醫(yī)用口罩及材料病毒過濾效率測試方法 Phi-X174噬菌體氣溶膠法 征求意見稿

1醫(yī)用口罩及材料病毒過濾效率測試方法Phi-X174噬菌體氣溶膠法YY/T0689-2008血液和體液防護(hù)裝備防護(hù)服材料抗血液傳播病原體穿透性能測試Phi-X174噬菌注：本文件中噬菌體即指Phi-X174。注：本方法中，大腸桿菌作為宿主細(xì)胞因Phi-X174感理論上由單個(gè)噬菌體感染裂解宿主細(xì)胞導(dǎo)致在平板上層瓊脂上形成的肉眼可見透噬菌斑形成單位plaque-forming病毒過濾效率viralfiltrationefficiency;2除特別要求外，檢測應(yīng)在溫度為16℃~32℃,相對濕度為（50±30）%的環(huán)境中進(jìn)行。在溫度為（21±5）℃、相對濕度為（85±5）%的環(huán)境中放置至少4h，或者按照其它文件中的要求7.1.1噬菌體：Phi-X174，A3按照YY/T0689-2008中規(guī)定的方法或者以下步驟，制備噬菌），），菌體懸液）。將噬菌體與宿主菌充分混勻后再加入10～15），注：也可向上層瓊脂培養(yǎng)基加入10～15mL噬菌體營養(yǎng)肉湯，4℃孵育至少4h，間或搖晃。將上層孵育液吸取至離將噬菌體懸液進(jìn)行1：10梯度稀釋，按照以下步驟進(jìn)行噬菌體濃度的4c)待上層瓊脂凝固后，將平板置于（36±1）℃條件下培養(yǎng)，直至產(chǎn)生肉眼清晰可見的噬菌斑，d)若進(jìn)行了梯度稀釋，則應(yīng)對噬菌斑數(shù)在30PFU～300PFU范圍內(nèi)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)可選擇具備儲(chǔ)液瓶的發(fā)生器，如Collison發(fā)生器。發(fā)生器產(chǎn)生的氣溶膠顆?？諝鈩?dòng)力學(xué)中值直徑約為1液體沖擊式采樣器可使用AGI-30或Biosampler采樣器（見圖1），兩種采樣器的推薦采樣流量均為12.5L/min。AGI-30采樣器是被廣泛使用的液體沖擊式采樣器。當(dāng)裝液量為20mL時(shí)，采樣管道出氣口5可選擇使用平面或拱形支撐網(wǎng)支撐醫(yī)用口罩或材料。支撐網(wǎng)結(jié)構(gòu)尺寸示意圖見過濾裝置和真空泵組成。過濾效率檢測系統(tǒng)示意圖68.5.1噴霧液噴霧介質(zhì)可采用1%蛋白胨水，也可采用磷酸鹽緩吸取一定濃度體積的噬菌體懸浮液至噴霧介質(zhì)中，作為噴霧液。噴霧液濃度一般約為1.0×108PFU/mL，但應(yīng)以能保證陽性對照的噬菌體數(shù)目至少為106PFU使用液體沖擊式采樣器時(shí)，裝液量應(yīng)為20mL。采樣液可選擇磷酸鹽緩沖液養(yǎng)肉湯等溶液?？稍诓蓸右褐刑砑?.01%（體積分?jǐn)?shù)）消泡劑，如橄欖油，降低采樣時(shí)的起7a)將樣品安裝在夾具內(nèi)?？谡謽悠肥箍谡终Ｅ宕鞣较虻耐鈧?cè)朝向氣溶膠來向，無明確方向要b)連接好氣溶膠發(fā)生器、采樣器等管d)按照陽性對照—樣品—陽性對照—陰性對照的順序開展試驗(yàn)，兩次陽性對照之間至少檢測3e)陰性對照試驗(yàn)不產(chǎn)生氣溶膠，不放置所有樣品和對照試驗(yàn)均應(yīng)使用基于相同原理的同一種采樣器，——兩個(gè)陽性對照平均值，單位PFU；a)將樣品安裝在夾具內(nèi)?？谡謽悠肥箍谡终Ｅ宕鞣较虻耐鈧?cè)朝向氣溶膠來向，無明確方向要b)連接好氣溶膠發(fā)生器、采樣器等管e)進(jìn)行陰性對照試驗(yàn)。陰性對照試驗(yàn)不產(chǎn)生氣溶膠，不放所有樣品和對照試驗(yàn)均應(yīng)使用基于相同原理的同一89結(jié)果報(bào)告b)樣品預(yù)處理?xiàng)l件；h)采樣器名稱；9[2]YY/T0689-2008血液和體液防護(hù)裝備防護(hù)服材料抗血液傳播病原體穿透性能測