2024-2025學年高中生物專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)學業(yè)質(zhì)量標準檢測5含解析新人教版選修1_第1頁
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PAGE12-專題五學業(yè)質(zhì)量標準檢測本試卷分第Ⅰ卷(選擇題)和第Ⅱ卷(非選擇題)兩部分。滿分100分,考試時間90分鐘。第Ⅰ卷(選擇題共50分)一、選擇題(共25小題,每小題2分,共50分,在每小題給出的4個選項中,只有1項是符合題目要求的)1.下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”試驗的敘述,錯誤的是(D)A.DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液也溶于蒸餾水B.向雞血細胞液中加蒸餾水是為了釋放出DNAC.向濃鹽溶液中加蒸餾水是為了析出DNAD.用菜花替代雞血做試驗,其試驗操作步驟相同[解析]DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液也溶于蒸餾水,A正確;向雞血細胞液中加蒸餾水是為了讓雞血細胞吸水漲破,從而釋放出DNA,B正確;向溶解DNA的濃鹽溶液中加蒸餾水是為了降低DNA的溶解度,進而析出DNA,C正確;用菜花替代雞血作為試驗材料,其試驗操作步驟不完全相同,如植物細胞有細胞壁,裂開細胞時須要研磨并加入食鹽和洗滌劑,D錯誤。2.下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分別試驗的敘述中,錯誤的有(D)A.提取動物細胞中的DNA和蛋白質(zhì)可以采納蒸餾水漲破細胞的方法B.采納不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA的方法可去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)C.蛋白質(zhì)純化過程中采納透析法可去除溶液中的小分子雜質(zhì)D.血紅蛋白只能采納凝膠色譜法純化,DNA則可采納電泳、鹽析等方法純化[解析]DNA和蛋白質(zhì)存在于細胞內(nèi),用動物細胞作材料提取DNA和蛋白質(zhì),都要用蒸餾水處理,使細胞吸水漲破,釋放出其中的蛋白質(zhì)或DNA,A正確;DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,因此可以采納不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA的方法可去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì),B正確;蛋白質(zhì)純化過程中,由于小分子雜質(zhì)可以通過透析袋,大分子蛋白質(zhì)不能通過透析袋而留在袋內(nèi),因此可以采納透析法去除溶液中的小分子雜質(zhì),C正確;凝膠色譜法純化血紅蛋白只是許多純化方法中的一種,蛋白質(zhì)的純化也可以采納電泳、鹽析等方法純化,D錯誤。3.如圖表示PCR技術(shù)擴增DNA分子的過程中,DNA聚合酶作用的底物,據(jù)圖分析正確的是(C)A.圖中a為引物,是一種單鏈RNA分子B.圖中b為DNA模板鏈,f端為3′末端C.PCR技術(shù)中通過限制溫度來實現(xiàn)DNA雙鏈的解旋和結(jié)合D.DNA聚合酶無需引物也能將單個脫氧核苷酸連接成DNA片段[解析]PCR技術(shù)中,DNA聚合酶須要引物,才能夠?qū)蝹€脫氧核苷酸連接成DNA片段,該技術(shù)中引物通常為單鏈DNA,即題圖中的a;圖中b為DNA模板鏈,f端為5′末端;PCR技術(shù)中通過高溫柔降溫來實現(xiàn)DNA雙鏈的解旋和結(jié)合。4.(2024·南京、鹽城一模)下列有關(guān)用雞血進行DNA粗提取和鑒定試驗的操作,錯誤的是(D)A.雞血細胞中加入蒸餾水后,用玻璃棒攪拌B.用蛋白酶純化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNAC.在溶有DNA的濾液中加入體積分數(shù)為95%的冷酒精后,用玻璃棒輕緩攪拌D.將卷在玻璃棒上的絲狀物加入4mL二苯胺試劑中,沸水浴加熱,冷卻后視察[解析]雞血細胞中加入蒸餾水后,用玻璃棒攪拌,使細胞吸水漲破,A正確;DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度高,再結(jié)合酶的專一性原理,可用蛋白酶純化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNA,B正確;DNA不溶于體積分數(shù)為95%的冷酒精,因此在溶有DNA的濾液中加入體積分數(shù)為95%的冷酒精后,用玻璃棒輕緩攪拌,可以進一步純化DNA,C正確;將卷在玻璃棒上的絲狀物先溶于2mol/LNaCl溶液中,再向溶液中加入4mL二苯胺試劑,沸水浴加熱,冷卻后視察,D錯誤。5.下列關(guān)于DNA的粗提取試驗和血紅蛋白的提取試驗,敘述正確的是(A)A.前者選擇雞血細胞作材料較好;后者選擇哺乳動物成熟的紅細胞做試驗材料較好B.樣品預(yù)處理時,前者靜置1d除去上清液即可;后者要加入清水反復(fù)低速短時間離心洗滌,至上清液無黃色即可C.DNA粗提取試驗中,向質(zhì)量濃度為2mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時,應(yīng)緩慢加入,直到出現(xiàn)黏稠物為止D.血紅蛋白的提取和分別試驗的原理是在電場中帶電顆粒遷移的速度不同[解析]雞血細胞有細胞核,哺乳動物成熟的紅細胞無細胞核和眾多的細胞器,故前者適于提取DNA,后者適用于提取血紅蛋白,A項正確;提取血紅蛋白試驗中,應(yīng)當用生理鹽水對紅細胞進行洗滌,不能用清水,B項錯誤;DNA粗提取試驗中,初次析出DNA時,應(yīng)當加蒸餾水至粘稠物不再增加為止,C項錯誤;血紅蛋白的提取和分別試驗的原理是凝膠色譜柱中相對分子質(zhì)量大小不同的蛋白質(zhì)遷移速率不同而實現(xiàn)分別,D項錯誤。6.生物產(chǎn)品的分別、純化是現(xiàn)代生物技術(shù)中一種常見的技術(shù)。下列關(guān)于物質(zhì)提取、純化原理的敘述中,不正確的是(B)A.采納凝膠色譜法分別果膠酶的原理是蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量不同,在色譜柱中的移動速度不同B.蛋白質(zhì)的提取和分別中洗滌時離心速度過小,時間過短,白細胞會沉淀達不到分別效果C.電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)和數(shù)量以及樣品分子大小不同,產(chǎn)生的遷移速度不同而實現(xiàn)樣品中各種分子的分別D.離心法分別蛋白質(zhì)的依據(jù)是不同大小的分子離心時沉降速度不同[解析]凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的原理是蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量不同,在色譜柱中的移動速度不同,A正確;洗滌時要低速短時離心,以防止白細胞沉淀,B錯誤;電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)和數(shù)量以及樣品分子大小不同,產(chǎn)生的遷移速度不同而實現(xiàn)樣品中各種分子的分別,C正確;離心法分別蛋白質(zhì)的依據(jù)是不同大小的分子離心時沉降速度不同,D正確。7.凝膠色譜操作正確的是(A)A.將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴B.將橡皮塞下部用刀切出凹穴C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D.將尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞下部一樣大小的圓片[解析]凝膠色譜柱制作過程中須要將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴,A正確;由A分析可知,B錯誤;插入玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底部,C錯誤;將尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞上部一樣大小的圓片,D錯誤。8.下列關(guān)于物質(zhì)的提取和分別的說法,錯誤的是(A)A.分別纖維素分解菌時,培育基中的纖維素要用蘇丹紅染色B.提取雞血細胞DNA時,需在雞血細胞液中加入肯定量的蒸餾水C.提取和分別血紅蛋白以及血紅蛋白純度鑒定用到的方法有:吸水漲破法、離心法、透析法、凝膠色譜法、電泳法D.分別細胞中各種細胞器可用差速離心法;驗證DNA半保留復(fù)制時用同位素標記法和密度梯度離心法[解析]分別纖維素分解菌時,培育基中加入的是能與培育基中的纖維素形成紅色復(fù)合物的剛果紅,而不是蘇丹紅染液。9.在DNA的粗提取過程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品分別是(D)①0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液②2.00mol/L的NaCl溶液③0.14mol/L的NaCl溶液④體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液A.①③ B.②③C.②④ D.③④[解析]在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中,DNA析出而蛋白質(zhì)溶解;冷卻的體積分數(shù)為95%的酒精溶液能使DNA析出。10.在進行DNA的粗提取試驗中,若選擇的是植物細胞,在裂開細胞時,加入肯定量的洗滌劑和食鹽,則加入洗滌劑與食鹽的目的分別是(B)①有利于DNA溶解②分別DNA和蛋白質(zhì)③溶解蛋白質(zhì)④溶解細胞膜A.①② B.④①C.②③ D.④②[解析]洗滌劑是一種離子去垢劑,可以溶解細胞膜,有利于細胞內(nèi)含物(DNA)的釋放,食鹽的主要成分是NaCl,可以加鹽析,游離出DNA分子,并使DNA分子充分溶解于NaCl溶液中,則①有利于DNA溶解;④溶解細胞膜正確。11.如圖表示DNA變性和復(fù)性示意圖,下列相關(guān)說法正確的是(A)A.向右的過程為加熱(80~100℃)變性的過程B.向左的過程是DNA雙鏈快速制冷復(fù)性C.變性與在生物體內(nèi)解旋過程的條件、實質(zhì)都相同D.圖中DNA片段共有4個游離的磷酸基、4個3′端[解析]向左為緩慢冷卻復(fù)性;變性是在90℃以上時,DNA雙鏈解旋為單鏈,這一過程在生物體內(nèi)需解旋酶;圖中DNA片段有兩個游離磷酸基,2個3′端。12.PCR一般要經(jīng)過三十次循環(huán),從其次輪循環(huán)起先,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參加反應(yīng),由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時將(B)A.仍與引物Ⅰ結(jié)合進行DNA子鏈的延長B.與引物Ⅱ結(jié)合進行DNA子鏈的延長C.同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進行子鏈延長D.無需與引物結(jié)合,在酶的作用下從頭合成子鏈[解析]當由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時,此單鏈引物端為5′端,因此與它互補的子鏈應(yīng)從另一端起先合成,即由引物Ⅱ結(jié)合延長DNA的子鏈。13.利用PCR技術(shù)擴增目的基因,其原理與細胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延長的基礎(chǔ)。以下敘述錯誤的是(B)A.變性過程中斷裂的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵B.退火時引物A必需與引物B堿基互補配對C.由原來的母鏈為模板合成的兩個新DNA分子中,只含有引物A或引物BD.延長時須要耐高溫DNA聚合酶催化[解析]在PCR技術(shù)變性過程中高溫能破壞的是DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu),使其堿基對間的氫鍵斷裂,A正確;退火時引物A、引物B須要與模板進行堿基互補配對,假如引物A和引物B發(fā)生堿基互補配對則不能與相應(yīng)模板鏈結(jié)合,無法完成子鏈的延長,B錯誤;由于DNA復(fù)制為半保留復(fù)制,而引物為單鏈DNA片段,所以由原來的母鏈為模板合成的兩個新DNA分子中,只含有引物A或引物B,C正確;延長時的溫度為72℃左右,所以要用耐高溫的DNA聚合酶催化子鏈合成,D正確。故選B。14.下列敘述中錯誤的是(A)A.變更NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色C.用電泳法可分別帶電性質(zhì)、分子大小和形態(tài)不同的蛋白質(zhì)D.用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)[解析]在NaCl溶液濃度為0.14mol/L時,DNA的溶解度最低,DNA析出。15.下列說法錯誤的是(D)A.在肯定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠反抗外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH基本不變B.緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成C.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程D.透析袋能使大分子自由進出,而將小分子保留在袋內(nèi)[解析]透析袋一般用硝酸纖維素制成,又稱玻璃紙。透析袋能使小分子自由進出,而將大分子保留在袋內(nèi)。16.下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是(C)A.是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分別開的一種方法B.在洗脫過程中,大分子不能進入凝膠內(nèi)部而最先流出,小分子可以進入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,最終流出C.凝膠內(nèi)部有很微細的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔隙大小與被分別的物質(zhì)分子的大小無相應(yīng)關(guān)系D.一般狀況下,凝膠對要分別的物質(zhì)沒有吸附作用,因此全部要分別的物質(zhì)都應(yīng)當被洗脫出來[解析]本題考查凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的原理。凝膠色譜法是依據(jù)相對分子質(zhì)量大小分別蛋白質(zhì)的有效方法,凝膠是由多糖類化合物構(gòu)成的,其內(nèi)部有很微細的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),小分子蛋白質(zhì)可以進入凝膠內(nèi)部,路程較長,移動速度慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部,路程較短,移動速度快,因此在洗脫時先分別出來,故C錯誤。凝膠一般對分別的物質(zhì)無吸附作用,全部要分別的物質(zhì)都應(yīng)當被洗脫出來,這是凝膠色譜法與一般層析法的不同。17.運用凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)時,洗滌紅細胞、釋放血紅蛋白質(zhì)和透析過程中,分別運用下列哪種試劑(C)①蒸餾水②生理鹽水③20mmol/L的磷酸緩沖液④清水⑤檸檬酸鈉A.①③⑤ B.①②③C.②①③ D.④①③[解析]運用凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)時,洗滌紅細胞的目的是分別紅細胞,除去雜蛋白,故用生理鹽水;釋放血紅蛋白時,血紅蛋白在紅細胞內(nèi),加蒸餾水和甲苯,紅細胞裂開,釋放血紅蛋白;透析時用的是20mmol/L磷酸緩沖液。18.細胞裂開后,各種蛋白質(zhì)就會被釋放出來,再依據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性進行提取。下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的措施中,不正確的是(D)A.酸性蛋白質(zhì)可用稀堿性溶液提取B.水溶性蛋白質(zhì)可用透析液(中性緩沖液)提取C.脂溶性蛋白質(zhì)可用有機溶劑提取D.堿性蛋白質(zhì)可用強酸性溶液提取[解析]提取蛋白質(zhì)的基本原理是依據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì),加入不同的試劑,使蛋白質(zhì)溶于試劑中而提取蛋白質(zhì)。強酸、強堿都會使蛋白質(zhì)變性而沉淀。19.凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)時,凝膠的種類較多,但其作用的共同點是(A)A.變更蛋白質(zhì)分子通過凝膠的路徑B.吸附一部分蛋白質(zhì),從而影響蛋白質(zhì)分子的移動速度C.將酶或細胞固定在凝膠中D.與蛋白質(zhì)分子進行化學反應(yīng),從而影響其移動速度[解析]凝膠的種類許多,但每一種凝膠內(nèi)部都有通道,相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)分子簡單進入通道,移動距離變長,移動速度減慢,而相對分子質(zhì)量大的分子不能進入通道,其移動距離短,移動速度快,因此可把相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分開。20.下圖是用除去DNA的濾液進行血紅蛋白的提取和分別試驗的裝置,下列有關(guān)敘述不正確的是(B)A.首先用圖甲裝置對濾液進行處理,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)B.圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)C.用圖乙裝置分別血紅蛋白時,待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每管收集5mL,連續(xù)收集D.圖丙裝置中電泳法分別提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有肯定量的電荷,在電場的作用下向一極移動[解析]用圖甲裝置對濾液進行處理,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。圖乙裝置表示通過凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的過程。蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量較大,被排阻在凝膠顆粒的外面,在顆粒之間快速通過。21.如圖表示對某蛋白質(zhì)溶液進行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的結(jié)果(類似于紙層析法分別色素),下列相關(guān)敘述不正確的是(B)A.蛋白質(zhì)上某些基團解離后可使蛋白質(zhì)帶電,電場中帶電的蛋白質(zhì)分子(或多肽)會向著與其所帶電荷相反的電極移動B.蛋白質(zhì)在SDS-聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于其所帶凈電荷多少C.蛋白質(zhì)在SDS-聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率基本取決于其相對分子質(zhì)量的大小D.電泳結(jié)果表明溶液中蛋白質(zhì)可能有兩種,但也可能只有一種[解析]蛋白質(zhì)的氨基與羧基可發(fā)生偏離,使其帶正電或負電,在電場中發(fā)生遷移。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳所加的SDS可掩蓋蛋白質(zhì)本身所帶電荷,故電泳遷移率與本身所帶電荷無關(guān),而由其分子大小確定。SDS會使蛋白質(zhì)解聚成單條肽鏈,故結(jié)果所示可能只是一種蛋白質(zhì)(有兩種肽鏈),也可能是兩種。22.下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取和分別試驗中樣品處理步驟的描述,正確的是(C)A.紅細胞的洗滌:加入蒸餾水,緩慢攪拌,低速短時間離心B.血紅蛋白的釋放,加入生理鹽水和甲苯,置于磁力攪拌器上充分攪拌C.分別血紅蛋白:將攪拌好的混合液離心,過濾后,用分液漏斗分別D.透析:將血紅蛋白溶液裝入透析袋,然后置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析12h[解析]紅細胞洗滌步驟中應(yīng)加入生理鹽水而不是蒸餾水,血紅蛋白釋放中加入蒸餾水,透析時緩沖液pH應(yīng)為7.0而不是4.0。23.從細胞中提取某種特定的蛋白質(zhì)比提取DNA難度大,其緣由不是(D)A.蛋白質(zhì)對溫度、鹽濃度、pH等條件更敏感,更易失活B.蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)多樣,理化性質(zhì)各不相同,使得蛋白質(zhì)的提取沒有統(tǒng)一的方法C.提取某種特定的蛋白質(zhì)需據(jù)其特性摸索提取的程序D.提取血紅蛋白程序可分為樣品處理、粗分別、純化、純度的鑒定四大步[解析]蛋白質(zhì)對溫度、鹽濃度、pH等條件更敏感,更易失活,而DNA分子相對來講比較穩(wěn)定,這些區(qū)分是提取某種特定的蛋白質(zhì)比提取DNA難度大的緣由之一,A項不符合題意;蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)多樣,理化性質(zhì)各不相同,使得蛋白質(zhì)的提取沒有統(tǒng)一的方法,而且還須要依據(jù)蛋白質(zhì)的特性摸索提取的程序,這些也是提取蛋白質(zhì)的難度較大的緣由,B、C項不符合題意;提取血紅蛋白程序可分為樣品處理、粗分別、純化、純度的鑒定四大步,這是提取蛋白質(zhì)的步驟,不是提取蛋白質(zhì)難度大的緣由,D項符合題意。24.PCR(多聚酶鏈式反應(yīng))技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),如圖表示合成過程。下列說法錯誤的是(B)A.甲過程高溫使DNA變性解旋,該過程不須要解旋酶的作用B.丙過程用到的酶在高溫下失活,因此在PCR擴增時須要再添加C.假如把模板DNA的兩條鏈用15N標記,游離的脫氧核苷酸不做標記,循環(huán)3次后,在形成的子代DNA中含有15N標記的DNA占25%D.PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變[解析]PCR中解旋是通過高溫進行的,故甲過程高溫使DNA變性解旋,該過程不須要解旋酶的作用,A正確;丙過程用到的酶為耐高溫的DNA聚合酶,在高溫下不會失活,因此在PCR擴增時不須要再添加,B錯誤;假如把模板DNA的兩條鏈用15N標記,游離的脫氧核苷酸不做標記,循環(huán)3次后,形成的DNA分子為8個,而含有15N標記的DNA分子為2個,故在形成的子代DNA中含有15N標記的DNA占25%,C正確;PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變,D正確。故選B。25.多聚酶鏈式反應(yīng)(PCR)是一種體外快速擴增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)驗下述三十多次循環(huán);95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃下引物鏈延長(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是(C)A.變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn)B.復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠堿基互補配對原則完成C.延長過程中須要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸D.PCR與細胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,所須要酶的最適溫度較高[解析]PCR擴增DNA的過程中須要的原料是四種脫氧核苷酸。第Ⅱ卷(非選擇題共50分)二、非選擇題(共50分)26.(10分)某生物愛好小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。詳細步驟如下:材料處理:稱取簇新的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10g。剪碎后分成兩組,一組置于20℃、另一組置于-20℃條件下保存24h。DNA粗提取:步驟一:將上述材料分別放入研缽中,各加入15mL研磨液(含洗滌劑和食鹽),充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。步驟二:先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液,再加入20mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。步驟三:取6支試管,分別加入等量的__________(填溶液名稱及濃度)溶液溶解上述絮狀物。步驟四:在上述試管中各加入4mL__________試劑?;旌蟿蚍Q后,置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表:材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20℃++++++-20℃+++++++++(注:“+”越多表示藍色越深)分析上述試驗過程,回答下列問題:(1)該探究性試驗課題名稱是__探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響__。(2)步驟一中研磨液中洗滌劑的作用是__溶解細胞膜__,食鹽的作用是__溶解DNA__。(3)步驟二中“緩緩地”攪拌,這是為了__削減(或防止)DNA斷裂__,所加酒精溶液需冷卻的緣由之一是低溫抑制__DNA水解酶(或核酸水解酶或DNA酶)__的活性,可以防止DNA降解。(4)上述試驗中步驟三、步驟四的空缺依次分別為__2_mol/L_NaCl__、__二苯胺__。(5)試驗表明,__保存在-20_℃的蒜黃__獲得的DNA量最多。[解析](1)表中信息顯示,該試驗有兩個自變量:試驗材料和溫度,所以該探究性試驗課題名稱是:探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響。(2)步驟一中研磨液中洗滌劑的作用是溶解細胞膜,有利于細胞內(nèi)DNA的釋放。食鹽的作用是溶解DNA。(3)步驟二中“緩緩地”攪拌,這是為了防止DNA斷裂,所加酒精溶液需冷卻的緣由之一是低溫抑制DNA水解酶的活性,可以防止DNA降解。(4)步驟二中得到的纏繞在玻璃棒上的絮狀物是DNA。在鑒定DNA時,需將DNA溶解在2mol/LNaCl溶液中,所用的鑒定試劑為二苯胺,所以上述試驗中步驟三、步驟四的空缺依次分別為2mol/LNaCl、二苯胺。(5)表中的“+”越多表示藍色越深,而DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成藍色,據(jù)此可知:保存在-20℃的蒜黃獲得的DNA量最多。27.(10分)乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,在工業(yè)生產(chǎn)中具有重要價值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下圖。回答下列問題:eq\x(產(chǎn)乳糖酶微生物L的篩選)→eq\x(產(chǎn)乳糖酶微生物L的培育)→eq\x(乳糖酶的提取和純化)→eq\x(乳糖酶的固定化)(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L時,培育基中的唯一碳源應(yīng)當是__乳糖__,在試驗室培育微生物L時,一方面須要為L供應(yīng)合適的養(yǎng)分和環(huán)境條件,另一方面須要__防止雜菌污染__,以獲得純凈的培育物。(2)將微生物L研磨裂開得到提取液后,可采納凝膠色譜法分別純化其中的乳糖酶。分別過程中,比乳糖酶相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì),在凝膠中的移動速度比乳糖酶__慢__(填“快”或“慢”),緣由是__相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)簡單進入凝膠內(nèi)部的通道,移動速度較慢__。(3)工業(yè)生產(chǎn)中,若要將乳糖酶固定化,一般__不相宜__(填“相宜”或“不相宜”)采納包埋法,緣由是__酶分子很小,簡單從包埋物中漏出__,與運用游離酶相比,工業(yè)生產(chǎn)中運用固定化酶的優(yōu)點是__酶不易失活,可以重復(fù)用,能提高產(chǎn)品質(zhì)量__。[解析](1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物時,宜用乳糖作為培育基中的唯一碳源。在試驗室培育微生物,一方面要為培育的微生物供應(yīng)合適的養(yǎng)分和環(huán)境條件,另一方面須要防止雜菌污染。(2)用電泳法純化乳糖酶時,若在相同條件下分別帶電荷相同的蛋白質(zhì),則其分子量越小,電泳速度越慢。凝膠色譜法是依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分別蛋白質(zhì)的有效方法,相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)簡單進入凝膠內(nèi)部的通道,路程長,移動的速度慢,相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不簡單進入凝膠內(nèi)部的通道,路程短,移動的速度快,因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分別。(3)固定化酶的方法包括化學結(jié)合法、包埋法、物理吸附法等。由于乳糖酶分子很小,簡單從包埋物中漏出,因此工業(yè)生產(chǎn)中,若要將乳糖酶固定化,一般不相宜采納包埋法,乳糖酶宜采納化學結(jié)合法(共價鍵結(jié)合法)進行固定化。與運用游離酶相比,工業(yè)生產(chǎn)中運用固定化酶的優(yōu)點是酶不易失活,可以重復(fù)用,能提高產(chǎn)品質(zhì)量。28.(10分)RT-PCR是將mRNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù),詳細過程如圖所示,請回答:(1)過程①須要加入緩沖液、原料、__RNA提取物__、__逆轉(zhuǎn)錄酶__和引物A等。(2)過程②首先要將反應(yīng)體系的溫度上升到95℃,其目的是__讓逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活、使mRNA-cDNA雜合雙鏈解開__,該反應(yīng)體系中所用的TaqDNA聚合酶至少應(yīng)能耐受__95__℃高溫。(3)確定RT-PCR擴增片段的是引物,要對圖中單鏈cDNA進行n次循環(huán)的擴增,理論上至少須要__2n-1__個引物B。(4)利用RT-PCR技術(shù)可對某些微量RNA病毒進行檢測,并可提高檢測的靈敏度,緣由是__增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量(或濃度),便于檢測__。(5)RT-PCR過程中主要通過對__溫度__的限制,影響酶的活性,從而使得化學反應(yīng)高效有序地進行。[解析](1)過程①是逆轉(zhuǎn)錄過程,操作時須要加入緩沖液、原料、模板(RNA提取物)、酶(逆轉(zhuǎn)錄酶)和引物A等。(2)過程②將反應(yīng)體系的溫度上升到95℃的目的是讓逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活,同時使mRNA-cDNA雜合雙鏈解開。接下來所用的TaqDNA聚合酶至少應(yīng)能耐受95℃高溫。(3)確定RT-PCR擴增片段的是引物A和引物B上的核苷酸序列,要對圖中單鏈cDNA進行n次循環(huán)的擴增,理論上至少須要2n-1個引物B。(4)利用RT-PCR技術(shù)可對某些微量RNA病毒進行檢測,并可提高檢測的靈敏度,緣由是增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量(或濃度),便于檢測。(5)RT-PCR過程中主要通過對溫度的限制,影響酶的活性,從而使得化學反應(yīng)高效有序地進行。29.(10分)下面是某探討小組開展的“豬血漿某白蛋白的提取及分子量測定”的探討,請完成下列有關(guān)問題。材料儀器:簇新豬血、低速冷凍離心機、透析袋、電泳儀等?;瘜W試劑:pH為7.4的緩沖液、檸檬酸鈉、奈氏試劑(與NHeq\o\al(+,4)反應(yīng)出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀)、飽和度為55%的(NH4)2SO4溶液、生理鹽水等。試驗步驟:(1)樣品獲得:向簇新豬血中加入__(適量的)檸檬酸鈉__以防止血液凝固,靜置一段時間后取上層血漿。(2)鹽析法粗提蛋白質(zhì):①向血漿中加入肯定體積的飽和度為55%的(NH4)2SO4溶液,充分混合后靜置、離心,取沉淀物,向沉淀物中加入適量生理鹽水使之溶解;②重復(fù)步驟①2~3次,最終用生理鹽水將沉淀溶解即得到粗提品,鹽析粗提“血漿某白蛋白”的主要原理是__該血漿白蛋白在飽和度為55%的(NH4)2SO4溶液中溶解度低__,重復(fù)步驟①的主要目的是__除去更多的雜蛋白__。(3)透析除鹽:將粗提品裝入透析袋,以pH

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