2024年高考生物真題和模擬題分類(lèi)匯編專(zhuān)題13發(fā)酵工程

PAGE24-專(zhuān)題13發(fā)酵工程一、單選題1．（2024·山東·高考真題）青霉菌處在葡萄糖濃度不足的環(huán)境中時(shí)，會(huì)通過(guò)分泌青霉素殺死細(xì)菌，以保證自身生存所需的能量供應(yīng)。目前已實(shí)現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn)，關(guān)于該生產(chǎn)過(guò)程，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．發(fā)酵液中的碳源不宜運(yùn)用葡萄糖B．可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量C．選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴(kuò)大培育后才可接種到發(fā)酵罐中D．青霉素具有殺菌作用，因此發(fā)酵罐不需嚴(yán)格滅菌【答案】D【解析】【分析】培育基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等四類(lèi)養(yǎng)分物質(zhì)。配制培育基時(shí)除了滿(mǎn)意基本的養(yǎng)分條件外，還需滿(mǎn)意微生物生長(zhǎng)對(duì)特別養(yǎng)分物質(zhì)、pH、O2的要求?！驹斀狻緼、青霉菌處于葡萄糖濃度不足的環(huán)境中會(huì)通過(guò)分泌青霉素殺死細(xì)菌；供應(yīng)相同含量的碳源，葡萄糖溶液?jiǎn)挝惑w積中溶質(zhì)微粒較多，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞失水，發(fā)酵液中的碳源不宜運(yùn)用葡萄糖，乳糖是二糖，可被水解為半乳糖和葡萄糖，是青霉菌生長(zhǎng)的最佳碳源，可以被青霉菌緩慢利用而維持青霉素分泌的有利條件，A正確；B、青霉菌的代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需氧型，可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量，B正確；C、選育出的高產(chǎn)青霉素菌株經(jīng)擴(kuò)大培育純化后，才可接種到發(fā)酵罐中進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，C正確；D、為了防止細(xì)菌、其他真菌等微生物的污染，獲得純凈的青霉素，發(fā)酵罐仍需嚴(yán)格滅菌，D錯(cuò)誤。故選D。2．（2024·山東·高考真題）關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”試驗(yàn)，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解B．離心研磨液是為了加速DNA的沉淀C．在肯定溫度下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色D．粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)【答案】B【解析】【分析】DNA的粗提取與鑒定的試驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分別的目的；②DNA不簡(jiǎn)潔酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分別；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斀狻緼、低溫時(shí)DNA酶的活性較低，過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解，A正確；B、離心研磨液是為了使細(xì)胞碎片沉淀，B錯(cuò)誤；C、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色，C正確；D、細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，可能有蛋白質(zhì)不溶于酒精，在95%的冷酒精中與DNA一塊兒析出，故粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)，D正確。故選B。3．（2024·湖南·高考真題）洗滌劑中的堿性蛋白酶受到其他成分的影響而變更構(gòu)象，部分解折疊后可被正常堿性蛋白酶特異性識(shí)別并降解（自溶）失活。此外，加熱也能使堿性蛋白酶失活，如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．堿性蛋白酶在肯定條件下可發(fā)生自溶失活B．加熱導(dǎo)致堿性蛋白酶構(gòu)象變更是不行逆的C．添加酶穩(wěn)定劑可提高加堿性蛋白酶洗滌劑的去污效果D．添加堿性蛋白酶可降低洗滌劑運(yùn)用量，削減環(huán)境污染【答案】B【解析】【分析】堿性蛋白酶能使蛋白質(zhì)水解成可溶于水的多肽和氨基酸。衣物上附著的血漬、汗?jié)n、奶漬、醬油漬等污物，都會(huì)在堿性蛋白酶的作用下，結(jié)構(gòu)松弛、膨脹解體，起到去污的效果?！驹斀狻緼、由題“部分解折疊后可被正常堿性蛋白酶特異性識(shí)別并降解（自溶）失活”可知，堿性蛋白酶在肯定條件下可發(fā)生自溶失活，A正確；B、由圖可知，加熱導(dǎo)致堿性蛋白酶由自然狀態(tài)變?yōu)椴糠纸庹郫B，部分解折疊的堿性蛋白酶降溫后可復(fù)原到自然狀態(tài)，因此加熱導(dǎo)致堿性蛋白酶構(gòu)象變更是可逆的，B錯(cuò)誤；C、堿性蛋白酶受到其他成分的影響而變更構(gòu)象，而且加熱也能使堿性蛋白酶失活，會(huì)降低堿性蛋白酶的洗滌劑去污效果，添加酶穩(wěn)定劑可提高加堿性蛋白酶洗滌劑的去污效果，C正確；D、酶具有高效性，堿性蛋白酶能使蛋白質(zhì)水解成多肽和氨基酸，具有很強(qiáng)的分解蛋白質(zhì)的實(shí)力，可有效地清除汗?jié)n、奶漬、醬油漬等污漬，添加堿性蛋白酶可降低洗滌劑運(yùn)用量，削減環(huán)境污染，D正確。故選B。4．（2024年1月·浙江·高考真題）用果膠酶處理草莓，可以得到比較澄清的草莓汁；而利用稀鹽酸處理草莓可以制得糊狀的草莓醬。果膠酶和鹽酸催化果膠水解的不同點(diǎn)在于（

）A．兩者催化果膠水解得到的產(chǎn)物片段長(zhǎng)度不同B．兩者催化果膠水解得到的單糖不同C．兩者催化果膠主鏈水解斷裂的化學(xué)鍵不同D．酶催化須要最適溫度，鹽酸水解果膠不須要最適溫度【答案】A【解析】【分析】酶和無(wú)機(jī)催化劑的不同點(diǎn)：酶降低化學(xué)反應(yīng)活化能的效果更顯著。酶和無(wú)機(jī)催化劑的相同點(diǎn)：都能降低化學(xué)反應(yīng)的活化能，加速化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行；都不能為化學(xué)反應(yīng)供應(yīng)能量；都不能改變更學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn)；在化學(xué)反應(yīng)前后質(zhì)和量都不變。【詳解】A、用果膠酶處理草莓，可以得到比較澄清的草莓汁；而利用稀鹽酸處理草莓可以制得糊狀的草莓醬，說(shuō)明兩者催化果膠水解得到的產(chǎn)物片段長(zhǎng)度不同，A正確；BC、鹽酸屬于無(wú)機(jī)催化劑，與果膠酶催化果膠主鏈水解斷裂的化學(xué)鍵、催化果膠水解得到的單糖是相同的，BC錯(cuò)誤；D、無(wú)論是酶和鹽酸催化化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)的過(guò)程中溫度達(dá)到最適的話，可以讓反應(yīng)更加充分，但可能酶的效果比鹽酸更好，D錯(cuò)誤。故選A。二、多選題5．（2024·山東·高考真題）啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后，最終過(guò)濾、調(diào)整、分裝。下列說(shuō)法正確的是（

）A．用赤霉素處理大麥，可使大麥種子無(wú)須發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶B．焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子胚并進(jìn)行滅菌C．糖漿經(jīng)蒸煮、冷卻后需接種酵母菌進(jìn)行發(fā)酵D．通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)可削減啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期【答案】ACD【解析】【分析】果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，酵母菌是異養(yǎng)兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精?！驹斀狻緼、赤霉素能促進(jìn)種子的萌發(fā)，據(jù)此可推想若用赤霉素處理大麥，可誘導(dǎo)α-淀粉酶相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)α-淀粉酶的合成，進(jìn)而使大麥種子無(wú)須發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶，A正確；B、焙烤可以殺死大麥種子的胚，但不使淀粉酶失活，沒(méi)有進(jìn)行滅菌，B錯(cuò)誤；C、糖漿經(jīng)蒸煮（產(chǎn)生風(fēng)味組分、終止酶的進(jìn)一步作用，并對(duì)糖漿滅菌）、冷卻后再接種酵母菌進(jìn)行發(fā)酵，防止高溫殺死菌種，C正確；D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)已被用來(lái)削減啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期，屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用，D正確。故選ACD。三、非選擇題6．（2024·全國(guó)甲卷·高考真題）某同學(xué)從被石油污染的土壤中分別得到A和B兩株可以降解石油的細(xì)菌，在此基礎(chǔ)上采納平板培育法比較二者降解石油的實(shí)力，并分析兩個(gè)菌株的其他生理功能。試驗(yàn)所用的培育基成分如下。培育基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培育基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步驟：①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培育基Ⅰ中培育，得到A、B菌液；②液體培育基Ⅰ、Ⅱ中添加瓊脂，分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔?；卮鹣铝袉?wèn)題。菌株透亮圈大小平板Ⅰ平板ⅡA+++++B++-(1)試驗(yàn)所用培育基中作為碳源的成分是____________。培育基中NH4NO3的作用是為菌株的生長(zhǎng)供應(yīng)氮源，氮源在菌體內(nèi)可以參加合成____________（答出2種即可）等生物大分子。(2)步驟①中，在資源和空間不受限制的階段，若最初接種N0個(gè)A細(xì)菌，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是____________。(3)為了比較A、B降解石油的實(shí)力，某同學(xué)利用步驟②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果如表所示（“+”表示有透亮圈，“+”越多表示透亮圈越大，“-”表示無(wú)透亮圈），推想該同學(xué)的試驗(yàn)思路是__________。(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，依據(jù)上表所示試驗(yàn)結(jié)果，治理石油污染應(yīng)選用的菌株是____________，理由是___________?！敬鸢浮?1)

石油

DNA、RNA、蛋白質(zhì)(2)N0?2n(3)在無(wú)菌條件下，將等量等濃度的A菌液和B菌液分別接種到平板Ⅰ的甲和乙兩孔處，平板Ⅱ也進(jìn)行同樣的操作，在相同且相宜條件下培育一段時(shí)間，比較兩個(gè)平板的兩孔處的透亮圈大小并作記錄，依據(jù)透亮圈大降解實(shí)力強(qiáng)，透亮圈小降解實(shí)力弱，進(jìn)而比較A、B降解石油的實(shí)力(4)

A

A菌株降解石油的實(shí)力高于B菌株，并且在沒(méi)有添加氮源的培育基中也能生長(zhǎng)【解析】【分析】培育基對(duì)微生物具有選擇作用。配置培育基時(shí)依據(jù)某一種或某一類(lèi)微生物的特別養(yǎng)分要求,加入某些物質(zhì)或除去某些養(yǎng)分物質(zhì)，抑制其他微生物的生長(zhǎng)，也可以依據(jù)某些微生物對(duì)一些物理、化學(xué)因素的抗性，在培育基中加入某種化學(xué)物質(zhì),從而篩選出待定的微生物。這種培育基叫做選擇培育基。(1)培育基的成分有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水等，從組成培育基的物質(zhì)所含化學(xué)元素可知，作為碳源的成分是石油。生物大分子DNA、RNA、蛋白質(zhì)都含有N元素，故氮源在菌體內(nèi)可以參加合成這些物質(zhì)。(2)由題意“資源和空間不受限制”可知，細(xì)菌的增殖呈J型曲線增長(zhǎng)，由于DNA的半保留復(fù)制，細(xì)菌每繁殖一代就是上一代的2倍，依據(jù)公式Nt=N0?λt，λ=2，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是N0?2n。(3)分析表格數(shù)據(jù)可知，試驗(yàn)的結(jié)果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解石油的實(shí)力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍舊能降解石油，而B(niǎo)菌株不能降解，依據(jù)試驗(yàn)的單一變量和比照原則，推想該同學(xué)的思路是：在無(wú)菌條件下，將等量等濃度的A菌液和B菌液分別接種到平板Ⅰ的甲和乙兩孔處，平板Ⅱ也進(jìn)行同樣的操作，在相同且相宜條件下培育一段時(shí)間，比較兩個(gè)平板的兩孔處的透亮圈大小并作記錄，依據(jù)透亮圈大降解實(shí)力強(qiáng)，透亮圈小降解實(shí)力弱，進(jìn)而比較A、B降解石油的實(shí)力。(4)由表格數(shù)據(jù)可知，在平板Ⅱ（無(wú)氮源的培育基）上，A菌株仍舊能降解石油，而B(niǎo)菌株不能降解，所以要治理貧氮且被石油污染的土壤，應(yīng)當(dāng)選用A菌株，因?yàn)锳菌株降解石油的實(shí)力高于B菌株，并且在沒(méi)有添加氮源的培育基中也能生長(zhǎng)。7．（2024·全國(guó)乙卷·高考真題）化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培育所利用的碳源關(guān)系親密。為此，某小組通過(guò)試驗(yàn)比較不同碳源對(duì)菌體生長(zhǎng)和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見(jiàn)表。碳源細(xì)胞干重（g/L）S產(chǎn)量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18回答下列問(wèn)題。(1)通常在試驗(yàn)室培育微生物時(shí)，須要對(duì)所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有______（答出2點(diǎn)即可）。(2)由試驗(yàn)結(jié)果可知，菌株C生長(zhǎng)的最適碳源是______；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是______。菌株C的生長(zhǎng)除須要碳源外，還須要______（答出2點(diǎn)即可）等養(yǎng)分物質(zhì)。(3)由試驗(yàn)結(jié)果可知，碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長(zhǎng)，其緣由是______。(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出試驗(yàn)思路：______。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實(shí)現(xiàn)廢物利用，其意義是______（答出1點(diǎn)即可）?！敬鸢浮?1)高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌(2)

葡萄糖

制糖廢液

氮源、無(wú)機(jī)鹽、水(3)缺少淀粉酶(4)分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培育基，培育菌株C，其他條件相同且相宜，一段時(shí)間后，測(cè)定并比較不同濃度制糖廢液中的S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度(5)削減污染、節(jié)約原料、降低生產(chǎn)成本【解析】【分析】1、試驗(yàn)室常用的滅菌方法：（1）灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，干脆在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以快速?gòu)氐椎販缇唬?）干熱滅菌：能耐高溫的，須要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培育皿）和金屬用具等，可以采納這種方法滅菌；（3）高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。2、培育基的養(yǎng)分構(gòu)成：各種培育基的詳細(xì)配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽；不同培育基還要滿(mǎn)意不同微生物對(duì)pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求。(1)通常在試驗(yàn)室培育微生物時(shí)，為防止試驗(yàn)用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培育物，須要運(yùn)用劇烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子，即對(duì)所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，玻璃器皿常用的滅菌的方法有干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等。(2)由試驗(yàn)結(jié)果可知，與以制糖廢液為碳源相比，以葡萄糖為碳源時(shí)菌株C的細(xì)胞干重最大，說(shuō)明最適于菌株C生長(zhǎng)的碳源是葡萄糖；而以制糖廢液為碳源時(shí)，用菌株C生產(chǎn)S的產(chǎn)量高于以葡萄糖為碳源時(shí)的產(chǎn)量，說(shuō)明最適于生產(chǎn)S的碳源是制糖廢液。微生物的生長(zhǎng)一般都須要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，還須要滿(mǎn)意微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧氣以及特別養(yǎng)分物質(zhì)的要求，故菌株C的生長(zhǎng)除須要碳源外，還須要氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等養(yǎng)分物質(zhì)。(3)分析題圖表格可以看出在以淀粉為碳源的培育基中，菌株C不能生長(zhǎng)，緣由可能是菌株C中缺少分解淀粉的酶，不能利用淀粉。(4)要測(cè)定生產(chǎn)S的最適制糖廢液為碳源的濃度，試驗(yàn)自變量為制糖廢液的濃度，可分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培育基，培育菌株C，其他條件相同且相宜，一段時(shí)間后，測(cè)定并比較不同濃度制糖廢液中的S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度，即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以試驗(yàn)廢物利用，既有利于削減污染、節(jié)約原料，又能降低生產(chǎn)成本。8．（2024·湖南·高考真題）黃酒源于中國(guó)，與啤酒、葡萄酒并稱(chēng)世界三大發(fā)酵酒。發(fā)酵酒的釀造過(guò)程中除了產(chǎn)生乙醇外，也產(chǎn)生不利于人體健康的氨基甲酸乙酯（EC）。EC主要由尿素與乙醇反應(yīng)形成，各國(guó)對(duì)酒中的EC含量有嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)某黃酒釀制工藝流程如圖所示，圖中加入的菌種a是_______，工藝b是_______（填“消毒”或“滅菌”），采納工藝b的目的是____________________。(2)以尿素為唯一氮源的培育基中加入________指示劑，依據(jù)顏色變更，可以初步鑒定分解尿素的細(xì)菌。尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶可用于降解黃酒中的尿素，脲酶固定化后穩(wěn)定性和利用效率提高，固定化方法有_________________________（答出兩種即可）。(3)探討人員利用脲酶基因構(gòu)建基因工程菌L，在不同條件下分批發(fā)酵生產(chǎn)脲酶，結(jié)果如圖所示。推想________是確定工程菌L高脲酶活力的關(guān)鍵因素，理由是__________________。(4)某公司開(kāi)發(fā)了一種新的黃酒產(chǎn)品，發(fā)覺(jué)EC含量超標(biāo)。簡(jiǎn)要寫(xiě)出利用微生物降低該黃酒中EC含量的思路_____________________________。【答案】(1)

酵母菌

滅菌

殺死黃酒中全部的微生物及芽孢、孢子，防止成品酒變酸或腐敗變質(zhì)(2)

酚紅指示劑

化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法(3)

pH

兩圖中脲酶活力隨時(shí)間變更的曲線基本一樣，而維持pH在6.5不變與pH從6.5降為4.5相比較而言，酶活力值始終要高(4)方案一：配置一種選擇培育基，篩選出產(chǎn)生EC降解酶的細(xì)菌，從細(xì)菌中分別得到EC降解酶，純化的EC降解酶進(jìn)行固定化操作后，加入該黃酒中。方案二：配置一種選擇培育基，篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌，從細(xì)菌中分別得到脲酶，純化的脲酶進(jìn)行固定化操作后，在黃酒工藝流程的發(fā)酵環(huán)節(jié)中加入?！窘馕觥俊痉治觥坑捎诩?xì)菌分解在尿素的過(guò)程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培育基堿性增加，pH上升，所以可以用檢測(cè)pH的變更的方法來(lái)推斷尿素是否被分解，可在培育基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，pH上升，指示劑變紅。(1)制造果酒利用的是酵母菌的無(wú)氧呼吸，加入的菌種a是酵母菌。過(guò)濾能除去啤酒中部分微生物，工藝b是滅菌，滅菌能殺死啤酒中全部微生物，，包括芽孢和孢子，防止雜菌污染，延長(zhǎng)其保存期。黃酒釀造好后須經(jīng)煎酒(滅菌)后灌壇貯存,貯存肯定時(shí)間后,經(jīng)過(guò)濾,灌瓶壓蓋、滅菌、包裝。(2)由于細(xì)菌分解尿素的過(guò)程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培育基堿性增加，pH上升，所以可以用檢測(cè)pH的變更的方法來(lái)推斷尿素是否被分解，故在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑可以鑒別尿素分解菌。固定化酶實(shí)質(zhì)上是將相應(yīng)酶固定在不溶于水的載體上，實(shí)現(xiàn)酶的反復(fù)利用，并提高酶穩(wěn)定性，酶的各項(xiàng)特性（如高效性、專(zhuān)一性和作用條件的溫柔性）依舊保持。固定化酶的方法包括化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法等。(3)對(duì)比兩坐標(biāo)曲線，兩圖中脲酶活力隨時(shí)間變更的曲線基本一樣，說(shuō)明培育時(shí)間不是確定因素；而維持pH在6.5不變與pH從6.5降為4.5相比較而言，酶活力值始終要高，說(shuō)明pH為6.5時(shí)，有利于酶結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，故pH是確定工程菌L高脲酶活力的關(guān)鍵因素。(4)從坐標(biāo)圖形看，利用脲酶消退其前體物質(zhì)尿素可降低該黃酒中EC含量。配置一種選擇培育基，篩選出產(chǎn)生EC降解酶的細(xì)菌，從細(xì)菌中分別得到EC降解酶，純化的EC降解酶進(jìn)行固定化操作后，加入該黃酒中?；蛘吲渲靡环N選擇培育基，篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌，從細(xì)菌中分別得到脲酶，純化的脲酶進(jìn)行固定化操作后，在黃酒工藝流程的發(fā)酵環(huán)節(jié)中加入。9．（2024·廣東·高考真題）探討深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對(duì)于開(kāi)發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號(hào)”考察船對(duì)中國(guó)南?？瓶贾校袊?guó)科學(xué)家采集了某海疆1146米深海冷泉旁邊沉積物樣品，分別、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步探討了其生物學(xué)特性?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)探討者先制備富集培育基，然后采納________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培育一段時(shí)間后，獲得了含擬桿菌的混合培育物，為了獲得純種培育物，除了稀釋涂布平板法，還可采納________________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以________________為碳源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好。(2)探討發(fā)覺(jué)，將采集的樣品置于各種培育基中培育，仍有許多微生物不能被分別篩選出來(lái)，推想其緣由可能是________________。（答一點(diǎn)即可）(3)藻類(lèi)細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會(huì)聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對(duì)深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________。(4)深海冷泉環(huán)境特別，推想此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有________________?！敬鸢浮?1)

高壓蒸汽滅菌

平板劃線

纖維素(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（或須要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活）(3)擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無(wú)機(jī)物，歸還到無(wú)機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順當(dāng)進(jìn)行(4)耐低溫【解析】【分析】進(jìn)行微生物純種培育物時(shí)，人們須要依據(jù)微生物對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求配制培育基；還須要防止雜菌污染，無(wú)菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌。獲得微生物純培育物的常用方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(1)培育基通常采納高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌?？梢圆杉{稀釋涂布平板法或平板劃線法，將單個(gè)微生物分散在固體培育基上，經(jīng)過(guò)培育得到單菌落，從而獲得純凈培育物。分析圖12可知，在以纖維素為碳源的培育基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好。(2)深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（或須要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活），故將采集的樣品置于各種培育基中培育，仍可能有許多微生物不能被分別篩選出來(lái)。(3)擬桿菌為異養(yǎng)生物，作為該生態(tài)系統(tǒng)的分解者，能將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無(wú)機(jī)物，歸還到無(wú)機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順當(dāng)進(jìn)行。(4)深海冷泉溫度較低，故生活在其中的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，應(yīng)具有耐低溫的特性，才能高效降解多糖，保證擬桿菌的正常生命活動(dòng)所需。10．（2024年6月·浙江·高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌育種有關(guān)的問(wèn)題：(1)為快速分別產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可將土樣用___________制成懸液，再將含有懸液的三角瓶置于80℃的___________中保溫一段時(shí)間，其目的是___________。(2)為提高篩選效率，可將菌種的___________過(guò)程與菌種的產(chǎn)酶性能測(cè)定一起進(jìn)行：將上述懸液稀釋后涂布于淀粉為唯一碳源的固體培育基上培育，采納___________顯色方法，依據(jù)透亮圈與菌落直徑比值的大小，可粗略估計(jì)出菌株是否產(chǎn)酶及產(chǎn)酶性能。(3)為了獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可利用現(xiàn)有菌種，通過(guò)___________后再篩選獲得，或利用轉(zhuǎn)基因、___________等技術(shù)獲得。（二）回答與植物轉(zhuǎn)基因和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題：(4)在用農(nóng)桿菌侵染的方法進(jìn)行植物轉(zhuǎn)基因過(guò)程中，通常要運(yùn)用抗生素，其目的一是抑制___________生長(zhǎng)，二是篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞。當(dāng)選擇培育基中抗生素濃度___________時(shí)，通常會(huì)出現(xiàn)較多假陽(yáng)性植株，因此在轉(zhuǎn)基因前須要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的___________檢測(cè)。(5)為提高培育轉(zhuǎn)基因植株的勝利率，植物轉(zhuǎn)基因受體需具有較強(qiáng)的___________實(shí)力和遺傳穩(wěn)定性。對(duì)培育的受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的早期檢測(cè)，可通過(guò)視察細(xì)胞內(nèi)___________形態(tài)是否變更進(jìn)行推斷，也可通過(guò)視察分裂期染色體的___________，分析染色體組型是否變更進(jìn)行推斷。(6)植物轉(zhuǎn)基因受體全能性表達(dá)程度的凹凸主要與受體的基因型、培育環(huán)境、繼代次數(shù)和___________長(zhǎng)短等有關(guān)。同時(shí)也與受體的取材有關(guān)，其中受體為_(kāi)__________時(shí)全能性表達(dá)實(shí)力最高?！敬鸢浮?1)

無(wú)菌水

水浴

殺死不耐熱微生物(2)

分別

KI-I2(3)

人工誘變

原生質(zhì)體融合(4)

農(nóng)桿菌

過(guò)低

敏感性(5)

再生

細(xì)胞核

形態(tài)特征和數(shù)量(6)

培育時(shí)間

受精卵【解析】【分析】（一）選擇培育基是依據(jù)某種微生物的特別養(yǎng)分要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培育基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率。（二）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。依據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，假如將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。轉(zhuǎn)化過(guò)程：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→目的基因整合到植物細(xì)胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。(1)產(chǎn)生淀粉酶的枯草桿菌的最適溫度為50-75℃，要快速分別枯草桿菌，先將土樣加入無(wú)菌水制成枯草桿菌懸液，再將含有懸液的三角瓶置于80℃的水浴中保溫一段時(shí)間，殺死不耐熱的微生物。(2)將菌種的分別過(guò)程與菌種的產(chǎn)酶性能測(cè)定同時(shí)進(jìn)行可以提高篩選效率。用稀釋涂布平板法可以分別枯草桿菌，在培育基中添加淀粉作為唯一碳源，并且在培育基中添加KI-I2，能合成淀粉酶的枯草桿菌因?yàn)槟芾玫矸鄱婊?，同時(shí)淀粉由于被分解在菌落四周會(huì)出現(xiàn)透亮圈，比較透亮圈與菌落直徑比值的大小，比值大的說(shuō)明該菌株產(chǎn)酶性能較高。(3)要獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可利用誘變育種，由于變異的不定向性，人工誘變后還須要再篩選才能獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌。也可以利用轉(zhuǎn)基因、原生質(zhì)體融合等技術(shù)，從其他生物那里獲得與高產(chǎn)淀粉酶有關(guān)的基因，進(jìn)而獲得相應(yīng)的高產(chǎn)性狀。(4)野生的農(nóng)桿菌沒(méi)有抗性基因，用于轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞的農(nóng)桿菌一般在其T—DNA中插入一種抗生素抗性基因?？股氐淖饔檬且种萍?xì)菌生長(zhǎng)，農(nóng)桿菌屬于細(xì)菌，在其侵染植物過(guò)程中，可以用另一種抗生素抑制農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)，從而達(dá)到在后續(xù)試驗(yàn)中消退轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞中農(nóng)桿菌的作用。具有T-DNA中抗性基因的細(xì)胞能在含有相應(yīng)抗生素的培育基上存活。當(dāng)培育基中抗生素濃度過(guò)低時(shí)，許多沒(méi)有抗性的細(xì)胞也存活下來(lái)，因此出現(xiàn)假陽(yáng)性，故在轉(zhuǎn)基因前要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的敏感性檢測(cè)。(5)轉(zhuǎn)基因植株要經(jīng)過(guò)植物組織培育，要提高培育轉(zhuǎn)基因植株的勝利率，應(yīng)當(dāng)選再生實(shí)力和遺傳穩(wěn)定性較強(qiáng)的受體，這種受體全能性較高，能保持生物的性狀。對(duì)培育的受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的早期檢測(cè)，可通過(guò)視察細(xì)胞核形態(tài)是否變更進(jìn)行推斷，也可以干脆在光學(xué)顯微鏡下視察分裂期染色體的形態(tài)特征和數(shù)量，分析染色體組型是否變更。(6)植物轉(zhuǎn)基因受體全能性表達(dá)程度凹凸除了與受體基因型、培育環(huán)境、繼代次數(shù)有關(guān)外，還與培育時(shí)間長(zhǎng)短和受體的取材有關(guān)，受精卵是沒(méi)分化的細(xì)胞，分裂和分化實(shí)力都很強(qiáng)，故受體為受精卵時(shí)全能性表達(dá)實(shí)力最高。1．（2024·河南開(kāi)封·模擬預(yù)料）橘子中含有豐富的碳水化合物、胡蘿卜素、蛋白質(zhì)維生素C、維生素B．維生素E、有機(jī)酸、膳食纖維、鈣、鐵、鋅等。某生物愛(ài)好小組利用橘子制作橘子果酒，大致流程如下：將橘子去皮榨汁→倒入發(fā)酵瓶至2/3處→添加適量的糖→用溫水活化酵母并倒入發(fā)酵瓶→發(fā)酵15天→橘子酒。回答下列問(wèn)題：(1)橘子榨汁時(shí)可加入肯定量的果膠酶，目的是______________________.橘子汁不能裝滿(mǎn)發(fā)酵瓶的緣由是__________________________。(2)依據(jù)實(shí)際閱歷，添加適量的糖能夠增加酒精度，緣由是________________________.枸櫞酸是橘子中一種重要的有機(jī)酸，其含量會(huì)影響橘子酒的風(fēng)味，相對(duì)含量在4.5左右為宜；枸櫞酸還能參加動(dòng)物血液中脂質(zhì)的運(yùn)輸，人體中另--種具有類(lèi)似功能的脂類(lèi)物質(zhì)是_____________。(3)該生物愛(ài)好小組接著探討了酵母菌接種量對(duì)酒精度及枸櫞酸構(gòu)4.7p+枸櫞酸含量的影響，結(jié)果如圖示。據(jù)圖可知橘子酒中酒精含量高且風(fēng)味最佳時(shí)，酵母菌的最適接種量為_(kāi)_______。隨著酵母菌接種量的增大，酒精度和枸櫞酸都不再增加，緣由是________________________。(4)該生物愛(ài)好小組用橘皮提取橘皮精油時(shí)，不用水中蒸餾法的理由是___________________。橘皮精油都用黑色不透光的瓶子包裝，緣由可能是____________________________________?！敬鸢浮?1)

增加果汁的體積和提高澄清度[給分原則：只答“增加果汁的體積”或“提高澄清度”給1分，兩者都答給2分]

酒精發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生氣體（CO2），簡(jiǎn)潔使發(fā)酵液中氣壓過(guò)大而造成發(fā)酵液溢出；初期瓶?jī)?nèi)的空氣有利于酵母菌快速繁殖(2)

糖可為酵母菌的生長(zhǎng)、繁殖供應(yīng)能源物質(zhì)，還可作為酵母菌酒精發(fā)酵的原料

膽固醇(3)

0.20%

酵母菌接種量過(guò)大，大量的糖類(lèi)用于酵母菌的生長(zhǎng)繁殖，用于酒精發(fā)酵的糖類(lèi)削減[給分原則：答出“酵母菌接種量過(guò)大，使得用于酒精發(fā)酵的糖類(lèi)較少”的意思即可給分](4)

水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致橘皮焦糊和有效成分水解

橘皮精油在光下簡(jiǎn)潔分解【解析】【分析】水蒸氣蒸餾法是指將含有揮發(fā)性成分的植物材料與水共蒸餾，使揮發(fā)性成分隨水蒸氣一并餾出，經(jīng)冷凝分取揮發(fā)性成分的浸提方法。該法適用于具有揮發(fā)性、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞、在水中穩(wěn)定且難溶或不溶于水的植物活性成分的提取。(1)果膠酶是水解果膠的一類(lèi)酶，植物細(xì)胞壁的成分為纖維素和果膠，植物細(xì)胞間還有果膠粘連，因此橘子榨汁時(shí)可加入肯定量的果膠酶，可以增加果汁的體積和提高澄清度；酒精發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生氣體（CO2），簡(jiǎn)潔使發(fā)酵液中氣壓過(guò)大而造成發(fā)酵液溢出，以及初期瓶?jī)?nèi)的空氣有利于酵母菌快速繁殖，因此橘子汁不能裝滿(mǎn)發(fā)酵瓶。(2)糖可為酵母菌的生長(zhǎng)、繁殖供應(yīng)能源物質(zhì)，還可作為酵母菌酒精發(fā)酵的原料，添加適量的糖能夠增加酒精度；膽固醇可以運(yùn)輸脂質(zhì)。(3)結(jié)合圖示可知，酵母菌的接種量為0.20%時(shí)枸櫞酸含量最多，酒精含量達(dá)到最大，橘子酒中酒精含量高且風(fēng)味最佳；酵母菌接種量過(guò)大，大量的糖類(lèi)用于酵母菌的生長(zhǎng)繁殖，用于酒精發(fā)酵的糖類(lèi)削減，因此隨著酵母菌接種量的增大，酒精度和枸櫞酸都不再增加。(4)水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致橘皮焦糊和有效成分水解，因此不用水中蒸餾法提取橘皮精油；橘皮精油在光下簡(jiǎn)潔分解，一般用黑色不透光的瓶子包裝。2．（2024·湖南師大附中三模）自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的運(yùn)用量。科研人員進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分別和固氮實(shí)力測(cè)定的探討，部分試驗(yàn)流程如下圖?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)步驟①土樣應(yīng)取自表層土壤的緣由是_____。(2)下表為兩種培育基的配方，步驟④應(yīng)選其中的_____培育基，緣由是_____。培育基類(lèi)型培育基組分Ashby培育基甘露醇（C6H14O6）、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸餾水、瓊脂LB培育基蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸餾水、瓊脂(3)步驟④所用的接種工具是_____，若在④的平板上統(tǒng)計(jì)的菌落的平均數(shù)量為126個(gè)，則每克土壤中含有的固氮菌為_(kāi)____個(gè)。(4)將純化的固氮菌置于完全培育液中擴(kuò)大培育48小時(shí)，經(jīng)離心后收集下層細(xì)胞并轉(zhuǎn)移至特定培育基中進(jìn)行固氮實(shí)力的測(cè)定，篩選出固氮實(shí)力最強(qiáng)的菌種CM12，為進(jìn)一步鑒定其固氮實(shí)力，科研人員選用發(fā)芽一樣的玉米種子進(jìn)行3組盆栽試驗(yàn)，30天后測(cè)定土壤微生物有機(jī)氮含量，結(jié)果如下圖。注：CK：比照處理組；N：尿素處理組（每盆土壤中50mL有氮全養(yǎng)分液：成分為在1000mL無(wú)氮植物養(yǎng)分液中加入0．12g尿素）；CM12：自生固氮菌CM12處理組（每盆土壤澆50mL，接種自身固氮菌的無(wú)氮植物養(yǎng)分液）。①比照組（CK）的處理為_(kāi)____。②試驗(yàn)結(jié)果表明：施用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機(jī)氮含量。與CK組相比，CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量增加了約_____%。③自生固氮菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，緣由是_____?！敬鸢浮?1)在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的固氮菌生長(zhǎng)（或固氮菌一般為需氧型，生活在土壤表層）(2)

Ashby

該培育基不含氮源，具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，LB培育基中的蛋白胨可以供應(yīng)氮源，不具有選擇作用(3)

涂布器

1．26×107(4)

每盆土壤澆50mL無(wú)氮植物養(yǎng)分液

120

自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮，不受宿主的限制【解析】【分析】培育基是人們依據(jù)微生物對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的養(yǎng)分基質(zhì)；分為固體培育基和液體培育基，培育基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，其中碳源和氮源常采納蛋白胨和牛肉膏，因?yàn)樗鼈儊?lái)源于動(dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等養(yǎng)分物質(zhì)。在供應(yīng)上述幾種主要養(yǎng)分物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培育基還須要滿(mǎn)意微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)和氧氣的要求。(1)土壤中含有豐富微生物，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大、種類(lèi)最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的固氮菌生長(zhǎng)，故步驟①土樣取自當(dāng)?shù)乇韺油寥馈?2)表格為兩種培育基的配方，步驟④應(yīng)選其中的Ashby培育基，緣由是該培育基不含氮源，具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈矗琇B培育基中的蛋白胨可以供應(yīng)氮源，不具有選擇作用。(3)試驗(yàn)采納的是稀釋涂布平板法，所以步驟④中所用的接種工具是涂布器。若在④的平板上統(tǒng)計(jì)的菌落的平均數(shù)量為126個(gè)，則每克土壤中含有的固氮菌為126÷0.1×104=1.26×107個(gè)。(4)①比照組的目的是解除無(wú)關(guān)變量對(duì)試驗(yàn)的影響，故比照組（CK）的處理為每盆土壤澆50mL無(wú)氮植物養(yǎng)分液。②由柱狀圖可知，空白比照組中土壤微生物有機(jī)氮含量為10，CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量為22，故與比照組相比，CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量增加值也許為（22-10）÷10×100%=120%。③自生固氮菌比共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，緣由是自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮，不受宿主的限制。3．（2024·湖南·長(zhǎng)郡中學(xué)模擬預(yù)料）甘肅某地由于TNT（主要成分為2，4-二硝基甲苯磺酸鹽）紅水蒸發(fā)池滲漏，對(duì)土壤造成嚴(yán)峻污染，威逼到黃河上游的水質(zhì)平安。因此，TNT紅水污染土壤修復(fù)是目前亟待解決的環(huán)境問(wèn)題。某試驗(yàn)小組欲通過(guò)生物修復(fù)分別有效降解2，4-二硝基甲苯磺酸鹽的菌株，進(jìn)行了如下試驗(yàn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)LB培育基的制備：取胰蛋白胨、NaCl和酵母提取物溶于蒸餾水中，此過(guò)程中胰蛋白胨供應(yīng)的養(yǎng)分物質(zhì)是___________，用NaOH調(diào)整pH至7．2，用___________在121°C條件下滅菌15分鐘。若要獲得本探討所用的固體培育基，需在上述培育基中加入___________。(2)菌株分別與鑒定：取___________土壤，放入裝有100mL無(wú)菌LB液體培育基的錐形瓶中，在30°C和120rpm的恒溫?fù)u床．上振蕩24小時(shí)，此過(guò)程的目的是___________。取1mL培育液，采納___________法分別純化菌株。(3)該試驗(yàn)小組欲進(jìn)一步探究菌株對(duì)2，4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解實(shí)力，請(qǐng)幫助設(shè)計(jì)試驗(yàn)，寫(xiě)出試驗(yàn)思路：___________________________________________。(4)探究鹽度對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響探討發(fā)覺(jué)，純化的菌株在NaCl濃度為0%～3%之間對(duì)2，4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解率在96小時(shí)后達(dá)到90%，但當(dāng)NaCl濃度達(dá)到5%后，降解率幾乎為0。探討中偶然發(fā)覺(jué)菌株B1在NaCl濃度達(dá)到5%后，降解率卻達(dá)到50%，說(shuō)明___________________________________________?！敬鸢浮?1)

碳源和氮源

高壓蒸汽滅菌鍋

瓊脂(2)

甘肅某TNT紅水污染場(chǎng)地污染

富集培育

稀釋涂布平板(3)取人工配制的肯定濃度的2，4-二硝基甲苯磺酸鹽（TNT）溶液加入錐形瓶中，之后再在錐形瓶中加入肯定量的純化菌液，每隔肯定時(shí)間取樣，測(cè)定2，4-二硝基甲苯磺酸鹽濃度(4)菌株B1具有肯定的耐鹽實(shí)力，能在較高鹽濃度條件下降解2，4-二硝基甲苯磺酸鹽【解析】【分析】稀釋平板計(jì)數(shù)是依據(jù)微生物在固體培育基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培育特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。篩選目的菌株的原理：在找尋目的菌株時(shí)，要依據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去找尋。(1)蛋白胨既可以供應(yīng)碳源，也可以供應(yīng)氮源；用NaOH調(diào)整pH至7．2，在121°C條件下用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌15分鐘；若要獲得本探討所用的固體培育基，需在上述培育基中加入瓊脂。(2)自然界中目的菌株的篩選依據(jù)：依據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去找尋，本試驗(yàn)要分別有效降解2，4-二硝基甲苯磺酸鹽的菌株，因此取甘肅某TNT紅水污染場(chǎng)地污染土壤。放入裝有100mL無(wú)菌LB液體培育基的錐形瓶中，在30°C和120rpm的恒溫?fù)u床上振蕩24小時(shí)，此過(guò)程的目的是富集培育，讓微生物的數(shù)目增加；取1mL培育液，采納稀釋涂布平板法分別純化菌株。(3)要分析菌株對(duì)2，4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解實(shí)力，可以取人工配制的肯定濃度的2，4-二硝基甲苯磺酸鹽（TNT）溶液加入錐形瓶中，之后再在錐形瓶中加入肯定量的純化菌液，每隔肯定時(shí)間取樣，測(cè)定2，4-二硝基甲苯磺酸鹽濃度。(4)由題干可知，純化菌株在NaCl濃度為0%～3%之間對(duì)2，4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解率在96小時(shí)后達(dá)到90%，但當(dāng)NaCl濃度達(dá)到5%后，降解率幾乎為0。而偶然發(fā)覺(jué)菌株B1在NaCl濃度達(dá)到5%后，降解率達(dá)到50%，說(shuō)明菌株B1具有肯定的耐鹽實(shí)力，能在較高鹽濃度條件下降解2，4-二硝基甲苯磺酸鹽。4．（2024·青?！ず|市第一中學(xué)模擬預(yù)料）許多食品都是利用微生物的發(fā)酵制作而成的。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：(1)制作葡萄酒時(shí)，酵母菌的培育狀態(tài)可以分為兩個(gè)階段：第一階段是酵母菌利用發(fā)酵裝置中少量的氧氣進(jìn)行有氧呼吸，其目的是________________；其次階段是在無(wú)氧環(huán)境中酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精。在________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物會(huì)被抑制生長(zhǎng)，所以葡萄僅須要經(jīng)過(guò)沖洗即可以用于酒精發(fā)酵。(2)泡椒屬于泡菜的一種，制作泡椒主要利用的微生物是________。制作泡椒時(shí)要先將鹽水煮沸，目的是_______________。為了縮短泡椒的制作時(shí)間，可加入少量的陳泡椒液，目的是____________________。(3)豆豉是把黃豆或黑豆泡透、蒸熟或煮熟，經(jīng)過(guò)毛霉、曲霉等發(fā)酵而成的食品，可以調(diào)味，也可以入藥。大豆經(jīng)過(guò)蒸煮不僅可以滅菌，還能使發(fā)酵變得更簡(jiǎn)潔，緣由是____________________________________。煮熟的大豆可為毛霉的生長(zhǎng)供應(yīng)__________________________等養(yǎng)分物質(zhì)，而毛霉分泌的蛋白酶又能將大豆中的蛋白質(zhì)分解成________________等，以被人體消化汲取?！敬鸢浮?1)

讓酵母菌（通過(guò)有氧呼吸）快速增殖

缺氧、呈酸性(2)

乳酸菌

殺滅雜菌

增加乳酸菌數(shù)量(3)

蒸煮可以使黃豆或黑豆結(jié)構(gòu)更加疏松，有利于養(yǎng)分物質(zhì)的溶出和菌種的生長(zhǎng)

碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子和水

小分子肽和氨基酸【解析】【分析】果酒制作的原理是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厭氧微生物，在缺氧條件下進(jìn)行無(wú)氧呼吸，在氧氣足夠的條件下進(jìn)行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的細(xì)胞核，屬于真核生物，相宜酵母菌生長(zhǎng)的溫度范圍是18~25°C；果醋制作的原理是在氧氣足夠的條件下，醋酸菌將葡萄糖或者乙醇轉(zhuǎn)化成醋酸，醋酸菌無(wú)核膜包被的細(xì)胞核，是原核生物，屬于好氧菌，醋酸菌相宜生長(zhǎng)的溫度范圍是30-35°C。(1)果酒發(fā)酵分為兩個(gè)階段：第一個(gè)階段是利用酵母菌的有氧呼吸，讓其大量繁殖；其次階段是利用酵母菌的無(wú)氧呼吸，讓其產(chǎn)生酒精。酵母菌在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中可以生長(zhǎng)繁殖而其他大多數(shù)微生物則不能，因此葡萄糖僅須要沖洗而不須要經(jīng)過(guò)滅菌處理就可以用于酒精發(fā)酵。(2)泡椒屬于泡菜的一種，制作泡椒主要利用的微生物是乳酸菌，在制作泡椒時(shí)所配制的鹽水要煮沸，目的是殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染。由于陳泡泡椒中含有乳酸菌，在鹽水中加入陳泡泡椒的目的是增加乳酸菌的數(shù)量。(3)大豆經(jīng)過(guò)蒸煮，蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)變得伸展，使黃豆或黑豆結(jié)構(gòu)更加疏松，有利于養(yǎng)分物質(zhì)的溶出和菌種的生長(zhǎng)。毛霉能在煮熟的大豆上生長(zhǎng)，說(shuō)明煮熟的大豆可以為毛霉的生長(zhǎng)供應(yīng)碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子和水等養(yǎng)分物質(zhì)，毛霉分泌的蛋白酶將大豆中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸等易被人體消化汲取的物質(zhì)。5．（2024·河北·石家莊二中模擬預(yù)料）測(cè)定水樣是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，常用濾膜法測(cè)定大腸桿菌的數(shù)目。流程如圖所示，濾膜法的大致流程：用濾膜過(guò)濾待測(cè)水樣→水樣中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培育基（EMB培育基）上培育→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。據(jù)圖回答問(wèn)題：(1)過(guò)濾待測(cè)水樣用到的濾杯、濾膜和濾瓶首先須要進(jìn)行消毒滅菌處理，保證明驗(yàn)不受其它微生物干擾。與過(guò)濾有關(guān)的操作都要在___________________旁進(jìn)行。(2)將完成過(guò)濾之后的濾膜緊貼在EMB培育基上，這屬于微生物培育中的_______________操作。從物理狀態(tài)角度分析，EMB培育基屬于_______________培育基，制備培育基時(shí)須要采納_______________法滅菌。(3)某生物愛(ài)好小組的某同學(xué)嘗試依據(jù)上述方法進(jìn)行測(cè)定，無(wú)菌操作下將10ml待測(cè)水樣加入到90ml無(wú)菌水中，稀釋后的100ml菌液通過(guò)濾膜法測(cè)得EMB培育基上的菌落數(shù)平均為124，黑色菌落數(shù)平均為31，則推想1升待測(cè)水樣中的大腸桿菌數(shù)目為_(kāi)__________________個(gè)。(4)該同學(xué)進(jìn)一步思索，利用濾膜法也可能用于測(cè)定待測(cè)水樣中其他微生物的數(shù)目。他取了兩份水樣，一份待測(cè)水樣來(lái)自變酸的果酒，從中檢測(cè)到兩種微生物，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上的主要區(qū)分是___________________。另一份來(lái)自某公園的欣賞湖，若要通過(guò)測(cè)量藍(lán)細(xì)菌的數(shù)目來(lái)探討水華，培育基配方中則必需添加___________________（水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源）?！敬鸢浮?1)酒精燈火焰(2)

接種

固體

高壓蒸汽滅菌(3)3100(4)

有無(wú)核膜為界限的（成形的）細(xì)胞核

水、無(wú)機(jī)鹽、氮源【解析】【分析】培育基是人們依據(jù)微生物對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的養(yǎng)分基質(zhì)；依據(jù)物理性質(zhì)分為固體培育基和液體培育基，培育基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在供應(yīng)上述幾種主要養(yǎng)分物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培育基還須要滿(mǎn)意微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)和氧氣的要求。(1)與過(guò)濾有關(guān)的操作都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，這是因?yàn)榫凭珶艋鹧媾源嬖跓o(wú)菌區(qū)域，能夠削減雜菌污染。(2)將完成過(guò)濾之后的濾膜緊貼在EMB培育基上，這屬于微生物培育中的接種操作。從物理性質(zhì)角度分析，EMB培育基能夠讓微生物在培育基上形成菌落，屬于固體培育基。培育基通常采納高壓蒸汽滅菌法滅菌。(3)某同學(xué)嘗試依據(jù)上述方法進(jìn)行測(cè)定，無(wú)菌操作下將10mL待測(cè)水樣加入到90mL無(wú)菌水中，即稀釋了10倍，稀釋后的100ml菌液通過(guò)濾膜法測(cè)得EMB培育基上的菌落數(shù)平均為124，黑色菌落數(shù)平均為31，黑色菌落為大腸桿菌，則推想1升待測(cè)水樣中的大腸桿菌數(shù)目為31÷100×10×1000=3100個(gè)。(4)變酸的果酒里含有酵母菌和醋酸桿菌，酵母菌屬于真核生物中的真菌，醋酸桿菌屬于原核生物，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上的主要區(qū)分是有無(wú)核膜為界限的（成形的）細(xì)胞核。若要通過(guò)測(cè)量藍(lán)細(xì)菌的數(shù)目來(lái)探討水華，結(jié)合藍(lán)細(xì)菌是自養(yǎng)型微生物，能夠利用光合作用合成自身所需的有機(jī)物，碳源來(lái)自空氣中的二氧化碳，故培育基配方中則必需添加水、無(wú)機(jī)鹽、氮源。6．（2024·內(nèi)蒙古·海拉爾其次中學(xué)模擬預(yù)料）牛奶富含鈣和蛋白質(zhì)等多種養(yǎng)分，已經(jīng)成為許多家庭的必需品。市場(chǎng)上供應(yīng)的牛奶一般有兩種，一種是運(yùn)用巴氏消毒法的牛奶，在70~75℃煮30min或在80℃煮15min，需冷藏保存；另一種是超高溫滅菌牛奶（常溫奶），用134~135℃的高溫徹底滅菌，采納利樂(lè)包裝，保存期長(zhǎng)達(dá)數(shù)月。回答下列問(wèn)題：(1)滅菌比消毒殺菌作用更徹底，在劇烈的理化因素作用下殺死全部微生物，包括______。巴氏消毒法處理的牛奶需冷藏保存的緣由是__________。采納利樂(lè)包裝的常溫奶，可以與外界空氣隔絕，避開(kāi)氧氣和外界微生物作用導(dǎo)致養(yǎng)分素被破壞。(2)愛(ài)好小組同學(xué)欲探究?jī)煞N牛奶中是否存在高度耐