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文檔簡介
實驗六金免疫測定技術(shù)
概述金免疫測定技術(shù):以膠體金顆粒作為示蹤物,屬于固相膜免疫分析技術(shù)膠體金:金鹽(HAuCl4)被還原成金原子后形成的金顆粒懸液,因呈穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。膠體金顆粒聚集后呈現(xiàn)紅色。免疫金:膠體金顆粒與蛋白質(zhì)通過靜電引力結(jié)合形成的復(fù)合物。方法類型:斑點金免疫滲濾試驗
斑點金免疫層析試驗本次實驗以測定尿中人絨毛膜促性腺激素(HCG)為例,來驗證斑點金免疫滲濾試驗和斑點金免疫層析試驗的基本原理,并通過實驗熟悉其操作過程及臨床應(yīng)用實驗?zāi)康囊弧唿c金免疫滲濾試驗實驗原理膠體金顆粒聚集后呈現(xiàn)紅色斑點實驗材料試劑:滲濾裝置、免疫金、洗滌液器材:一次性滴管標本:尿液實驗步驟(1)將滲濾裝置平放于實驗臺上,于加樣孔內(nèi)滴加尿液5滴,待完全滲入。(2)于加樣孔內(nèi)滴加免疫金試劑3滴,待完全滲入。(3)于加樣孔內(nèi)滴加洗滌液2~3滴,待完全滲入。(4)15min內(nèi)觀察結(jié)果實驗結(jié)果在微孔膜中央出現(xiàn)紅色斑點者判為陽性反應(yīng),說明標本HCG陽性;反之則為陰性反應(yīng),說明標本HCG陰性。斑點呈色的深淺相應(yīng)地提示陽性強度。注意事項注意試劑的保存及使用溫度注意加入的尿量和免疫金量盡量采集晨尿進行檢測二、斑點金免疫層析試驗陰性陽性實驗原理層析條實驗材料試劑:層析條標本:尿液實驗步驟(1)將層析條的加樣端浸入尿液中2~5秒,并平放于桌面上。(2)15min內(nèi)觀察結(jié)果。
陽性陰性無效實驗結(jié)果TC注意事項打開層析條包裝后應(yīng)在1h內(nèi)應(yīng)用將層析條插入樣品中,樣品的液面不能超過試劑條的標記線盡量采集晨尿進行檢測注意在規(guī)定時間內(nèi)觀察反應(yīng)結(jié)果臨床應(yīng)用金免疫測定技術(shù)屬于固相膜免疫測定技術(shù),具有操作簡便、快速以及操作人員不需技術(shù)培訓(xùn),無需特殊儀器設(shè)備,試劑穩(wěn)定、便于保存等特點,因此特別符合POCT項目的要求。只能作為定性試驗,主要用于正常體液中不存在的物質(zhì)(如傳染病抗原和抗體等)和正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質(zhì)(如HCG
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