(高清版)GB∕T 1741-2020 漆膜耐霉菌性測定法

ICS87.040代替GB/T1741—2007Testmethodfordetermi國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會IGB/T1741—2020本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T1741—2007《漆膜耐霉菌性測定法》,與GB/T1741—2007相比，除編輯性修改外主要技術(shù)變化如下：2009、YY0569—2011”;刪除了規(guī)范性引用文件“GB/T1727—1992”(見第2章，2007年版的第2章);-—刪除了霉菌的定義(見2007年版的3.1);——修改了術(shù)語名稱和定義(見3.1,2007年版的3.2);——修改了試驗(yàn)原理(見第4章，2007年版的第4章);——修改了儀器設(shè)備和材料及要求(見第5章，2007年版的第5章);菌時間(見第6章，2007年版的第5章);(見6.2,2007年版的5.4);其他試驗(yàn)菌種”的描述；刪除了“根據(jù)產(chǎn)品的使用要求，也可適當(dāng)增加其他菌種作為檢測菌種”的描述；增加了試驗(yàn)菌種的菌株號(見7.1.1,2007年版的6.1);———修改了試樣的準(zhǔn)備(見7.3,2007年版的5.5);——刪除了陰性對照及內(nèi)容(見2007年版的7.1.2.3);-—增加了“經(jīng)有關(guān)方商定，可以延長培養(yǎng)時間至56d”的規(guī)定(見7.4.1、7.4.2);--修改了結(jié)果評定(見7.5,2007年版的第8章);——增加了試驗(yàn)報(bào)告(見第8章)。本標(biāo)準(zhǔn)由中國石油和化學(xué)工業(yè)聯(lián)合會提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國涂料和顏料標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC5)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：廣東省微生物研究所(廣東省微生物分析檢測中心)、杜邦中國集團(tuán)有限公司上海分公司、立邦涂料(中國)有限公司、浙江魚童新材料股份有限公司、中航百慕新材料技術(shù)工程股份有限科新材料有限公司、浙江博星化工涂料有限公司、中海油常州涂料化工研究院有限公司、廣東迪美生物利涂料(蘇州)有限公司、東莞大寶化工制品有限公司、青島愛爾家佳新材料股份有限公司、河北晨陽工貿(mào)集團(tuán)有限公司、標(biāo)格達(dá)精密儀器(廣州)有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為： 1GB/T1741—2020漆膜耐霉菌性測定法警示——使用本標(biāo)準(zhǔn)的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，本標(biāo)準(zhǔn)并未指出所有可能的安全問1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了漆膜耐霉菌性試驗(yàn)所涉及的試驗(yàn)原理、儀器設(shè)備和材料、培養(yǎng)基和試劑、試驗(yàn)程序以及試驗(yàn)報(bào)告。本標(biāo)準(zhǔn)適用于建筑涂料漆膜耐霉菌性的測定，其他類型漆膜耐霉菌性的測定可參考本標(biāo)準(zhǔn)。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T3186色漆、清漆和色漆與清漆用原材料取樣GB/T6682—2008分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T9271—2008色漆和清漆標(biāo)準(zhǔn)試板GB/T9278涂料試樣狀態(tài)調(diào)節(jié)和試驗(yàn)的溫濕度GB/T23987—2009色漆和清漆涂層的人工氣候老化曝露曝露于熒光紫外線和水YY0569—2011Ⅱ級生物安全柜3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1防霉菌性抗霉菌性耐受或阻止、抑制霉菌孢子及菌絲體的生長與繁殖的能力。4試驗(yàn)原理模擬自然界霉菌生長的環(huán)境條件，按霉菌生長的生理特點(diǎn)設(shè)計(jì)加速試驗(yàn)。在試樣表面接種霉菌孢子，然后將試樣放置在適合霉菌生長的環(huán)境條件下培養(yǎng)，觀察霉菌在試樣表面的生長情況。根據(jù)試樣表面長霉程度對漆膜的耐霉菌性進(jìn)行評定分級。5儀器設(shè)備和材料5.1恒溫恒濕培養(yǎng)箱：控溫范圍10℃~50℃,溫度均勻性不超過±2℃,溫度波動度不超過±1℃,相2GB/T1741—2020對濕度范圍50%～95%,精度5%。5.2生化培養(yǎng)箱：控溫范圍5℃~50℃,溫度均勻性不超過±2℃,溫度波動度不超過±1℃。5.3高壓蒸汽滅菌鍋：控溫范圍101℃~137℃,溫度均勻性不超過±2℃,溫度波動度不超過±2℃。5.4干熱滅菌箱：控溫范圍50℃~200℃,溫度均勻性不超過±2℃,溫度波動度不超過±2℃。5.8生物安全柜：符合YY0569—2011規(guī)定的Ⅱ級生物安全柜要求。5.10冰箱：控溫范圍4℃~10℃,溫度均勻性不超過±2℃,溫度波動度不超過±2℃。5.16接種環(huán)。5.18玻璃漏斗。5.20燒杯：容量為500mL和1000mL。6培養(yǎng)基和試劑除另有規(guī)定外，所有試驗(yàn)均使用化學(xué)純或化學(xué)純以上的試劑和符合GB/T6682—2008中三級水要求的蒸餾水或去離子水。準(zhǔn)確稱取0.005g分散劑(如吐溫80)加入到100mL水中攪拌均勻，按10mL/支分裝到無色玻璃營養(yǎng)鹽溶液的組分見表1。3GB/T1741—2020表1營養(yǎng)鹽溶液組分試劑名稱添加量/g硝酸鈉(NaNO?)磷酸二氫鉀(KH?PO?)磷酸氫二鉀(K?HPO?)氯化鉀(KCl)0.25硫酸鎂(MgSO?·7H?O)硫酸亞鐵(FeSO?·7H?O)0.002氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.0～6.5,用三角瓶(5.15)分裝后置于高壓蒸汽滅菌鍋(5.3)中在(121±2)℃條件下滅菌20min后備用。6.4營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基準(zhǔn)確稱取20.0g瓊脂到1000mL未滅菌的營養(yǎng)鹽溶液(6.3.2)中，加熱攪拌熔化，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.0～6.5,用三角瓶(5.15)分裝后置于高壓蒸汽滅菌鍋(5.3)中在(121±2)℃條件下滅菌20min后備用。6.5馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)6.5.1馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)組分馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)組分見表2。表2馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)組分試劑名稱添加量/g馬鈴薯(去皮后)葡萄糖瓊脂取新鮮無霉?fàn)€的馬鈴薯，去皮切片，準(zhǔn)確稱取300.0g,加按表2稱取準(zhǔn)確其余組分，加入到汁液中煮沸溶解，加水至1000mL,用無色玻璃試管(5.21)分裝，置于高壓蒸汽滅菌鍋(5.3)中，在(121±2)℃條件下滅菌20min,趁熱取出試管并傾斜擺放，自然凝固成斜面后備用。也可用馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)商品培養(yǎng)基，按照產(chǎn)品標(biāo)簽要求制備。4GB/T1741—20207試驗(yàn)程序7.1混合孢子液的制備耐霉菌性試驗(yàn)所用菌種見表3。經(jīng)有關(guān)方商定后，可增加其他試驗(yàn)菌種。表3漆膜耐霉菌性試驗(yàn)菌種菌種的中文名稱菌種的拉丁名菌株號黑曲霉AspergillusnigerCGMCC3.5487黃曲霉AspergillusflavusCGMCC3.3950臘葉芽枝霉(多主枝孢霉)CladosporiumherbarumCGMCC3.2757宛氏擬青霉PaecilomycesvariotiCGMCC3.4253桔青霉PenicilliumcitrinumCGMCC3.2913綠色木霉TrichodermavirideCGMCC3.2941出芽短梗霉AureobasidiumpullulansCGMCC3.837鏈格孢AlternataalternataCGMCC3.4255“CGMCC為中國普通微生物菌種保藏管理中心。在生物安全柜(5.8)內(nèi)用無菌接種環(huán)(5.16)分別接種各種菌種(表3)于馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)(6.5)上，在生化培養(yǎng)箱(5.2)中，于28℃~30℃條件下培養(yǎng)至斜面長滿霉菌孢子，培養(yǎng)后置于3℃~10℃條件下保藏，時間不超過3個月。7.1.3混合霉菌孢子液的制備在生物安全柜(5.8)內(nèi)用無菌接種環(huán)(5.16)挑取霉菌孢子(7.1.2),接種于馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)(6.5)上，在28℃~30℃條件下培養(yǎng)7d～14d,當(dāng)培養(yǎng)基表面長滿霉菌孢子時，加入10mL無菌水(6.2),在生物安全柜(5.8)內(nèi)用無菌接種環(huán)(5.16)在無菌操作條件下輕輕地刮取霉菌培養(yǎng)物表面的將霉菌孢子懸浮液倒入125mL帶有塞子并預(yù)先裝有45mL無菌水(6.2)和10個～15個無菌玻璃珠(5.17)的無菌三角瓶(5.15)中，用力振蕩無菌三角瓶(5.15)以打散孢子團(tuán)并使霉菌孢子從子實(shí)體中釋放出來。將帶有無菌纖維濾紙(5.19)的無菌玻璃漏斗(5.18)置于無菌三角瓶(5.15)上，把振蕩后的霉菌孢子懸浮液倒入無菌玻璃漏斗(5.18)內(nèi)過濾，除去菌絲和培養(yǎng)基碎片。無菌條件下以4000r/min的速度離心已過濾的霉菌孢子懸浮液，去掉上清液，加入10mL~50mL無菌水(6.2)于孢子沉淀物中，充分混勻，然后離心得到霉菌孢子沉淀物，重新加入無菌水混勻，再次離心得到霉菌孢子沉淀物。將霉菌孢子沉淀物用營養(yǎng)鹽溶液(6.3)稀釋，用血球計(jì)數(shù)板(5.14)或其他方法測定霉菌孢子濃度，并稀釋使懸浮液中霉菌孢子濃度為0.8×10?個/毫升～1.2×10?個/毫升。制備好的每種霉菌孢子懸浮液可在4℃~10℃冰箱(5.10)中保存不超過4d,試驗(yàn)前將制備的每種霉菌孢子懸浮液等體積混合，獲得混合霉菌孢子液。5GB/T1741—20207.2樣品產(chǎn)品按GB/T3186規(guī)定取樣，取樣量根據(jù)檢驗(yàn)需要確定。7.3試樣的準(zhǔn)備除另有規(guī)定外，采用鋁板、玻璃板等不易生銹和吸潮的底材，尺寸為50mm×50mm,厚度至少為除另有規(guī)定外，按GB/T9271—2008的規(guī)定處理每一塊試板，鋁板等金屬底材可用合適的砂紙打磨。然后按產(chǎn)品的規(guī)定施涂及養(yǎng)護(hù)3塊試板作為試驗(yàn)樣品。室外用產(chǎn)品試驗(yàn)樣品的漆膜在耐霉菌性試驗(yàn)前按GB/T23987—2009中8.2.1的規(guī)定進(jìn)行老化試驗(yàn)，輻照度為0.83W·m-2·nm-1,試驗(yàn)時間為100h。除另有商定外，試驗(yàn)前試驗(yàn)樣品應(yīng)在GB/T9278規(guī)定的條件下至少調(diào)節(jié)4h。3張尺寸為(50×50)mm的無菌纖維濾紙(5.19)。7.4接種培養(yǎng)向無菌培養(yǎng)皿(5.13)中倒入約20mL營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基(6.4),當(dāng)培養(yǎng)基凝固后，在無菌條件下，將3個試驗(yàn)樣品和3個對照樣品分別放置在裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿表面中央。用無菌噴霧器(5.11)向每個試驗(yàn)樣品和對照樣品表面和培養(yǎng)基表面均勻噴灑0.4mL～0.6mL混合霉菌孢子液(7.1.3),使整個試驗(yàn)樣品和對照樣品表面和培養(yǎng)基表面濕潤。將已接種的試驗(yàn)樣品和對照樣品置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱(5.1)中，在溫度25℃~30℃、相對濕度不低于85%的條件下培養(yǎng)7d后目視檢查對照樣品上霉菌生長情況，3個對照樣品均應(yīng)有霉菌生長，否則試驗(yàn)無效，應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。若每個對照樣品上均可見霉菌生長，則繼續(xù)培養(yǎng)試驗(yàn)樣品和對照樣品至28d后按7.5進(jìn)行結(jié)果評定。經(jīng)有關(guān)方商定，可以延長培養(yǎng)時間至56d。本方法適用于大件試驗(yàn)樣品、不規(guī)則試驗(yàn)樣品和無法用培養(yǎng)皿法測試的試驗(yàn)樣品。把準(zhǔn)備好的混合霉菌孢子液(7.1.3),分別接種于3個試驗(yàn)樣品和3個對照樣品的表面。將已接種的試驗(yàn)樣品和對照樣品在室溫下晾干10min～30min,懸掛在帶有緊密蓋子、能放置試驗(yàn)樣品的玻璃或塑料容器內(nèi)。容器的大小與形狀應(yīng)使得在它內(nèi)部空間的底部具有足夠敞露的水表面積，保證放置的樣品有足夠的空間，不相互接觸干擾，并保持容器內(nèi)相對濕度大于85%。懸掛好的樣品應(yīng)確保不被水觸及或?yàn)R到。把懸掛已接種試驗(yàn)樣品和對照樣品的容器放在恒溫恒濕培養(yǎng)箱(5.1)中，在溫度25℃~30℃,相對濕度不低于85%的條件下培養(yǎng)7d后目視檢查對照樣品上霉菌生長情況，3個對照樣品均應(yīng)有霉菌生長，否則試驗(yàn)無效，應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。若每個對照樣品上均可見霉菌生長，則繼續(xù)培養(yǎng)試驗(yàn)樣品和對照樣品至28d后按7.5進(jìn)行結(jié)果評定。經(jīng)有關(guān)方商定，可以延長培養(yǎng)時間至56d。7.5結(jié)果評定培養(yǎng)結(jié)束后，將試驗(yàn)樣品從恒溫恒濕培養(yǎng)箱(5.1)取出，應(yīng)先目視檢查，長霉面積占比小于10%時用顯微鏡(5.9)放大50倍觀察，按表4評定耐霉菌性等級。結(jié)果以至少兩塊樣板的級別一致為準(zhǔn)，若任意6GB/T174