GB 14923-2022 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 遺傳質(zhì)量控制

代替GB14923—2010國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)I一個(gè)動(dòng)物群體中，任何個(gè)體基因組中98.6%以上的座位為純合的品系。由兩個(gè)近交系雜交后，經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配育重組同類系recombinantcongenicstrain;RC由兩個(gè)近交系雜交后，子代與兩個(gè)親代近交系中的一個(gè)進(jìn)行數(shù)次回交(通?；亟?次),再經(jīng)不對(duì)特殊基因選擇的連續(xù)兄妹交配(通常大于14代)而育成的近交系。從供體品系中選擇一個(gè)特定標(biāo)記，通過(guò)回交方式形成的一個(gè)與原近交系只在一個(gè)很小染色體片段1由最多3個(gè)親本品系(其中一個(gè)是重組基因的ES細(xì)胞株)混合制作的近交系。兩個(gè)近交系間繁殖到F2,采取非兄妹交配的互交方式所得到的多個(gè)近交系。4.2命名2近交系的近交代數(shù)用大寫(xiě)英文字母F表示。例如當(dāng)一個(gè)近交系的近交代數(shù)為87代時(shí)，寫(xiě)成b)當(dāng)保持者保持的某個(gè)近交系具有兩個(gè)以上亞系時(shí)，可在數(shù)字后再加保持者的縮寫(xiě)英文名稱來(lái)在兩個(gè)親代近交系的縮寫(xiě)名稱中間加大寫(xiě)英文字母X命名。相同雙親交配育成的一組近交系用c)導(dǎo)入基因(或基因組片段)的符號(hào)(用英文斜體),與b之間以連字符分開(kāi)；3基因組和BALB/c細(xì)胞質(zhì)的品系。這樣的品系是以雄的C57BL/6J小鼠和雌的BALB/c小鼠交配，子代雌鼠與C57BL/6J雄鼠反復(fù)回交10代而成。b)兩個(gè)以上親本品系制作的近交系，或者受不明遺傳因素影響的突變系，作為混合近交系，用STOCK空格后加基因或染色體異常來(lái)表示，如STOCKRb(16.17)5Bnr為具有Rb(16.17)遠(yuǎn)交群由2個(gè)~4個(gè)大寫(xiě)英文字母命名，種群名稱前標(biāo)明保持者的英文縮寫(xiě)名稱，第一個(gè)字母需大45種數(shù)目大于或等于25對(duì)。循環(huán)交配法等方法進(jìn)行繁殖。封閉群的繁殖方式同遠(yuǎn)交群。具體方法見(jiàn)附錄B。將適齡的雌性親代品系動(dòng)物與另一個(gè)品系雄性親代動(dòng)物雜交，即可得到F1動(dòng)物。雌雄親本交配順序不同，得到的F1動(dòng)物也不一樣。F1動(dòng)物自繁成為F2動(dòng)物。除特殊需要外F1動(dòng)物一般不進(jìn)行雌性種鼠數(shù)量(N)6近交系小鼠選擇位于10條染色體上的14個(gè)生化座位，近交系大鼠選擇位于6條染色體上的11個(gè)生6一可命名為同源突變系兩個(gè)或兩個(gè)以上座位的標(biāo)記基因與淘汰，重新引種7附錄F和附錄G;檢測(cè)數(shù)量100以下，不少于15頭(只),100以上89TgX=方式(mode)Nc非編Pt啟動(dòng)子c)實(shí)驗(yàn)室指定序號(hào)及實(shí)驗(yàn)室注冊(cè)代號(hào)實(shí)驗(yàn)室指定序號(hào)是由實(shí)驗(yàn)室對(duì)已成功的轉(zhuǎn)基因系給予的特定編號(hào)，最多不超過(guò)5位數(shù)字。而實(shí)驗(yàn)室注冊(cè)代號(hào)是對(duì)從事轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究生產(chǎn)的實(shí)驗(yàn)室給予的特定符號(hào)。根據(jù)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物命名的原則，如果轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的遺傳背景是由不同的近交成時(shí)，則以STOCK表示未知的背景或2個(gè)以上親代品系。A.2.2基因定位突變動(dòng)物的命名此外，通常d代表deletion,in代表insert,d或in后面的數(shù)字代表敲除或者敲入片段的大小。A.3鑒定與質(zhì)量控制A.3.1轉(zhuǎn)基因動(dòng)物通過(guò)PCR、DNA印跡等檢測(cè)方法確認(rèn)陽(yáng)性基因在子代動(dòng)物中整合成功。經(jīng)鑒定為陽(yáng)性的小鼠成為首建鼠(founder)。外源基因的穩(wěn)定表達(dá)是轉(zhuǎn)基因成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，采用RT-PCR、Northern雜交、We通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)(Southernbolt,PCR或測(cè)序等)檢測(cè)純合子或雜合子小鼠靶位點(diǎn)突變，選用(資料性)b)當(dāng)遠(yuǎn)交群中每代交配的雄種動(dòng)物數(shù)目為26只～100只時(shí)，一般采用循環(huán)交c)當(dāng)遠(yuǎn)交群中每代交配的雄種動(dòng)物數(shù)目多于100只時(shí)，一般采用隨選交配法，也可采用循環(huán)交每只雄種動(dòng)物和每只雌種動(dòng)物，分別從子代各留一只雄性動(dòng)物和雌性動(dòng)物，作為繁殖下一代的種為自1開(kāi)始的自然數(shù))。n代所生動(dòng)物與n+1代交配編排見(jiàn)表B.1。n+1代籠號(hào)雌種來(lái)自n代籠號(hào)雄種來(lái)自n代籠號(hào)1122343564:892143表B.1最佳避免近交法的交配編排(續(xù))B.3.2循環(huán)交配法B.3.2.1應(yīng)用范圍B.3.2.2實(shí)施辦法單位等);112234356478521643765887B.3.3.1應(yīng)用范圍B.3.3.2實(shí)施辦法(資料性)主要近交系小鼠的標(biāo)記基因中文名稱A1堿性磷酸酶-1bbbaa3babababbab8酯酶-1bbbabcccacabbab4葡萄糖-6-磷酸脫氫酶-1bbbab7葡萄糖磷酸異構(gòu)酶-1aabbb7dddsd1異檸檬酸脫氫酶-1abaab9蘋(píng)果酸酶-1ababb5磷酸葡萄糖變位酶-1aabaa1bbbab9轉(zhuǎn)鐵蛋白bbbbakkbkkkbk主要近交系小鼠的標(biāo)記基因中文名稱1堿性磷酸酶-1baabba3babbaaababbb8酯酶-1bbbabbaccaccabbbaa4葡萄糖-6-磷酸脫氫酶-1babbbb7葡萄糖磷酸異構(gòu)酶-1aaaaba7dddsds1異檸檬酸脫氫酶-1abbaaa9蘋(píng)果酸酶-1aaabbb5磷酸葡萄糖變位酶-1abbabb1abbcba9轉(zhuǎn)鐵蛋白bbbbbbdqdbbkdqdbbk主要近交系大鼠的標(biāo)記基因中文名稱9堿性磷酸酶-1baaaaab9bbbbbab2aaaaabb酯酶-1baaaaaa酯酶-3adadabdbbbbbab8bbaabaa酯酶-8babbbbaacacaacabaaaab1血紅蛋白baabaaa引物名稱序列(5'-3')常用品系帶型bbaATTGGCGATATCATTTCACTbabacbbbaACTCTACAAGGACCAGAAAaabAGTGTTGCCCTCCTATGCAabbAGAACATGCTGTTGTCAGG注：按泳動(dòng)快慢將條帶依次命名為a、b、c…帶，泳動(dòng)最快的命名為a帶。序號(hào)引物序列(5'-3′)染色體1121324ATTGGTGATCAGATTTTTTTC253ATTGGCGATATCATTTCACT6ACTCATCTTCTGAGGAGTA474表D.325個(gè)遠(yuǎn)交群大鼠微衛(wèi)星引物序列(續(xù))序號(hào)引物序列(5'-3')染色體8596789AGGAAATTAAGAGAAGTTGGGAGGGAGCAGAACTACTAAAGATXSNP標(biāo)記基因11AF-067836_350A_1TATT21TTTC32M-09011_1AACC43M-02707_1TTCC54M-01609_1CTTT65GGTT75AAAA86M-02094_1GTTT97M-05782_1TGGG8CAAA9M-05537_1AAGA9M-04819_1TCCCTGTTM-05799_1GGGGM-08924_1ACACM-05727_1TCCCTCCCM68896_151_1CTTTTGGGM-07251_1TTTTM-07646_1GGAAATTAM-04659_1AAGGAF027865_1TCCCM-09844_1GAGGM-02162_1GAAGXM-05810_1TTCT8TCCGAAATCC一A一GG1GT4TCTGA G基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%五指山小型豬近交系五指山小型豬近交系表F.1實(shí)驗(yàn)用五指山小型豬近交系、廣西巴馬小型豬和貴州小型豬近交系培育過(guò)程中，遺傳質(zhì)量控制的微衛(wèi)星座位及優(yōu)勢(shì)等位基因(續(xù))基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%基因%引物序列(5'-3')染色體退火溫度℃等位基因范圍12AGAAATTAGTGCCTCAAATAAACCATTAAGTCCCTAGC23456798AGGGTGGCTAAAAAAGAAAATCAAATCCTTA