GB/T 42239.2-2022 洗滌用酶制劑 第2部分：脂肪酶（正式版）

ICS71.100.40CCSY43GB/T42239.2—2022國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)IGB/T42239.2—2022本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》起草。本文件是GB/T42239《洗滌用酶制劑》的第2部分。GB/T42239已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：堿性蛋白酶；——第2部分：脂肪酶。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由全國表面活性劑和洗滌用品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC272)歸口。ⅡGB/T42239.2—2022洗滌用品行業(yè)是酶制劑重要的應(yīng)用領(lǐng)域之一，制定GB/T42239《洗滌用酶制劑》,對(duì)于我國洗滌用品行業(yè)規(guī)范含酶類洗滌用品細(xì)分領(lǐng)域的市場，指導(dǎo)行業(yè)內(nèi)企業(yè)創(chuàng)新開發(fā)新產(chǎn)品，杜絕不良企業(yè)欺騙消費(fèi)GB/T42239《洗滌用酶制劑》擬由以下2個(gè)部分構(gòu)成：—第1部分：堿性蛋白酶，目的在于確立洗滌用堿性蛋白酶的分類和技術(shù)要求； 第2部分：脂肪酶，目的在于確立洗滌用脂肪酶的分類和技術(shù)要求。1GB/T42239.2—2022洗滌用酶制劑第2部分：脂肪酶保質(zhì)期。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文本文件。GB/T191包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T6003.1試驗(yàn)篩技術(shù)要求和檢驗(yàn)第1部分：金屬絲編織網(wǎng)試驗(yàn)篩GB/T6005試驗(yàn)篩金屬絲編織網(wǎng)、穿孔板和電成型薄板篩孔的基本尺寸GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T13174衣料用洗滌劑去污力及循環(huán)洗滌性能的測定GB15258化學(xué)品安全標(biāo)簽編寫規(guī)定QB/T2739洗滌用品常用試驗(yàn)方法滴定分析(容量分析)用試驗(yàn)溶液的制備JJF1070定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)則3術(shù)語和定義酯合成和酯交換反應(yīng)的酶。脂肪酶催化脂肪水解的能力。注：脂肪酶酶活力以脂肪酶酶活力單位表示，1g固體酶粉(或1mL液體酶),在一定溫度和pH條件下，1min內(nèi)水解底物產(chǎn)生1μmol的可滴定脂肪酸，即為1個(gè)酶活力單位，用U/g表示。4符號(hào)和縮略語下列符號(hào)和縮略語適用于本文件。JB-04:胡蘿卜素豬油污布。F?:洗前白度值。2GB/T42239.2—2022F?:洗后白度值。R:去污值。P:去污比值。5產(chǎn)品分類按產(chǎn)品形態(tài)分為液體劑型和固體劑型。6要求產(chǎn)品的外觀和理化性能指標(biāo)應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1外觀和理化性能指標(biāo)指標(biāo)液體劑型固體劑型外觀淺黃色至棕褐色液體白色、灰白色、黃褐色或其他顏色可自由流動(dòng)的顆粒酶活力/(U/g)≥標(biāo)示值去污力比值(JB-04污布)≥試驗(yàn)溶液濃度：GB/T13174規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉為0.2%,脂肪酶制劑加入量為0.4%(相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)粉質(zhì)量計(jì))。每批產(chǎn)品的銷售包裝凈含量應(yīng)符合JJF1070的要求。除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和GB/T6682中規(guī)定的三級(jí)或以上的水。按附錄A進(jìn)行。采用不同于附錄A的方法測定時(shí)，應(yīng)提供所應(yīng)用的酶活力單位與本文件確定的酶活力單位的轉(zhuǎn)換按附錄B進(jìn)行。3GB/T42239.2—2022按附錄C進(jìn)行。按JJF1070的規(guī)定進(jìn)行。8檢驗(yàn)規(guī)則出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為表1規(guī)定的外觀、酶活力。型式檢驗(yàn)為表1規(guī)定的全部項(xiàng)目，在下列情況下應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：化可能影響產(chǎn)品質(zhì)量和性能時(shí)；c)長期停產(chǎn)后再恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)；d)出廠檢驗(yàn)結(jié)果與上次的型式檢驗(yàn)有較大差異時(shí)；產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)生產(chǎn)廠的質(zhì)量檢驗(yàn)部門按本文件規(guī)定的檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)合格，并出具產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證根據(jù)批量大小，按表2確定樣本大小，從批中隨機(jī)抽取樣本單位。取樣前應(yīng)將選定的樣本包裝中的表2批量和樣本大小單位為桶/箱/袋批量樣本大小2344GB/T42239.2—2022理化指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果按修約值比較法修約后與指標(biāo)比較判定合格與否，如有一項(xiàng)指標(biāo)不合格，可重新產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)及仲裁機(jī)構(gòu)抽查檢驗(yàn)時(shí)不進(jìn)行二次抽樣。收貨單位如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量不符合本文件規(guī)定的要求，應(yīng)在到貨1個(gè)月內(nèi)向生產(chǎn)者交涉。若因檢驗(yàn)結(jié)果不同，不能取得協(xié)議時(shí)，雙方應(yīng)按8.2.3取樣。取樣總量不應(yīng)少于450g,將選取的試樣仔細(xì)混勻存，保存期1個(gè)月。仲裁檢驗(yàn)結(jié)果為最后依據(jù)。9.1標(biāo)志產(chǎn)品的外包裝使用符合GB/T191要求的標(biāo)志。產(chǎn)品的包裝上應(yīng)貼有牢固的標(biāo)簽。標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)包括產(chǎn)品名稱、凈含量、生產(chǎn)者和(或)經(jīng)銷者的名應(yīng)符合GB15258的要求。9.2包裝產(chǎn)品的內(nèi)包裝和(或)包裝容器的內(nèi)涂料應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定。產(chǎn)品在運(yùn)輸過程中應(yīng)輕拿輕放，不應(yīng)倒置，嚴(yán)防雨淋和暴曬，不應(yīng)在箱上踩踏和堆放重物。運(yùn)輸工產(chǎn)品應(yīng)貯存在陰涼干燥的環(huán)境下。不應(yīng)與有毒、有害、有腐蝕性的物質(zhì)同存。9.5保質(zhì)期保質(zhì)期由生產(chǎn)企業(yè)自定。在規(guī)定的運(yùn)輸和包裝貯存條件下，保質(zhì)期內(nèi)的酶活力不應(yīng)低于標(biāo)示酶活力。5GB/T42239.2—2022(規(guī)范性)酶活力的測定A.1方法概要力。反應(yīng)式為：RCOOH+NaOH—→RCOONa+H,OA.2.1聚乙烯醇(PVA),聚合度1750±50[不同來源或批號(hào)的PVA對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響，結(jié)果報(bào)告應(yīng)標(biāo)明聚乙烯醇(PVA)廠家及生產(chǎn)批號(hào)]。A.2.2橄欖油(不同來源或批號(hào)的橄欖油對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響，結(jié)果報(bào)告應(yīng)標(biāo)明橄欖油廠家及生產(chǎn)批A.2.4磷酸二氫鉀(KH?PO?)。A.2.5十二水磷酸氫二鈉(Na?HPO?·12H?O)。A.2.6氫氧化鈉。A.2.8酚酞。A.3.2高速勻漿機(jī)。A.3.4自動(dòng)電位滴定儀。A.3.5自動(dòng)移液器。A.3.6電磁加熱攪拌器。A.3.7電磁攪拌器。A.3.8微量滴定管：10mL,分刻度≤0.05mL。A.4溶液A.4.12%PVA溶液加熱攪拌器上邊加熱邊攪拌，攪拌速度以能把所有的PVA攪拌起來為宜，在微沸狀態(tài)下加熱攪拌約1h,直至全部溶解，在攪拌狀態(tài)下逐漸冷卻至室溫，定容到500mL,該溶液室溫下有效期為2d,密封6GB/T42239.2—2022保存。A.4.2橄欖油底物溶液稱取2%PVA溶液150g,加橄欖油50g,用高速勻漿機(jī)在7000r/min(當(dāng)乳化效果不好時(shí)可加大底部分層現(xiàn)象或者在水浴中反應(yīng)時(shí)有明顯沉淀產(chǎn)生，更換其他來源的A.4.5磷酸緩沖液(pH為7.5)稱取磷酸二氫鉀(KH?PO?)19.6g,十二水磷酸氫二鈉(Na?HPO?·12H?O)396.2g,加水約4.5L,攪拌至溶解均勻，用0.5mol/L按QB/T2739配制與標(biāo)定0.5mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用時(shí)，準(zhǔn)確稀釋10倍。A.5樣品溶液的制備稱取約1g樣品(稱準(zhǔn)至0.001g),用磷酸緩沖液溶解并稀釋。樣品稱量定容后放入轉(zhuǎn)子，在電磁攪拌器上攪拌15min。表A.1脂肪酶樣品稀釋表待測酶活力推薦稀釋倍數(shù)A.6試驗(yàn)步驟A.6.1程序按照表A.2所列程序分別進(jìn)行空白和樣品試驗(yàn)，選擇自動(dòng)電位滴定法或酚酞指示劑滴定法進(jìn)行滴定。7表A.2試驗(yàn)步驟步驟內(nèi)容100mL燒杯A(空白)100mL燒杯B(樣品)1燒杯中放入轉(zhuǎn)子，加入底物溶液4.00mL和磷酸緩沖液5.00mL,磁力攪拌2加95%乙醇15.00mL,攪拌混勻直接進(jìn)行水浴3(40±0.2)℃水浴中預(yù)熱5min4加樣品1.00mL混勻計(jì)時(shí)，攪拌混勻時(shí)間約15s5(40±0.2)℃水浴中準(zhǔn)確反應(yīng)15min取出6直接取出加95%乙醇15.00mL混勻取出7加25mL水，立即開始滴定注：若使用酚酞指示劑滴定法，用100mL三角瓶代替燒杯。A.6.2.1自動(dòng)電位滴定法對(duì)自動(dòng)電位滴定儀進(jìn)行儀器校正，用0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液即刻滴定，以突躍為滴定終點(diǎn)，最終溶液pH在30s內(nèi)保持不變，記錄消耗0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。A.6.2.2酚酞指示劑滴定法加酚酞指示劑兩滴，用0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液即刻滴定，滴定至微紅色并保持在30s內(nèi)不退色為滴定終點(diǎn)，記錄消耗0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。A.7結(jié)果計(jì)算產(chǎn)品的酶活力X以U/g表示，按公式(A.1)計(jì)算：X——產(chǎn)品的酶活力，單位為酶活力單位(U/g);V?———滴定樣品時(shí)消耗0.05mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為毫升(mL);V?——滴定空白時(shí)消耗0.05mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為毫升(mL);c——?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位為摩爾每升(mol/L);0.05——?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度換算系數(shù)；n—試樣的稀釋倍數(shù)；m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g);1/15——反應(yīng)時(shí)間15min,以1min計(jì)。結(jié)果按修約值表示，當(dāng)結(jié)果大于或等于10?,后三位取整；當(dāng)結(jié)果大于或等于10?且小于10?,后兩位取整；當(dāng)結(jié)果大于或等于103且小于10?,后一位取整。A.8精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于這兩個(gè)測定值的算術(shù)平均值的10%,以大于10%的情況不超過5%為前提。8(規(guī)范性)粒度的測定篩分法B.1方法概要用規(guī)定孔徑的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)篩，經(jīng)振篩機(jī)篩分，測定篩子及底盤中試樣的質(zhì)量，計(jì)算其占試樣總質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。B.2分析儀器B.2.1標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)篩：符合GB/T6005和GB/T6003.1的規(guī)定。按產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的要求選取篩孔尺寸0.150mm(100目)的篩子，配以底盤和篩蓋。B.2.2天平：精度為0.1g。B.2.3振篩機(jī)：采用拍擊式電動(dòng)振篩機(jī)，篩體的運(yùn)動(dòng)方式為平行往復(fù)式，篩體振幅為30mm±10mm,振動(dòng)頻率為278次/min±10次/min,拍擊次數(shù)為150次/min±10次/min。B.3試驗(yàn)步驟把按要求選取的清潔、干燥的篩孔尺寸0.150mm(100目)篩子置于底盤之上，一起裝在電動(dòng)振篩機(jī)上。稱取試樣100.0g,置于上層篩中，加篩蓋。開啟電動(dòng)振篩機(jī)，振篩5min±30s。停止振蕩后取下底盤和篩子，收集篩子及底盤中的試樣質(zhì)量。B.4結(jié)果計(jì)算產(chǎn)品的粒度P,以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，按公式(B.1)計(jì)算：P;——產(chǎn)品的粒度；m;——底篩上留存樣品質(zhì)量，單位為克(g);m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。以兩次平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示至小數(shù)點(diǎn)后一位作為測定結(jié)果。B.5準(zhǔn)確度和精密度試樣過篩的總質(zhì)量損失不得超過1%。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于這兩個(gè)測定值的算術(shù)平均值的1.5%,以大于1.5%的情況不超過5%為前提。9GB/T42239.2—2022(規(guī)范性)去污力的測定C.1方法概要在去污試驗(yàn)機(jī)內(nèi)于規(guī)定的溫度和洗滌時(shí)間下，用一定硬度的水配制成確定濃度的標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉溶C.2試劑與材料C.2.1氯化鈣(CaCl?)。C.2.2氯化鎂(MgCl?·6H?O)。C.2.3污布：JB-04(胡蘿卜素豬油污布，按附錄D制備),可由標(biāo)準(zhǔn)歸口單位委托相關(guān)單位統(tǒng)一制作提供。C.3儀器和設(shè)備C.4試驗(yàn)步驟C.4.1硬水配制時(shí)取1.0L沖至10.0L即為250mg/kg硬水。配制用水建議用蒸餾水或去離子水或純度相當(dāng)?shù)乃?。JB-04試片每組應(yīng)有6片，同時(shí)做好編號(hào)記錄，每組試片用于一個(gè)樣品的性能試驗(yàn)。洗前，將試片相疊，用白度計(jì)在457nm下逐一讀取洗滌前的白度值。洗前白度以正面取兩個(gè)點(diǎn)(兩個(gè)點(diǎn)應(yīng)中心對(duì)稱),測量白度值，以兩次測量的平均值為該試片的洗前白度F?;洗后白度則以洗后試片正面取兩個(gè)點(diǎn)(兩個(gè)點(diǎn)應(yīng)中心對(duì)稱),測量白度值，以兩次測量的平均值為該試片的洗后白度F?。C.4.3去污洗滌測試含脂肪酶洗滌劑去污力，每組試片為6片。個(gè)“工作單元”,并預(yù)熱儀器至(30±1)℃下穩(wěn)定一段時(shí)間。試驗(yàn)時(shí)用250mg/kg硬水(事先預(yù)熱至約30℃時(shí)使用)將標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉(C.2.4)配制成0.2%的溶液每1L倒入對(duì)應(yīng)的去污浴缸內(nèi)，然后浴缸放入所GB/T42239.2—2022對(duì)應(yīng)的位置并裝好攪拌葉輪，調(diào)節(jié)儀器使洗滌試驗(yàn)溫度保持在(30±1)℃,準(zhǔn)備加入脂肪酶樣品(需要留出一個(gè)不加酶的空白標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉溶液去污浴缸作參比)。開動(dòng)機(jī)器攪拌，在0s時(shí)將0.4%脂肪酶試樣(以標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉質(zhì)量計(jì)，例如加量為2g,則加入脂肪酶試樣8mg)加入去污浴缸內(nèi)，攪拌30s后，將C.4.2測定過白度的JB-04試片投入浴缸中，同時(shí)開始對(duì)該浴缸計(jì)算主洗時(shí)間，20min后停止洗滌。注1:鑒于脂肪酶試樣稱取量較低，為便于測定和提高試驗(yàn)精度，可以采用擴(kuò)容的方式準(zhǔn)備脂肪酶樣品。即事先將脂肪酶試樣配置成一定濃度的溶液。去污測試時(shí)，用移液管定量移取該溶液添加至去污浴缸中。擴(kuò)容步驟在加樣前進(jìn)行，不宜將擴(kuò)容后樣品放置過久。將含酶和不含酶去污浴缸中的試片分別在兩個(gè)漂洗器(C.3)中漂洗(避免脂肪酶交叉污染)。首先將試片放入內(nèi)筒中，控干水分，倒出污水后，加入1500mL去離子水，蓋上蓋子，轉(zhuǎn)動(dòng)蓋子上手柄，使內(nèi)筒轉(zhuǎn)動(dòng)約30s后停止(期間應(yīng)使內(nèi)筒充分轉(zhuǎn)動(dòng)，但宜避免因轉(zhuǎn)動(dòng)過快導(dǎo)致容器內(nèi)漂洗水的溢出)。放掉漂洗后的水，再次加入1500mL去離子水，重復(fù)進(jìn)行第二次漂洗。接著進(jìn)行第三次漂洗，最后放掉漂洗水，對(duì)試片進(jìn)行手工脫水15s(轉(zhuǎn)速應(yīng)達(dá)到使布片水分瀝干)。去除漂洗完成后的試片，在無光陰涼處懸掛晾干，然后按C.4.2測定白度F?。以一一對(duì)應(yīng)的方式，計(jì)算每片試片洗滌前后的白度差(F?-F?),并對(duì)每組試片，分別在置信度90%下，進(jìn)行Q檢驗(yàn)，對(duì)可疑值進(jìn)行取舍(參見GB/T13174—2021的附錄D)。每組試片中超出極限范圍，需要取舍的數(shù)據(jù)不超過1個(gè)，否則該組試驗(yàn)作廢，應(yīng)重做試驗(yàn)。確認(rèn)有效的白度差和試片數(shù)量nC.5結(jié)果計(jì)算去污值(R)按式(C.1)計(jì)算。R=∑(F?—F?)/n………………(C.1)式中：R——去污值，%;F?——每組污布試片洗前光譜反射率，%;F?——每組污布試片洗后光譜反射率，%;n——經(jīng)Q值檢驗(yàn)后，每組污布試片的有效數(shù)量。結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉，JB-04污布去污比值(P)按式(C.2)計(jì)算。P=R?/R?！?C.2)式中：P——JB-04污布去污比值；R。加入標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉的污布去污值，%;R?——加入脂肪酶試樣和標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉的污布去污值，%;結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后兩位。GB/T42239.2—2022(規(guī)范性