實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測(cè)-T27405-2008解讀-教學(xué)課件

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范

食品微生物檢測(cè)GB/T27405-2008規(guī)范的內(nèi)容引言前言適用范圍引用文件術(shù)語(yǔ)管理要求技術(shù)要求過(guò)程控制要求內(nèi)部質(zhì)量控制和外部質(zhì)量評(píng)估附錄前言發(fā)布機(jī)構(gòu)：國(guó)家質(zhì)檢總局和國(guó)標(biāo)委負(fù)責(zé)起草單位：中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可中心（CNAS）起草單位：CNAS、山東出入境檢驗(yàn)檢疫局實(shí)施日期：2008年10月1日引用文件GB14925實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施GB15981消毒與滅菌效果的評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)GB/T18202室內(nèi)空氣中臭氧衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用標(biāo)準(zhǔn)GB50436生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范SN/T1538.1培養(yǎng)基制備指南第1部分實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則SN/T1538.2培養(yǎng)基制備指南第2部分培養(yǎng)基性能測(cè)試實(shí)用指南ISO7218食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué)—微生物檢驗(yàn)通則ISO16140食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué)—可替代方法確認(rèn)規(guī)程ISO18593食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué)—使用接觸平板和棉拭子的表面取樣技術(shù)水平方法EA-04/10微生物實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可術(shù)語(yǔ)實(shí)驗(yàn)室最高管理者在最高層指揮和控制實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)人或一組人實(shí)驗(yàn)室管理層在實(shí)驗(yàn)室最高管理者領(lǐng)導(dǎo)下負(fù)責(zé)管理實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的人員實(shí)驗(yàn)室能力實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)所需的物質(zhì)、環(huán)境、信息資源、人員、技術(shù)和專業(yè)知識(shí)樣品取自某一整體的一個(gè)或多個(gè)部分，旨在提供該整體的相關(guān)信息，通常作為判斷該整體的基礎(chǔ)術(shù)語(yǔ)標(biāo)準(zhǔn)方法國(guó)際、區(qū)域、國(guó)家或行業(yè)發(fā)布的，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格確認(rèn)的、公認(rèn)的方法可替代方法用來(lái)檢測(cè)某一特定產(chǎn)品中某種目標(biāo)微生物的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法等效方法陰性偏差標(biāo)準(zhǔn)方法得出陽(yáng)性結(jié)果，而可替代卻得出未經(jīng)證實(shí)的陰性結(jié)果，如果后者被證明為陽(yáng)性，這種偏離便是一個(gè)假陰性陽(yáng)性偏差標(biāo)準(zhǔn)方法得出陰性結(jié)果，而可替代卻得出未經(jīng)證實(shí)的性陽(yáng)結(jié)果，如果后者被證明為陰性，這種偏離便是一個(gè)假陽(yáng)性術(shù)語(yǔ)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株和工作菌株的統(tǒng)稱標(biāo)準(zhǔn)菌株至少定義到屬或種水平的菌株。按其特征進(jìn)行分類和描述有明確的來(lái)源標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)一代轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株工作菌株由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株術(shù)語(yǔ)判定限進(jìn)行定性微生物檢測(cè)時(shí)，在特定評(píng)估方法規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室條件下，可以引起特定變化的微生物的最小量。檢出限進(jìn)行定量微生物檢測(cè)時(shí)，能檢測(cè)到但無(wú)法給出精確數(shù)值的微生物的最小量。特異性陰性菌株或所確認(rèn)菌落數(shù)與可疑檢出物的比例規(guī)范中管理要求4.1組織4.2管理體系4.3文件控制4.4質(zhì)量及技術(shù)記錄4.5服務(wù)客戶4.6投訴處理4.7不符合工作控制4.8糾正措施4.9預(yù)防措施4.10內(nèi)部審核4.11管理評(píng)審4.12持續(xù)改進(jìn)2024/7/25GB/T27405-200895.1人員

5.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)由具有一定資質(zhì)的微生物學(xué)或相近專業(yè)的人員來(lái)操作或指導(dǎo)微生物檢測(cè)。

5.1.2如果實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告中包含意見(jiàn)和解釋，那么授權(quán)的簽署意見(jiàn)和解釋的人員應(yīng)具有相關(guān)的工作經(jīng)驗(yàn)和專業(yè)知識(shí)。

5.1.3實(shí)驗(yàn)室的管理層應(yīng)保證所有人員接受勝任工作所需的設(shè)備操作、微生物檢測(cè)技能和實(shí)驗(yàn)室生物安全等方面的培訓(xùn)，并有針對(duì)所有級(jí)別檢測(cè)人員的繼續(xù)教育計(jì)劃。

5.1.4實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過(guò)參加內(nèi)部質(zhì)量控制、能力驗(yàn)證或使用標(biāo)準(zhǔn)菌株等方法客觀評(píng)估檢測(cè)人員的能力，必要時(shí)對(duì)其進(jìn)行再培訓(xùn)并重新評(píng)估。當(dāng)使用一種非經(jīng)常使用的方法或技術(shù)時(shí)，在檢測(cè)前確認(rèn)微生物檢測(cè)人員的操作技能是十分必要的。2024/7/25GB/T27405-200810解讀（關(guān)鍵詞）：人員資質(zhì)、提供條件（資源和培訓(xùn)）、能力評(píng)估5.2設(shè)施和環(huán)境條件

5.2.1設(shè)施

5.2.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有進(jìn)行微生物檢測(cè)所需的適宜、充分的設(shè)施條件，包括檢測(cè)設(shè)施（專用于微生物檢測(cè)和相關(guān)活動(dòng)）及輔助設(shè)施（大門、走廊、管理區(qū)、樣品室、清潔間、儲(chǔ)存室、文檔室等）。特殊設(shè)備要在特定環(huán)境下放置和操作。

依據(jù)所檢測(cè)微生物的不同等級(jí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)授權(quán)進(jìn)入工作區(qū)域的人員采取嚴(yán)格的限制措施，并明確告知有關(guān)人員以下內(nèi)容：

a）特殊區(qū)域的特定用途；

b）特殊工作區(qū)域的限制措施；

c）采取這些限制措施的原因；

d）合理的控制水平。2024/7/25GB/T27405-200811解讀（關(guān)鍵詞）：專門設(shè)施、限制進(jìn)入5.2設(shè)施和環(huán)境條件

5.2.1設(shè)施

5.2.1.2應(yīng)根據(jù)具體檢測(cè)活動(dòng)（如檢測(cè)種類和數(shù)量等），有效分割不相容的業(yè)務(wù)活動(dòng)。應(yīng)采取措施將交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)降低到最小。為達(dá)到這一目標(biāo)可采取以下措施：

a）實(shí)驗(yàn)室建設(shè)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定，符合“無(wú)回路”原則；

b）在時(shí)間或空間上有效隔離各種檢測(cè)活動(dòng)；

c）為確保檢測(cè)樣品的完整性（如使用密封容器），操作時(shí)應(yīng)按照規(guī)定的程序，并采取預(yù)處理措施。2024/7/25GB/T27405-200812解讀（關(guān)鍵詞）：分區(qū)、降低交叉污染風(fēng)險(xiǎn)、“無(wú)回路”原則5.2設(shè)施和環(huán)境條件

5.2.1.3按照良好操作規(guī)范，應(yīng)考慮清楚標(biāo)識(shí)的隔離場(chǎng)地或明確制定的區(qū)域：

a）樣品接收和儲(chǔ)藏區(qū)；

b）樣品前處理區(qū)（如應(yīng)在被隔離的區(qū)域處理極易樣重污染的粉狀產(chǎn)品）；

c）樣品的微生物檢測(cè)（包括培養(yǎng)）和可疑致病菌的鑒定區(qū)；

d）標(biāo)準(zhǔn)菌株和其他菌株的儲(chǔ)藏區(qū)；

e）培養(yǎng)基和化學(xué)試劑儲(chǔ)藏區(qū)（培養(yǎng)基和化學(xué)試劑分開(kāi)存放，危險(xiǎn)品和有毒藥品應(yīng)設(shè)有專柜保存）；

f）培養(yǎng)基和器材的準(zhǔn)備和滅菌區(qū)；

g）無(wú)菌區(qū)；h）清潔間；i）污染物處理區(qū)；j）急救區(qū)；

k）行政區(qū)；l）文檔處理區(qū)；m）更衣室；n）倉(cāng)庫(kù)；o）休息室。

5.2.1.4在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)限定在某個(gè)工作區(qū)域使用吸管、吸管頭、離心管、試管等。2024/7/25GB/T27405-200813解讀（關(guān)鍵詞）：區(qū)域標(biāo)識(shí)、培養(yǎng)基和化學(xué)試劑分開(kāi)存放，危險(xiǎn)品和有毒藥品應(yīng)設(shè)有專柜保存5.2設(shè)施和環(huán)境條件

5.2.1設(shè)施

……

5.2.1.5應(yīng)保證工作區(qū)潔凈無(wú)塵，空間應(yīng)與微生物檢測(cè)需要及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部整體布局相稱。實(shí)驗(yàn)室空間應(yīng)符合GB19489和GB50346的相關(guān)規(guī)定。

5.2.1.6通過(guò)自然條件或換氣裝置或使用空調(diào)，保持良好的通風(fēng)和適當(dāng)?shù)臏囟?。使用空調(diào)時(shí)，應(yīng)根據(jù)不同工作類別檢查、維護(hù)和更換合適的過(guò)濾設(shè)備。2024/7/25GB/T27405-200814解讀（關(guān)鍵詞）：

環(huán)境的潔凈度空調(diào)的維護(hù)和管理5.2設(shè)備與環(huán)境條件

5.2.1設(shè)備

5.2.1.7可通過(guò)以下途徑減少污染

a）表面光滑的墻、天花板、地面和桌椅（光滑程度應(yīng)取決于對(duì)其清潔的難以程度）；

b）地面、墻壁、天花板連接處應(yīng)有弧，地面應(yīng)防滑；

c）當(dāng)進(jìn)行檢測(cè)室，應(yīng)關(guān)閉門窗；

d）遮陽(yáng)板應(yīng)安裝到室外或方便清潔；

e）除非密閉，液體運(yùn)輸管路不應(yīng)在工作區(qū)上方穿過(guò)；

f）換氣系統(tǒng)中應(yīng)有空氣過(guò)濾裝置；

g）獨(dú)立的洗手池非手動(dòng)控制效果更好，最好在實(shí)驗(yàn)室的門附近；

h）不使用粗糙裸露的木塊；

i）固定設(shè)備和室內(nèi)裝置的木質(zhì)表面應(yīng)密閉包裹；

j）試驗(yàn)可能低度污染空氣時(shí)作業(yè)區(qū)應(yīng)裝備一臺(tái)層流生物安全柜；

k）儲(chǔ)存設(shè)施和設(shè)備的擺放應(yīng)易于清洗；

l）只將檢測(cè)必需的櫥柜、文件或其他物品放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。解讀（關(guān)鍵詞）：減少污染5.2設(shè)備與環(huán)境條件

5.2.1設(shè)備

5.2.1.8理想天花板應(yīng)具有光滑表面并附帶充足照。如果無(wú)法實(shí)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有書(shū)面材料來(lái)證明已有效控制了任何導(dǎo)致污染的風(fēng)險(xiǎn)同時(shí)具備有效的防治污染措施如清洗表面和檢查程序

5.2.1.9實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)清楚潛在的容易發(fā)生污染的檢測(cè)區(qū)域并證明已經(jīng)采取清潔措施。解讀（關(guān)鍵詞）：減少污染5.2設(shè)備與環(huán)境條件

5.2.2環(huán)境監(jiān)測(cè)

5.2.2.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定合理的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序（見(jiàn)ISO18593并參見(jiàn)附錄D）。

5.2.2.2對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析（見(jiàn)ISO18593和ISO7218）。設(shè)定不同工作區(qū)域可接受的背景菌落總數(shù)量并且有文件化的程序處理背景菌落總數(shù)超標(biāo)情況。

解讀（關(guān)鍵詞）：環(huán)境監(jiān)測(cè)：潔凈區(qū)空氣、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、消毒效果監(jiān)測(cè)等5.2設(shè)備與環(huán)境條件

5.2.3衛(wèi)生

5.2.3.1制定清潔實(shí)驗(yàn)室固定裝置、設(shè)備、表面等的文件化程序所制定的程序應(yīng)考慮環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果和交叉污染發(fā)生的概率。

5.2.3.2應(yīng)有有害微生物發(fā)生污染時(shí)的處理程序。

5.2.3.3采取以下措施防止房間內(nèi)潔凈度降低：

a）提供足夠空間；

b）盡可能減少在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行文件處理；

c）禁止把植物和個(gè)人物品帶入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。

5.2.3.4根據(jù)所檢測(cè)的微生物危害等級(jí)的不同在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿著相應(yīng)的防護(hù)服（如果需要包括保護(hù)頭發(fā)、胡須、手和鞋等防護(hù)措施）。離開(kāi)工作區(qū)域時(shí)脫下防護(hù)服。這對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室和危害等級(jí)II級(jí)以上的實(shí)驗(yàn)室尤為重要。

5.2.3.5應(yīng)準(zhǔn)備足夠數(shù)量的洗手設(shè)施和急救材料。

5.2.3.6無(wú)菌室在使用前后應(yīng)進(jìn)行消毒并定期監(jiān)測(cè)無(wú)菌室的消毒效果。（參見(jiàn)附錄B和附錄D）解讀（關(guān)鍵詞）：環(huán)境監(jiān)測(cè)：潔凈區(qū)空氣、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、消毒效果監(jiān)測(cè)等附錄B.微生物無(wú)菌室基本要求及管理B.1.無(wú)菌室的基本建設(shè)要求B.1.1根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室所涉及的生物安全等級(jí)無(wú)菌室的設(shè)計(jì)和建設(shè)應(yīng)符合GB50364和GB19489的相關(guān)要求。B.1.2無(wú)菌室大小應(yīng)能夠滿足檢驗(yàn)工作的需求。內(nèi)墻為淺色，墻面和地面應(yīng)光滑，墻壁與地面、天花板連接處應(yīng)呈凹弧形無(wú)縫隙，無(wú)死角，易于清潔和消毒。B.1.3無(wú)菌室入口處應(yīng)設(shè)置緩沖間，緩沖間內(nèi)應(yīng)安裝非手動(dòng)式開(kāi)關(guān)的洗手盆，并可有毛巾。緩沖間應(yīng)有足夠的面積以保證操作人員更換工作服及鞋帽。B.1.4無(wú)菌室內(nèi)工作臺(tái)的高度約80cm，工作臺(tái)應(yīng)保持水平，工作臺(tái)面應(yīng)無(wú)滲漏耐腐蝕易于清潔、消毒。B.1.5無(wú)菌室內(nèi)光照應(yīng)分布均勻，工作臺(tái)面的光照度應(yīng)不低于540lx。B.1.6無(wú)菌室應(yīng)具備適當(dāng)?shù)耐L(fēng)和溫度調(diào)節(jié)的條件。無(wú)菌室的推薦溫度為20相對(duì)濕度為40-60%。B.1.7緩沖間及操作室內(nèi)均應(yīng)設(shè)置能達(dá)到空氣消毒效果的紫外燈或其他適宜的消毒裝置。附錄B.2微生物無(wú)菌室的管理B.2.1無(wú)菌室在使用前后應(yīng)進(jìn)行有效的消毒，消毒方法參見(jiàn)附錄D。B.2.2無(wú)菌室的滅菌效果應(yīng)至少每?jī)芍茯?yàn)證一次。B.2.3應(yīng)制定清潔、消毒、滅菌、使用和應(yīng)急處理程序。B.2.4應(yīng)記錄環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果，并歸檔保存。B.2.5不符合規(guī)定時(shí)應(yīng)立即停止使用。附錄D無(wú)菌室消毒方法D.1.1紫外線消毒D.1.1.1在室溫20-25時(shí)，220V30W紫外燈下方垂直位置1m處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)大于70uW/cm2，低于此值時(shí)應(yīng)更換。適當(dāng)數(shù)量的紫外燈確保平均每立方米不少于1.5W。D.1.1.2紫外線消毒時(shí)，無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔干燥。D.1.1.3在無(wú)人條件下，可采取紫外線消毒最用時(shí)間不少于30分鐘，室內(nèi)溫度在20-40度之外、相對(duì)濕度大于60%時(shí)應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)照射時(shí)間。D.1.1.4用紫外線消毒物品表面時(shí)，應(yīng)使照射表面受到紫外線的直接照射且應(yīng)達(dá)到足夠的照射劑量。D.1.1.5人員在關(guān)閉紫外燈至少30分鐘方可入內(nèi)作業(yè)。D.1.1.6按照GB15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)紫外線的消毒與殺菌效果。附錄D無(wú)菌室消毒方法D.1.2臭氧消毒D.1.2.1封閉無(wú)菌室內(nèi)，無(wú)人條件下，采用20mg/m3濃度的臭氧，作用時(shí)間應(yīng)大于30分鐘。消毒后室內(nèi)臭氧濃度低于0.2mg/3時(shí)方可入內(nèi)作業(yè)。D.1.2.2按照GB18202的規(guī)定，檢測(cè)室內(nèi)臭氧濃度。5.3設(shè)備

5.3.1總則

5.3.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定并實(shí)施設(shè)備維護(hù)、校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證程序（參見(jiàn)附錄C）

5.3.1.2設(shè)備應(yīng)達(dá)到規(guī)定的性能參數(shù)并符合相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)。無(wú)論如何，只要發(fā)現(xiàn)設(shè)備故障，應(yīng)立即停止使用必要時(shí)檢查對(duì)以前結(jié)果的影響。

5.3.1.3每臺(tái)設(shè)備均應(yīng)有唯一性標(biāo)識(shí)。

5.3.1.4如果設(shè)備脫離實(shí)驗(yàn)室直接控制或被修理，恢復(fù)使用前應(yīng)對(duì)其檢查或校準(zhǔn)，以確保其性能滿足要求。解讀（關(guān)鍵詞）：設(shè)備要控制5.3設(shè)備

5.3.1總則

5.3.1.5使用計(jì)算機(jī)或自動(dòng)化設(shè)備收集、處理、記錄、報(bào)告、存儲(chǔ)或檢索數(shù)據(jù)應(yīng)確保：

a）由使用者開(kāi)發(fā)的計(jì)算機(jī)軟件應(yīng)被制定成足夠詳細(xì)的文件，并對(duì)其適用性進(jìn)行適當(dāng)驗(yàn)證；

b）制定并執(zhí)行相應(yīng)程序以隨時(shí)保護(hù)數(shù)據(jù)和記錄的完整性，防止無(wú)意的或未經(jīng)授權(quán)者訪問(wèn)、修改或破壞；

c）應(yīng)維護(hù)計(jì)算機(jī)和自動(dòng)化設(shè)備，以確保其正常運(yùn)轉(zhuǎn)，并應(yīng)提供相應(yīng)的環(huán)境和操作條件。

5.2.1.6為避免偶然發(fā)生的交叉污染，實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備不應(yīng)頻繁移動(dòng)解讀（關(guān)鍵詞）：涉及計(jì)算機(jī)參與的活動(dòng)的控制5.3設(shè)備

5.3.2維護(hù)

5.3.2.1設(shè)備的安裝和布局應(yīng)便于操作，易于維護(hù)、清潔和校準(zhǔn)5.3.2.2應(yīng)定期驗(yàn)證和維護(hù)設(shè)備，以確保其處于良好工作狀態(tài)。應(yīng)根據(jù)使用頻率在特定時(shí)間間隔內(nèi)進(jìn)行維護(hù)和性能驗(yàn)證，并保存相關(guān)記錄。

5.3.2.3新購(gòu)置的玻璃器皿用5%氫氧化鈉和3%稀酸分別浸泡24小時(shí)，清洗后使用。

5.3.2.4應(yīng)注意以下交叉污染：

a）一次性設(shè)備和重復(fù)使用的玻璃器皿應(yīng)潔凈無(wú)菌；

b）建議實(shí)驗(yàn)室使用專門處理污染物的高壓滅菌鍋；解讀（關(guān)鍵詞）：設(shè)備維護(hù)5.3設(shè)備

5.3.2維護(hù)

5.3.2.5以下設(shè)備需要清潔、維護(hù)、定期進(jìn)行損壞檢驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行滅菌：

a）一般設(shè)備：濾器、玻璃和塑料容器（瓶子、試管、培養(yǎng)皿）、取樣工具、接種環(huán)或接種針等

b）測(cè)量器具：溫度計(jì)、計(jì)時(shí)器、天平、酸度計(jì)、菌落計(jì)數(shù)器等；

c）定容設(shè)備：吸管、自動(dòng)分液器、微量移液器等；

d）其他設(shè)備：水浴鍋、培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)或生物安全柜、高壓滅菌鍋、均質(zhì)器、冷藏箱、冷凍柜等。解讀（關(guān)鍵詞）：需要維護(hù)的設(shè)備5.3設(shè)備

5.3.3校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.3.3.1總則：

應(yīng)制定影響檢測(cè)結(jié)果的設(shè)備的校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證程序。實(shí)驗(yàn)室選擇使用的校準(zhǔn)服務(wù)應(yīng)確保其測(cè)量可溯源至國(guó)際單位制（SI）；若測(cè)量無(wú)法溯源到SI單位或與之無(wú)關(guān)時(shí)，應(yīng)能夠溯源到諸如有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（參考物質(zhì)）、約定的方法和協(xié)議標(biāo)準(zhǔn)等。根據(jù)設(shè)備以前的性能狀況以及經(jīng)驗(yàn)和實(shí)際需要，確定設(shè)備使用性能驗(yàn)證的頻率。應(yīng)在設(shè)備使用前，確認(rèn)其性能使用后要記錄。

應(yīng)定期維護(hù)以保證設(shè)備處于良好的工作狀態(tài)。

附錄C規(guī)定了不同設(shè)備的校準(zhǔn)、性能驗(yàn)證和維護(hù)方法。解讀（關(guān)鍵詞）：校準(zhǔn)、驗(yàn)證、維護(hù)、溯源5.3校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.3.3.2測(cè)溫裝置

a）溫度是直接影響檢測(cè)結(jié)果或設(shè)備正常運(yùn)轉(zhuǎn)的因素。安裝在培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋溫度計(jì)、熱電偶和鉑電阻溫度計(jì)應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

b）測(cè)溫裝置監(jiān)控相關(guān)設(shè)備的溫度，設(shè)備使用前應(yīng)驗(yàn)證此類裝置的性能。2024/7/25GB/T27405-200828解讀（關(guān)鍵詞）：

溫度是影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果的重要因素.

溫度計(jì)需要檢定或校準(zhǔn).5.3校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.3.3.3培養(yǎng)箱、水浴鍋和干熱滅菌箱

a）首次安裝使用時(shí)對(duì)溫度的穩(wěn)定和一致性進(jìn)行校準(zhǔn)。

b）應(yīng)確定并記錄設(shè)備的溫度穩(wěn)定性、溫度分布的均勻性和達(dá)到平衡狀態(tài)所需要的時(shí)間，尤其要注意使用狀況（如培養(yǎng)皿的位置、間距、高度和層疊數(shù)量）。

c）每次維修和校準(zhǔn)后，都應(yīng)檢查和記錄最初確認(rèn)設(shè)備時(shí)所記錄的各參數(shù)的穩(wěn)定性。應(yīng)監(jiān)測(cè)設(shè)備的運(yùn)行溫度，并保存記錄。

d）應(yīng)定期清潔和消毒內(nèi)外壁。2024/7/25GB/T27405-200829解讀（關(guān)鍵詞）：培養(yǎng)箱、水浴鍋、干熱滅菌箱校準(zhǔn)、性能驗(yàn)證5.3校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.3.3.4高壓滅菌鍋（包括培養(yǎng)基制備儀）

a）時(shí)間和溫度知識(shí)的準(zhǔn)確度應(yīng)滿足使用要求，不能僅靠眼里表測(cè)定時(shí)間，應(yīng)使用感應(yīng)器控制和監(jiān)控運(yùn)轉(zhuǎn)循環(huán)情況。

b）初次使用前、大型維修或調(diào)試（更換溫度調(diào)節(jié)器的探測(cè)儀或程序器、調(diào)整安裝位置及工作循環(huán)）或需要對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行控制時(shí)，應(yīng)在每批物品不同位置放置足夠的溫度感應(yīng)器（已于充滿水或培養(yǎng)基的容器中）以顯示不同位置的溫度。

c）在驗(yàn)證過(guò)程中，應(yīng)提供基于加熱分布圖的清晰明了的操作說(shuō)明。確定接受（拒絕）的標(biāo)準(zhǔn)和使用記錄，包括每個(gè)運(yùn)轉(zhuǎn)循環(huán)的溫度時(shí)間。

d）監(jiān)控措施：應(yīng)用熱電偶和記錄儀打印輸出圖表、直接觀察和記錄最高溫度及達(dá)到最高溫度值的時(shí)間、化學(xué)或生物指示劑檢查每個(gè)滅菌循環(huán)的運(yùn)轉(zhuǎn)效果。

e）應(yīng)及時(shí)除銹和排水。2024/7/25GB/T27405-200830解讀（關(guān)鍵詞）：高壓滅菌鍋、校準(zhǔn)、維護(hù)、性能驗(yàn)證5.3校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.3.3.5砝碼和天平

a）砝碼和天平應(yīng)在規(guī)定時(shí)間間隔內(nèi)進(jìn)行校準(zhǔn)和檢定。

b）使用中可能造成污染時(shí)，應(yīng)使用非腐蝕性消毒劑進(jìn)行清潔和消毒。

5.3.3.6定容設(shè)備

a）應(yīng)進(jìn)行初始驗(yàn)證，以后定期檢查。已經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)或檢定證明符合使用要求的玻璃器皿不必進(jìn)行初始驗(yàn)證。應(yīng)檢查移取不同體積的準(zhǔn)確度（如在體積可變?cè)O(shè)備的幾個(gè)不同設(shè)置），測(cè)定反復(fù)移取液體所得的精密度。

b）對(duì)于單用途的一次性定容設(shè)備，應(yīng)要求供應(yīng)商具備保證產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠的質(zhì)量體系，并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行初始驗(yàn)證，對(duì)其準(zhǔn)確度進(jìn)行隨機(jī)抽查。必要時(shí)對(duì)每批定容設(shè)備的實(shí)用性進(jìn)行核查。2024/7/25GB/T27405-200831解讀（關(guān)鍵詞）：

這些都是影響準(zhǔn)確度的因素

5.3校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.3.3.7生物安全柜

應(yīng)定期對(duì)生物安全柜進(jìn)行校準(zhǔn)和性能確認(rèn)，方法和頻率見(jiàn)GB50346。2024/7/25GB/T27405-200832解讀（關(guān)鍵詞）：生物安全柜

10.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)（GB50346）10.3.1有下列情況之一時(shí)，應(yīng)對(duì)生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)：a）安裝完畢，投入使用前；b）被移動(dòng)位置；c）檢修后；d）一年一度的常規(guī)檢測(cè)10.3.2生物安全柜必須具有合格的出廠檢測(cè)報(bào)告和安裝完成后的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)合格并出具的檢測(cè)報(bào)告。2024/7/25GB/T27405-20083310.3.3生物安全柜必檢項(xiàng)目：項(xiàng)目情況執(zhí)行條款備注安裝位置靜態(tài)9.4垂直氣流速度正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.4II級(jí)安全柜工作窗口氣流流向正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.5I、II級(jí)安全柜工作窗口氣流流速正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.6I、II級(jí)安全柜工作區(qū)潔凈度正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.7II級(jí)安全柜噪聲正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.8照度正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.9排風(fēng)高效過(guò)濾器檢漏檢測(cè)狀態(tài)10.3.10接觸電流正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.11接地電阻正常運(yùn)轉(zhuǎn)10.3.122024/7/25GB/T27405-20083410.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)（GB50346）10.3.4生物安全柜垂直氣流平均風(fēng)速檢測(cè)

方法：在高效過(guò)濾器以下0.15m處的截面上，采用風(fēng)速儀均勻布點(diǎn)測(cè)量截面風(fēng)速。測(cè)點(diǎn)間距不大于0.15m，每列至少3點(diǎn)，每行至少5點(diǎn)。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：平均風(fēng)速不低于0.25m/s，與生產(chǎn)廠家給定值不大于±0.025m/s，且單點(diǎn)風(fēng)速與平均風(fēng)速之差不大于±20%。2024/7/25GB/T27405-20083510.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)（GB50346）10.3.5生物安全柜工作窗口的氣流流向檢測(cè)

方法：采用發(fā)煙法或絲線法在工作窗口斷面檢測(cè)，檢測(cè)位置包括工作窗口的四周邊緣和中間區(qū)域。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：工作窗口斷面所有位置的氣流均向內(nèi)。2024/7/25GB/T27405-20083610.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)（GB50346）10.3.6生物安全柜工作窗口氣流流速檢測(cè)

方法：采用風(fēng)速計(jì)測(cè)量工作窗口斷面風(fēng)速。測(cè)點(diǎn)間距不大于0.01m，每列至少2點(diǎn)，每行至少5點(diǎn)。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：其斷面上的風(fēng)速均不低于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。2024/7/25GB/T27405-20083710.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)

（GB50346）10.3.7生物安全柜工作區(qū)潔凈度檢測(cè)

方法：采用塵埃粒子計(jì)數(shù)器在工作區(qū)檢測(cè)。計(jì)數(shù)器的采樣口置于工作臺(tái)面上20cm高度位置，其測(cè)量點(diǎn)服從行、列均為20cm網(wǎng)格分布。每列至少3點(diǎn)，每行至少5點(diǎn)。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：工作區(qū)潔凈度應(yīng)達(dá)到5級(jí)（100級(jí)）。2024/7/25GB/T27405-20083810.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)

（GB50346）10.3.8生物安全柜噪聲檢測(cè)

方法：生物安全柜前面板水平中心向外300mm，且高于工作太380mm處用聲級(jí)計(jì)測(cè)量噪聲。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：噪聲不得高于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。2024/7/25GB/T27405-20083910.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)

（GB50346）10.3.9生物安全柜照度檢測(cè)方法：沿工作臺(tái)面長(zhǎng)度方向中心線每隔30cm設(shè)置一個(gè)測(cè)量點(diǎn)。與邊墻距離＜15cm時(shí)，不再設(shè)置。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：平均照度不低于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。10.3.10生物安全柜箱體漏泄檢測(cè)密封并加壓到500Pa的壓力下用皂泡檢漏?？梢詸z出小的泄漏點(diǎn)。大的泄漏點(diǎn)會(huì)產(chǎn)生細(xì)微的空氣流動(dòng)聲。2024/7/25GB/T27405-20084010.3生物安全柜的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)（GB50346）10.3.8生物安全柜工作窗口氣流流速檢測(cè)

方法：采用風(fēng)速計(jì)測(cè)量工作窗口斷面風(fēng)速。測(cè)點(diǎn)間距不大于0.01m，每列至少2點(diǎn)，每行至少5點(diǎn)。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：其斷面上的風(fēng)速均不低于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。2024/7/25GB/T27405-2008415.3校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.3.3.8其他設(shè)備

a）應(yīng)定期或在使用前驗(yàn)證傳導(dǎo)計(jì)、氧氣表、pH計(jì)和其他類似設(shè)備的性能。在適當(dāng)調(diào)節(jié)愛(ài)你想儲(chǔ)存驗(yàn)證用的緩沖液，并且標(biāo)記有效期。

b）如果適度對(duì)于檢測(cè)結(jié)果很重要，則應(yīng)對(duì)濕度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。

c）若所測(cè)量時(shí)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果有影響，應(yīng)使用經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的定時(shí)器或計(jì)時(shí)器。

d）若檢測(cè)過(guò)程中使用離心機(jī)，應(yīng)評(píng)估離心力的危險(xiǎn)程度，如果離心機(jī)是關(guān)鍵的，則需要校準(zhǔn)。2024/7/25GB/T27405-200842解讀（關(guān)鍵詞）：

檢定:強(qiáng)檢設(shè)備如天平、pH計(jì)、溫度計(jì)、壓力表等校準(zhǔn)：根據(jù)檢驗(yàn)需要，對(duì)影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的應(yīng)進(jìn)行設(shè)備校準(zhǔn)要求和頻率（ISO7218和EA-04/10）設(shè)備類型要求推薦頻率參考玻璃溫度計(jì)校準(zhǔn)五年一次單點(diǎn)核查一年一次參考熱電偶校準(zhǔn)三年一次用參考溫度計(jì)核查一年一次工作溫度計(jì)零點(diǎn)和工作溫度范圍核查一年一次工作熱電偶零點(diǎn)和工作溫度范圍核查一年一次天平校準(zhǔn)一年一次校準(zhǔn)砝碼校準(zhǔn)五年一次核查砝碼校準(zhǔn)砝碼和校準(zhǔn)天平核查一年一次設(shè)備校準(zhǔn)要求和頻率（ISO7218和EA-04/10）設(shè)備類型要求推薦頻率玻璃定容器具重量法校準(zhǔn)值所需公差一年一次顯微鏡測(cè)微器校準(zhǔn)初次使用時(shí)濕度計(jì)校準(zhǔn)一年一次離心機(jī)校準(zhǔn)一年一次壓力表校準(zhǔn)一年一次設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率溫控設(shè)備（培養(yǎng)箱、水浴鍋、冰箱等）確定溫度的穩(wěn)定和均勻性初次使用前，此后兩年一次和維修后監(jiān)測(cè)溫度每個(gè)工作日一次或每次使用前干熱滅菌器確定溫度的穩(wěn)定和均勻性初次使用前，此后兩年一次和維修后監(jiān)測(cè)溫度每次使用前設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率高壓滅菌器確定運(yùn)轉(zhuǎn)特性初次使用前，此后兩年一次和維修后監(jiān)測(cè)溫度和時(shí)間每一次使用前生物安全柜確定性能初次使用前，此后一年一次和維修后微生物監(jiān)測(cè)每?jī)芍軞饬鞅O(jiān)測(cè)每次使用前設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率超凈工作臺(tái)確定性能初次使用前，每次維修后瓊脂平板檢測(cè)每?jī)芍芏〞r(shí)器核查每年一次顯微鏡檢查調(diào)準(zhǔn)裝置每工作日一次或每次使用前pH計(jì)至少兩種緩沖液調(diào)整每工作日一次或每次使用前設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率天平清零并砝碼核查每工作日一次或每次使用前去離子器和反滲透裝置檢查傳導(dǎo)率每周一次檢查微生物污染每月一次重量稀釋機(jī)檢查所分配部分的重量每工作日一次檢查稀釋比例每工作日一次設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率培養(yǎng)基分裝器檢查所分配的量初次使用前，每次調(diào)整或替換時(shí)移液器（管）準(zhǔn)確性和精密度有規(guī)律地（使用頻率）螺旋菌接種儀確定其性能初次使用前，此后每年一次檢測(cè)針突狀況以及始端和終端每工作日一次或每次使用前檢查所分配的量每月一次設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率菌落計(jì)數(shù)器對(duì)照手動(dòng)計(jì)數(shù)器核查每年一次離心機(jī)旋速計(jì)核查每年一次厭氧罐（箱）厭氧指示劑確認(rèn)每次使用時(shí)無(wú)菌室使用采樣器、沉降平板、接觸盤或棉拭子方法監(jiān)測(cè)微生物污染每?jī)芍芤淮卧O(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率培養(yǎng)箱、冰箱、凍干機(jī)、干熱滅菌器清潔和消毒內(nèi)表面每月一次水浴鍋倒空、清潔、消毒、再注水每月一次，使用消毒劑是每6月一次離心機(jī)檢修每?jī)芍芤淮吻鍧嵑拖久看问褂们吧锇踩袢鏅z修和機(jī)械檢查每年一次或生產(chǎn)商推薦設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率高壓滅菌器檢查襯墊、清潔和排空內(nèi)室生產(chǎn)商推薦全面檢修每年一次或生產(chǎn)商推薦壓力容器的安全檢查每年顯微鏡全面維修保養(yǎng)每年一次pH計(jì)清潔電極每次使用前設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率天平、重量稀釋機(jī)清潔每次使用前檢修每年一次蒸餾鍋清潔和除垢必要時(shí)（如3月一次）去離子機(jī)和反滲透裝置更換柱體或?yàn)V膜生產(chǎn)商推薦厭氧罐清潔和消毒每次使用后培養(yǎng)基分裝器、定容設(shè)備、移液器必要時(shí)去污染、清潔和滅菌每次使用前設(shè)備的性能驗(yàn)證設(shè)備類型要求推薦頻率螺旋菌落接種儀檢修每年一次去污染、清潔和滅菌每次使用前實(shí)驗(yàn)室清潔和消毒工作區(qū)表面每個(gè)工作日一次或使用期間清潔地板、消毒洗滌槽每周一次清潔和消毒其他表面每三月一次5.4試劑和培養(yǎng)基

5.4.1試劑

5.4.1.1應(yīng)有對(duì)試劑進(jìn)行檢查、接受（拒收）和儲(chǔ)存的程序，確保所有試劑質(zhì)量符合相關(guān)檢測(cè)需要。應(yīng)使用有證的國(guó)家或國(guó)際質(zhì)控微生物（標(biāo)準(zhǔn)微生物），在初次使用和保存期限內(nèi)驗(yàn)證并記錄每一批對(duì)檢測(cè)其決定作用的試劑的適用性，不得使用未達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的試劑。

5.4.1.2應(yīng)對(duì)試劑進(jìn)行管理控制，包括全部相關(guān)試劑、質(zhì)控材料以及校準(zhǔn)品的批號(hào)、實(shí)驗(yàn)室接受日期以及這些材料投入使用的日期。

5.4.1.3化學(xué)藥品和培養(yǎng)基應(yīng)分類存放，其中無(wú)機(jī)物可按酸、堿、鹽分區(qū)存放。2024/7/25GB/T27405-200855解讀（關(guān)鍵詞）：

試劑的驗(yàn)收試劑的存放，分區(qū)存放5.4校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.4.2實(shí)驗(yàn)室制備培養(yǎng)基

5.4.2.1實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備和使用等應(yīng)按照SN/T1538.1的要求執(zhí)行。

5.4.2.2應(yīng)檢查自制培養(yǎng)基，稀釋劑和其他懸浮液的適用性檢查方式如下，按SN/T1538.2的定量程序評(píng)估目標(biāo)微生物在培養(yǎng)基的復(fù)蘇或存活力。

a）目標(biāo)微生物的復(fù)蘇或存活力的保持；

b）對(duì)非目標(biāo)微生物的控制；

c）生化（分離的和鑒定的）性質(zhì)；

d）理化性質(zhì)（例如pH、體積）。

5.4.2.3原料（包括商業(yè)脫水配料和單獨(dú)配方組分）應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下儲(chǔ)存，如低溫、干燥、避光。所有的容器應(yīng)密封，尤其盛放脫水培養(yǎng)基的容器。不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。

5.4.2.4要確定和驗(yàn)證已制備的培養(yǎng)基在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下的保存期限。

5.4.2.5除非方法有特殊要求，培養(yǎng)基、試劑及稀釋劑配制用水應(yīng)經(jīng)蒸餾、去離子或反滲透處理并無(wú)菌、無(wú)干擾劑和抑制劑，配制用水應(yīng)滿足下列參數(shù)：

a）電阻率在25℃時(shí)，應(yīng)≥300000??cm，建議每檢測(cè)一次；

b）重金屬（鎘、鉻、銅、鎳、鉛等）＜0.05mg/L，重金屬總量＜10mg/L，建議每年檢測(cè)一次。2024/7/25GB/T27405-200856解讀（關(guān)鍵詞）：SN/T1538.15.4校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證

5.4.3即用型培養(yǎng)基

5.4.3.1在使用前需驗(yàn)證所有即用型或部分完成的培養(yǎng)基（包括稀釋劑和其他懸浮液），應(yīng)充分定量評(píng)估其對(duì)目標(biāo)微生物的復(fù)蘇或存活力以及對(duì)非目標(biāo)微生物抑制性能，應(yīng)使用客觀的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)其品質(zhì)（如感官和生化性質(zhì)）進(jìn)行評(píng)估。

5.4.2.2作為培養(yǎng)基驗(yàn)證的一部分，應(yīng)充分了解制造商所提供的產(chǎn)品之說(shuō)明書(shū)，其中至少應(yīng)包括：

a）培養(yǎng)基的名稱和組成成分，包括所有添加劑；

b）保存期限和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)；

c）儲(chǔ)存條件；

d）產(chǎn)品特性（級(jí)別）；

e）無(wú)菌檢查；

f）目標(biāo)和非目標(biāo)對(duì)照微生物的生長(zhǎng)狀態(tài)的檢查以及驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)；

g）感官檢測(cè)和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)；

h）說(shuō)明書(shū)上的生產(chǎn)日期。

5.4.2.3應(yīng)驗(yàn)證每一批培養(yǎng)基，確保所接收的每批培養(yǎng)基滿足質(zhì)量要求。2024/7/25GB/T27405-200857解讀（關(guān)鍵詞）：培養(yǎng)基驗(yàn)證D.2培養(yǎng)基和試劑消毒處理方法D.2.1培養(yǎng)基通常采用高壓濕熱滅菌法121℃滅菌15分鐘，特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌（如含糖培養(yǎng)基115℃滅菌20分鐘）。D.2.2部分培養(yǎng)基（如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基、膽硫乳培養(yǎng)基），只能煮沸滅菌。D.2.3對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì)，應(yīng)采用膜過(guò)濾方法進(jìn)行過(guò)濾除菌。D.2.4即用型試劑不需滅菌，應(yīng)參見(jiàn)相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說(shuō)明，直接使用。D.3器具和設(shè)備消毒處理方法D.3.1濕熱滅菌：采用高壓滅菌器，121℃滅菌20分鐘，適用于玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等。按照GB15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)高壓滅菌器的殺菌效果。D.3.2干熱滅菌：采用干燥箱滅菌，160℃滅菌2h，180℃滅菌2h，適用于玻璃器皿，不銹鋼器具等。D.3.4液體消毒劑消毒：使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑（參見(jiàn)表1）對(duì)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面進(jìn)行消毒?？砂凑誈B15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)自配或商業(yè)消毒劑的消毒效：可按照ISO18593檢測(cè)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面的消毒效果。D.4實(shí)驗(yàn)室廢棄物消毒處理方法D.4.1對(duì)于培養(yǎng)物及其污染的物品（如斜面、api20E測(cè)試條、api20NE測(cè)試條、生物鑒定管、血清學(xué)鑒定用載玻片、mini-VIDAS測(cè)試條、用過(guò)的移液器吸頭、細(xì)菌培養(yǎng)皿、注射器等），應(yīng)使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑（見(jiàn)表1）對(duì)處理后一定時(shí)間或121℃高壓滅菌至少30分鐘，或者其他有效處置措施，將處理物倒入特殊標(biāo)識(shí)的垃圾袋內(nèi)直接送到指定地點(diǎn)。D.4.2對(duì)于實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物尸體及相關(guān)廢棄物，按照GB14925的規(guī)定進(jìn)行處理。D.4.3記錄并保留廢棄物和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體處理的記錄。表1某些消毒劑的特性（ISO7218）抗活性毒性皮膚眼睛肺次氯酸鹽a+++乙醇b+甲醛a+++戊二醛a+++++++++碘載體a++-a:真菌、細(xì)菌、分枝桿菌、孢子、親脂病毒b:細(xì)菌、分枝桿菌、孢子5.4.標(biāo)識(shí)

應(yīng)標(biāo)明所有試劑（包括儲(chǔ)存液）、培養(yǎng)基、稀釋劑和其他懸浮液名稱，可行時(shí)應(yīng)標(biāo)明適用性、特性、濃度、儲(chǔ)存條件、配置日期、有效期或推薦保存期限。負(fù)責(zé)微生物檢測(cè)準(zhǔn)備的試驗(yàn)人員可以通過(guò)記錄加以識(shí)別。

5.5標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物

5.5.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

5.5.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)提供了測(cè)量中基本的可溯源性，其可用來(lái)：

a）證明結(jié)果的準(zhǔn)確性；

b）校準(zhǔn)設(shè)備；

c）監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)轉(zhuǎn)；

d）驗(yàn)證試驗(yàn)方法；

e）比較試驗(yàn)方法。2024/7/25GB/T27405-200862解讀（關(guān)鍵詞）：標(biāo)識(shí)

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（診斷血清等）5.5標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物

5.5.2標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物

5.5.2.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定并實(shí)施特定程序管理和使用標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物。

5.5.2.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物來(lái)驗(yàn)收培養(yǎng)基（包括試劑盒）、驗(yàn)證方法和評(píng)估實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)室可使用來(lái)自認(rèn)可的國(guó)內(nèi)或國(guó)外菌種收藏機(jī)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)菌株，或使用與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有相關(guān)特性等效的商業(yè)派生菌株，確定試劑盒的性能和驗(yàn)證方法，并證實(shí)其可追溯性（見(jiàn)SN/T1538.2）。

5.5.2.3將標(biāo)準(zhǔn)菌株傳代培養(yǎng)一次，制得標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)（純度和生化檢查）。建議使用深度冰凍或凍干的方法制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株經(jīng)繼代培養(yǎng)獲得日常微生物檢測(cè)所需要的工作菌株（見(jiàn)附錄A）。一旦標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株被解凍，最好不要重新冷凍和再次使用。

5.5.2.4所有標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物從儲(chǔ)備菌株傳代培養(yǎng)次數(shù)不得超過(guò)5次，除非標(biāo)準(zhǔn)方法中要求并規(guī)定或?qū)嶒?yàn)室能夠提供文件化證據(jù)證明其相關(guān)特性沒(méi)有改變。

5.5.2.5工作菌株不可代替標(biāo)準(zhǔn)菌株。標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)派生菌株僅可用作工作菌株。

5.5.2.6標(biāo)準(zhǔn)菌株如已老化、退化或變異、污染等，經(jīng)確認(rèn)試驗(yàn)不符合的或該菌種已無(wú)使用需要的，應(yīng)及時(shí)銷毀。2024/7/25GB/T27405-200863解讀（關(guān)鍵詞）標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、工作菌株附錄D.1.3無(wú)菌室空氣滅菌效果驗(yàn)證方法（沉降法）1.在消毒處理后與開(kāi)展檢驗(yàn)活動(dòng)之前期間采樣。2.取樣位點(diǎn)的選擇應(yīng)基于人員流量情況和做試驗(yàn)的頻率。

30m2以下從所設(shè)定的一條對(duì)角線上選取3個(gè)點(diǎn)（中心1點(diǎn)兩端各距墻1m處各取1點(diǎn)）

30m2以上東南西北中5點(diǎn)，東南西北各距墻1m處）3.瓊脂平板或菌落總數(shù)測(cè)試片置于選點(diǎn)上距地面80cm處，開(kāi)蓋暴露15min。4.36±

1℃,培養(yǎng)48±

1小時(shí)。5.確認(rèn)菌落總數(shù)。如大于設(shè)定的風(fēng)險(xiǎn)值。應(yīng)分析原因并采取適當(dāng)措施。凈化工作臺(tái)的控制水平流凈化工作臺(tái)工作區(qū)域，要求潔凈度為100級(jí)?？諝獬两?0min，細(xì)菌數(shù)＜1個(gè)/皿。垂直流凈化工作臺(tái)，細(xì)菌數(shù)＜0.49個(gè)/皿.凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢查頻次：1次/月主要是細(xì)菌沉降檢測(cè)。凈化工作臺(tái)高效過(guò)濾膜一般為一年更換一次，并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。2024/7/2565GB/T27405-2008紫外線燈的控制檢測(cè)方法：儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。前者是通過(guò)專用儀器檢測(cè)紫外燈管發(fā)射的紫外光強(qiáng)度。國(guó)家消毒技術(shù)規(guī)范中表明在距離照射無(wú)1米處，要求其強(qiáng)度為90。生物測(cè)試法：采用一定的菌培養(yǎng)物，經(jīng)一定比例稀釋，菌量控制在200-250個(gè)/0.5ml，涂布平板在紫外燈光下照射，2min，同時(shí)設(shè)置普通光源的對(duì)照組，后置37℃48h，計(jì)算其殺滅率。要求殺滅率達(dá)99%。2024/7/2566GB/T27405-2008規(guī)范中過(guò)程控制要求6.1合同評(píng)審6.2分包6.3檢測(cè)方法的確認(rèn)和驗(yàn)證6.3.1滿足客戶要求6.3.2對(duì)非標(biāo)方法、實(shí)驗(yàn)室制定的方法、超出其預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法、擴(kuò)充和修改的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行確認(rèn)。6.3.2.1定性微生物檢測(cè)方法，確認(rèn)其特異性、陽(yáng)性偏差、陰性偏差、判定限、培養(yǎng)基影響、重復(fù)性和再現(xiàn)性6.3.2.2定量微生物檢測(cè)方法，確認(rèn)其特異性、靈敏度、陽(yáng)性偏差、陰性偏差、重復(fù)性和再現(xiàn)性以及規(guī)定的可變范圍內(nèi)的判定限。在檢測(cè)不同種類樣品時(shí)，應(yīng)考慮不同培養(yǎng)基的差異。應(yīng)使用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法評(píng)估檢測(cè)結(jié)果。6.3.3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保留制造者或第三方機(jī)構(gòu)提供的所用商業(yè)檢測(cè)系統(tǒng)（試劑盒）的確認(rèn)數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)應(yīng)為合作試驗(yàn)獲得的。如果沒(méi)有或不完全適用，實(shí)驗(yàn)室有責(zé)任完成所用商業(yè)檢測(cè)系統(tǒng)的確認(rèn)2024/7/25GB/T27405-200867規(guī)范中過(guò)程控制要求6.4測(cè)量不確定度6.4.1檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有并應(yīng)用評(píng)定測(cè)量不確定度的程序。應(yīng)識(shí)別和證實(shí)不確定度分量處于控制之中，并評(píng)估處它們對(duì)結(jié)果的影響程度。6.4.2了解待檢微生物的分布情況，分樣時(shí)予以考慮。但建議不把不確定度包括在內(nèi)，除非委托人有這方面要求。6.4.3不確定度概念不能直接用于定性檢測(cè)結(jié)果。但應(yīng)識(shí)別并證明個(gè)別的可變因素（如試劑的濃度）處于控制之中。對(duì)于判定限是一個(gè)重要的適用性指標(biāo)的檢測(cè)而言，應(yīng)慎重評(píng)估有關(guān)接種量的不確定度極其重要性。應(yīng)意識(shí)到定性試驗(yàn)中出現(xiàn)的假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果。2024/7/25GB/T27405-200868規(guī)范中過(guò)程控制要求6.5取樣6.5.1保證質(zhì)量。6.5.2保持完整性，保證運(yùn)輸和儲(chǔ)存條件。6.5.3無(wú)菌取樣。檢測(cè)和記錄取樣地點(diǎn)的環(huán)境狀況（如空氣污染、溫度等）。6.6樣品的處置和確認(rèn)6.6.7沒(méi)有特殊要求的，實(shí)驗(yàn)室一般不保留樣品。6.6.8有嚴(yán)重污染的樣品，去污染后再?gòu)U棄。6.7污染廢物的處理6.8檢測(cè)報(bào)告2024/7/25GB/T27405-2008697.內(nèi)部質(zhì)量控制和外部質(zhì)量控制7.1內(nèi)部質(zhì)量控制7.1.1內(nèi)部質(zhì)控是實(shí)驗(yàn)室對(duì)其所承擔(dān)工作進(jìn)行連續(xù)評(píng)估的所有程序組成。7.1.2制定周期檢查程序以證實(shí)檢測(cè)的可變性在控制范圍之下?？刂品椒ㄅe例：使用添加已知水平的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物的樣品使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)平行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的平行評(píng)估很少進(jìn)行的項(xiàng)目，與檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行的驗(yàn)證程序更為適合7.2外部質(zhì)量控制7.2.1盡可能參加實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)7.2.2比對(duì)可以評(píng)定結(jié)果偏差，也可以檢查質(zhì)量管理體系的有效性內(nèi)部質(zhì)量控制評(píng)估食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué).微生物計(jì)數(shù)的水平法.30℃時(shí)的菌落計(jì)數(shù)技術(shù).(ISO4833:2003)重復(fù)性極限:相同方法,同一試驗(yàn)材料,在相同條件下和短暫的時(shí)間間隔,所測(cè)得的兩個(gè)獨(dú)立結(jié)果之差的絕對(duì)值不能大于重復(fù)性極限(r=0.25)舉例:結(jié)果1:105,另一結(jié)果的范圍為log104.75-log105.25=56000-178000再現(xiàn)性極限:相同方法,同一試驗(yàn)材料,在不同條件下所測(cè)得的兩個(gè)測(cè)試結(jié)果之差的絕對(duì)值不能大于重復(fù)性極限(r=0.45)舉例:結(jié)果1:105,另一結(jié)果的范圍為log104.55-log105.45=36000-280000培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

SN/T1538.1培養(yǎng)基制備指南第1部分實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則

SN/T1538.2培養(yǎng)基制備指南第2部分培養(yǎng)基性能測(cè)試實(shí)用指南4.3培養(yǎng)基的制備（SN/T1538.1）4.3.1概述商品化培養(yǎng)基應(yīng)按廠商提供的說(shuō)明使用。包括質(zhì)量/體積、pH、制備條件、滅菌條件和操作步驟等。使用個(gè)別成分配制時(shí)，應(yīng)記錄其特性（如代號(hào)和批號(hào)等）4.3.2水蒸餾水或相同質(zhì)量的水，如果是氯消毒水，蒸餾前應(yīng)對(duì)氯進(jìn)行中和（GB/T6682）。盛放水的容器在初次使用前要確認(rèn)不含有任何抑制因子，最好是中性材料制成的（如中性玻璃、聚乙烯等）。水的電阻率最少應(yīng)達(dá)300000m最好不適用離子交換器（去離子）生產(chǎn)的去離子水。因?yàn)檫@種水微生物含量較高，過(guò)濾滅菌后，仍可帶有細(xì)菌生長(zhǎng)抑制因子。4.3培養(yǎng)基的制備（SN/T1538.1）4.3.3稱量和復(fù)水稱量時(shí)注意培養(yǎng)基粉末，必要時(shí)佩戴口罩或在通風(fēng)櫥中操作。先加少量水，充分混勻（避免結(jié)塊），然后再加水之所需要的量。4.3.4溶解和分類脫水培養(yǎng)基，加水后適當(dāng)加熱不停攪拌使其快速溶解瓊脂培養(yǎng)基加熱前應(yīng)浸泡幾分鐘。含個(gè)別成分培養(yǎng)基，應(yīng)將不同成分分別加入適量水中，并充分溶解后再加至所需要的量。4.3培養(yǎng)基的制備（SN/T1538.1）4.3.5pH的測(cè)定和調(diào)整用pH計(jì)測(cè)pH。自制培養(yǎng)基滅菌后冷卻到25℃，pH的變化不應(yīng)超過(guò)0.2個(gè)單位。使用40g/L氫氧化鈉和36.5g/L的鹽酸調(diào)整pH

商品化培養(yǎng)基用優(yōu)質(zhì)蒸餾水或去離子水配制時(shí)，滅菌前無(wú)需調(diào)節(jié)pH值。4.3.6分裝容器體積可為培養(yǎng)基的1、2、3倍。4.3培養(yǎng)基的制備（SN/T1538.1）4.3.7滅菌4.3.7.1概述應(yīng)采用濕熱和過(guò)濾滅菌。亮綠等特定培養(yǎng)基中含有對(duì)光和熱敏感的物質(zhì)只能煮沸滅菌。煮沸后應(yīng)迅速冷卻，避光保存明膠、血清、糖類等不耐熱高溫物質(zhì)，應(yīng)采用高壓鍋低溫滅菌法/間歇滅菌法滅菌。有些試劑不需要滅菌，可直接使用。4.3培養(yǎng)基的制備（SN/T1538.1）4.3.7滅菌4.3.7.2濕熱滅菌高壓鍋或制備培養(yǎng)基中進(jìn)行高壓濕熱滅菌一般采用121℃滅菌15分鐘。當(dāng)體積超過(guò)1000mL時(shí)（容易導(dǎo)致過(guò)度加熱），對(duì)滅菌條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，但應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。滅菌過(guò)程應(yīng)有效果監(jiān)測(cè)（特定位置的熱電偶或測(cè)試條）加熱后采用適當(dāng)?shù)睦鋮s方法，防止加熱過(guò)度，對(duì)腸道菌培養(yǎng)基和大容器中的培養(yǎng)基十分重要。4.3培養(yǎng)基的制備（SN/T1538.1）4.3.7滅菌4.3.7.3過(guò)濾滅菌可在真空負(fù)壓或正壓的條件下進(jìn)行。濾膜或?yàn)V墊孔徑0.22um。濾膜或?yàn)V墊使用前應(yīng)滅菌。濾器于121℃滅菌15分鐘，滅菌后在無(wú)菌條件下組裝。注意濾膜上附著有蛋白質(zhì)（如抗生素）。使用時(shí)先將濾膜用無(wú)菌水潤(rùn)濕。4.3.7.4監(jiān)測(cè)pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)4.3培養(yǎng)基的制備（SN/T1538.1）4.3.8添加成分的制備制備含有有毒物質(zhì)的添加成分（尤其是抗生素）時(shí)應(yīng)小心操作（必要時(shí)在通風(fēng)櫥中操作）。按說(shuō)明書(shū)操作，注意有效期。抗生素工作溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。批量配制抗生素溶液分裝后冷凍儲(chǔ)存，解凍后不能再次冷凍使用。廠商應(yīng)提供冷凍對(duì)抗生素活性影響的有關(guān)資料，也可由使用者自行測(cè)定。4.4培養(yǎng)基的使用（SN/T1538.1）4.4.1瓊脂培養(yǎng)基的融化經(jīng)過(guò)高壓的培養(yǎng)基應(yīng)盡量減少重加熱時(shí)間47+2℃恒溫水浴鍋保溫，放置時(shí)間不超過(guò)4小時(shí)。4.4.2培養(yǎng)基的脫氣必要時(shí)，沸水浴加熱15分鐘后（松開(kāi)蓋子），迅速冷卻。4.4.3添加成分的加入注意避免過(guò)冷或過(guò)熱4.4培養(yǎng)基的使用（SN/T1538.1）4.4.4平板的制備和儲(chǔ)存平皿形成2mm厚的瓊脂層。培養(yǎng)中，培養(yǎng)基損失量大于總量15%時(shí)，會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基水分損失的因素如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)基總量、培養(yǎng)箱類型（如帶風(fēng)扇、濕度偏低、位置靠近加熱管、培養(yǎng)溫度過(guò)高等）凝固后的培養(yǎng)基應(yīng)立即使用或存放與暗處和（或）在4-12℃冰箱的密封袋中，最多存放一周，或按照廠商提供的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。平板應(yīng)冷卻后裝入密閉袋中，儲(chǔ)存前不要進(jìn)行表面干燥處理。在平板底部做好標(biāo)識(shí)（包括名稱、制備日期和有效期）。也可使用適宜的培養(yǎng)基編碼系統(tǒng)。表面接種的固體培養(yǎng)基可進(jìn)行表面干燥，但注意不要過(guò)分干燥。4.4培養(yǎng)基的使用（SN/T1538.1）4.4.5培養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)最多堆放6個(gè)平板（使用厭氧罐除外）平板間留空隙。液體培養(yǎng)基溫度與培養(yǎng)箱溫度一致取決于體積、容器類型、培養(yǎng)類型等4.5培養(yǎng)基的棄置符合法律法規(guī)及規(guī)范要求。5培養(yǎng)基的質(zhì)量控制（SN/T1538.1）5.1物理指標(biāo)控制pH值（20-25℃）加入培養(yǎng)基的量、瓊脂層的厚度。色澤透明度和是否存在肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)凝膠穩(wěn)定性、粘稠度和濕度5培養(yǎng)基的質(zhì)量控制（SN/T1538.1）5.2微生物指標(biāo)控制5.2.1污染的控制每批抽樣進(jìn)行污染測(cè)試。5.2.2測(cè)試菌株來(lái)源：標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心或自己分離的具有良好特性的菌株，最好使用食品中分離的菌株。新復(fù)蘇的菌株可能會(huì)有非特異性反應(yīng)。記錄標(biāo)注菌株的特性。每種培養(yǎng)基的測(cè)試菌株應(yīng)包括據(jù)典型反應(yīng)特性的強(qiáng)陽(yáng)性菌株微弱生長(zhǎng)的陽(yáng)性菌株（對(duì)培養(yǎng)基中選擇性試劑敏感性強(qiáng)）非特異性菌株，如產(chǎn)生不同發(fā)酵和熒光反應(yīng)的菌株陰性菌株5培養(yǎng)基的質(zhì)量控制（SN/T1538.1）5.2微生物指標(biāo)控制5.2.3即用型培養(yǎng)基和試劑指以即用形式置于容器內(nèi)（如平皿、試管或其他容器）供應(yīng)的培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)提供商品化的即用型培養(yǎng)基ISO9001體系認(rèn)證或滿足相應(yīng)質(zhì)量要求，使用者在保證儲(chǔ)存條件的前提下，不必進(jìn)行培養(yǎng)基測(cè)試工作。5.2.4商品化合成脫水培養(yǎng)基制備的培養(yǎng)基每批除用標(biāo)準(zhǔn)菌株測(cè)試，還應(yīng)用實(shí)際樣品進(jìn)行測(cè)試。不含指示劑或選擇劑的，只需用陽(yáng)性菌株進(jìn)行檢測(cè)含指示劑或選擇劑的應(yīng)使用能證明其指示或選擇作用的菌株進(jìn)行試驗(yàn)復(fù)合培養(yǎng)基（加入添加成分）的培養(yǎng)基需要用5.2.2性能的菌株逐批進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)室制備的具有添加成分的即用型培養(yǎng)基基本條款同樣適用。5培養(yǎng)基的質(zhì)量控制（SN/T1538.1）5.2微生物指標(biāo)控制5.2.5個(gè)別成分制備的培養(yǎng)基按照5.2.4條款進(jìn)行測(cè)試另用Miles&Misra技術(shù)、螺旋平板技術(shù)或菌落總數(shù)技術(shù)進(jìn)行測(cè)試。附錄B質(zhì)控菌種的保藏和使用（SN/T1538.1）B.1概述（凍干法、液氮法、-70℃玻璃珠保存法）標(biāo)準(zhǔn)菌株標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株工作菌株由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株經(jīng)過(guò)一次傳代得到的菌株標(biāo)準(zhǔn)菌株在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)一次傳代獲得的一組相同的菌株從標(biāo)準(zhǔn)菌株保藏中心獲得的真空保存的菌株?；蛑辽俣x導(dǎo)屬或種水平，來(lái)源已知，性能穩(wěn)定附錄B質(zhì)控菌種的保藏和使用（SN/T1538.1）B.2商業(yè)途徑獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株以原始包裝形式進(jìn)行保藏、復(fù)蘇和使用。B.3實(shí)驗(yàn)室制備的標(biāo)準(zhǔn)菌株的保藏標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備被多份保存超低溫或凍干測(cè)試菌株在每種培養(yǎng)基的生長(zhǎng)特性應(yīng)文件化。

B.4工作菌株轉(zhuǎn)接時(shí)避免交叉污染和菌株退化。應(yīng)將參考原株轉(zhuǎn)接到多份非選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到穩(wěn)定期的菌株。工作菌株不能再傳代。但工作菌株處理或儲(chǔ)存得當(dāng)如不存在交叉污染或在一周內(nèi)不退化，則可多次使用。附錄B質(zhì)控菌種的保藏和使用（SN/T1538.1）B.2商業(yè)途徑獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株以原始包裝形式進(jìn)行保藏、復(fù)蘇和使用。B.3實(shí)驗(yàn)室制備的標(biāo)準(zhǔn)菌株的保藏標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株制備被多份保存超低溫或凍干測(cè)試菌株在每種培養(yǎng)基的生長(zhǎng)特性應(yīng)文件化。

B.4工作菌株轉(zhuǎn)接時(shí)避免交叉污染和菌株退化。應(yīng)將參考原株轉(zhuǎn)接到多份非選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到穩(wěn)定期的菌株。工作菌株不能再傳代。但工作菌株處理或儲(chǔ)存得當(dāng)如不存在交叉污染或在一周內(nèi)不退化，則可多次使用。附錄C培養(yǎng)基質(zhì)量保證—常見(jiàn)問(wèn)題解答（SN/T1538.1）異常現(xiàn)象可能原因培養(yǎng)基不能凝固制備過(guò)程中過(guò)度加熱低pH值造成培養(yǎng)基酸解稱量不正確瓊脂未完成溶解培養(yǎng)基成分未充分混勻附錄C培養(yǎng)基質(zhì)量保證—常見(jiàn)問(wèn)題解答（SN/T1538.1）異?，F(xiàn)象可能原因pH值不正確制備過(guò)程中過(guò)度加