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文檔簡介
關(guān)于藥物對離體豚鼠回腸收縮的作用目的學(xué)習(xí)離體小腸平滑肌的制備和灌流。觀察小腸平滑肌的自律性收縮,理解其原理。觀察藥物acetylcholine(Ach、乙酰膽堿),histamine(His、組胺),BaCl2分別對離體豚鼠回腸平滑肌的作用,并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、撲爾敏)為工具藥,初步分析以上藥物的作用原理。第2頁,共17頁,星期六,2024年,5月原理(1)胃腸平滑肌收縮的自動節(jié)律性(慢波理論:Cajal細胞的生電性鈉泵活動的結(jié)果)。第3頁,共17頁,星期六,2024年,5月原理(2)乙酰膽堿:M膽堿能受體激動藥。Ach與M受體結(jié)合,使平滑肌Ca2+通道開放,Ca2+內(nèi)流↑,肌漿[Ca2+]↑,平滑肌收縮幅度增高。阿托品:M膽堿能受體阻斷藥。阿托品與平滑肌細胞膜M受體結(jié)合,阻斷乙酰膽堿與M受體結(jié)合,阻斷乙酰膽堿與M受體的激動作用。第4頁,共17頁,星期六,2024年,5月原理(2)組胺:激動平滑肌細胞膜H1受體,通過激活G蛋白-磷脂酶C系統(tǒng),使細胞內(nèi)Ca2+增高,導(dǎo)致平滑肌收縮。撲爾敏:H1受體阻斷藥。撲爾敏與平滑肌細胞膜H1受體結(jié)合,阻斷組胺與H1受體結(jié)合,從而阻斷組胺對H1受體的激動作用。第5頁,共17頁,星期六,2024年,5月原理(3)氯化鋇:肌肉興奮劑。Ba2+經(jīng)鈣通道進入胞漿,使肌漿[Ba2+]↑,平滑肌收縮幅度增高,但泵出障礙;另一方面BaCl2能興奮膽堿能受體,使平滑肌收縮幅度增高。第6頁,共17頁,星期六,2024年,5月材料
豚鼠1只:WT為300g左右麥氏浴槽,生物信號采集系統(tǒng),張力換能器。臺氏液,10-2g/L乙酰膽堿、1g/L硫酸阿托品、10-2g/L組胺,10-3g/L撲爾敏、10g/LBaCl2
溶液。第7頁,共17頁,星期六,2024年,5月方法1.實驗裝置準備:打開恒溫水浴37℃---加臺氏液于麥氏浴槽中---95%O2+5%CO2持續(xù)通氣(氣泡一個個逸出為宜)。2.標本準備:擊昏豚鼠---開腹---減取回腸---沖洗內(nèi)腔---截取腸段---
腸段兩端對角穿線---
固定于麥氏浴槽和換能器上。3.實驗記錄:打開配置(藥物對離體豚鼠回腸的作用)---零點設(shè)置---調(diào)節(jié)換能器張力2g---穩(wěn)定10-30分鐘(基線和收縮幅度穩(wěn)定)第8頁,共17頁,星期六,2024年,5月找到盲腸,在離回盲部1cm處剪斷,取出回腸約10cm左右一段,置于盛有冰冷臺氏液的培養(yǎng)皿中,沖洗干凈,將回腸剪成1-1.5cm的幾小段。標本準備(1)第9頁,共17頁,星期六,2024年,5月標本準備(2)取一段腸管置于盛有臺氏液的培養(yǎng)皿中,在其兩端對角處分別用縫針穿線,并打結(jié)。一端系于浴槽固定鉤上,另一端系在張力換能器的懸臂梁上。換能器腸管第10頁,共17頁,星期六,2024年,5月觀察項目記錄腸段基礎(chǔ)張力,收縮張力,收縮頻率。加入10-2g/LAch0.2ml,觀察并記錄曲線,作用明顯時換液。重復(fù)以上Ach劑量,待收縮到最高點時加入1g/L阿托品
0.2ml,觀察曲線,此時不換液,待曲線基本穩(wěn)定后,再加入相同量的Ach,觀察并記錄收縮曲線,換液。加入10-2g/L組胺
0.3ml,作用明顯時迅速換液。預(yù)先加入10-2g/L撲爾敏0.2ml,5min后(不換液)加入同量組胺,觀察并記錄收縮曲線,換液。加入10g/LBaCl2
溶液1ml,當(dāng)作用達到最高點,加入1g/L阿托品
0.2ml,觀察并記錄收縮曲線。第11頁,共17頁,星期六,2024年,5月實驗結(jié)果Ach
換液Ach
阿
Ach
換液His
換液撲
HisBacl2
阿
(每次換液后穩(wěn)定15min)穩(wěn)定20min第12頁,共17頁,星期六,2024年,5月注意事項注意保持腸管通暢,勿使其封閉。不要把藥物直接滴加到回腸上。每次加的臺氏液量保持相等。加的臺氏液量必須預(yù)先加熱到37℃。藥物作用明顯后,盡早沖洗。每次換液后穩(wěn)定10-20min。第13頁,共17頁,星期六,2024年,5月實驗結(jié)果(1)曲線描記:標上加藥時間點,藥物名,洗脫時間點。對曲線進行測量:基礎(chǔ)張力,收縮張力。填入表格。第14頁,共17頁,星期六,2024年,5月實驗結(jié)果(2)表3.藥物對離體豚鼠回腸平滑肌張力的影響組別標本數(shù)基礎(chǔ)張力(g)收縮幅度(g)
乙酰膽堿阿托品+乙酰膽堿組胺撲爾敏+組胺BaCl2BaCl2+阿托品 第15頁,共17頁,星期六,2024年,5月實驗報告針對實驗數(shù)據(jù),進行結(jié)果描述總結(jié)Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2分別對離體豚鼠回腸有什么作用。2.討論和結(jié)論分析Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2對離體豚鼠回腸平滑肌的作用機理。
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