yàn)步驟儀器清洗（結(jié)束工作）2021/5/92一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆丈V分析的原理掌握高效液相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)和工作原理掌握SY-8100高效液相色譜儀的基本操作步驟掌握HPLC條件試驗(yàn)的方法以及分離條件的確定2021/5/93二、實(shí)驗(yàn)原理本次實(shí)驗(yàn)采用ODS-C18色譜柱，以甲醇+水混合液為流動(dòng)相，根據(jù)混合物中萘、聯(lián)苯和菲在固定相與流動(dòng)相間分配性質(zhì)的不同，進(jìn)行分離。不同比例的甲醇+水混合液為流動(dòng)相，流動(dòng)相的極性發(fā)生改變，因此混合液的分離條件也發(fā)生了改變，選擇能將混合液中各組分能充分分離并且相對(duì)分析時(shí)間短的條件，綜合確定HPLC法分析萘、聯(lián)苯、菲的分析條件，完成對(duì)混合液的分析。檢測(cè)器采用紫外分光（UV）檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。2021/5/94三、儀器與試劑儀器：

SY-8100高效液相色譜儀 1臺(tái)

KQ-50B超聲波清洗器 1臺(tái)

AP-01P真空泵 1臺(tái)過濾裝置 1套微量注射器 50μL 1支容量瓶 50mL 7只藥品：萘（G.R.）、聯(lián)苯（G.R.）、菲（G.R.）、甲醇（G.R.）、二次蒸餾水2021/5/95四、實(shí)驗(yàn)步驟流動(dòng)相的準(zhǔn)備1、流動(dòng)相的過濾安裝抽濾裝置，選用有機(jī)相過濾膜，過濾試劑甲醇；選用無機(jī)相過濾膜，過濾二次蒸餾水。2021/5/962、流動(dòng)相的脫氣

將盛有過濾好甲醇、二次蒸餾水的試劑瓶分別放于超聲波清洗器中，進(jìn)行脫氣處理。2021/5/97儀器的準(zhǔn)備1、更換流動(dòng)相將A泵的輸液管放入處理好的甲醇試劑瓶中；B泵的輸液管放入處理好的二次蒸餾水試劑瓶中。2、分別排除A、B兩個(gè)泵輸液管中的氣泡2021/5/983、開啟高壓泵A、高壓泵B、UV檢測(cè)器、混合器的電源，打開工作站

2021/5/99分析步驟1、分別設(shè)置兩個(gè)高壓泵的流量，使總流量為F＝1.00mL/min，分別啟動(dòng)兩泵2021/5/9102、待基線穩(wěn)定后，完成標(biāo)樣的分析，記錄分析所獲得的各組分的保留時(shí)間、理論塔板數(shù)、分離度。數(shù)據(jù)填表3、選擇最佳流動(dòng)相配比，調(diào)整A、B兩泵的流量。待基線穩(wěn)定后吸取標(biāo)樣，完成分析后建立組分表，再完成試樣的分析，測(cè)得試樣中萘、聯(lián)苯和菲的含量，完成實(shí)驗(yàn)2021/5/911實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

保留時(shí)間分離度理論塔板次數(shù)萘聯(lián)苯菲萘聯(lián)苯菲萘聯(lián)苯菲2021/5/912五、儀器的清理（結(jié)束工作）更換流動(dòng)相將流動(dòng)相重新更換為處理過的甲醇，以利于色譜柱的保護(hù)。清洗“進(jìn)樣閥”用適量的甲醇清洗進(jìn)樣器、進(jìn)樣閥，以避免樣品組分的殘留。2021/5/913THEENDTHANKSPPT模板下載：/moban/行業(yè)PPT模板：/hangye/節(jié)日PPT模板：/jieri/PPT素材下載：/sucai/PPT背景圖片：/beijing/PPT圖表下載：/tubiao/優(yōu)秀PPT下載：/xiazai/PPT教程：/powerpoint/Word教程：/word/Excel教程：/excel/資料下載：/ziliao/PPT課件下載：/k