GB∕ T 31402-2023 塑料和其他無孔材料表面抗菌活性的測定（正式版）

GB/T31402—2023代替GB/T31402—2015(ISO22196:2011,IDT)國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會GB/T31402—2023 I 2規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 24.1試驗(yàn)細(xì)菌 2 2 46儀器滅菌和菌種保藏 46.1干熱滅菌 46.2高壓蒸汽滅菌 46.3玻璃器皿的準(zhǔn)備 46.4菌種的保藏 5 57.1細(xì)菌預(yù)培養(yǎng) 57.2試樣的制備 57.3接種液的制備 57.4試樣接種 57.5接種試樣的培養(yǎng) 67.6試樣上的細(xì)菌回收 77.7平板培養(yǎng)法測定活菌數(shù) 7 78.1活菌數(shù)測定 78.2試驗(yàn)有效的條件 88.3抗菌活性值的計(jì)算 88.4抗菌效果 89重復(fù)性與再現(xiàn)性 810試驗(yàn)報(bào)告 8附錄A(規(guī)范性)生物材料的質(zhì)量要求 附錄B(資料性)重復(fù)性和再現(xiàn)性 附錄NA(資料性)抗菌率的計(jì)算 GB/T31402—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替GB/T31402—2015《塑料塑料表面抗菌性能試驗(yàn)方法》,與GB/T31402—2015相和產(chǎn)品的描述(見第1章，2015年版的第1章);c)更改了“試樣的制備”中清洗試樣的要求(見7本文件做了下列最小限度的編輯性改動：-—用資料性引用文件GB/T19275—2003中的方法B替換了ISO846:1997中的方法C,兩個文件相關(guān)技術(shù)內(nèi)容完全一致(見第1章);——表1中列出了與測試菌種等同的國內(nèi)菌株號，并以腳注的形式加以說明；請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中國石油和化學(xué)工業(yè)聯(lián)合會提出。本文件由全國塑料標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC15)歸口。本文件于2015年首次發(fā)布，本次為第一次修訂。IⅡGB/T31402—2023抗菌材料和產(chǎn)品因其全新的功能已被消費(fèi)者廣泛而迅速地認(rèn)可，該功能與傳統(tǒng)的材料保護(hù)功能具GB/T31402—2015的適用范圍主要為塑料表面。本文件適用范圍已擴(kuò)展到由其他無孔材料制成的產(chǎn)品表面，適用于上述各類產(chǎn)品?；贘1GB/T31402—2023塑料和其他無孔材料表面抗菌活性的測定本文件不涉及光催化材料及產(chǎn)品(ISO274478)適用)。試驗(yàn)結(jié)果宜包括對本文件的引用和試驗(yàn)條件。利用本文件所得結(jié)果表明，在本文件規(guī)定的試驗(yàn)條試驗(yàn)需要把最小劑量的抗菌劑(化學(xué)品)溶入到接種菌液中。建議試驗(yàn)人員按照ISO7218進(jìn)行微生物檢驗(yàn)操作。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文本文件。ISO7218食品和動物飼料的微生物學(xué)微生物檢驗(yàn)的一般要求和指南(Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs—Generalrequirementsandguidanceformicrobiologicalexaminations)3術(shù)語和定義3.13.23.3產(chǎn)品表面抑制細(xì)菌生長的性能或抗菌劑抑制產(chǎn)品表面細(xì)菌生長的效果。通過表面抗菌處理或添加到產(chǎn)品而抑制細(xì)菌在產(chǎn)品表面生長的藥劑?？咕钚灾礱ntibacterialactivi2GB/T31402—20233.44材料應(yīng)使用以下兩種細(xì)菌：a)金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus);b)大腸桿菌(Escherichiacoli)。試驗(yàn)所用菌株如表1所示。如從表1以外的機(jī)構(gòu)獲取菌株，則該機(jī)構(gòu)應(yīng)是世界菌種保藏聯(lián)合會菌種名稱菌株金黃色葡萄球菌ATCC6538P(CGMCC1.2910*)CIP53.156DSM346NCIB8625大腸桿菌ATCC8739(CGMCC1.2463°)CIP53.126NBRC3972NCIB8545中國普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)是WFCC成員，與金黃色葡萄球菌ATCC6538P等同的國內(nèi)菌株號為CGMCC1.2910,與大腸桿菌ATCC8739等同的國內(nèi)菌株號為CGMCC1.2463。所有試劑應(yīng)為分析純和/或適用微生物試驗(yàn)用的級別。非離子表面活性劑應(yīng)為聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯。所需生物材料如下：——卵磷脂；3GB/T31402—20234.2.3.2懸浮培養(yǎng)基——1/500營養(yǎng)肉湯(1/500NB)離子水稀釋至500倍體積，并用氫氧化鈉溶液或鹽酸將pH值調(diào)整至6.8～7.2。用高壓蒸汽滅菌(見6.2)。如不立即使用，置于5℃~10℃條件下保藏。不應(yīng)使用存放7d或以上的1/500NB。在電爐上或沸水水浴箱中加熱，攪拌直至瓊脂溶解。用氫氧化鈉溶液或鹽酸將pH值調(diào)整至7.0～7.2(25℃)。用高壓蒸汽滅菌(見6.2),如不立即使用，置于5℃~10℃條件下保藏。不應(yīng)使用存放30d或以上的營養(yǎng)瓊脂。中。在電爐上或沸水水浴箱中加熱，攪拌直到瓊脂溶解。用氫氧化鈉溶液或鹽酸將pH值調(diào)整至7.0~7.2(25℃)。用高壓蒸汽滅菌(見6.2)。如不立即使用，置于5℃~10℃條件下保藏。不應(yīng)使用存放30d或以上的平板計(jì)數(shù)瓊脂。將6mL～10mL加熱溶解的營養(yǎng)瓊脂倒入螺蓋試管中，用高壓蒸汽滅菌(見6.2)。滅菌后將試管與水平方向呈15°左右的角度放置，讓培養(yǎng)基凝固。如不立即使用，置于5℃~10℃條件下保藏。不應(yīng)使用存放30d或以上的斜面培養(yǎng)基。脂溶入1000mL蒸餾水或去離子水中，攪拌均勻后加入7.0g非離子表面活性劑，用氫氧化鈉溶液或鹽酸將pH值調(diào)整至6.8～7.2(25℃),高壓蒸汽滅菌(見6.2)。如不立即使用，置于5℃~10℃條件下保藏。不應(yīng)使用存放30d或以上的SCDLP培養(yǎng)液。氧化鈉溶液調(diào)整pH至6.8～7.2(25℃)。加入去離子水或蒸餾水至1000mL。高壓蒸汽滅菌(見4GB/T31402—20236.2)。不應(yīng)使用存放30d或以上的磷酸鹽緩沖液。4.2.3.8磷酸鹽緩沖生理鹽水將8.5g氯化鈉加入1000mL去離子水或蒸餾水中，攪拌均勻，制備生理鹽水。以生理鹽水稀釋磷酸鹽緩沖液(4.2.3.7)至800倍體積。高壓蒸汽滅菌(見6.2)。如不立即使用，置于5℃~10℃條件下保藏。不應(yīng)使用存放30d或以上的磷酸鹽緩沖生理鹽水。如無特別說明，使用以下器具和材料。5.1干熱滅菌器：溫度保持在160℃~180℃,溫度波動不超過±2℃。5.2高壓蒸汽滅菌鍋：溫度保持在121℃±2℃,壓力保持在103kPa±5kPa。5.3帶攪拌的加熱電爐或水浴箱。5.5天平：精度±0.01g。5.6移液器：帶有1000μL的吸頭，滅菌后使用。5.7培養(yǎng)箱：在設(shè)定溫度下，溫度波動不超過±1℃。5.8漩渦攪拌器：若需使用(見7.6.1)。5.9超聲波清洗器：若需使用(見7.6.1)。5.10接種環(huán)：直徑4mm,滅菌后使用。5.11覆蓋膜：不影響細(xì)菌生長并且不吸水(以聚乙烯、聚丙烯或聚對苯二甲酸乙二醇酯制成等)。膜厚度宜在0.05mm～0.10mm之間。5.12帶螺蓋試管。5.13培養(yǎng)皿：直徑90mm～100mm,滅菌后使用。5.14紗布或脫脂棉。5.151000mL容量瓶。5.16制備培養(yǎng)基所需要的具塞錐形瓶或培養(yǎng)基瓶。6儀器滅菌和菌種保藏6.1干熱滅菌將物品放入干熱滅菌器，滅菌溫度和時(shí)間如下：溫度滅菌時(shí)間30min60min6.2高壓蒸汽滅菌將物品放入高壓蒸汽滅菌鍋，于121℃±2℃滅菌15min或以上。6.3玻璃器皿的準(zhǔn)備用堿性或中性清潔劑清洗，然后用蒸餾水或去離子水沖洗干凈。使用前用干熱滅菌器或高壓蒸汽5GB/T31402—2023菌種接種于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上，應(yīng)存放在5℃~10℃條件下，每30d轉(zhuǎn)種一次。不應(yīng)使用轉(zhuǎn)種超過7試驗(yàn)步驟用無菌接種環(huán)將細(xì)菌從保藏菌種的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到斜面培養(yǎng)基(4.2.3.5)上并于35℃±1℃培養(yǎng)16h～24h。再將培養(yǎng)好的細(xì)菌用無菌接種環(huán)轉(zhuǎn)至新鮮的斜面培養(yǎng)基，于35℃±1℃培養(yǎng)16h～20h。每種經(jīng)過抗菌處理的材料應(yīng)至少準(zhǔn)備3片試樣，未經(jīng)抗菌處理的材料至少準(zhǔn)備6片。3片未經(jīng)抗菌處理試樣用于接種后立即測量活的細(xì)菌數(shù)，另3片用于測量接種后24h的活細(xì)菌數(shù)。在對同一聚合材料的一系列抗菌處理的樣品檢測時(shí)，若所有抗菌樣品都采用同一個菌液同時(shí)進(jìn)行制備抗菌處理和未經(jīng)抗菌處理的試樣，試樣尺寸為(50±2)mm×(50±2)mm,試樣厚度不宜超過10mm。如果無法切割成規(guī)定尺寸的試樣，可采用其他尺寸和形狀，只要試樣能夠被面積為(400~1600)mm2的覆蓋膜覆蓋即可。優(yōu)先考慮從產(chǎn)品上制備測試樣，如果無法從制品上制備上述尺寸的試樣，可利用相同原料和工藝以適宜測試的尺寸單獨(dú)制備試樣。如果試樣尺寸不是50mm×50mm,則應(yīng)在試驗(yàn)報(bào)告中寫明實(shí)際的試樣尺寸。止交叉污染，應(yīng)確保該金屬無抗菌效果。必要時(shí)，能在試驗(yàn)前對試樣進(jìn)行清洗、消毒或殺菌(如以70%酒精擦洗)。使用無菌接種環(huán)，轉(zhuǎn)移一環(huán)預(yù)培養(yǎng)好的細(xì)菌(見7.1)到少量的1/500NB(4.2.3.2)中。確保細(xì)菌分散均勻，并采用顯微鏡觀測及細(xì)胞計(jì)數(shù)板或利用其他合適的方法(如分光光度計(jì)法)測定細(xì)菌數(shù)量。用1/500NB稀釋菌懸液，使細(xì)菌的濃度在2.5×10?cells/mL～10×10?cells/mL之間，最適濃度為6.0×10?cells/mL,用作接種液。如果接種液不立即使用，將其放置于冰塊上(0℃)并在2h內(nèi)使用。產(chǎn)品的暴露面作為測試表面，不應(yīng)測試產(chǎn)品的橫切面。將各個試樣(見7蓋膜邊緣滲出。在試樣接種完并蓋上覆蓋膜后，蓋上培養(yǎng)皿蓋(見圖1)。6GB/T31402—2023標(biāo)引序號說明：3——試樣；4——培養(yǎng)皿； 單位為毫米除非特別說明，覆蓋膜的標(biāo)準(zhǔn)尺寸應(yīng)為正方形(40±2)mm×(40±2)mm,而試樣尺寸為50mm×不應(yīng)小于400mm2,并且覆蓋膜邊緣距試樣邊緣應(yīng)為2.5mm～5.0mm。如果覆蓋膜的尺寸不是40mm×40mm,應(yīng)在試驗(yàn)報(bào)告中說明其實(shí)際尺寸。所使用的接種液體積也應(yīng)按覆蓋膜面積變化的比接種液不應(yīng)從覆蓋膜邊緣滲出。然而，很難防止菌液從某些表面(如親水性非常強(qiáng)的表面)滲出。采用下面的選項(xiàng)1防止菌液滲出。如果采用選項(xiàng)1仍發(fā)生滲出，則選用選項(xiàng)2。如果采用其中一個選——選項(xiàng)1:減少菌液體積以適應(yīng)試樣表面，但菌液體積不應(yīng)小于0.1mL。當(dāng)菌液體積減少時(shí)，應(yīng)——選項(xiàng)2:通過增加惰性增稠劑(如瓊脂)以增加接種液的黏度。除特別說明外，含有接種試樣(包括3片未經(jīng)抗菌處理產(chǎn)品的接種試樣)的培養(yǎng)皿，在(35±1)℃相對濕度不小于90%的條件下培養(yǎng)(24±1)h。根據(jù)在培養(yǎng)溫度下檢測所得到的抗菌活性值來確定產(chǎn)品的抗菌效果。在相關(guān)方同意的條件下，也可采用其他培養(yǎng)溫度。如使用的不是(35±1)℃,應(yīng)在試驗(yàn)報(bào)告中記錄。7GB/T31402—2023注：若培養(yǎng)溫度低于35℃,活菌總數(shù)將會減少。這將使所測得的抗菌活性值與35℃下所測得的結(jié)果不同。接種后，立即對已接種的3片未經(jīng)抗菌處理試樣進(jìn)行菌種回收，在這3個培養(yǎng)皿中分別加入10mLSCDLP培養(yǎng)液(4.2.3.6)或其他適宜而有效的中和劑。從未經(jīng)抗菌處理試樣獲得的菌數(shù)將用于確定細(xì)菌的回收率。確保試樣得到充分沖洗，即用移液管吸取和釋放SCDLP特別注意的是，需要達(dá)到足夠的接種菌的回收率。尤其是如試驗(yàn)中采用了7.4中的選項(xiàng)2,導(dǎo)致菌沖洗法，則可采用上述方法。若變更回收方法，則應(yīng)在試驗(yàn)報(bào)告中說明。由于試樣的尺寸和性質(zhì)的原7.7平板培養(yǎng)法測定活菌數(shù)用磷酸鹽緩沖生理鹽水(4.2.3.8)對SCDLP回收液進(jìn)行10倍梯度稀釋，以計(jì)算活菌。將試樣上的回收液及其10倍稀釋液各取1mL,分別放入無菌培養(yǎng)皿中，每個稀釋度應(yīng)做兩個培養(yǎng)皿。每個培養(yǎng)皿養(yǎng)40h～48h。培養(yǎng)后，對培養(yǎng)皿中菌落數(shù)在30～300之間的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。記下每個稀釋度培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)并保留兩位有效數(shù)字，記錄稀釋倍數(shù)。若1mL洗脫液中的細(xì)菌數(shù)小于30,則對該培養(yǎng)皿直接計(jì)數(shù)。如8試驗(yàn)結(jié)果N=(100×C×D×V)/A…………(1)式中：N——每個試樣每平方厘米的活菌數(shù)；D——稀釋倍數(shù)；V——用于洗脫的SCDLP培養(yǎng)液的體積，單位為毫升(mL);計(jì)算每組試樣回收活菌數(shù)的算術(shù)平均值并記錄，取兩位有效數(shù)字。若各稀釋度的所有瓊脂板上都沒有菌落，則將菌落數(shù)計(jì)作<V(用于洗脫的SCDLP培養(yǎng)液的體積)。計(jì)算平均值時(shí)，如各稀釋度均沒8GB/T31402—20238.2.2未經(jīng)抗菌處理試樣接種后立即測得的細(xì)菌數(shù)的對數(shù)值應(yīng)符合公式(2)要求：(LmaxLmin)/Lmean式中：Lmin——試樣上最小活菌數(shù)的常用對數(shù)；8.2.3未經(jīng)抗菌處理的試樣接種后立即測得的活菌平均值應(yīng)在6.2×103cells/cm2~2.5×10?cells/cm2。8.2.4每個未經(jīng)抗菌處理試樣接種后培養(yǎng)24h活菌數(shù)不應(yīng)小于62cells/cm2式中：R——抗菌活性值；U?——未經(jīng)抗菌處理試樣接種后立即回收的活菌數(shù)的常用對數(shù)的平均值，菌數(shù)單位為細(xì)菌數(shù)每平方厘米(cells/cm2);U?——經(jīng)抗菌處理試樣接種24h回收活菌數(shù)的常用對數(shù)的平均值，菌數(shù)單位為細(xì)菌數(shù)每平方厘米(cells/cm2):A.——經(jīng)抗菌處理試樣接種24h的菌數(shù)的常用對數(shù)的平均值，菌數(shù)單位為細(xì)菌數(shù)每平方厘米(cells/cm2)?？咕钚灾的苡糜诒碚骺咕Ч?。判定抗菌效果的抗菌活性值指標(biāo)應(yīng)由相關(guān)方商定。9重復(fù)性與再現(xiàn)性對重復(fù)性和再現(xiàn)性進(jìn)行了定量討論(見附錄B)。a)注明采用本文件編號；e)接種菌液的體積；f)計(jì)算得到的接種菌液的活菌數(shù)；9GB/T31402—2023h)計(jì)算所得的抗菌活性值；k)試驗(yàn)日期；GB/T31402—2023(規(guī)范性)生物材料的質(zhì)量要求A.1概述根據(jù)來源的不同，用于接種液制備的材料的質(zhì)量會有所差異，從而對結(jié)果產(chǎn)生重大影響，因而其成分需專門規(guī)范。A.21/500營養(yǎng)肉湯(1/500NB)的化學(xué)成分牛肉膏和蛋白胨是控制1/500營養(yǎng)肉湯質(zhì)量差異的關(guān)鍵成分。以下是本文件對市售材料中總氮和牛肉膏蛋白陳(酪蛋白的酶消解產(chǎn)物)總氮12.0%～16.0%GB/T31402—2023(資料性)重復(fù)性和再現(xiàn)性B.1背景本附錄內(nèi)容是基于大量研究結(jié)果所獲得的本方法的重復(fù)性和再現(xiàn)性。該研究于2000年至2004年由日本國家技術(shù)與評價(jià)研究所完成，其目的一方面是采納ISO/IEC17025[6]作為實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可體系(見參考文獻(xiàn)[12])的一部分，另一方面是測定JISZ280111的不確定度，該方法是本文件制定的依據(jù)。B.2概述通過統(tǒng)計(jì)分析確定了本方法的重復(fù)性和再現(xiàn)性(見ISO5725-2[2)。對兩種經(jīng)處理過的測試樣品在5個實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，從而得出抗菌活性的試驗(yàn)結(jié)果。在剔除其中一個實(shí)驗(yàn)室的數(shù)據(jù)后，根據(jù)剩余實(shí)驗(yàn)室的同一實(shí)驗(yàn)室的相同測試項(xiàng)目重復(fù)性為0.087;不同實(shí)驗(yàn)室相同測試項(xiàng)目的再現(xiàn)性為0.304。這些數(shù)據(jù)是用本方法能獲得的重復(fù)性和再現(xiàn)性的舉例，不宜用于判定是否認(rèn)可不同實(shí)驗(yàn)室的測試結(jié)果。B.3試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室間測試所用的材料和應(yīng)用的試驗(yàn)條件見表B.1。表B.1材料與試驗(yàn)條件抗菌處理的試樣PET膜，50mm×50mm方塊，厚度0.055mmI類試樣：丙烯酸(樹脂)涂層，混合350pg/g銀化合物Ⅱ類試樣：丙烯酸(樹脂)涂層，混合450μg/g銀化合物未經(jīng)抗菌處理對照試樣PET膜，50mm×50mm方塊，厚度0.055mm,但涂層中不加銀化合物覆蓋膜PE膜，40mm×40mm方塊，厚度0.09mm菌種金黃色葡萄球菌NBRC12732(見注)接種菌液體積注：僅使用金黃色葡萄球菌，是因?yàn)樗却竽c桿菌具有更高的變異性。參加實(shí)驗(yàn)室間測試的5個實(shí)驗(yàn)室都對兩種樣品進(jìn)行了重復(fù)的測試。用于各個階段的樣品數(shù)均符合樣品包含涂了水溶性丙烯酸樹脂涂層的PET膜。在涂丙烯酸樹脂前混入一定量的銀系抗菌劑，以確保試驗(yàn)樣品上的抗菌劑均勻分布。由于丙烯酸涂層是水溶性的，接種菌液容易擴(kuò)散到涂層以外的區(qū)域。樣品/膜的結(jié)構(gòu)與本文件的樣品有所不同，所以，先在覆蓋膜上有時(shí)，空白對照膜和未經(jīng)處理的材料(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0)上的細(xì)菌存活率存在很大差異。有可能無法制備真正的空白材料，因?yàn)樘砑觿┎皇遣牧系慕M成部分，就是材料的載體，相關(guān)的未處理體系將是無涂層的基材，而不是沒有添加劑的基材。因此，在某些情況下，宜與標(biāo)準(zhǔn)材料進(jìn)GB/T31402—2023經(jīng)初步分析，采用裂區(qū)分析計(jì)算得到一個實(shí)驗(yàn)室的Z值大于2.0,因此，該實(shí)驗(yàn)室的數(shù)據(jù)結(jié)果被棄用，數(shù)據(jù)分析僅采用剩余4個實(shí)驗(yàn)室的測試結(jié)果。表B.2列出了抗菌性能的平均值和每種抗菌處理試樣的標(biāo)準(zhǔn)差。重復(fù)性試驗(yàn)顯示為下表第一組和第二組。樣品種類(見表B.1)平均抗菌活性值(括號內(nèi)為標(biāo)準(zhǔn)差)第一組第二組I類試樣Ⅱ類試樣每個實(shí)驗(yàn)室對兩種類型樣品均做了2次重復(fù)實(shí)驗(yàn)。每種類型樣品采用3個相同的試樣?？紤]分析結(jié)果的變異性來源包括重復(fù)試驗(yàn)變異性Vk(即結(jié)果或來自第一組或來自第二組),實(shí)驗(yàn)室間變異性VL和3種被測試樣之間的變異性Vs。因?yàn)閂r和VL不能隨機(jī)化，每組都要單獨(dú)分析。表B.3列出了方差表B.3方差分析表與不確定度變異性來源平方和自由度平方平均值F(檢驗(yàn))重復(fù)，VR1實(shí)驗(yàn)室，VL3Vr×V?(一階誤差，e?)3測試樣品，Vs1313二階誤差，e?總計(jì)如表B.3所示，主要區(qū)組誤差VR×V?(一階誤差e?)比二階誤差e?在1%水平時(shí)差異性更顯著。另一方面，與e?相比，Vr×Vs和VR×V×Vs沒有統(tǒng)計(jì)顯著性。所以這誤差e?中，表B.4列出了合并非顯表B.4方差分析表和不確定度(非顯著性差異匯總)變異性來源平方和自由度平方平均值F比F(p=0.05)F(P=0.01)F(檢驗(yàn))重復(fù)，VR0.120.010.120-00.4034.12實(shí)驗(yàn)室，VL4.656939.2829.46Vk×V?(一階誤差，e?)0.899130.22972.904.46GB/T31402—2023表B.4方差分析表和不確定度(非顯著性差異匯總)(續(xù))變異性來源平方和自由度平方平均值F(檢驗(yàn))試樣，Vs13二階誤差，e'2總計(jì)σ(e?)=[V(e'?)/3]1/2=(0.0228/3)/2=0.087 σ(e?)={[V(e?)-V(e'?)]/3}1/2=[(0.2997—0.0228)/3]1/2=0.304(資料性)抗菌率的計(jì)算用公式(NA.1)計(jì)算抗菌率?！?NA.1)R′——抗菌率，%;U',——未經(jīng)抗菌處理試樣接種24h后回收的活菌數(shù)的平均菌數(shù)，單位為細(xì)菌數(shù)每平方厘米(cells/cm2);[2]ISO5725-2Accuracy(truenessandprecision)ofmeasurementmethodsandresults—Part2:Basicmethodforthedeterminationofrepeatabilityandreproducibilityofastandardmeasure-mentmethod[3]ISO14851Determinationoftheultimateaerobicbiodegradabilityofplasticmaterialsinanaqueousmedium—Methodbymeasuringtheoxygendemandinaclosedrespirometer[4]ISO14852Determinationoftheultimateaerobicbiodegradabilityofplasticmaterialsinan[5]ISO14855(both