四川省成都九校2025屆高三壓軸卷生物試卷含解析

四川省成都九校2025屆高三壓軸卷生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．結(jié)核分枝桿菌俗稱結(jié)核桿菌，屬胞內(nèi)寄生菌，是引起結(jié)核病的病原菌，下列有關(guān)結(jié)核桿菌所引起的免疫調(diào)節(jié)的說法中不正確的是（）A．結(jié)核桿菌能夠引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫B．T細(xì)胞可增殖分化形成效應(yīng)T細(xì)胞直接清除結(jié)核桿菌C．吞噬細(xì)胞可對結(jié)核桿菌的抗原進(jìn)行非特異性識別和處理D．過量使用免疫抑制劑會(huì)使結(jié)核病的發(fā)病率出現(xiàn)上升趨勢2．下列關(guān)于人和動(dòng)物生命活動(dòng)的敘述正確的是（）A．當(dāng)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)遭到破壞時(shí)，必將引起酶促反應(yīng)速率的加快B．在神經(jīng)纖維膜外，局部電流的方向與興奮傳導(dǎo)的方向相同C．效應(yīng)T細(xì)胞與靶細(xì)胞密切接觸，使之裂解死亡屬于細(xì)胞凋亡D．寒冷時(shí)下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素的靶器官是甲狀腺3．下列與染色體有關(guān)實(shí)驗(yàn)的說法，正確的是（）A．可通過觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目變化判斷有絲分裂所處時(shí)期B．可選擇分化程度高、體積大的動(dòng)植物細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料觀察染色體C．可選用龍膽紫染液、醋酸洋紅染液、卡諾氏液等堿性染料對染色體染色D．可在低倍鏡下找到分裂期細(xì)胞后再用高倍鏡觀察染色體的動(dòng)態(tài)行為變化4．果蠅的生物鐘基因位于X染色體上，有節(jié)律（XB）對無節(jié)律（Xb）為顯性；體色基因位于常染色體上，灰身（A）對黑身（a）為顯性。在基因型為AaXBY的雄蠅減數(shù)分裂過程中，若出現(xiàn)一個(gè)AAXBXb類型的變異細(xì)胞，下列分析錯(cuò)誤的是（）A．該細(xì)胞屬于次級精母細(xì)胞B．該細(xì)胞的核DNA數(shù)是體細(xì)胞的一半C．該生物完成一次有絲分裂與一次減數(shù)分裂過程中染色體的復(fù)制次數(shù)相同D．形成該細(xì)胞過程中，有節(jié)律基因發(fā)生了突變，且A與a隨同源染色體的分開而分離5．最新研究證實(shí)，砒霜可以明顯抑制腫瘤細(xì)胞中糖酵解通路限速酶已糖激酶2的活性而影響細(xì)胞代謝，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡。相關(guān)說法中正確的（）A．細(xì)胞的凋亡與癌變是生物體異常的生命活動(dòng)B．老年人頭發(fā)變白是細(xì)胞凋亡的結(jié)果C．細(xì)胞凋亡過程中有新mRNA的合成D．由于細(xì)胞膜上的脂蛋白等物質(zhì)減少，使得癌細(xì)胞彼此之間的黏著性顯著降低6．下圖①、②、③表示由不同原因引起的糖尿病，下列敘述正確的是（）A．Y1抗體與胰島素受體結(jié)合，導(dǎo)致血糖濃度升高B．Y2抗體攻擊胰島B細(xì)胞，導(dǎo)致胰島素分泌量升高C．可通過注射胰島素進(jìn)行治療的是②、③D．③患者血液中胰島素含量可能正常，但仍表現(xiàn)出尿糖癥狀7．某二倍體植物的基因型為AaBbCC，這3對基因分別位于3對同源染色體上。下圖表示以該植物為親本進(jìn)行的育種過程，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．單倍體幼苗的基因型有4種B．個(gè)體Ⅰ的體細(xì)胞中含有2個(gè)染色體組C．個(gè)體Ⅱ中重組類型占9/16D．若要盡快獲得基因型為aaBBCC的純種，則應(yīng)采用圖中A→B→C過程進(jìn)行育種8．（10分）下表為人睪丸中甲、乙、丙、丁四個(gè)細(xì)胞內(nèi)的染色體組和同源染色體的數(shù)量，據(jù)表推測下列說法正確的是（）細(xì)胞類別甲乙丙丁同源染色體對數(shù)230046染色體組數(shù)2214A．甲、丁分別表示減數(shù)分裂和有絲分裂過程中的細(xì)胞B．甲細(xì)胞內(nèi)可能發(fā)生非同源染色體的自由組合C．丁細(xì)胞內(nèi)的染色單體數(shù)是乙細(xì)胞的兩倍D．乙細(xì)胞內(nèi)含有一條X或Y染色體二、非選擇題9．（10分）某雌雄異株植物，其性別分化受等位基因M、m控制。研究發(fā)現(xiàn)，含基因M的受精卵發(fā)育成雄株。該植物剛萌發(fā)形成的嫩莖有綠色、紫色與紅色三種類型，依次由基因aB、ab、a控制，且前者對后者完全顯性。（1）該植物雌株的基因型是____________，雄株的基因型是____________。綠莖雄株有_______種基因型。（2）在一個(gè)該植物的種群中，雌株與雄株的數(shù)目比為1∶1，m基因的頻率為_________。（3）該植物的嫩莖具有很髙的食用與藥用價(jià)值，研究發(fā)現(xiàn)，雄株萌發(fā)產(chǎn)生的嫩莖數(shù)量多、品質(zhì)好。為讓雜交子代全為雄株，育種工作者成功培育出一種“超雄株”。該“超雄株”的基因型為______。育種工作者培育“超雄株”采用的方法可能是_____________。10．（14分）斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中選擇性表達(dá)，研究人員構(gòu)建了HuC基因的表達(dá)載體，并導(dǎo)入到斑馬魚細(xì)胞中研究其作用，請回答：（1）為獲取HuC基因，研究人員從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過_________獲得大量的DNA，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的______________。（2）DraⅢ，SnaBⅠ等是質(zhì)粒上不同限制酶的切割位點(diǎn)。為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的____________酶進(jìn)行切割，這樣做的原因是_________。不選擇NotⅠ酶切割的原因是_____________。（3）用Ca2+處理大腸桿菌，大腸桿菌細(xì)胞即能夠______________。實(shí)驗(yàn)過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察________________________或者在培養(yǎng)基中添加______________，篩選出導(dǎo)入表達(dá)載體的大腸桿菌。11．（14分）CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)，其原理是由一個(gè)向?qū)NA（sgRNA）分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。受此機(jī)制啟發(fā)，科學(xué)家們通過設(shè)計(jì)sgRNA中堿基的識別序列，即可人為選擇DNA上的任一目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割（見下圖）。（1）從CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖看，能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點(diǎn)功能的分子是___________，其類似于基因工程中__________的作用。（2）CCR5基因是人體的正常基因，其編碼的細(xì)胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵T淋巴細(xì)胞的主要輔助受體之一?？蒲腥藛T依據(jù)_____________的部分序列設(shè)計(jì)sgRNA序列，導(dǎo)入骨髓_________細(xì)胞中，構(gòu)建sgRNA-Cas9復(fù)合體，以實(shí)現(xiàn)對CCR5基因的定向切割，變異的CCR5蛋白無法裝配到細(xì)胞膜上，即可有效阻止HIV侵染新分化生成的T淋巴細(xì)胞。試分析與上述過程最接近的現(xiàn)代生物科技是________________。（3）CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對象出錯(cuò)而造成脫靶，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)sgRNA的序列越短脫靶率越高。試分析脫靶最可能的原因是____________________________。（4）通過上述介紹，CRISPR/Cas9系統(tǒng)的基因編輯技術(shù)在______________等方面有廣闊的應(yīng)用前景。（至少答出兩點(diǎn)）12．某生態(tài)系統(tǒng)的部分食物網(wǎng)如下圖所示，請回答：（1）漿果、草、黑松位于食物鏈的起點(diǎn)，構(gòu)成了第一營養(yǎng)級，也稱____________營養(yǎng)級。該食物網(wǎng)共有食物鏈_________條，其中處于多個(gè)營養(yǎng)級的生物有_______種。（2）該生態(tài)系統(tǒng)中的所有棕熊稱為一個(gè)________，其在該生態(tài)系統(tǒng)中的數(shù)量增長方式應(yīng)為_____增長。（3）與棕熊直接取食漿果相比，鹿取食漿果，棕熊取食鹿（假設(shè)兩種情形下漿果的量相等），棕熊所獲得的能量更_______（填多或少）。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

對于胞內(nèi)寄生生物，體液免疫先起作用，阻止寄生生物的傳播感染，當(dāng)寄生生物進(jìn)入細(xì)胞后，細(xì)胞免疫將抗原釋放，再由體液免疫最后清除?！驹斀狻緼、結(jié)核桿菌屬于胞內(nèi)寄生菌，在侵染的過程中首先通過體液免疫阻止其擴(kuò)散，當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)時(shí)，會(huì)引起T細(xì)胞的增殖分化，從而引發(fā)細(xì)胞免疫，A正確；B、效應(yīng)T細(xì)胞的作用是和靶細(xì)胞結(jié)合，導(dǎo)致靶細(xì)胞裂解死亡，效應(yīng)T細(xì)胞不能直接清除病原體，B錯(cuò)誤；C、吞噬細(xì)胞能對病原體進(jìn)行非特異性識別，并處理和暴露抗原，將信息呈遞給T細(xì)胞，C正確；D、使用免疫抑制劑會(huì)導(dǎo)致機(jī)體的免疫功能降低，使結(jié)核病的發(fā)病率上升，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查疫苗、特異性免疫的相關(guān)知識，有一定的綜合性，意在考查學(xué)生識記和理解能力，在此基礎(chǔ)上可將注射抗原和注射疫苗相互進(jìn)行比較，注射抗體，抗體可以直接清除病毒，發(fā)揮作用快，可起到治療的作用，一般使用于緊急治療，此法缺點(diǎn)是抗體存活時(shí)間比較短，沒有長期預(yù)防的作用。2、C【解析】

1、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指正常機(jī)體通過調(diào)節(jié)作用，使各個(gè)器官、系統(tǒng)協(xié)調(diào)活動(dòng)，共同維持的相對穩(wěn)定狀態(tài)，人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)是通過神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)來實(shí)現(xiàn)的。2、靜息時(shí)，神經(jīng)細(xì)胞膜對鉀離子的通透性大，鉀離子大量外流，形成內(nèi)負(fù)外正的靜息電位；受到刺激后，神經(jīng)細(xì)胞膜的通透性發(fā)生改變，對鈉離子的通透性增大，鈉離子內(nèi)流，形成內(nèi)正外負(fù)的動(dòng)作電位。興奮部位和非興奮部位形成電位差，產(chǎn)生局部電流，興奮就以電信號的形式傳遞下去，且興奮傳導(dǎo)的方向與膜內(nèi)電流方向一致、與膜外電流方向相反。3、下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素能促進(jìn)垂體分泌促甲狀腺激素，垂體分泌促甲狀腺激素能促進(jìn)甲狀腺分泌甲狀腺激素?！驹斀狻緼、當(dāng)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)遭到破壞時(shí)必將引起細(xì)胞代謝紊亂，酶促反應(yīng)速率可能降低或不變，A錯(cuò)誤；B、在神經(jīng)纖維膜外，局部電流的方向與興奮傳導(dǎo)的方向相反，B錯(cuò)誤；C、效應(yīng)T細(xì)胞與靶細(xì)胞密切接觸使其裂解死亡屬于細(xì)胞凋亡，C正確；D、寒冷時(shí)下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素的靶器官是垂體，D錯(cuò)誤。故選C。3、A【解析】

低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實(shí)驗(yàn)：1、低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實(shí)驗(yàn)的原理：低溫能抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。2、該實(shí)驗(yàn)的步驟為選材→固定→解離→漂洗→染色→制片。3、該實(shí)驗(yàn)采用的試劑有卡諾氏液（固定）、改良苯酚品紅染液（染色），體積分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸溶液和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液（解離）?！驹斀狻緼、有絲分裂的各個(gè)時(shí)期，染色體的形態(tài)?位置和數(shù)目各有不同，所以能根據(jù)這些特點(diǎn)來確定細(xì)胞所處的分裂時(shí)期，A正確；B、分化程度高的細(xì)胞，一般分裂能力弱，而要觀察染色體則一定需要分裂期才能看到，因此要選擇分化程度低的細(xì)胞，它們分裂旺盛，容易找到分裂期的細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、卡諾氏液不是染色劑，它是固定劑，C錯(cuò)誤；D、教材中觀察染色體的實(shí)驗(yàn)中，因?yàn)榻怆x?固定等原因，細(xì)胞均處于死亡狀態(tài)，所以無法觀察動(dòng)態(tài)行為，D錯(cuò)誤?故選A。4、B【解析】

根據(jù)題干信息分析，題中兩對等位基因位于兩對同源染色體上，遵循基因的自由組合定律；已知在基因型為AaXBY的雄蠅減數(shù)分裂過程中，若出現(xiàn)一個(gè)AAXBXb類型的變異細(xì)胞，該細(xì)胞中沒有a基因和Y染色體，說明同源染色體已經(jīng)正常分離，其含有2個(gè)A基因和B、b基因，說明該細(xì)胞應(yīng)該處于減數(shù)第二次分裂過程中，為次級精母細(xì)胞，且發(fā)生了基因突變（B突變成了b）。【詳解】A、根據(jù)以上分析已知，該細(xì)胞為次級精母細(xì)胞，A正確；B、該細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂過程中，核DNA的含量與體細(xì)胞相等，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)有絲分裂和減數(shù)分裂的過程分析可知，該生物完成一次有絲分裂與一次減數(shù)分裂過程中，染色體都進(jìn)行一次復(fù)制，C正確；D、根據(jù)以上分析可知，形成該細(xì)胞過程中，有節(jié)律基因發(fā)生了突變（B突變成了b），且A與a隨同源染色體的分開而分離，D正確。故選B。5、C【解析】

癌細(xì)胞由于基因發(fā)生改變，粘連蛋白減少或缺少，容易在組織間轉(zhuǎn)移。另外癌細(xì)胞還有一個(gè)最重要的特點(diǎn)，是無限增殖的特性，正常的細(xì)胞不可能出現(xiàn)無限增殖。細(xì)胞凋亡指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程，而是主動(dòng)過程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用，它并不是病理?xiàng)l件下自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭取的一種死亡過程?！驹斀狻緼、細(xì)胞凋亡對于多細(xì)胞生物體完成正常發(fā)育，維持內(nèi)部環(huán)境的穩(wěn)定，以及抵御外界各種因素的干擾都起著非常關(guān)鍵的作用，A錯(cuò)誤；B、老年人頭發(fā)變白是細(xì)胞衰老的結(jié)果，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過程，因此，細(xì)胞凋亡過程中有新mRNA的合成，C正確；D、由于細(xì)胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少，使得癌細(xì)胞彼此之間的黏著性顯著降低，D錯(cuò)誤。故選C。6、D【解析】

1、據(jù)圖分析，圖中抗體Y1能與胰島B細(xì)胞上的受體結(jié)合，導(dǎo)致葡萄糖與受體的結(jié)合受到影響，使胰島B細(xì)胞分泌胰島素減少，從而使血糖升高。2、圖中抗體Y2能直接作用于胰島B細(xì)胞，影響胰島B細(xì)胞的分泌，導(dǎo)致胰島素減少，從而血糖升高。3、圖中Y3能與胰島素受體結(jié)合，影響胰島素與受體的結(jié)合，從而胰島素不能發(fā)揮作用，血糖升高?！驹斀狻緼、通過分析可知，Y1抗體與胰島B細(xì)胞上的葡萄糖受體結(jié)合，導(dǎo)致葡萄糖與受體的結(jié)合受到影響，使胰島B細(xì)胞分泌胰島素減少，從而使血糖升高，A錯(cuò)誤；B、通過圖示可知，Y2抗體攻擊胰島B細(xì)胞，導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能分泌胰島素，使其分泌量減少，B錯(cuò)誤；CD、圖中③的Y3能與胰島素受體結(jié)合，影響胰島素與受體的結(jié)合，患者血液中胰島素含量可能正常，但仍表現(xiàn)出尿糖癥狀，不可通過注射胰島素進(jìn)行治療的是③，C錯(cuò)誤；D正確。故選D。7、C【解析】

分析題圖可知A表示減數(shù)分裂形成配子，B表示花藥離體培養(yǎng)，D表示受精作用，E表示細(xì)胞增殖和分化，C表示用秋水仙素進(jìn)行人工誘導(dǎo)?！驹斀狻緼、某二倍體植物的基因型為AaBbCC，這3對基因分別位于3對同源染色體上，則減數(shù)分裂形成的配子類型為ABC、AbC、aBC、abC，經(jīng)過花藥離體培養(yǎng)形成的單倍體幼苗的基因型有ABC、AbC、aBC、abC共4種，A正確；B、個(gè)體Ⅰ是單倍體幼苗經(jīng)過秋水仙素處理形成的二倍體，體細(xì)胞中含有2個(gè)染色體組，B正確；C、基因型為AaBbCC的個(gè)體產(chǎn)生的雌雄配子種類和比例為ABC∶AbC∶aBC∶abC=1∶1∶1∶1，雌雄配子受精后形成9種基因型，四種表現(xiàn)型，與親本表現(xiàn)型相同的為A-B-CC，占3/4×3/4=9/16，所以Ⅱ中重組類型占1-9/16=7/16，C錯(cuò)誤；D、單倍體育種能明顯縮短育種年限，A→B→C過程為單倍體育種，所以若要盡快獲得基因型為aaBBCC的純種，應(yīng)采用圖中A→B→C過程進(jìn)行育種，D正確。故選C。8、B【解析】

通過表格數(shù)據(jù)分析，甲有23對同染色體，2個(gè)染色體組可能處于有絲分裂的前中期和減數(shù)第一次分裂；乙沒有同源染色體，但有兩個(gè)染色體組，處于減數(shù)第二次分裂后期；丙沒有同源染色體，但有1個(gè)染色體組，是精細(xì)胞；丁有46對同源染色體，4個(gè)染色體組，處于有絲分裂后期?！驹斀狻緼、通過分析可知，甲可能表示減數(shù)分裂或有絲分裂過程中的細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、通過分析可知，甲細(xì)胞可能處于減數(shù)第一次分裂后期，故可能發(fā)生非同源染色體的自由組合，B正確；C、丁細(xì)胞處于有絲分裂后期，細(xì)胞內(nèi)沒有染色單體數(shù)，C錯(cuò)誤；D、乙細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂后期，細(xì)胞內(nèi)含有兩條X或Y染色體，D錯(cuò)誤。故選B。二、非選擇題9、mmMm375%MM單倍體育種【解析】

根據(jù)題意分析可知：該雌雄異株植物的性別分化受等位基因M、m控制，含基因M的受精卵發(fā)育成雄株，則雌株基因組成為mm。由于嫩莖有綠色、紫色與紅色三種類型，依次由基因aB、ab、a控制，且前者對后者完全顯性，則綠色莖的基因型為aBaB、aBab、aBa共3種，紫色莖的基因型為abab、aba共2種，紅色莖的基因型為aa共1種?！驹斀狻浚?）根據(jù)題意可知，含基因M的受精卵發(fā)育成雄株，即雌株基因組成為mm，由于雌株只能產(chǎn)生m，所以子代不會(huì)出現(xiàn)MM，故雄株的基因組成是Mm。綠色莖的基因型為aBaB、aBab、aBa，故綠莖雄株的基因型為aBaBMm、aBabMm、aBaMm共3種。（2）在一個(gè)種群中雌雄比例為1∶1，由于雌株基因組成為mm，雄株的基因組成是Mm，則M基因頻率為1/2×1/2=1/4，m的基因頻率為1-1/4=3/4，即75%。（3）含基因M的受精卵發(fā)育成雄株，超雄株的后代全為雄株，說明雄株只產(chǎn)生一種類型的配子M，可推測超雄株的基因型是MM。這種超雄株的培養(yǎng)可能是采用了花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株幼苗，再用秋水仙素處理得到正常二倍體雄株，這種育種方法為單倍體育種?！军c(diǎn)睛】本題考查基因的分離定律、自由組合定律、基因頻率的計(jì)算和育種的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識綜合分析問題和解決問題的能力。10、逆轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù)擴(kuò)增cDNA文庫EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接破壞標(biāo)記基因無法篩選（且沒有啟動(dòng)子）吸收周圍環(huán)境中的DNA分子表達(dá)的綠色熒光蛋白菌落卡那霉素【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成目的基因，并通過PCR技術(shù)在體外擴(kuò)增可獲得大量的目的基因，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的cDNA文庫。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，不能破壞運(yùn)載體上的啟動(dòng)子、復(fù)制原點(diǎn)，以及運(yùn)載體上需要保留標(biāo)記基因，為了防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接，常用不同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，結(jié)合圖示中各種限制酶的酶切位點(diǎn)可知，為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶進(jìn)行切割?？敲顾乜剐曰?yàn)闃?biāo)記基因，若用NotⅠ酶切割，將會(huì)導(dǎo)致卡那霉素抗性基因被破壞，且切割后的質(zhì)粒會(huì)失去啟動(dòng)子，使基因表達(dá)載體中缺少標(biāo)記基因無法選擇，且沒有啟動(dòng)子無法轉(zhuǎn)錄，所以不選擇NotⅠ酶切割質(zhì)粒。（3）用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞，易于吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。由于綠色熒光蛋白表達(dá)后會(huì)發(fā)綠光，所以實(shí)驗(yàn)過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察表達(dá)的綠色熒光蛋白菌落或者在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選出導(dǎo)入表達(dá)載體的大腸桿菌?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。11、向?qū)NA（sgRNA）分子和Cas9蛋白限制酶CCR5基因造血干蛋白質(zhì)工程其他DNA序列也含有與向?qū)NA（sgRNA）互補(bǔ)配對的序列，造成向?qū)NA（sgRNA）錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶基因治療、動(dòng)植物育種（基因水平）、研究基因功能【解析】

根據(jù)題意分析可知，CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是利用該基因表達(dá)系統(tǒng)中的引導(dǎo)RNA能識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實(shí)現(xiàn)對靶基因序列的編輯。由于其他DNA序列也含有與引導(dǎo)RNA互補(bǔ)配對的序列，造成引導(dǎo)RNA錯(cuò)誤結(jié)合而出現(xiàn)脫靶現(xiàn)象?！驹斀狻浚?）由題干信息“向?qū)NA能識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA”，說明能夠行使