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本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的1野生稻基因型(SNP)鑒定規(guī)范NY/T2594植物品種鑒定DNA分子標記法總則微效等位基因頻率minorallelefre2在DNA測序過程中為每個測序堿基分配的質量分數(shù)。這個分數(shù)用于表示每個測序堿基的測序可靠4鑒定前準備4.1樣品制備),小約為22kb~23kb,以確認DNA降解水平較低,點樣孔4.2.2取均勻混合后的DNA樣品2μL,使用ThermoScientifi樣品純度,儀器應未提示有嚴重污染物,1.8<A260/A280≤2.0,2.0<4.2.3使用InvitrogenQubi4.3文庫構建4.3.1將檢驗合格的DNA樣品通過超聲波破碎機進行片段化,采用TruSeqDNALibraryPr5基于高通量測序的基因型鑒定將構建好的文庫提交第二代測序平臺(Illumine和BGI高通量測序平臺)進行雙端高通量測序。高通量測序得到的原始圖像數(shù)據(jù)文件,經(jīng)CASAVA堿基識別(BaseCalling)分析轉化為原始測序序列(SequencedReads),結果以FASTQ(fq)文件格式存儲,其中包含測序序列(reads)的序列信息以及其對應的測序質量信息。每個樣本平均測序深度達到10×。3按下列條件對rawreads進行過濾和質控,獲得高質量測序數(shù)據(jù)(cle——使用FastQCv0.12.1軟件——使用fastpv0.23.4對單端測序r——使用FastQCv0.12.1軟件,修剪末端polyG,并去除長度小于30nt的片段。6.2.1使用BWAv07.15軟件(參數(shù):bwamem-T4-K32-M6.2.2使用samtoolsv16.2.3使用picardv2.18.7軟件markduplicat6.2.4使用GATKv4.5.0軟件中BaseR6.2.5使用GATKv4.5.0軟件中HaplotypeCalle6.2.6使用GATKv4.5.0軟件中CombineGVCFs和Genotyp——測序深度大于4;——缺失率小于0.2;Q=–10×log10(P)P——當該堿基未被錯誤識別時,在該位置上讀取到的堿基含量百分比。47.2按NY/T2594的要求,將每份資源每7.3進行水稻種質資源的群體結構、主成分、系統(tǒng)發(fā)育樹分析,明確種質資源中具有雜交優(yōu)勢的親本類群(即具有遺傳異質性類群)。利用Admixture軟件使用塊松弛(blockrelaxatio
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