土壤銨態(tài)氮的測定

第第頁土壤銨態(tài)氮的測定土壤銨態(tài)氮的測定4.4.3.12mol·L—1KCl浸提—蒸餾法4.4.3.1.1方法原理用2mol·L—1KCl浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。取一份浸出液在半微量定氮蒸餾器中加MgO（MgO是弱堿，有防止浸出液中酰銨有機(jī)氮水解的可能）蒸餾。蒸出的氨以H3BO3汲取，用標(biāo)準(zhǔn)酸溶液滴定，計(jì)算土壤中的NH4+—N含量。4.4.3.1.2重要儀器振蕩器、半微量定氮蒸餾器、半微量滴定管（5mL）。4.4.3.1.3試劑（1）20g·L—1硼酸—指示劑。20gH3BO3（化學(xué)純）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑5mL并用稀酸或稀堿調(diào)整至微紫紅色，此時該溶液的pH為4.8、指示劑用前與硼酸混合，此試劑宜現(xiàn)配，不宜久放。（2）0.005mol·L—11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液。量取H2SO4（化學(xué)純）2.83mL，加蒸餾水稀釋至5000mL，然后用標(biāo)準(zhǔn)堿或硼酸標(biāo)定之，此為0.0200mol·L—1（1/2H2SO4）標(biāo)準(zhǔn)溶液，再將此標(biāo)準(zhǔn)液精準(zhǔn)地稀釋4倍，即得0.005mol·L—11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液（注1）。（3）2mol·L—1KCl溶液稱KCl（化學(xué)純）14901g溶解于1L水中。（4）120g·L–1MgO懸濁液MgO12g經(jīng)500～600℃灼燒2h，冷卻，放入100mL水中搖勻。4.4.3.1.4操作步驟取新鮮土樣10.0g（注2），放入100mL三角瓶中，加入2mol·L—1KCl溶液50.0mL。用橡皮塞塞緊，振蕩30min，立刻過濾于50mL三角瓶中（假如土壤NH4+—N含量低，可將液土比改為2.5:1）。吸取濾液25.0mL（含NH4+—N25μg以上）放入半微量定氮蒸餾器中，用少量水沖洗，先把盛有20g·L–1硼酸溶液5mL的三角瓶放在冷凝管下，然后再加120g·L–1MgO懸濁液10mL于蒸餾室蒸餾，待蒸出液達(dá)30～40mL時（約10min）停止蒸餾，用少量水沖洗冷凝管，取下三角瓶，用0.005mol·L—11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液滴至紫紅色為盡頭，同時做空白試驗(yàn)。4.4.3.1.5結(jié)果計(jì)算土壤中銨態(tài)氮NH4+—（N）含量（mg·kg—1）=式中：c——0.005mol·L—11/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度；V——樣品滴定硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（mL）；V0——空白滴定硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（mL）；14.0——氮的原子摩爾質(zhì)量（g·mol—1）；ts——分取倍數(shù)；103——“換算系數(shù)”（包括mL換算為L，10—3；g換算為mg，103；換算為kg，103）；m——烘干樣品質(zhì)量（g）。4.4.3.22mol·L—1KCl浸提—靛酚藍(lán)比色法4.4.3.2.1方法原理2mol·L—1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。土壤浸提液中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.05～0.5mol·L—1的范圍內(nèi)，吸光度與銨態(tài)氮含量成正比，可用比色法測定。4.4.3.2.2試劑（1）2mol·L—1KCl溶液稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學(xué)純）溶于水中，稀釋至1L。（2）苯酚溶液稱取苯酚（C6H5OH，化學(xué)純）10g和硝基鐵氰化鈉[Na2Fe（CN）5NO2H2O]100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（3）次氯酸鈉堿性溶液稱取氫氧化鈉（化學(xué)純）10g、磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O,化學(xué)純）7.06g、磷酸鈉（Na3PO4·12H2O,化學(xué)純）31.8g和52.5g·L—1次氯酸鈉（NaOCl，化學(xué)純，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀釋至1L，貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（4）掩蔽劑將400g·L—1的酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O,化學(xué)純）與100g·L—1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10mol·L—1氫氧化鈉0.5mL。（5）2.5μg·mL–1銨態(tài)氮（NH4+—N）標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取干燥的硫酸銨[（NH4）2SO4，分析純]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制備成含銨態(tài)氮（N）100μg·mL–1的貯存溶液；使用前將其加水稀釋40倍，即配制成含銨態(tài)氮（N）2.5μg·mL–1的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。4.4.3.2.3儀器與設(shè)備往復(fù)式振蕩機(jī)、分光光度計(jì)。4.4.3.2.4分析步驟（1）浸提稱取相當(dāng)于20.00g干土的新鮮土樣（若是風(fēng)干土，過10號篩）精準(zhǔn)到0.01g，置于200mL三角瓶中，加入氯化鉀溶液100mL，塞緊塞子，在振蕩機(jī)上振蕩1h。取出靜置，待土壤—氯化鉀懸濁液澄清后，吸取肯定量上層清液進(jìn)行分析。假如不能在24h內(nèi)進(jìn)行，用濾紙過濾懸濁液，將濾液儲存在冰箱中備用。（2）比色吸取土壤浸出液2mL～10mL（含NH4+—N2μg～25μg）放入50mL容量瓶中，用氯化鉀溶液補(bǔ)充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL，搖勻。在20℃左右的室溫下放置1h后（注1），加掩蔽劑1mL以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波優(yōu)點(diǎn)（或紅色濾光片）進(jìn)行比色，讀取吸光度。（3）工作曲線分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mLNH4+—N標(biāo)準(zhǔn)液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化鈉溶液，同（2）步驟進(jìn)行比色測定。4.4.3.2.5結(jié)果計(jì)算土壤中NH4+—（N）含量（mg·kg—1）=式中：ρ——顯色液銨