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v 1 4 4 9 關(guān)于本手冊(cè)本手冊(cè)所述信息旨在為操作人員提供指導(dǎo)操作人員必須具備免疫磁珠分離(IMS)的理論知識(shí)及實(shí)驗(yàn)室操作經(jīng)驗(yàn)。請(qǐng)?zhí)貏e注意用戶(hù)預(yù)期用途DynaMagCTS磁力架是適合與Dynabeads磁珠結(jié)合使用的磁性設(shè)備,可用于中等至大規(guī)模的細(xì)胞分離。可以在無(wú)菌封閉系統(tǒng)中進(jìn)行靶細(xì)胞的陽(yáng)性分離或去除不想要的細(xì)接下頁(yè)一個(gè)底座裝置,帶有溶液桿,可容納含有填裝和沖洗溶液的袋子;以及一塊伸縮板,可容納含有(捕獲磁珠結(jié)合細(xì)胞后)殘留細(xì)胞的袋子。圖中的標(biāo)準(zhǔn)血袋和導(dǎo)管旋轉(zhuǎn)裝置圖1.DynaMagCTS磁力架概述7.磁角測(cè)量?jī)x圖2.DynaMagCTS磁力架詳細(xì)介紹底座裝置底座裝置(1)支撐旋轉(zhuǎn)裝置(2)和溶液桿(3),用伸縮板底座裝置下方的伸縮板(4)提供了額外的空間,可容納至多3kg的袋子。水平放置袋子可以減輕2主磁體主磁體包括一排磁性極強(qiáng)的釹鐵硼永磁體。磁體排列已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,具有高場(chǎng)強(qiáng)和磁場(chǎng)梯度,可介紹了采用同類(lèi)磁珠分離系統(tǒng)對(duì)較大體積樣本進(jìn)行連續(xù)流動(dòng)分離的步驟[參考文獻(xiàn)2主磁體可與旋轉(zhuǎn)裝置拆分,如果需要冷分離,則可以置于冰箱內(nèi)。參閱“連接和拆分主磁體”袋的下方或上方(圖9,第7頁(yè))。當(dāng)磁體位于樣本袋上方時(shí),磁珠-細(xì)胞復(fù)合物會(huì)在重力作用下移主磁體由透明的有機(jī)玻璃蓋保護(hù)。嵌入蓋子的鐵板可以在磁力作用下對(duì)樣本袋施加壓力。此開(kāi)/關(guān)把手磁體柄注:磁體的場(chǎng)強(qiáng)隨磁體表面距離呈指數(shù)型下降。在特定的應(yīng)用中,如果場(chǎng)強(qiáng)過(guò)高,則可通過(guò)在接下頁(yè)主磁角測(cè)量?jī)x通過(guò)旋轉(zhuǎn)底座并倒置主磁體,可使主磁體位于無(wú)菌袋的下方或上方。磁體可以逆時(shí)針傾斜–15°磁角測(cè)量?jī)x磁體固定銷(xiāo)次級(jí)磁體由單個(gè)的釹鐵硼磁體組成,方向與柱的軸平行。采用特定的配置,由非磁性材料將單個(gè)磁體相互隔開(kāi),確保流穿系統(tǒng)中的磁性捕獲的優(yōu)化(即較大的表磁性導(dǎo)管夾4接下頁(yè)滾軸導(dǎo)軌拉磁體固定銷(xiāo)推5打開(kāi)和關(guān)閉主磁體蓋按照下列步驟打開(kāi)主磁體蓋。反向操作關(guān)閉主磁體蓋。l抬拉l抬拉開(kāi)/關(guān)把手鐵板接下頁(yè)6注意:當(dāng)蓋子打開(kāi)時(shí),切勿轉(zhuǎn)動(dòng)主磁體。固定銷(xiāo)頭可能會(huì)撞到旋轉(zhuǎn)裝置,損壞蓋子。確保蓋子1123推23推接下頁(yè)7珠-細(xì)胞復(fù)合物在磁力作用下與重力呈反向移動(dòng),避免了非特異性的細(xì)胞捕獲。注:開(kāi)始該過(guò)程1.取下次級(jí)磁體2.傾斜主磁體94.轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)裝置180°。5.活接下頁(yè)8?生物材料應(yīng)作為具有潛在傳染性的物質(zhì)進(jìn)行處理,在清潔過(guò)程中9免疫磁珠分離(IMS)的將Dynabeads加入血袋中,與樣本一可直接或間接進(jìn)行細(xì)胞分離:圖11顯示了直接細(xì)胞分離圖11顯示了直接細(xì)胞分離。將Dynabeads磁珠加入無(wú)菌袋的細(xì)胞群體中。在短在陽(yáng)性分離中,磁珠結(jié)合的細(xì)胞被用于下游應(yīng)用領(lǐng)域。采用去除磁珠,棄去不想要的細(xì)胞類(lèi)型,將余下的未結(jié)合細(xì)胞用于下將磁珠結(jié)合的細(xì)胞保留在第一個(gè)袋子將未結(jié)合(無(wú)磁珠)細(xì)胞排入第二個(gè)袋接下頁(yè)磁珠分離的說(shuō)明(續(xù))磁珠分離磁珠分離采用無(wú)菌技術(shù)完成所有步驟??膳cDynaMagCT主袋中容納包含Dynabeads磁珠的樣本和在主磁體中分離的細(xì)胞。主磁體吸引并保留磁珠-細(xì)胞復(fù)合物,而無(wú)磁珠的細(xì)胞懸液則從主磁體進(jìn)入采集袋。離開(kāi)主袋的所有液體先通過(guò)次級(jí)磁體,然后進(jìn)入采集袋。用填裝和沖洗溶液注滿(mǎn)與袋子相連的導(dǎo)管,排出空氣后再分離。分離后,用接下頁(yè)3.確保連接管路上的所有管路磁夾和滾軸磁夾均已關(guān)閉。將含有填裝和沖洗溶液的袋子懸掛在磁珠結(jié)合細(xì)胞的分離12.打開(kāi)磁體蓋,取出主袋。打開(kāi)填入主袋內(nèi)。輕輕重懸磁珠-細(xì)胞復(fù)合物。使用與初始磁珠捕獲的效率取決于磁珠的大小和鐵含量,以及樣本的粘度。由于條件差異,我們建議每位研究人員已經(jīng)在大鼠中研究了Dyna

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