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文檔簡介
背景介紹肺纖維化是一種致命疾病,患病率不斷上升。肺纖維化的非放射性和無創(chuàng)性早期診斷可以改善預(yù)后,但卻是艱巨的挑戰(zhàn)。粘度的異常是肺纖維化的典型微環(huán)境特征。最近,粘度的精準(zhǔn)可視化檢測引起了人們的廣泛興趣。然而,由于其特性復(fù)雜,直接觀察生物系統(tǒng)中的粘度仍然是一個巨大的挑戰(zhàn)。線粒體粘度波動與肺纖維化、糖尿病、神經(jīng)退行性疾病、癌癥等多種疾病有關(guān)。本文亮點1開發(fā)了一種近紅外熒光探針,NIR-V-BR,通過響應(yīng)粘度變化來檢測細(xì)胞肺纖維化過程;2表現(xiàn)出很好的生物相容性,且具有良好的線粒體靶向能力。內(nèi)容介紹1
實驗部分2
結(jié)果與討論2.1
探針的合成及探針的光學(xué)性質(zhì)測試從圖2中,可以看到NIR-V-BR的激發(fā)波長在水和50%的甘油體系中紅移了40nm(520~560nm),這可能是由于共軛體系的增加導(dǎo)致的結(jié)果。隨后,測試了一系列不同的粘度梯度(0.893~856.0cP),以更準(zhǔn)確地測試NIR-V-BR和粘度之間的響應(yīng)關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn),NIR-V-BR對粘度的反應(yīng)可增強近180倍(圖3)。2.2
探針細(xì)胞毒性實驗在熒光成像之前,通過標(biāo)準(zhǔn)的MTT細(xì)胞毒性實驗評估了NIR-V-BR在A549細(xì)胞中的細(xì)胞毒性(圖8)。2.3
線粒體共定位熒光成像線粒體內(nèi)膜帶負(fù)電,由于探針本身帶正電,在A549細(xì)胞中對NIR-V-BR和商用線粒體綠色定位劑進行了共定位實驗。從圖9可以看出,NIR-V-BR的紅色熒光與商用線粒體綠色定位劑的綠色熒光可以很好地重疊。2.4
探針細(xì)胞成像應(yīng)用兩種抗真菌藥物,制霉菌素莫能菌素可誘導(dǎo)功能紊亂,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)粘度的變化如圖10所示,僅用NIR-V-BR處理的細(xì)胞熒光較弱,熒光強度隨著制霉菌素或莫能菌素引起的細(xì)胞內(nèi)粘度的增加而大大增強。3
結(jié)論綜上所述,開發(fā)了一種近紅外熒光探針,NIR-V-BR,通過響應(yīng)粘度變化來檢測細(xì)胞肺纖維化過程。NIR-V-BR在低粘度下幾乎沒有熒光,而在高粘度條件下有明亮強的近紅
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