臨床生化檢驗：6-線性范圍試驗

實驗六線性范圍試驗

檢驗系生化教研室臨床生化試劑盒性能評價試劑空白吸光度試劑空白吸光度變化速率分析靈敏度線性范圍重復(fù)性準(zhǔn)確度穩(wěn)定性時間反應(yīng)曲線臨床試驗臨床生化試劑盒的性能指標(biāo)1、線性范圍：在試劑盒評價中很重要,是指試劑盒按說明書使用可準(zhǔn)確測量的范圍。試劑盒測定線性范圍是衡量其質(zhì)量的重要指標(biāo),也是鑒定試劑盒和保證正確使用的關(guān)鍵指標(biāo)之一。2.酶促反應(yīng)時間曲線或化學(xué)反應(yīng)速度時間曲線觀察以吸光度為縱坐標(biāo)，反應(yīng)時間為橫坐標(biāo)作圖，觀察動態(tài)期（包栝延遲期，線性期，混和期）和平衡期出現(xiàn)，持續(xù)和終止的時間，分析有關(guān)性能指標(biāo)。3.穩(wěn)定性（1）效期穩(wěn)定性（2）熱穩(wěn)定性試驗（3）開瓶穩(wěn)定性實驗?zāi)康恼莆諜z測臨床生化檢驗商品試劑盒測定線性范圍的原理和方法,劑量反應(yīng)曲線的繪制,統(tǒng)計方法和性能評價;熟悉線性范圍變窄的原因;了解影響線性的因素.原理使用不同濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,用GOD-POD法試劑測定各自的吸光度,以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),以其對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),在方格紙上作圖.即可繪制出一條直線,即劑量反應(yīng)曲線(dose-responsecurve).試劑與器材40mmol/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液蒸餾水GOD-POD試劑盒可見分光光度計水浴鍋加入物標(biāo)準(zhǔn)管

012345葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(ul)010203040

50蒸餾水(ul)50403020100GOD-POD試劑(ml)

555555操作步驟混勻，37℃水浴10min，0號管調(diào)零，500nm讀取吸光度；以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，將其交叉點在坐標(biāo)紙上標(biāo)出，獲得血糖與GOD-POD之間的劑量反應(yīng)曲線結(jié)果計算1.測定結(jié)果：5個不同濃度的標(biāo)本，隨機排列，每個標(biāo)本測定4次，舍去最大值與最小值，取中間兩個值的均值為測定值。。2.線性評價統(tǒng)計采用回歸分析,求出此直線的截距a和斜率b,建立直線回歸方程y=a+bx;并作相關(guān)分析,求出相關(guān)系數(shù)(r),r2≥0.995認(rèn)為此濃度范圍內(nèi)的溶液與吸光度呈良好的線性關(guān)系。注意事項1.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的加量必須十分準(zhǔn)確,應(yīng)用計量性能準(zhǔn)確度很高的微量進樣器加樣。2.本方法線性可達22.24mmol/L,(指生化分析儀)造成線性變窄的原因試劑配料中組分投料不足;試劑配制后組分穩(wěn)定性差;因運輸或儲存不當(dāng)?shù)葘?dǎo)致試劑組分的含量發(fā)生變化。3.酶法測定時,有時當(dāng)酶量相對不足時,