驢駒大腸桿菌病防治技術規(guī)程-地方標準編制說明

1《驢駒大腸桿菌病防治技術規(guī)程》編制說明一、工作簡況（一）任務來源本標準根據(jù)山東省市場監(jiān)督管理局2020年下達的《全省標準化創(chuàng)新發(fā)展項目計劃的通知》立項，魯市監(jiān)標函本標準由山東省畜牧業(yè)標準化技術委員會歸口。承擔此項地方標準制定的團隊成員均為從事驢等大動物疫病防控的權威科研人員和基層從業(yè)人員，對全省規(guī)?；H場的疫病情況比較熟悉。同時，也積累了可靠的數(shù)據(jù)和具有實際應用價值的技術經(jīng)驗，為此標準的制定奠定了基礎。（二）起草單位、起草人及任務分工（1）起草單位聊城大學、聊城市東昌府區(qū)畜牧獸醫(yī)事業(yè)發(fā)展中心、山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院、中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所、陽信縣畜牧獸醫(yī)管理服務中心、青島農(nóng)業(yè)大學、聊城市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法支隊、山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學院、北京美萊博醫(yī)學科技有限公司、山東灼華生物技術有限公司、東阿阿膠股份有限公司、聊城職業(yè)技術學院和禹城惠民農(nóng)業(yè)科技有限公司等單位協(xié)作完成。2（2）起草人及任務分工1234567893（三）起草過程2021年1月-12月，聊城大學、聊城市畜牧獸醫(yī)主管部門和東阿阿膠股份有限公司等單位聯(lián)合開展了規(guī)模化驢場主要疫病的診斷、治療與預防攻關項目。承擔此項標準制定的團隊，根據(jù)規(guī)模化驢場驢駒大腸桿菌病發(fā)生的實際情況，按照預防為主、生物安全優(yōu)先的原則，總結(jié)和借鑒了國內(nèi)外禽、牛、豬、羊等相關畜種規(guī)?；B(yǎng)殖場大腸桿菌病防治的技術規(guī)程和研究成果，并充分考慮了飼養(yǎng)管理、疾病發(fā)生特點，完成了標準制定和論證等工作。同時，該團隊對全國驢產(chǎn)業(yè)發(fā)展及驢場情況非常熟悉，也積累了可靠的數(shù)據(jù)和具有實際應用價值的技術經(jīng)驗，為此項地方標準的制定奠定了基2022年1月~2022年8月，根據(jù)任務要求，擬定工作計劃，根據(jù)成員專業(yè)背景，分解任務。通過實地走訪近100家規(guī)?；B(yǎng)驢場，召開不同規(guī)模的座談會，開展不同形式的調(diào)4查研究工作，掌握了大量的一手資料。起草小組實施了標準的編寫工作，制定了編寫方案。起草人員認真查閱了標準制定的有關文件，通過參加標準宣貫培訓，對標準的格式、內(nèi)容、術語表達等進行了深入學習，嚴格遵循GB/T1.1-2020《標準化工作導則》所規(guī)定的標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則起草了《驢駒大腸桿菌病防治規(guī)程》。2022年9月~2023年7月，起草組以函審的方式廣泛征求來自東北農(nóng)業(yè)大學，哈爾濱獸醫(yī)研究所，山東畜牧總站，山西農(nóng)業(yè)大學，山東省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，新疆畜牧科學院畜牧研究所等高?？蒲性核膶＜液完柟葮s發(fā)牧業(yè)，高唐縣阿多寶畜禽養(yǎng)殖專業(yè)合作社等有關企業(yè)技術人員的意見，先后發(fā)出30條，回函的單位或?qū)＜覕?shù)為22個，通過意見反饋，進行對標準內(nèi)容和編制說明進一步修改和完善，形成送審稿。2023年7月~2023年9月，進行企業(yè)回歸驗證；9月7日在省畜牧局在濟南召開了山東省地方標準組織專家審查會議，省市場監(jiān)督管理局對審查會進行監(jiān)督指導，來自山東師范大學、山東省動物疾病與控制中心等單位的9名專家提出標準內(nèi)容刪減，格式修改等意見，起草小組根據(jù)審查意見對標準文本進行修改完善，審查委員會對修改內(nèi)容確認無誤，最終形成報批稿。二、地方標準制定目的和意義5我國是世界主要繁育驢的國家之一，擁有4000多年的養(yǎng)驢歷史，而且我國驢的種質(zhì)資源豐富，存欄數(shù)量曾一度長期居于世界首位。驢產(chǎn)業(yè)是我國重要的區(qū)域特色畜牧業(yè)，也是“精準扶貧”事業(yè)的重點產(chǎn)業(yè)。近年來，全國大力發(fā)展規(guī)模化養(yǎng)驢，在政府主導，龍頭企業(yè)帶動下，驢產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，肉用和藥用產(chǎn)品的加工工藝進步顯著，驢產(chǎn)品消費者逐年增多，市場開發(fā)前景十分廣闊。在傳統(tǒng)的養(yǎng)殖模式下，驢發(fā)生傳染病的機會較少。與之相反，在規(guī)?；H場，傳染病頻發(fā)造成群體感染的風險日益增加。驢的繁殖周期較長，一般為360天，且為單胎。因而驢駒的成活率對規(guī)模化驢場的經(jīng)濟收益至關重要，在驢場常見傳染病中，由某些致病性或條件致病性大腸桿菌（pathogenicEscherichiacoli）引起的驢腹瀉病是規(guī)模驢場最常見的一種疾病，也是影響驢駒健康的主要因素之一。起草單位對49個場進行幼齡驢駒腹瀉病調(diào)查，其中33個規(guī)模驢場有腹瀉病發(fā)生，場發(fā)病率為67.3%（33/49共調(diào)查4755其中1099頭驢駒發(fā)病，發(fā)病率為23.1%（1099/4755其中高發(fā)日齡為15~45d。約有15%的病例在發(fā)病48h~72大腸桿菌是一種革蘭氏陰性桿菌，宿主范圍廣泛，分為共生菌和致病菌。致病性大腸桿菌是腹瀉、食源性疾病和各種腸道外感染的主要病原。研究發(fā)現(xiàn)致病性大腸桿菌感染驢駒后主要表現(xiàn)為腹瀉、敗血癥等特征，病死率高，對驢規(guī)模6化養(yǎng)殖造成了嚴重的經(jīng)濟損失，而且臨床上尚無可用的有效疫苗，常用治療方法使用抗生素配合支持療法治療該病，但是由于驢駒免疫系統(tǒng)和消化器官發(fā)育不成熟及其抵抗力差，加之病原體毒力強，治療結(jié)果收效甚微。同時盲目添加使用或過量使用抗生素，導致耐藥菌株越來越多，治療效果越來越差，養(yǎng)殖效益越來越低，最終造成嚴重的經(jīng)濟損失；不僅如此，抗生素過量使用不但對驢源食品造成安全隱患，而且嚴重威脅人體健康。因此，有必要對規(guī)模化驢場驢駒大腸桿菌病防治進行規(guī)范，用于指導規(guī)模化驢場的驢駒大腸桿菌病的防治工作。因此，基于養(yǎng)殖場生物安全規(guī)范和預防為主的原則，制定驢駒大腸桿菌病的防治技術規(guī)程。本文件規(guī)定了驢駒大腸桿菌病的流行病學、臨床癥狀、病理變化、診斷、預防、治療的指導方針，還包括病死驢及病害驢處理和檔案管理。本標準實施可有效解決目前規(guī)?；H場面臨的驢駒腸炎和敗血癥死亡率高、種驢攜帶并垂直傳播大腸桿菌等問題。本標準的執(zhí)行將有助于提高養(yǎng)驢企業(yè)對該病的綜合防治水平。本標準在制定過程中，總結(jié)和借鑒了國內(nèi)外禽、牛、豬、羊等相關畜種規(guī)模化養(yǎng)殖場防疫工作的技術規(guī)程和研究成果，并充分考慮了驢品種、飼養(yǎng)管理、疾病發(fā)生特點，為建設驢無規(guī)定疫病區(qū)和生物安全隔離區(qū)提供理論支撐，保障驢產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。三、地方標準編制原則、主要技術內(nèi)容和確定依據(jù)7（一）標準編制原則本文件參照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草：（1）科學性：本標準所涉及的主要內(nèi)容以我國多年在驢產(chǎn)業(yè)研究方面正式發(fā)表的研究成果和驢產(chǎn)業(yè)發(fā)展水平的現(xiàn)實情況為主，尤其是標準主要起草單位多年試驗研究數(shù)據(jù)庫，適當參考國外有關研究資料，對規(guī)?；H場驢駒大腸桿菌病防治技術各環(huán)節(jié)進行全面評價。（2）協(xié)調(diào)性：將規(guī)?；H駒大腸桿菌病防控分為驢駒大腸桿菌病診斷、大腸桿菌分離鑒定、大腸桿菌病防控等方面進行把關，前后連貫。（3）適用性：標準規(guī)定操作詳實、可靠，實用性強，符合當前我國驢產(chǎn)業(yè)發(fā)展的實際，并適當超前具有引領性。（4）一致性：編制成員廣泛查找資料，走訪山東、陜西、新疆、內(nèi)蒙古、遼寧等省或自治區(qū)內(nèi)規(guī)?；H養(yǎng)殖場（戶充分考慮我國驢養(yǎng)殖的生產(chǎn)實踐，力求達到內(nèi)容符合實際、可操作性強，確保本標準內(nèi)容豐富、具體、易操作，并且實用性強。標準制定后能夠廣泛地適用于規(guī)模化驢場驢駒大腸桿菌病防控。（5）規(guī)范性：本標準的編寫按照GB/T1.1標準化工作導則的第一部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則進行。本標準的編寫按照GB/T1.1標準化工作導則的第一部分：標準的結(jié)構(gòu)和8編寫規(guī)則進行。（二）主要技術內(nèi)容1本標準涉及的專業(yè)術語和定義驢駒大腸桿菌?。―onkeyfoalcolibacillosis）：由O78、O101、O8等特定血清型的致病性大腸桿菌引起驢駒的急性、接觸性傳染病。其病例特征呈現(xiàn)劇烈的下痢和敗血癥癥狀。本病常引起驢駒死亡，廣泛發(fā)生于飼養(yǎng)管理不符合衛(wèi)生要求的規(guī)?；H場。2流行病學項目組研究發(fā)現(xiàn)，細菌性病原導致的腹瀉在驢養(yǎng)殖場普遍發(fā)生，主要致病菌是大腸桿菌。對49個規(guī)模驢場4755頭驢駒進行腹瀉調(diào)查，場發(fā)病率為67.3%（33/49）；驢駒個體發(fā)病率為23.1%（1099/4755其中高發(fā)日齡為15~45約15%的病例在48~72h內(nèi)死亡。因此，致病性大腸桿菌不僅是引起腸炎和敗血癥的主要病原，也是引起驢駒嚴重腹2.1病原特點驢駒大腸桿菌病的病原為腸桿菌科大腸埃希氏菌屬中O78、O101、O8等主要血清型的致病性大腸桿菌。本病原菌為革蘭氏陰性小桿菌，本菌存在于驢駒腸道及其糞便污染的環(huán)2.2傳染源9發(fā)病驢駒和攜帶致病性大腸桿菌的驢。2.3傳播途徑起草單位在聊城市規(guī)模驢場腹瀉病料中分離到416株大腸桿菌，經(jīng)純化培養(yǎng)、電鏡分析，全自動生化鑒定，動物感染試驗和16SrRNA測序，共鑒定出85株致病性大腸桿菌。表明該病主要通過消化道傳播，糞-口傳播是主要途徑。任何病原菌污染的東西都能傳播，如糞便、污染的圈舍、飼料、水槽及飲水等。另外還能通過臍帶或分娩時經(jīng)產(chǎn)道傳播。2.4易感動物在2015~2017年期間開展了腹瀉驢年齡分布情況調(diào)查。把每個驢場內(nèi)所有驢按年齡分為三個階段，包括幼齡驢駒（0~~每個階段隨機選取100頭驢并對腹瀉現(xiàn)象進行統(tǒng)計記錄，最后分析出腹瀉情況嚴重的年齡段。調(diào)查結(jié)果顯示：幼齡驢駒發(fā)病率約為31.8%，發(fā)病率最高，且死亡率高為12.4%；青年驢發(fā)病率為13.4%，發(fā)病率也較高，而死亡率高為3.7%。18月齡以上的驢發(fā)病率較低，多為經(jīng)過性發(fā)病，無死亡率。2.5發(fā)病特點一年四季均可發(fā)生，以冬末初春季節(jié)交替時段多發(fā)，潛伏期為1d~2d。該病發(fā)病率通常為5%~40%，病死率為2%~20%。3臨床癥狀驢駒發(fā)病初期體溫升高，精神沉郁，食欲不振，糞便粥樣或水樣，劇烈腹瀉，肛門失禁，排出液狀糞便，呈黃色、白色或灰白色，有時含多量黏液或血液，腥臭味。發(fā)病中期出現(xiàn)衰弱，脫水，喜躺臥，無法站立。發(fā)病末期，食欲廢絕，腹瀉和便秘交替發(fā)生，由敗血癥和全身微循環(huán)衰竭致死。4病理變化對腹瀉發(fā)病驢進行臨床診斷發(fā)現(xiàn)，腹瀉驢駒具有精神沉及帶血樣腹瀉等不同類型腹瀉、脫水嚴重不能站立等癥狀；剖檢后，肝臟發(fā)暗色、脾臟出血、小腸粘膜脫落、敗血癥、盲腸粘膜脫落、直腸粘膜脫落、胃粘膜脫落并有草料不能排出等癥狀；采集發(fā)病驢的腸道，制做病理切片觀察發(fā)現(xiàn)有十二直腸粘膜脫落、水腫、盲腸粘膜脫落、有大量單核細胞出現(xiàn)等癥狀?？偨Y(jié)其病理變化為：胃黏膜脫落，有出血點和出血斑。小腸、盲腸和結(jié)腸表現(xiàn)為黏膜脫落。肝臟腫大、淤血。脾腫大，包膜下有出血點。心內(nèi)膜和外膜也有出血點，腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血。5.1臨床診斷驢駒出現(xiàn)腹瀉或敗血癥等癥狀可假定大腸桿菌感染，根據(jù)該病流行病學、臨床癥狀和病理變化等做出初步臨床診斷。5.2實驗室診斷5.2.1采樣按NY/T514的規(guī)定執(zhí)行，主要采集肛拭子、腹瀉物等病料。5.2.2細菌分離培養(yǎng)無菌取病料，經(jīng)三區(qū)劃線接種于麥康凱培養(yǎng)基上，37℃溫箱培養(yǎng)24h，培養(yǎng)出表面光滑、粉紅色圓形菌落。挑取符合大腸桿菌特征的單菌落純化3次~4次。圖1麥康凱培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落5.2.3顯微鏡檢將單菌落革蘭氏染色，鏡檢，油鏡下（100×)呈現(xiàn)兩端鈍圓，單在或成對的革蘭氏陰性菌，見圖2。圖2革蘭氏染色鏡檢（100×)5.2.4生化鑒定將純化后的細菌接種于葡萄糖、甘露醇、乳糖、阿拉伯糖、麥芽糖、吲哚試驗、V-P試驗、甲基紅試驗、枸櫞酸鹽試驗管37℃恒溫培養(yǎng)24h后觀察。結(jié)果顯示：葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、甘露醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣、乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、麥芽糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、吲哚試驗和甲基紅試驗呈陽性，阿拉伯糖、V-P試驗和枸櫞酸鹽試驗呈陰性。見表1。表1大腸桿菌生化鑒定結(jié)果項目葡萄糖甘露醇乳糖阿拉伯糖麥芽糖吲哚試驗--+枸櫞酸鹽-5.2.5大腸桿菌O血清型鑒定將純化的大腸桿菌接種于普通液體培養(yǎng)基中，置恒溫搖床中培養(yǎng)20h，經(jīng)121℃高壓2h，制備O抗原。取潔凈玻片，吸取O抗原滴于玻片兩端，一滴加入10μL抗O血清，一滴加入等量生理鹽水。輕輕晃動玻片，傾斜玻片30°于1min內(nèi)觀察試驗現(xiàn)象。參照附錄B表1判定，出現(xiàn)“++”及以上凝集反應判定陽性結(jié)果。見圖3。圖3大腸桿菌O血清型鑒定結(jié)果5.2.6分離菌株16SrDNA序列測定提取分離菌基因組DNA為模板擴增16SrDNA序列。引物序列見附錄B。PCR反應體系為模板（基因組DNA20ng/μL~50ng/μL）2μL，2×TaqPCRMasterMix12.5μL，上下游引物（20μmol/L）各1μL，符合（GB/T6682）ddH2O53℃退火15s，72℃延伸2min，共30個循環(huán)；最終延伸72℃、5min。通過1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定。片段大小約1500bp回收并純化PCR產(chǎn)物，送生物公司測序。圖4PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳鑒定結(jié)果5.3結(jié)果判定使用NCBI中的BLAST進行檢索，是否與數(shù)據(jù)庫序列一致，即可判定，見圖5。圖5測序結(jié)果比對圖5.4廢棄物與病料處理方法廢棄物參照GB39707的有關規(guī)定處理診療廢棄物。5.5注意事項5.5.1所有操作應嚴格遵守生物安全規(guī)定。5.5.2鑒定或測定時，若采用商品化的培養(yǎng)基、生化試驗鑒6.1環(huán)境衛(wèi)生應按NY/T388的規(guī)定執(zhí)行。夏季食槽和水槽應及時清6.2生物安全生產(chǎn)區(qū)內(nèi)不得飼養(yǎng)其他動物，不應屠宰和解剖病死驢，不帶入其他畜產(chǎn)品。料庫應有防鼠防鳥設施。6.3.1妊娠母驢做好孕驢產(chǎn)前和產(chǎn)后護理工作，將臨產(chǎn)母驢提前轉(zhuǎn)入消毒好的專用產(chǎn)舍。接產(chǎn)人員應消毒。產(chǎn)后及時清理胎衣和其它排泄物并徹底消毒。寒冷季節(jié)做好產(chǎn)房保溫。6.3.2驢駒產(chǎn)后及時做好驢駒臍部消毒工作。驢駒吸吮初乳前，對乳區(qū)進行消毒，確保新生驢駒吃到足夠初乳。驢駒斷奶前應提前做好補料，預防斷奶應激。驢駒設置獨立圈舍，并保持圈舍干燥、清潔。秋冬季新生驢駒應做好保暖工作。6.4藥物預防根據(jù)流行病學調(diào)查結(jié)果，發(fā)病率高驢廠，在分娩前3d~5d給予母驢微生態(tài)制劑或中獸藥。7.1.1如果出現(xiàn)脫水、衰弱、食欲廢絕、糞便水樣、腥臭等嚴重臨診癥狀的，應及時治療。7.1.2口服、注射方式投入獸藥應符合NY/T5030的要求。7.1.3抗菌藥物的使用應根據(jù)實驗室藥敏試驗結(jié)果，科學規(guī)7.1.4如果僅出現(xiàn)糞便發(fā)軟，采食量少等情況無需治療。7.2方法根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選擇合適藥物。消化道給藥：口服或灌腸慶大霉素,磺胺脒等敏感藥物。靜脈注射或肌肉注射：慶大霉素、頭孢類藥物、氨基糖苷類藥物。根據(jù)脫水程度，補充葡萄糖、鈉制劑、鉀制劑和維生素，調(diào)整胃腸機能。冬季補液應加溫。對癥治療：對癥治療是治療本病的關鍵，患病驢常因心力衰竭、酸中毒、內(nèi)毒素中毒等引起死亡，因此應積極進行對癥治療，如止血、維護心臟功能、解毒、緩解酸中毒和止瀉等。推薦藥物、用量及方法：針對消化道炎癥用藥，維生素B和維生素K，西咪替丁。出現(xiàn)心力衰竭的，可注射強心藥如強爾心、西地蘭等，出現(xiàn)內(nèi)毒素中毒的，可注射鹽酸上莨菪堿（654-2）、維生素C地塞米松、氫化可的松等；出現(xiàn)酸中毒的，可靜脈注射5%碳酸鈉注射液，止瀉可內(nèi)服中藥止瀉散，西藥如矽炭銀、次硝酸鉍、鞣酸蛋白、藥用炭等。8病死驢及病害驢處理應按《病死及病害動物無害化處理技術規(guī)范》（農(nóng)醫(yī)發(fā)[2017]25號）的規(guī)定執(zhí)行。9檔案管理9.1記錄記錄應統(tǒng)一、規(guī)范。記錄內(nèi)容包括驢的年齡，發(fā)病時間及癥狀、藥品使用、藥品的生產(chǎn)場家、生產(chǎn)日期、劑量、療程、消毒、免疫、實驗室檢測結(jié)果、療效及停藥時間。9.2存檔各種記錄保存期限不低于兩年，并分類保存。六.第三方檢測機構(gòu)驗證結(jié)論本標準涉及檢測內(nèi)容分別由山東省農(nóng)業(yè)科學院家禽研究所檢測中心，冠縣冠康動物檢測服務有限公司和山東潤達檢測技術有限公司等3家檢測機構(gòu)進行檢測驗證。檢測結(jié)果均與《驢駒大腸桿菌病防治技術規(guī)程》編制說明提供的實驗數(shù)據(jù)保持一致（詳細內(nèi)容參見附件）。（三）制定本標準的主要依據(jù)生物安全通用要求GB39707醫(yī)療廢物處理處置污染控制標準GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法NY/T388畜禽場環(huán)境質(zhì)量標準NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術規(guī)范NY/T5027無公害食品畜禽飲用水水質(zhì)NY/T5030無公害農(nóng)產(chǎn)品獸藥使用準則《病死及病害動物無害化處理技術規(guī)范》2017年7月32015年~2017年期間，標準起草單位對49個規(guī)?；H場新生驢駒的調(diào)查結(jié)果顯示：0月~6月齡驢駒腹瀉病的場發(fā)病率約為67.3%（33/49驢駒個體發(fā)病率超過21.6%（1099/4755），其中高發(fā)日齡為15d~45d，大部分幼駒腹瀉后經(jīng)抗生素治療效果不佳，約有15%的病例在發(fā)病48h~72h內(nèi)死亡，部分驢場幼駒發(fā)病率高達80%，病死率超過30%，給規(guī)模化驢場帶來了巨大的經(jīng)濟損失，嚴重影響到驢產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。大腸桿菌的耐藥性問題在規(guī)?；H場同樣突出。在20世紀70年代和80年代，大腸桿菌的耐藥性并不高；然而，在20世紀90年代以后呈明顯線性增長趨勢。從驢場分離到的大腸桿菌菌株，耐藥性分析結(jié)果進一步表明該趨勢的嚴重性。通過藥敏片試驗和全自動細菌鑒定分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)驢源E.coli的敏感藥物有阿米卡星、妥布霉素等、耐藥藥物有頭孢西汀、氨芐西林等。相關結(jié)果為規(guī)?；H場治療大腸桿菌使用抗生素提供技術指導，尤其在藥物使用方面，避免或減少使用抗菌藥物，使抗菌藥物在臨床上得到科學使用，減少無效抗生素的使用及其造成的藥物殘留，為畜產(chǎn)品的安全生產(chǎn)提供有力的科學保障，同時還節(jié)省了對應的治療成本。研究還發(fā)現(xiàn)驢場大腸桿菌的來源復雜：大腸桿菌16SrDNA序列生物信息學分析結(jié)果表明7株驢源E.coli分離株之間的同源性為98.2%~99.7%，與牛、馬、豬、禽和人源菌株的同源性分別為97.0%~99.9%，88.6%~91.0%，97.7%~99.6%，95.8%~97.3%和98.8%~99.9%。親緣關系分析可闡明驢源分離株之間同源性差異較大，與其它動物的差異也比較明顯，與牛源、人源的同源性較高，提示其感染來源可能有兩類：養(yǎng)驢場內(nèi)部與其密切接觸的相關工作人養(yǎng)驢場的生物安全工作，避免以大腸桿菌為例的牛-驢-人之間的循環(huán)與傳播；進而提示與馬源的大腸桿菌的親緣關系較遠，可能雖然是同屬于馬屬動物，但是由于不同的養(yǎng)殖模式導致了其互相接觸感染的機會較少。以規(guī)?；B(yǎng)驢為基礎的驢產(chǎn)業(yè)，在發(fā)展過程中幼駒大腸桿菌病的威脅日益增加，有必要制定科學、標準和規(guī)范的防治技術規(guī)程，在規(guī)?；H場有效防控該病，保障驢產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。四、與現(xiàn)行相關法律、行政法規(guī)和其他標準的關系為了更好地貫徹《中華人民共和國畜牧法》《中華人民共和國動物防疫法》，特制定了《驢駒大腸桿菌病防治技術規(guī)程》。本標準制定發(fā)布后，將提高我省驢產(chǎn)業(yè)對該病的綜合防治水平。制定和實施本規(guī)程有助于建立健全驢場的科學防治體系和生物安全體系，避免耐藥性大腸桿菌在規(guī)模驢場的傳播，維護公眾健康，同時為藥品和食品行業(yè)提供優(yōu)質(zhì)、健康和安全的原材料做出基礎性貢獻。五、重大分歧意見的處理過程、處理意見及其依據(jù)本標準無重大分歧意見。六、對地方標準自發(fā)布日期至實施日期之間的過渡期的建議及理由本標準發(fā)布后，為了有效貫徹實施之，建議有關部門加強實施推廣，使相關人員充分了解標準的各項條款，改變目前我省驢駒大腸桿菌病診斷與防控過程中各個環(huán)節(jié)存在的參考文獻[1]王仁虎.引起驢駒腹瀉的致病性大腸桿菌分離鑒定及復合疫苗研[2]夏楠.腹瀉型驢源大腸桿菌毒力因子及全基因組分析[D].聊城大[3]劉憲斌，王仁虎，姜桂苗等.規(guī)模驢場主要傳染性疫病的流行特[4]朱曼玲,齊鵬飛,丁召亮等.山東一規(guī)模化驢場主要細菌病的流行[5]馮培祥，楊莉，莊桂玉等.致驢駒腹瀉大腸桿菌的分離鑒定及藥[7]王瑩.致驢駒腹瀉的大腸桿菌分離鑒定及臨床治療[D].吉林大[8]王瑩，買買提·吐尼牙孜，李爽等.引菌的分離鑒定[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2022(05):68[9]馮培祥，楊莉，莊桂玉等.致驢駒腹瀉大腸桿菌的分離鑒定及藥antimicrobialsusceptib