淋巴瘤分子診斷臨床應(yīng)用

新一代分子診斷技術(shù)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用上海源奇生物醫(yī)藥科技有限公司張文晶為什么淋巴瘤很復(fù)雜?來源于不同分化階段細(xì)胞形成的惡

性克隆性疾病，異質(zhì)性大新的淋巴瘤分類將不同特點(diǎn)的淋巴瘤定義為不同疾病淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤的診斷及分類歷史早期，淋巴瘤的診斷及分類主要根據(jù)組織形態(tài)學(xué)和自然病程的發(fā)展過程1994年，“REAL”(TheRevisedEuropeanAmericanLymphomaClassification)分類將形態(tài)學(xué)、免疫表型、分子遺傳及臨床特點(diǎn)結(jié)合起來，從而把淋巴瘤分類為不同的亞型，并通過臨床驗(yàn)證2008年，WHO根據(jù)細(xì)胞免疫學(xué)的研究和分子學(xué)特征性標(biāo)志的發(fā)現(xiàn)，將分類作了進(jìn)一步的修訂2016年，進(jìn)一步進(jìn)行了修訂3WHO淋巴組織腫瘤分類(2016)慢性淋巴細(xì)胞白血病/小淋巴細(xì)胞淋巴瘤（CLL/SLL)單克隆B淋巴細(xì)胞增多(MBL)B細(xì)胞前淋巴細(xì)胞白血病脾邊緣區(qū)淋巴瘤毛細(xì)胞白血病脾B細(xì)胞淋巴瘤/白血病，未分類淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤(LPL)意義未明的單克隆丙種球蛋白病（MGUS），IgMMu重鏈病Alpha重鏈病Gamma重鏈病意義未明的單克隆丙種球蛋白?。∕GUS），IgG/A漿細(xì)胞骨髓瘤孤立性骨漿細(xì)胞瘤髓外漿細(xì)胞瘤單克隆免疫球蛋白沉積病粘膜相關(guān)淋巴組織結(jié)外邊緣區(qū)淋巴瘤(MALT淋巴瘤)結(jié)內(nèi)邊緣區(qū)淋巴瘤（NMZL）濾泡性淋巴瘤（FL）兒童型濾泡性淋巴瘤伴有IRF4重組的大B淋巴瘤原發(fā)于皮膚的濾泡中心淋巴瘤套細(xì)胞淋巴瘤彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL），NOST細(xì)胞/組織細(xì)胞豐富的大B細(xì)胞淋巴瘤原發(fā)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的DLBCL原發(fā)于皮膚的DLBCL，腿型EBV陽性的DLBCL，NOSEBV陽性的粘膜皮膚潰瘍與慢性炎癥相關(guān)的DLBCL淋巴樣肉芽腫病原發(fā)于縱隔（胸腺）的大B細(xì)胞淋巴瘤血管內(nèi)大B細(xì)胞淋巴瘤ALK陽性的大B細(xì)胞淋巴瘤漿母細(xì)胞性淋巴瘤原發(fā)性滲出性淋巴瘤HHV8陽性的DLBCL，NOS伯基特淋巴瘤伴有11q異常的伯基特樣淋巴瘤高級別B細(xì)胞淋巴瘤，伴有MYC和BCL2和/或BCL6重組高級別B細(xì)胞淋巴瘤，NOSB細(xì)胞淋巴瘤，不能分類型，具有介于彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤與典型霍奇金病之間的成熟B細(xì)胞淋巴瘤T細(xì)胞前淋巴細(xì)胞性白血病T細(xì)胞大顆淋巴細(xì)胞性白血病NK細(xì)胞性慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病侵襲性NK細(xì)胞白血病兒童系統(tǒng)性EB病毒陽性的T細(xì)胞淋巴瘤種痘水皰病樣淋巴組織增殖性疾病成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤，鼻型腸道病相關(guān)性T細(xì)胞淋巴瘤單型性親上皮腸道T細(xì)胞淋巴瘤（原EATLII型）胃腸道惰性T細(xì)胞淋巴組織增殖性疾病肝脾T細(xì)胞淋巴瘤皮下脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤蕈樣真菌病Sézary綜合征原發(fā)于皮膚的CD30陽性的T細(xì)胞增殖性疾病原發(fā)于皮膚的gamma-delta-T細(xì)胞淋巴瘤原發(fā)于皮膚的CD8陽性侵襲性嗜表皮的細(xì)胞毒性T細(xì)胞淋巴瘤原發(fā)于皮膚的肢端CD8陽性T細(xì)胞淋巴瘤原發(fā)于皮膚的CD4陽性小/中間T細(xì)胞增殖性疾病外周T細(xì)胞淋巴瘤，NOS血管免疫母細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤濾泡性T細(xì)胞淋巴瘤伴有TFH表型的淋巴結(jié)外周T細(xì)胞淋巴瘤間變性大細(xì)胞性淋巴瘤，ALK陽性間變性大細(xì)胞性淋巴瘤，ALK陰性隆胸相關(guān)間變性大細(xì)胞性淋巴瘤霍奇金淋巴瘤結(jié)節(jié)淋巴細(xì)胞為主型霍奇金淋巴瘤典型霍奇金淋巴瘤結(jié)節(jié)硬化型典型霍奇金淋巴瘤富含淋巴細(xì)胞的典型霍奇金淋巴瘤混合細(xì)胞性典型霍奇金淋巴瘤淋巴細(xì)胞消減型典型霍奇金淋巴瘤移植后淋巴細(xì)胞增殖性疾病(PTLD)漿細(xì)胞增生傳染性單核細(xì)胞增多樣PTLD旺熾型濾泡增生型多形性PTLD單一形態(tài)的PTLD(B-及T/NK-細(xì)胞型)典型霍奇金淋巴瘤類型PTLD

成熟T/NK細(xì)胞HL和PTLD分子生物學(xué)檢測在淋巴瘤診斷和治療中的意義成熟B成熟T/NKHL/PTLD患者化療靶向治療免疫治療HSCT鞏固治療療效評價(jià)預(yù)后分析復(fù)發(fā)監(jiān)測微小殘留病檢測（MRD)準(zhǔn)確、特異、敏感、快速、經(jīng)濟(jì)適用鑒別診斷危險(xiǎn)度分層靶向藥物選擇療效評價(jià)預(yù)后分析復(fù)發(fā)監(jiān)測微小殘留病檢測（MRD)檢測項(xiàng)目基因基因區(qū)域試劑盒B淋巴瘤(IGgenes)IGH:(HA,HB,HC,HD,HE)VH-JH和DH-JHIGH：IGHIGK:(KA,KB) V

-J

IGK：IG

IGL:(IGL)V

-J

IGL:IG

T淋巴瘤(TCRgenes)TCRB:(BA,BB,BC)V

-J和D

-J

TCRB：TCR

TCRG:(GA,GB)V

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TCRG：TCR

TCRD:(TCRD) V

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,D

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TCRD:TCR

淋巴瘤檢測基因7NHL的各亞型：按發(fā)生頻率排列

（全球9個(gè)醫(yī)學(xué)中心，1400例)31%22%

8%

7%

7%6%2%2%2%2%1%2%DLBCL的發(fā)生干細(xì)胞前B細(xì)胞B1細(xì)胞活化的淋巴樣母細(xì)胞免疫母細(xì)胞漿細(xì)胞邊緣帶細(xì)胞生發(fā)中心淋巴結(jié)抗原刺激濾泡母細(xì)胞中心母細(xì)胞中心細(xì)胞生發(fā)中心DLBCL非生發(fā)中心DLBCLSeminHematol.2015April;52(2):67–76ClinCancerRes.

2016Jan27.DLBCL不同亞型存在不同突變基因MYD88和CD79B與DLBCL在DLBCL患者中，MYD88基因和CD79B基因突變大部分出現(xiàn)在ABC型的患者伴有該基因突變的DLCBL患者其發(fā)病年齡明顯高于未突變者，這與ABC型DLBCL患者隨著年齡增加該突變發(fā)生頻率升高一致。BloodCancerJ.2013Sep;3(9):e139.MYD88L256P可作為WM/LPL的鑒別診斷標(biāo)志MYD88是一種接頭蛋白，在TOLL樣受體受到刺激后能夠激活NF-KB和JAK-STAT信號通路淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤(LPL)是具有漿細(xì)胞樣分化特征的小B細(xì)胞淋巴瘤，通常累及骨髓，淋巴結(jié)和脾常伴有單克隆丙種球蛋白血癥，多數(shù)為IgM型，少數(shù)為IgG和IgA，其中95%的LPL累及骨髓，同時(shí)伴有IgM型單克隆丙種球蛋白血癥，被稱為華氏巨球蛋白血癥（WM）。90％以上的WM患者中存在MYD88L256P位點(diǎn)突變，而其他淋巴增殖性疾病患者以及健康供者中極少出現(xiàn)該突變，因此MYD88-L256P突變有利于WM/LPL與其他Ｂ淋巴細(xì)胞疾病相鑒別NEnglJMed.2012;367(9):826-833HCL-V占10%的HCL在WHO2016年分類中，歸類于脾B細(xì)胞淋巴瘤/白血病，未分類與HCL不同之處：高血細(xì)胞計(jì)數(shù)Annex-1，CD25陰性BRAF基因野生型約50%的患者出現(xiàn)MAP2K1突變對PA方案容易產(chǎn)生耐藥，惡性程度高

NatGenet.2014;46(1):8-10中國B細(xì)胞慢性淋巴增殖性疾病診斷專家共識(2014年版)MAP2K1突變位點(diǎn)BRAF、MAP2K1可作為HCL-V的鑒別診斷標(biāo)志ClinCancerRes.2014;20(20):5240-54T細(xì)胞淋巴瘤所累及的基因改變中國人群NK/T淋巴瘤常見突變NatGenet.

2015Sep;47(9):1061-6兒童T-ALL相關(guān)突變基因JHematolOncol.2015Apr24;8:42分子生物學(xué)檢測在淋巴瘤診斷和治療中的意義成熟B成熟T/NKHL/PTLD患者化療靶向治療免疫治療HSCT鞏固治療療效評價(jià)預(yù)后分析復(fù)發(fā)監(jiān)測微小殘留病檢測（MRD)準(zhǔn)確、特異、敏感、快速、經(jīng)濟(jì)適用鑒別診斷危險(xiǎn)度分層靶向藥物選擇療效評價(jià)預(yù)后分析復(fù)發(fā)監(jiān)測微小殘留病檢測（MRD)突變基因與DLBCL預(yù)后的關(guān)系SeminHematol.2015April;52(2):67–76ClinCancerRes.

2016Jan27.濾泡淋巴瘤淋巴瘤國際預(yù)后指數(shù)（FLIPI）年齡≥60歲AnnArborⅢ～Ⅳ期；Hb<120g/L；乳酸脫氫酶(LDH)＞正常上限；受累淋巴結(jié)≥５枚。每個(gè)特征一分，根據(jù)得到的總分，將患者分為低危（０～１分）、中危（２分）和高危組（３～５分）7個(gè)基因的突變狀態(tài)和臨床風(fēng)險(xiǎn)因素的整合可改善接受一線免疫化療法的濾泡淋巴瘤患者的預(yù)后，并且是一種鑒定治療失敗高危風(fēng)險(xiǎn)亞組的有效方法。相關(guān)的工具：http://www.glsg.de/m7-FLIPILancetOncol.2015;16(9):1111-1122基因突變可以幫助FL鑒別診斷和預(yù)后分期MLL2(89%)，

EZH2(7.2%),CREBBP(32.6%)，突變在FL中是早期事件RRAGC只存在于FL，可以與DLBCL鑒別EBF1、MYD88、TNFAIP3突變是晚期事件，發(fā)生于FL轉(zhuǎn)化期NatureGeNetics201446：176-181NatureGeNetics201648：183-189JClinInvest.

2012;122(10):3424-3431.MYD88L256P與MGUSMYD88-L256P也是IgM型MGUS較為常見的基因突變（55%）高M(jìn)YD88-L256P表達(dá)量容易向WM轉(zhuǎn)化MYD88-L256P與臨床特征、預(yù)后具有相關(guān)性，可作為疾病的目標(biāo)監(jiān)測分子，評估疾病的殘留程度、療效反應(yīng)。Blood.2013Sep26;122(13):2284-5CXCR4可作為WM/LPL的鑒別診斷和治療預(yù)測標(biāo)志趨化因子受體-4(chemokinereceptor-4，CXCR4)屬趨化因子家族，為G蛋白偶聯(lián)的7次跨膜受體蛋白，基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-12是該受體的唯一配體CXCR4突變出現(xiàn)30％以上的LPL和20%以上的伴有IgM的MGUS患者中，但不存在伴有IgA或者IgG的MGUS患者中，因此CXCR4突變可作為此類疾病的鑒別診斷標(biāo)志。Ibrutinib可用于治療WM患者。MYD88和CXCR4突變影響患者對這種藥物的緩解。MYD88L265PCXCR4WT患者的效果最好（總緩解率100%，主要緩解率91.2%），MYD88L265PCXCR4WHIM患者總緩解率和主要緩解率分別為85.7%和61.9%，MYD88WTCXCR4WT患者分別為71.4%和28.6%。Blood.2014Mar13;123(11):1637-46NEnglJMed2015;372:1430-40TP53,NOTCH1,SF3B1,andBIRC3突變可作為CLL/SLL預(yù)后標(biāo)志CLL/小淋巴細(xì)胞淋巴瘤（SLL）是主要發(fā)生在中老年人群的一種成熟B淋巴細(xì)胞克隆增殖性腫瘤，以淋巴細(xì)胞在外周血、骨髓、脾臟和淋巴結(jié)聚集為特征。

CLL與SLL的主要區(qū)別在于前者主要累及外周血和骨髓，而后者則主要累及淋巴結(jié)和骨髓。該類患者的中位生存期約10年，但不同患者的預(yù)后呈高度異質(zhì)性。具有del（17p）和（或）p53基因突變的患者預(yù)后最差；del（11q）是另一個(gè)預(yù)后不良標(biāo)志，但免疫化療可以改善其預(yù)后。治療預(yù)測：SF3B1突變或BIRC3異常與氟達(dá)拉濱耐藥相關(guān)；NOTCH1突變的患者不能從新的CD20單抗Ofatumumab中獲益；抗CD52單抗聯(lián)合FC（氟達(dá)拉濱+環(huán)磷酰胺）方案可克服TP53突變對CLL的不良影響；伴有SF3B1突變的患者可能與BTK抑制劑耐藥相關(guān)，但卻可從抗CD52單抗中獲益。Blood.2013;121(8):1403-1412NOTCH1/2可作為MCL治療預(yù)測標(biāo)志Notch基因編碼一類高度保守的細(xì)胞表面受體Notch信號影響細(xì)胞正常形態(tài)發(fā)生的多個(gè)過程，包括多能祖細(xì)胞的分化、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖及細(xì)胞邊界的形成。NOTCH1/2突變出現(xiàn)10％左右的MCL。具有NOTCH1/2突變的腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)的侵襲性，并且與總生存期較差相關(guān)。ProcNatlAcadSciUSA.2013;110(45):18250-18255Blood.2012;119(9):1963-1971.NOTCH1突變位點(diǎn)NOTCH2突變位點(diǎn)NOTCH1突變與MCL預(yù)后NOTCH2突變與MCL預(yù)后PTCL-NOS中的突變基因和預(yù)后組蛋白甲基化通路（MLL2、KDM6A）基因突變預(yù)后差突變基因分布和頻率Leukemia.2015;29(1):237-241分子生物學(xué)檢測在淋巴瘤診斷和治療中的意義成熟B成熟T/NKHL/PTLD患者化療靶向治療免疫治療HSCT鞏固治療療效評價(jià)預(yù)后分析復(fù)發(fā)監(jiān)測微小殘留病檢測（MRD)準(zhǔn)確、特異、敏感、快速、經(jīng)濟(jì)適用鑒別診斷危險(xiǎn)度分層靶向藥物選擇療效評價(jià)預(yù)后分析復(fù)發(fā)監(jiān)測微小殘留病檢測（MRD)與淋巴瘤靶向治療相關(guān)的基因突變

Nat.Rev.Clin.Oncol.11,585–596(2014).目前已通過FDA批準(zhǔn)的靶向治療藥物套餐檢測平臺臨床意義T細(xì)胞淋巴瘤熱點(diǎn)30基因NGS輔助臨床診斷，進(jìn)行疾病分型，臨床預(yù)后判斷，指導(dǎo)靶向用藥B細(xì)胞淋巴瘤熱點(diǎn)47基因NGSNK/T細(xì)胞淋巴瘤熱點(diǎn)9基因NGS彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤熱點(diǎn)55基因NGS淋巴瘤熱點(diǎn)53基因NGS淋巴瘤熱點(diǎn)53基因序號檢測基因序號檢測基因序號檢測基因序號檢測基因1ARIDA15CREBBP29LYN43Pten2ATM16CRLF230MEF2B44PTPN13BCL217CXCR431MYC45RHOA4BCL618EP30032MYD8846SOCS15BIRC319EPHA733MYOM247TAL16BTG120EZH234NOTCH148TEL7CARD1121FAT135NOTCH249TET28CCND122FBXW736PAX550TNFAIP39CD20(KRT20)23IDH237PDGFRB51TP5310CD5824IKZF138PHF652TRAF211CD79A25JAK139PIK3CA53WHSC112CD79B26JAK240PIM113CDKN1A27KIT41PRDM114CDKN2A28KMT2D42Ps6k與治療相關(guān)的基因ATMATM在Mantle細(xì)胞淋巴瘤中有41%的突變率，在生發(fā)中心B細(xì)胞淋巴瘤突變率為13.64%，突變和失活可以導(dǎo)致基因不穩(wěn)定性的增加、DNA雙鏈斷裂修復(fù)障礙，從而出現(xiàn)對放射的高度敏感。因此ATM基因突變可作為預(yù)測放療敏感性的分子標(biāo)志物之一。BCL2BCL2基因是一種原癌基因，具有抑制凋亡的作用。BCL2抑制劑obatoclax(GX15-070)可以與許多BCL2家族成員結(jié)合，包括BCL2、BCL-XL和MCL-1。Ⅰ期試驗(yàn)中，GX15-070聯(lián)合氟達(dá)拉濱、利妥昔單抗治療復(fù)發(fā)CLL，有54％患者達(dá)部分緩解。Navitoclax（ABT-263）與BCL家族蛋白均有較高的親和性，并與蛋白酶抑制劑、抗CD20抗體有協(xié)同抗腫瘤作用。BCL6BCL6編碼一個(gè)鋅指蛋白,屬于一種轉(zhuǎn)錄抑制因子。BCL6抑制劑可能對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。CARD11CARD11基因?qū)儆谀は嚓P(guān)鳥苷酸激酶家族成員，通過與B細(xì)胞淋巴瘤10(BCL10)、黏膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤基因1(MALT1)組成CARMA-BCL10-MALT1(CBM)復(fù)合體參與人核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)的激活過程,從而發(fā)揮其生物學(xué)功能。MALT1抑制劑可能對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效CD79ABCR通路中信號傳導(dǎo)的組成分子，BTK，SYK，PRC抑制劑對攜帶此類突變的淋巴瘤患者有效CD79BBCR通路中信號傳導(dǎo)的組成分子，BTK，SYK，PRC抑制劑對攜帶此類突變的淋巴瘤患者有效CREBBPCREBBP屬于KAT3家族的組蛋白/蛋白賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶，組蛋白去乙?；敢种苿℉DACI）通過抑制組蛋白去乙?；?，從而開放染色質(zhì)構(gòu)型，解除低乙酰化對基因轉(zhuǎn)錄的抑制，使異常沉默的基因得以重新表達(dá)，可能對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。CRLF2CRLF2是細(xì)胞因子受體基因，其異常導(dǎo)致CRLF2受體自身激活突變，并激活JAK，導(dǎo)致JAK突變，引起JAK-STAT信號通路持續(xù)活化，JAK抑制劑對此類突變有效。CXCR4CXCR4拮抗劑在體內(nèi)、體外均具有一定程度的抗淋巴瘤效應(yīng)，且可加大利妥昔單抗對NHL治療作用。普樂沙福作為CXCR4強(qiáng)有力的拮抗劑在NHL患者造血干細(xì)胞動員中的貢獻(xiàn)不容忽視，其與粒細(xì)胞集落刺激因子聯(lián)用進(jìn)行成人造血干細(xì)胞動員的方案已獲得美國食品藥品管理局和歐洲藥物管理局的批準(zhǔn)，使更多的NHL患者進(jìn)行造血干細(xì)胞移植治療成為可能。EP300EP300屬于KAT3家族的組蛋白/蛋白賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶，組蛋白去乙?；敢种苿℉DACI）通過抑制組蛋白去乙?；瑥亩_放染色質(zhì)構(gòu)型，解除低乙?；瘜蜣D(zhuǎn)錄的抑制，使異常沉默的基因得以重新表達(dá)，可能對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。EZH2EZH2突變?yōu)楣δ塬@得型突變，應(yīng)用EZH2小分子抑制劑(DZNep、EI1、EPZ005687、EPZ6438、GSK126等)，可以直接抑制EZH2轉(zhuǎn)移酶的活性，降低H3K27me3水平，恢復(fù)沉默的PRC2靶基因，能夠有效的抑制EZH2突變的淋巴瘤細(xì)胞系的增殖，目前的新藥研究已經(jīng)進(jìn)入Ⅰ期和Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。與治療相關(guān)的基因IDH2IDH2是一類參與細(xì)胞有氧代謝三羧酸循環(huán)的酶家族成員之一，IDH2突變抑制劑對對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。JAK2魯索利替尼（ruxolitinib）是第一個(gè)通過美國FDA認(rèn)證的用于治療血液系統(tǒng)腫瘤的JAK2抑制劑類藥物，已進(jìn)入四期臨床試驗(yàn)，用于患者治療，能夠減輕疾病相關(guān)的癥狀，提高患者的生存質(zhì)量。此外，STAT抑制劑對攜帶此突變的患者有效。MEF2BMEF2B屬于MADS-box轉(zhuǎn)錄因子家族，可以直接激活正常的生發(fā)中心B細(xì)胞中原癌基因BCL-6的表達(dá)，BCL6抑制劑對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。MYCMyc基因是一種核蛋白類的原癌基因，BET抑制劑和蛋白翻譯抑制劑對攜帶此類突變的淋巴瘤患者有效。MYD88MyD88作為一種銜接蛋白，通過TIR區(qū)域(Toll/IL-1receptor，TIR)與TLRs/IL-1R結(jié)合，向胞內(nèi)傳遞信號，激活核因子-κB(NF-κB)。IRAK1/4抑制劑對攜帶此類突變的淋巴瘤患者有效。NOTCH1NOTCH抑制劑對對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。NOTCH2NOTCH抑制劑對對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。PTPN1JAK2抑制劑和STAT抑制劑對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。SOCS1JAK2抑制劑和STAT抑制劑對攜帶此突變的淋巴瘤患者有效。TNFAIP3TNFAIP3是一個(gè)腫瘤抑制基因，是NF--KB激活的負(fù)調(diào)控因子,可以抑制TNF受體(TNFR)和Toll樣受體(TLR)誘導(dǎo)的NF-kB激活，蛋白酶抑制劑對攜帶此類突變的淋巴瘤患者有效。與鑒別診斷相關(guān)的基因BCL2BCL2基因是一種原癌基因，具有抑制凋亡的作用。急性淋巴細(xì)胞白血病和非何杰金氏淋巴瘤t(14;18)染色體易位，產(chǎn)生IgH/BCL2融合基因，是診斷這一類淋巴瘤的重要依據(jù)。BCL6BCL6編碼一個(gè)鋅指蛋白,屬于一種轉(zhuǎn)錄抑制因子。BCL6是生發(fā)中心來源的淋巴瘤尤其是DLBCL的特異性標(biāo)志。BCL6的突變導(dǎo)致FLs轉(zhuǎn)變成DLBCL，BCL6的第1個(gè)內(nèi)含子的397位以及423～443bp區(qū)域突變是大B細(xì)胞淋巴瘤的特異性標(biāo)志。BIRC3BIRC3，又稱細(xì)胞凋亡抑制蛋白-2(inhibitorofapoptosisProtein-2,c-IAP2)是細(xì)胞凋亡抑制蛋白(IAPs)家族的重要組成部分,t(11,18)(q21;q21)易位產(chǎn)生c-IAP2/MALT1融合蛋白可激活NF-κB途徑引起惡性細(xì)胞轉(zhuǎn)化和淋巴瘤進(jìn)展，可作為診斷這一類淋巴瘤的重要依據(jù)。CARD11CARD11基因?qū)儆谀は嚓P(guān)鳥苷酸激酶家族成員，通過與B細(xì)胞淋巴瘤10(BCL10)、黏膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤基因1(MALT1)組成CARMA-BCL10-MALT1(CBM)復(fù)合體參與人核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)的激活過程,從而發(fā)揮其生物學(xué)功能。CARD11突變發(fā)生在卷曲螺旋區(qū)域，多見于DBLCL的ABC亞型，增強(qiáng)了該區(qū)域在CARD11功能方面的重要性，因此此類突變可能有助于與其他類型的鑒別CCND190%MCL有t（11；14）（q13；q32）染色體易位，致Cyc1inD1基因過度表達(dá)，CyclinD1蛋白陽性有利于MCL的診斷。此外，MCL中還存在包括ATM、CCND1、POT1、RB1在內(nèi)的多種突變，并且突變頻率與細(xì)胞來源所致的染色質(zhì)開放程度高度相關(guān)，因此出現(xiàn)此類突變可作為與其他類型的鑒別。KRT20\cd20KRT20屬于角蛋白家族，參與表皮細(xì)胞纖毛結(jié)構(gòu)完整性調(diào)節(jié)，同時(shí)也是細(xì)胞完整性的維持蛋白。參與凋亡調(diào)節(jié)，刺激應(yīng)激。KRT20突變多發(fā)生于邊緣區(qū)淋巴瘤，可作為和其他類型的鑒別診斷CREBBPCREBBP屬于KAT3家族的組蛋白/蛋白賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶，CREBBP的失活突變大多發(fā)生在B細(xì)胞NHL最常見的兩種類型DLBCL和FL中，因此突變可能有助于與其他類型的NHL鑒別CRLF2CRLF2是細(xì)胞因子受體基因，其異常導(dǎo)致CRLF2受體自身激活突變，并激活JAK，導(dǎo)致JAK突變，引起JAK-STAT信號通路持續(xù)活化，因此此類突變有助于Ph樣ALL的診斷EP300EP300屬于KAT3家族的組蛋白/蛋白賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶，EP300的失活突變大多發(fā)生在B細(xì)胞NHL最常見的兩種類型DLBCL和FL中，因此突變可能有助于與其他類型的NHL鑒別FBXW7Fbxw7的突變廣泛見于各器官部位，其中在T-ALL（31%）和膽管癌（35%）中更是高頻發(fā)生突變，未發(fā)現(xiàn)Fbxw7突變的腫瘤有急性髓性白血?。ˋML）和多發(fā)性骨髓瘤，可據(jù)此進(jìn)行鑒別診斷。與鑒別診斷相關(guān)的基因JAK2JAK2V617F為MPNs的高突變位點(diǎn)，約76%的真性紅細(xì)胞增多癥（polycythemiavera,PV）及60%的特發(fā)性血小板增多癥（essentialthrombocythemia,ET）和37.5%特發(fā)性骨髓纖維化（primarymyelofibrosis,PMF）患者存在JAK2V617F突變，發(fā)生率顯著高于普通人群，與MPNs發(fā)病密切相關(guān)。KMT2D\mll2MLL2基因編碼一種組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶，89%的FL與24%-32%的DLBCL攜帶了MLL2基因突變，可作為與其他類型的淋巴瘤鑒別MEF2BMEF2B屬于MADS-box轉(zhuǎn)錄因子家族，可以直接激活正常的生發(fā)中心B細(xì)胞中原癌基因BCL-6的表達(dá)，突變多見于DLBCL的GCB亞型和FL，可作為與其他類型的淋巴瘤鑒別MYCMyc基因是一種核蛋白類的原癌基因，C-myc的基因易位已成為Burkitt淋巴瘤的標(biāo)志性基因易位，可用于與其他類型的鑒別MYD88鑒別診斷彌漫大B淋巴瘤以及淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤NOTCH2NOTCH2更傾向于表達(dá)在成熟B細(xì)胞，并且是邊緣區(qū)B細(xì)胞發(fā)育所必須的。NOTCH2在DLBCL中的突變率為8%，其中大約25%的脾邊緣區(qū)淋巴瘤（SMZL）患者中存在NOTCH2基因突變，并且在慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）、套細(xì)胞淋巴瘤（ＭCL）、濾泡淋巴瘤（FL）和HCL中不存在NOTCH2突變，可作為鑒別診斷標(biāo)志。PAX5PAX5基因編碼一個(gè)成對盒家族轉(zhuǎn)錄因子，特異表達(dá)于B細(xì)胞的核轉(zhuǎn)錄因子,在早期B細(xì)胞定向分化發(fā)育過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用Pax5突變、缺失在B細(xì)胞性急性淋巴細(xì)胞白血病患者中常見，有可能作為分子標(biāo)記診斷B-ALL和監(jiān)測B-ALL的微小殘留病變TET2血管免疫母細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤(angioimmunoblasticT－celllymphoma，AITL)是具有獨(dú)特臨床病理和生物學(xué)行為的外周T細(xì)胞淋巴瘤(peripheralT－celllymphoma，PTCL)，TET2突變可能參與AITL的發(fā)病過程，突變可能有助于AITL與其他類型鑒別。TNFAIP3TNFAIP3是一個(gè)腫瘤抑制基因，是NF--KB激活的負(fù)調(diào)控因子,可以抑制TNF受體(TNFR)和Toll樣受體(TLR)誘導(dǎo)的NF-kB激活，突變多見于DBLCL的ABC亞型，因此此類突變可能有助于與其他類型的鑒別與判斷預(yù)后相關(guān)的基因ARIDAARID1A是個(gè)抑癌基因，突變導(dǎo)致ARID1A在腫瘤中表達(dá)降低。ARID1A低表達(dá)導(dǎo)致低生存率,同時(shí)對順鉑(platinum)更易產(chǎn)生抗性。因此，ARID1A突變和表達(dá)水平可作為預(yù)測以鉑類為基礎(chǔ)的化療方案的患者預(yù)后的一種方法。BCL2BCL2基因是一種原癌基因，具有抑制凋亡的作用。BCL2的過度表達(dá)可阻止多柔吡星、長春新堿(VCR)和潑尼松等多種化療藥物及X線誘發(fā)的淋巴瘤細(xì)胞的凋亡,使其表現(xiàn)出更強(qiáng)的耐藥性，預(yù)后差BCL6BCL6編碼一個(gè)鋅指蛋白,屬于一種轉(zhuǎn)錄抑制因子。BCL6是生發(fā)中心來源的淋巴瘤尤其是DLBCL的特異性標(biāo)志。BCL6的突變導(dǎo)致FLs轉(zhuǎn)變成DLBCL，BCL6的第1個(gè)內(nèi)含子的397位以及423～443bp區(qū)域突變患者，與無該區(qū)突變的患者相比,有更高的總體生存率。BIRC3BIRC3，又稱細(xì)胞凋亡抑制蛋白-2(inhibitorofapoptosisProtein-2,c-IAP2)，是細(xì)胞凋亡抑制蛋白(IAPs)家族的重要組成部分。該基因發(fā)生突變后,失去對Caspase的抑制作用，多與耐藥、疾病復(fù)發(fā)等有關(guān)。BTG1BTG1是抗增殖基因家族的一個(gè)成員，在人的正常組織中和完全緩解的病人淋巴細(xì)胞內(nèi)都可檢測到其表達(dá)，所以BTG1可作為完全緩解的一個(gè)潛在的生物標(biāo)志物。CREBBPCREBBP屬于KAT3家族的組蛋白/蛋白賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶，CREBBP基因有些突變只出現(xiàn)于復(fù)發(fā)時(shí)，有些復(fù)發(fā)時(shí)出現(xiàn)的突變在初診時(shí)存在于亞克隆之中，因此CREBBP突變很可能與ALL復(fù)發(fā)相關(guān)，因此可以作為MRD檢測的標(biāo)志物。CRLF2CRLF2是細(xì)胞因子受體基因，其異常導(dǎo)致CRLF2受體自身激活突變，并激活JAK，導(dǎo)致JAK突變，引起JAK-STAT信號通路持續(xù)活化，而此通路的活化則與成人和兒童ALL不良預(yù)后相關(guān)。CXCR4CXCR4屬于蛋白偶聯(lián)的7次跨膜受體家族，CXCR4水平是影響患者總生存的獨(dú)立不良預(yù)后因素，NHL患者化療后骨髓中CXCR4的表達(dá)降低可能是一個(gè)良好的預(yù)后因素。EPHA7Epha7甲基化是鑒別縱隔灰區(qū)淋巴瘤、結(jié)節(jié)硬化型霍奇金淋巴瘤(HL)和原發(fā)縱隔大B細(xì)胞淋巴瘤(PMLBCL)的良好指標(biāo)。EZH2在22%的DLBCL中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)針對性體細(xì)胞突變-EZH2基因突變，這一突變局限在GCB亞型中。與判斷預(yù)后相關(guān)的基因FAT1Fat1特定地與EGFR信號通路協(xié)同調(diào)控細(xì)胞的增殖。它可以在細(xì)胞生長周期中激活早期信號傳導(dǎo)以及調(diào)節(jié)激活后的下游事件，其恰當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)可以維持細(xì)胞的正常生長、分化和最終的組織表型，而不恰當(dāng)?shù)母蓴_會導(dǎo)致病理性改變。在ALL中，攜帶該基因突變的患者，預(yù)后比野生型好。FBXW7FBXW7基因突變被認(rèn)為是T-ALL預(yù)后較好的指標(biāo)，該基因突變后可能影響某些藥物的療效：甲磺酸Obatoclax，舒尼替尼，來那度胺，舒尼替尼，吉西他濱。IDH2IDH2是一類參與細(xì)胞有氧代謝三羧酸循環(huán)的酶家族成員之一，AML患者中IDH2突變提示較高的生存率,NPM1與IDH1/IDH2突變聯(lián)合發(fā)生時(shí),提示AML預(yù)后較好。IKZF1IKZF1基因缺失突變，是易復(fù)發(fā)高?；颊叩囊粋€(gè)重要分子標(biāo)記。此外，在CML中檢測IKZF1基因缺失突變，可作為CML急淋變的預(yù)警。JAK1JAK1作為JAK酪氨酸激酶家族的成員,在細(xì)胞信號的傳導(dǎo)中有著重要的調(diào)節(jié)作用，JAK1發(fā)生突變的患者年齡偏大，治療反應(yīng)差。JAK2JAK2發(fā)生突變，與ALL預(yù)后差有關(guān)，尤其是和高危ALL預(yù)后差和較高復(fù)發(fā)率有高度相關(guān)性。MYCMyc基因是一種核蛋白類的原癌基因，C-myc基因異常與DLBCL的不良預(yù)后相關(guān)NOTCH1NOTCH1基因突變被認(rèn)為是T-ALL預(yù)后較好的指標(biāo)TET2TET2突變很可能會成為判斷中危組AML患者預(yù)后的重要標(biāo)志。TNFAIP3TNFAIP3是一個(gè)腫瘤抑制基因，彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中TNFAIP3突變病例比無突變病例預(yù)后差。病例總結(jié)編號姓名年齡檢測項(xiàng)目送檢日期報(bào)告日期突變基因及比率N1劉**50淋巴瘤突變基因（53種）20160811201608181.TET2突變型12.35%2.RHOA突變型11.40%3.IDH2突變型13.03%

臨床上診斷考慮外周T淋巴瘤或者漿母細(xì)胞瘤