載亞硝基脲的多功能納米載體的構(gòu)建及其評(píng)價(jià)

背景介紹卡莫司?。˙CNU）是臨床上重要的抗腫瘤烷化劑，但由于腫瘤細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)的O6-烷基鳥嘌呤-DNA烷基轉(zhuǎn)移酶（AGT）介導(dǎo)的耐藥性，其抗癌效果被大大降低。臨床上常將AGT抑制劑與BCNU聯(lián)合使用來(lái)提高腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性。然而，BCNU和AGT抑制劑均不具備腫瘤靶向性，往往導(dǎo)致藥物對(duì)正常細(xì)胞的毒性增強(qiáng)，從而產(chǎn)生明顯的毒副作用。因此，開發(fā)同時(shí)具備腫瘤細(xì)胞抑制能力、抗耐藥活性和腫瘤靶向性的新型亞硝基脲類化合物，成為亟待解決的問(wèn)題。納米藥物遞送系統(tǒng)在改善藥物水溶性、提高靶向性和降低毒副作用高等方面表現(xiàn)出巨大潛力，因此，本研究合成了一種葉酸修飾的抗耐藥低氧激活納米載體，用于BCNU的靶向遞送。文章亮點(diǎn)1.

本文設(shè)計(jì)合成了一種具有低氧響應(yīng)性、抗耐藥性和葉酸受體靶向性的納米藥物遞送系統(tǒng)FA-PEG-AZO-BGNPs；2.

該納米載體具有合適的粒徑、良好的穩(wěn)定性和還原敏感性，可實(shí)現(xiàn)BCNU的有效包載及遞送，克服了傳統(tǒng)BCNU耐藥性強(qiáng)、水溶性差和半衰期短等弊端；3.

該納米載體不僅可對(duì)BCNU高效包載和低氧響應(yīng)釋放；而且實(shí)現(xiàn)了藥物的靶向遞送，能夠有效抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，具有良好的低氧選擇性和抗腫瘤活性；4.

本研究將為新型亞硝基脲和抗腫瘤納米藥物的開發(fā)提供思路。內(nèi)容介紹1

實(shí)驗(yàn)部分1.1

主要儀器與試劑1.2

實(shí)驗(yàn)方法1.2.1

載BCNU的FA修飾抗耐藥低氧激活納米遞送系統(tǒng)（FA-PEG-AZO-BG/BCNUNPs）的合成路線及方法1.2.2

FA-PEG-AZO-BG/BCNUNPs的理化性質(zhì)表征2

結(jié)果與討論2.1

化合物D和E的結(jié)構(gòu)表征通過(guò)1HNMR、IR及UV-Vis對(duì)化合物D和化合物E的結(jié)構(gòu)確證，表明FA、NH2-PEG-COOH和化合物C通過(guò)酰胺化反應(yīng)，成功合成化合物E。2.2

理化性質(zhì)表征2.2.1

粒徑、形貌和穩(wěn)定性表征FA-PEG-AZO-BGNPs呈球形結(jié)構(gòu)，納米載體在H2O、PBS和含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中的粒徑均無(wú)明顯變化，說(shuō)明FA-PEG-AZO-BGNPs具有較好的穩(wěn)定性。2.2.2

低氧響應(yīng)性表征2.2.3

包封率和載藥量測(cè)定納米載體可實(shí)現(xiàn)藥物的有效包載，并且在不同投料比下，F(xiàn)A-PEG-AZO-BG/BCNUNPs對(duì)BCNU的包封率先上升后下降，載藥量呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，進(jìn)一步觀察發(fā)現(xiàn)，當(dāng)投料比為2:10時(shí)，藥物的包封率和載藥量均較高，分別為59.56%和17.18%，故后續(xù)實(shí)驗(yàn)選用此藥物投料比進(jìn)行BCNU的包載。3

結(jié)論本文設(shè)計(jì)合成了一種具有低氧響應(yīng)性、抗耐藥性和FR靶向性的納米藥物遞送系統(tǒng)FA-PEG-AZO-BGNPs。該納米載體具有合適的粒徑、良好的穩(wěn)定性和還原敏感性，可實(shí)現(xiàn)BCNU的有效包載及遞送，克服了傳統(tǒng)BCNU耐藥性強(qiáng)、水溶性差和半衰期短等弊端。FA-PEG-AZO-BG/BCNUNPs的載藥能力和釋藥行為評(píng)估實(shí)驗(yàn)證明該納米載體可對(duì)BCNU高效包載和低氧響應(yīng)釋放；細(xì)胞攝取、細(xì)胞毒性、克隆形成和劃痕實(shí)驗(yàn)表明FA-PEG-AZO-BG/BCNUNPs可實(shí)現(xiàn)藥物的靶向遞送和有