《高效液相色譜法》考核試題

《高效液相色譜法》考核試題滿分：100分考試日期：姓名：部門：填空題（1-4題每空3分，共33分，第5-8題每空4分，共20分；填空題共53分）高效液相色譜法系采用將規(guī)定的流動相泵入裝入填充劑的色譜柱進行分離測定的色譜方法。高效液相色譜儀基本由泵，，，和組成。定量測定時，對照品溶液和供試品溶液均應(yīng)分別配制份。供試溶液在注入色譜儀前，一般應(yīng)經(jīng)適宜的濾膜濾過。色譜系統(tǒng)的適用性試驗通常包括、、和等四個指標。無論是定性鑒別還是定量分析，均要求待測峰與其他峰、內(nèi)標峰或特定的雜質(zhì)對照峰之間有較好的分離度。除另有規(guī)定外，定量分析時分離度應(yīng)大于。色譜柱的理論板數(shù)按n=計算。重復(fù)性測定中，取各品種項下的對照溶液，連續(xù)進樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測定值的相對標準偏差應(yīng)不大于。為保證分離效果和測量精度，應(yīng)檢測待測峰的拖尾因子是否符合各品種項下的規(guī)定。除另有規(guī)定外，峰高法定量時T應(yīng)在～之間。二、判斷題（每題5分，共25分）1、在梯度洗脫裝置中，兩個泵通過一個“T”型接口接到柱子上，這樣不同的溶劑就能按照標準中規(guī)定的進行混合。整個梯度洗脫過程由梯度控制器控制。（）2、外標法測定供試品中某個雜質(zhì)或主成分含量，測量對照品溶液和供試品溶液中待測成分的峰面積（或峰高），按下式計算含量：含量（CX）=CRAXAR（）3、面積歸一化法一般也宜用于微量雜質(zhì)的檢查，方法是測量各雜質(zhì)峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的色譜峰面積，計算各峰面積及其之和占總峰面積的百分率。（）4、對所有的反相柱，先用高比例水相的脫鹽流動相至少沖洗30分鐘，流速同檢測時的流速，然后用水：甲醇＝50：50沖洗，最后用甲醇。（）5、使用的流動相應(yīng)與儀器系統(tǒng)的原保存溶劑能互溶，如不互溶，則先取下上次的色譜柱，用異丙醇沖洗過渡，進樣器和檢測器的流通池也注入異丙醇進行過渡，過渡完畢后，接上相應(yīng)的色譜柱，換上本次使用的流動相。（）三、問答題（共22分）如果系統(tǒng)適應(yīng)性指標不符合要求，應(yīng)對柱子進行哪些檢查？《高效液相色譜法》試題答案滿分：100分填空題（1-4題每空3分，共33分，第5-8題每空4分，共20分；填空題共53分）高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動相泵入裝入填充劑的色譜柱進行分離測定的色譜方法。高效液相色譜儀基本由泵，進樣器，色譜柱，檢測器和色譜數(shù)據(jù)處理器組成。定量測定時，對照品溶液和供試品溶液均應(yīng)分別配制2份。供試溶液在注入色譜儀前，一般應(yīng)經(jīng)0.45μm適宜的濾膜濾過。色譜系統(tǒng)的適用性試驗通常包括理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子等四個指標。無論是定性鑒別還是定量分析，均要求待測峰與其他峰、內(nèi)標峰或特定的雜質(zhì)對照峰之間有較好的分離度。除另有規(guī)定外，定量分析時分離度應(yīng)大于1.5。色譜柱的理論板數(shù)按n=5.54（tR/Wh/2）2計算。重復(fù)性測定中，取各品種項下的對照溶液，連續(xù)進樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測定值的相對標準偏差應(yīng)不大于2.0％。為保證分離效果和測量精度，應(yīng)檢測待測峰的拖尾因子是否符合各品種項下的規(guī)定。除另有規(guī)定外，峰高法定量時T應(yīng)在0.95～1.05之間。二、判斷題（每題5分，共25分）1、在梯度洗脫裝置中，兩個泵通過一個“T”型接口接到柱子上，這樣不同的溶劑就能按照標準中規(guī)定的進行混合。整個梯度洗脫過程由梯度控制器控制。（√）2、外標法測定供試品中某個雜質(zhì)或主成分含量，測量對照品溶液和供試品溶液中待測成分的峰面積（或峰高），按下式計算含量：含量（CX）=CRAXAR（√）3、面積歸一化法一般也宜用于微量雜質(zhì)的檢查，方法是測量各雜質(zhì)峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的色譜峰面積，計算各峰面積及其之和占總峰面積的百分率。（×）4、對所有的反相柱，先用高比例水相的脫鹽流動相至少沖洗30分鐘，流速同檢測時的流速，然后用水：甲醇＝50：50沖洗，最后用甲醇。（×）5、使用的流動相應(yīng)與儀器系統(tǒng)的原保存溶劑能互溶，如不互溶，則先取下上次的色譜柱，用異丙醇沖洗過渡，進樣器和檢測器的流通池也注入異丙醇進行過渡，過渡完畢后，接上相應(yīng)的色譜柱，換上本次使用的流動相。（√）三、問答題（22