兩種血栓彈力圖檢測(cè)試劑比對(duì)結(jié)果分析

兩種血栓彈力圖檢測(cè)試劑比對(duì)結(jié)果分析

[摘要]目的通過30組臨床枸櫞酸抗凝全血標(biāo)本進(jìn)行血栓彈力圖檢測(cè)，驗(yàn)證以下內(nèi)容：評(píng)價(jià)YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測(cè)試劑和HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測(cè)試劑具有良好的相關(guān)性。結(jié)果30例血標(biāo)本分別用兩種廠家試劑進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)分析具有相關(guān)性。結(jié)論陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測(cè)試劑和已經(jīng)獲得國家醫(yī)療器械注冊(cè)證HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測(cè)試劑具有良好的相關(guān)性。[關(guān)鍵詞]TEG；YZ5000型血栓彈力圖儀；TEG5000型血栓彈力圖儀1948年，Hartert最早描述血栓彈力圖（Throm-belastography,TEG），當(dāng)時(shí)用于檢測(cè)單個(gè)血樣的整體凝血功能[1]。TEG的設(shè)備體積小，測(cè)量速度快，可在30min內(nèi)檢測(cè)出血小板功能和凝血狀態(tài)。TEG主要由一次性盛血樣的燒杯、自由懸針及其上的扭力絲組成。將0.36ml血樣加入小燒杯中，小燒杯溫度保持在37℃，并以4°45′角旋轉(zhuǎn)，每轉(zhuǎn)持續(xù)10s。在旋轉(zhuǎn)過程中，纖維蛋白在燒杯壁與扭力絲之間發(fā)生多聚反應(yīng)，凝血過程開始，凝血塊逐漸形成。通過自由懸針和扭力絲將凝血過程中凝血塊機(jī)械阻抗的變化記錄到電腦上，并與時(shí)間相對(duì)應(yīng)，繪制成圖像，即為TEG[2-3]。傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室凝血檢查主要針對(duì)凝血過程的某個(gè)孤立的部分，而TEG反應(yīng)了全血的凝血及纖溶能力。所以，TEG可以更好地為臨床服務(wù)[3]。資料與方法標(biāo)本要求30例符合凝血檢測(cè)要求的枸櫞酸抗凝全血（建議BDVacutainer注冊(cè)證號(hào)國食藥監(jiān)械（進(jìn)）字2011第2412553號(hào)，吸入后3小時(shí)內(nèi)使用），按照抗凝管刻度抽滿2管，未離心、新鮮血樣。儀器與試劑實(shí)驗(yàn)組：陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測(cè)試劑（以下簡(jiǎn)稱國產(chǎn)試劑）對(duì)照組：HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測(cè)試劑（以下簡(jiǎn)稱進(jìn)口試劑）其他耗材：

樣品杯：陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)0.2M氯化鈣：陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司實(shí)驗(yàn)室配制試驗(yàn)設(shè)計(jì)本次試驗(yàn)采用自身對(duì)照配對(duì)設(shè)計(jì)方法，即將符合要求的同一血樣分別獲得國產(chǎn)試劑檢測(cè)結(jié)果與該血樣的進(jìn)口試劑檢測(cè)結(jié)果，每個(gè)血樣得到國產(chǎn)試劑的檢測(cè)結(jié)果及該血樣的進(jìn)口試劑檢測(cè)結(jié)果形成配對(duì)數(shù)據(jù)。本次臨床試驗(yàn)?zāi)康氖窃u(píng)價(jià)兩種檢測(cè)TEG的試劑是否具有相關(guān)性，故采用自身對(duì)照配對(duì)設(shè)計(jì)使得試驗(yàn)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果與該血樣的真實(shí)數(shù)據(jù)形成直接對(duì)比的配對(duì)結(jié)果，通過兩個(gè)結(jié)果的對(duì)比評(píng)價(jià)試驗(yàn)產(chǎn)品檢測(cè)TEG的準(zhǔn)確性。1.儀器準(zhǔn)備TEG5000型血栓彈力圖儀美國HaemoscopeCorporation生產(chǎn)正常保養(yǎng)后對(duì)應(yīng)兩通道簡(jiǎn)稱為I1、I2YZ5000型血栓彈力圖儀陜西醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)正常保養(yǎng)后對(duì)應(yīng)兩通道簡(jiǎn)稱為D1、D22.試驗(yàn)操作步驟2.1按照血栓彈力圖操作要求，使TEG5000血栓彈力圖儀與YZ5000型血栓彈力圖儀4個(gè)通道基線值保持一致，進(jìn)行化學(xué)質(zhì)控操作并符合質(zhì)控要求。2.2按照血栓彈力圖操作指南要求在I1、I2、D1、D2上裝載樣品杯，分別加入0.2M氯化鈣20ul，待檢。2.3將一管送檢未離心枸櫞酸抗凝全血上下顛倒5次混勻后，用移液器吸取1ml加入到復(fù)溫到室溫的進(jìn)口試劑中再上下顛倒5次靜止兩分鐘備用。為高嶺土激活血樣。2.4再同一管血中進(jìn)行國產(chǎn)試劑操作，步驟同3）2.5從進(jìn)口試劑中分別取0.34ml高嶺土激活血樣，加入到I1、D1的樣品杯中，控制桿移到Test位置，軟件立即點(diǎn)擊開始按鈕開始檢測(cè)。2.6國產(chǎn)試劑加樣至I2、D2通道步驟同5）2.7當(dāng)檢測(cè)到MA值出現(xiàn)后停止檢測(cè)。2.8重復(fù)步驟3-7，到測(cè)試樣本數(shù)達(dá)到要求為止。2.9分別導(dǎo)出R，K，Angle，MA進(jìn)行分析，保留原始圖形。3.注意事項(xiàng)3.1操作人員應(yīng)嚴(yán)格按照血栓彈力圖儀操作手冊(cè)進(jìn)行操作3.2獻(xiàn)血者應(yīng)無抗凝藥物使用，不在輸血或溶栓等對(duì)凝血產(chǎn)生影響治療過程中。3.3儀器每通道基線與彈力（同一標(biāo)尺）調(diào)節(jié)應(yīng)該均在正常范圍內(nèi)，化學(xué)質(zhì)控結(jié)果在正常范圍內(nèi)且每通道結(jié)果CV在15%以內(nèi)。3.4多儀器通道間調(diào)試應(yīng)符合第2條注意事項(xiàng)。3.5活化凝血檢測(cè)試劑應(yīng)保證足夠的復(fù)溫時(shí)間（建議20分鐘）3.6枸櫞酸抗凝管應(yīng)為1：9抗凝濃度（推薦BD），抗凝管中至少應(yīng)有2ml標(biāo)本，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)檢查抗凝管中血樣是否均質(zhì)，有無凝塊，如已靜置分層應(yīng)顛倒混均；如有凝塊，應(yīng)廢棄重抽標(biāo)本。3.7應(yīng)盡量縮短兩次1ml標(biāo)本的吸取和注入時(shí)間，混勻和顛倒等操作應(yīng)保持一致。3.8加樣時(shí)應(yīng)將移液器吸頭沿樣品杯壁緩緩注入，不應(yīng)產(chǎn)生氣泡，加樣后應(yīng)迅速開始檢測(cè)，兩通道檢測(cè)應(yīng)保持相同節(jié)奏，盡量縮短兩通道間檢測(cè)開始時(shí)間。3.臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法以I1為因變量，以I2、D1、D2為自變量對(duì)R、K、Angle、MA分別應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行相關(guān)回歸分析，計(jì)算斜率、截距和相關(guān)系數(shù)，并根據(jù)以上指標(biāo)進(jìn)行顯著性分析。具體方法如下：病人比對(duì)實(shí)驗(yàn)用相關(guān)系數(shù)r值計(jì)算：設(shè)對(duì)進(jìn)口試劑測(cè)定結(jié)果為，國產(chǎn)試劑測(cè)定結(jié)果為值。按公式計(jì)算出r值。判定r值的顯著性采用統(tǒng)計(jì)學(xué)的p值，p值是將觀察結(jié)果認(rèn)為有效即具有總體代表性的犯錯(cuò)概率。根據(jù)費(fèi)希爾的理論，當(dāng)p值小于0.05時(shí)在統(tǒng)計(jì)上是顯著的。0.05≥P>0.01被認(rèn)為是具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而0.01≥P≥0.001被認(rèn)為具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。設(shè)定進(jìn)口試劑的測(cè)定結(jié)果為,國產(chǎn)試劑的測(cè)定結(jié)果為值。回歸方程的一般形式是Y=a+bx，其中x為自變量，一般為資料中能精確測(cè)定和控制的量，Y為應(yīng)變量，指在x規(guī)定范圍內(nèi)隨機(jī)變化的量。a為截距，是回歸直線與縱軸的交點(diǎn)，b為斜率，意為x每改變一個(gè)單位時(shí),Y的變化量。回歸方程的顯著性檢驗(yàn)表1方差分析表離差名稱平方和自由度均方差回歸RSSKRSS/k（k個(gè)解釋變量）殘差ESSn-k-1ESS/n-k-1總離差TSSn-1檢驗(yàn)：Y與解釋變量x1，x2，…,xk之間的線性關(guān)系是否顯著。(1)H0：b1=b2=……bk=0H1：bi不全為0（i=1，２，…,k）(2)

或(3)查F分布表，得：(4)若,拒絕H0，回歸方程顯著,接受H0，回歸方程不顯著4.關(guān)于臨床試驗(yàn)樣本量的說明陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司在產(chǎn)品活化凝血檢測(cè)試劑盒(以下簡(jiǎn)稱試劑盒)的臨床對(duì)比方案中，我們選擇的是等效試驗(yàn)。將入選的同一臨床血樣，分別用試劑盒和已經(jīng)上市的試劑HaemoscopeCorporation活化凝血檢測(cè)試劑盒在已上市的HaemoscopeCorporation公司生產(chǎn)的血栓彈力圖儀器上進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性統(tǒng)計(jì)。樣本量確定的依據(jù)基于在符合《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》的前提下，應(yīng)符合定量樣本計(jì)算的統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。對(duì)于上述的統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，我們對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)回歸分析，計(jì)算斜率、截距和相關(guān)系數(shù)，并根據(jù)以上指標(biāo)進(jìn)行顯著性分析。具體方法如下：病人比對(duì)實(shí)驗(yàn)用相關(guān)系數(shù)r值計(jì)算：設(shè)對(duì)照試杯測(cè)定結(jié)果為，HaemoscopeCorporation公司生產(chǎn)的測(cè)定結(jié)果為值。按公式計(jì)算出r值。判定r值的顯著性采用統(tǒng)計(jì)學(xué)的p值，p值是將觀察結(jié)果認(rèn)為有效即具有總體代表性的犯錯(cuò)概率。根據(jù)費(fèi)希爾的理論，當(dāng)p值小于0.05時(shí)在統(tǒng)計(jì)上是顯著的。0.05≥P>0.01被認(rèn)為是具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而0.01≥P≥0.001被認(rèn)為具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在統(tǒng)計(jì)學(xué)上樣本量確定多少有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具體計(jì)算如下：線性回歸樣本量計(jì)算公式：N=1+M+M*F2*(1/R2-1)M:自變量的個(gè)數(shù),本試驗(yàn)中M值為1F：本試驗(yàn)中取α=0.05F=1.96R：相關(guān)系數(shù)，相關(guān)系數(shù)越大，樣本量越小，當(dāng)R大于0.8時(shí)，可認(rèn)為高度相關(guān)。本試驗(yàn)中R均大于0.8，按R=0.8計(jì)算最小樣本量。N=1+1+1*1.962*(1/0.82-1)=4.2取N=5因此，在本試驗(yàn)中，樣本數(shù)大于5即有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3討論和結(jié)論本次研究，共計(jì)完成30例合格血樣檢測(cè)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，國產(chǎn)試劑和進(jìn)口試劑檢測(cè)結(jié)果有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，試驗(yàn)樣本數(shù)也符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，因此，YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測(cè)試劑和HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測(cè)試劑具有良好的相關(guān)性。試驗(yàn)產(chǎn)品未出現(xiàn)影響可用性能的評(píng)價(jià)結(jié)果，表明試驗(yàn)產(chǎn)品具有良好的臨床可用性能。參考文獻(xiàn)[1]BischofD,DalbertS,ZollingerA,etal.Thrombelastographyinthesurgicalpatient.MinervaAnestesiol，2010,76(2):131-137.[2]GanterMT，HoferCK.Coagulationmonitoring:currenttechniquesa