TGXAS-永福報春苣苔組培快繁技術(shù)規(guī)程

Q/LB.□XXXXX-XXXX前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出。本文件起草單位：廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所。本文件主要起草人：閆海霞、陶大燕、關(guān)世凱、宋倩、周錦業(yè)、羅述名。永福報春苣苔組培快繁技術(shù)規(guī)程范圍本文件確立了永福報春苣苔（Primulinayungfuensis）組培快繁的程序，規(guī)定了組培苗和穴盤苗的質(zhì)量要求，規(guī)定了組織培養(yǎng)、組培苗移栽和包裝運輸?shù)入A段的操作指示。本文件適用于永福報春苣苔的組培快繁。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件

。GB/T8321(所有部分)農(nóng)藥合理使用準則NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程術(shù)語和定義NY/T2306界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。永福報春苣苔Primulinayungfuensis苦苣苔科報春苣苔屬多年生草本植物，廣西特有種，是一種觀葉兼觀花的室內(nèi)盆花。組織培養(yǎng)方法培養(yǎng)基各培養(yǎng)基參見附錄A。培養(yǎng)時間和培養(yǎng)條件各培養(yǎng)階段的培養(yǎng)時間為30d，培養(yǎng)溫度為25℃～28℃，光照強度為3000lx～5000lx，光周期12h～14h。滅菌取成熟葉片，經(jīng)洗潔精800倍液浸泡10min后在流水下沖洗10min，然后轉(zhuǎn)移到超凈工作臺上進行滅菌操作。在超凈工作臺上，先用棉球蘸取75％乙醇溶液拭擦葉片正面和背面，無菌水沖洗2次；再將葉片在75％乙醇溶液中浸泡8s～10s，無菌水沖洗5次；最后用0.1％氯化汞溶液進行兩次浸泡，每次浸泡時間為6min，每次浸泡后用無菌水沖洗5次。乙醇溶液和氯化汞溶液浸泡過程中要輕輕震蕩使滅菌劑充分接觸葉片。在接種盤內(nèi)將葉片切成2cm～3cm×2cm～3cm的葉塊。不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將葉塊按葉面朝上，平放在不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方參見附錄A中的A.1。不定芽增殖培養(yǎng)將從葉片誘導(dǎo)得到的不定芽切取下來，以單芽形式接入增殖培養(yǎng)基中。壯苗培養(yǎng)選擇具有1對以上葉片的植株，以單株形式接入壯苗培養(yǎng)基中。生根培養(yǎng)將經(jīng)過壯苗培養(yǎng)的、具有2對以上葉片的植株以單株形式接入生根培養(yǎng)基中。煉苗將生長健壯、生根良好、具有2對以上葉片的組培苗，帶瓶放置溫室中7d～10d，光照強度應(yīng)控制為5000lx～10000lx，環(huán)境溫度控制為26℃～30℃，然后除去瓶蓋繼續(xù)放置1d～2d。煉苗過程中污染的生根組培苗應(yīng)廢棄。組培苗移栽基質(zhì)腐殖土和粗沙按體積比2:1配制。在定植前1d～2d用0.3％～0.5％高錳酸鉀溶液淋透消毒。容器50孔的育苗穴盤。移栽將組培苗取出，洗去根部培養(yǎng)基，用50％多菌靈可濕性粉劑1000倍溶液浸泡10min～15min，在陰涼處晾置10min。每穴種植1株，澆透定根水。移栽后管理環(huán)境條件環(huán)境溫度15℃～28℃，空氣相對濕度70％～80％，用遮光率為70％的遮陽網(wǎng)遮陰。病蟲害防治每30d用50％多菌靈可濕性粉劑1000～1500倍液噴霧預(yù)防病害。病蟲害的化學(xué)防治方法應(yīng)符合GB/T8321規(guī)定。質(zhì)量要求組培苗植株健壯，葉片6～8枚，根數(shù)10條以上，無微生物污染。穴盤苗植株健壯，葉片8枚以上，根系充滿穴盤孔，能輕易拔出而基質(zhì)不散，無病蟲害危害。包裝、標簽和運輸按NY/T2306的規(guī)定執(zhí)行。

（資料性附錄）

培養(yǎng)基配方不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方MS培養(yǎng)基＋3.00mg/L6-BA＋0.25mg/LNAA＋30.00g/L白砂糖＋6.00g/L瓊脂，pH值為5.8～6.0。不定芽的增殖培養(yǎng)基配方MS培養(yǎng)基＋1.00mg/L～3.00mg/LZT＋0.25mg/LIBA＋30.00g/L白砂糖＋6.00g/L瓊脂，pH值為5.8～6.0。壯苗培養(yǎng)基配方1/2MS培養(yǎng)基＋0.10mg/LIBA＋0.10g/L活性炭＋30.00g/L白砂糖＋6.00g/L