上海市長征中學(xué)2025屆高三第四次模擬考試生物試卷含解析

上海市長征中學(xué)2025屆高三第四次模擬考試生物試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1．生態(tài)系統(tǒng)的發(fā)展方向往往是趨向穩(wěn)態(tài)。圖甲表示載畜量對草原中生產(chǎn)者凈生產(chǎn)量的影響（凈生產(chǎn)量即生產(chǎn)者光合作用制造的有機(jī)物總量與自身呼吸消耗量的差值）。圖乙表示生殖或死亡數(shù)量與種群大小的關(guān)系。下列說法錯誤的是（）A．由圖乙可知，F(xiàn)點(diǎn)時種群的年齡組成為衰退型B．由圖甲可知，適量的放牧可增加草原中生產(chǎn)者的凈生產(chǎn)量C．由圖乙可知，F(xiàn)點(diǎn)表示該環(huán)境所能維持的種群最大數(shù)量D．由圖甲可知，D點(diǎn)以后生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)可能會受到破壞2．下列關(guān)于胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述中，正確的是（）A．卵裂期細(xì)胞數(shù)量及每個細(xì)胞的遺傳物質(zhì)均增加B．胚胎移植一般需發(fā)育到桑椹胚或囊胚期，囊胚期開始岀現(xiàn)細(xì)胞分化C．囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)形成原腸腔，此過程稱為卵化D．利用臍帶血中的造血干細(xì)胞進(jìn)行自體移植時，應(yīng)長期給予免疫抑制藥物3．白化病與鐮刀型細(xì)胞貧血癥是兩種常見的人類單基因遺傳病，發(fā)病機(jī)理如下圖所示。下列有關(guān)說法正確的是（）A．①②分別表示轉(zhuǎn)錄、翻譯，主要發(fā)生在細(xì)胞核中B．由于基因的選擇性表達(dá)，導(dǎo)致M1與M2在結(jié)構(gòu)上有差異C．圖中兩基因?qū)ι镄誀畹目刂品绞较嗤珼．調(diào)查白化病的發(fā)病率和遺傳方式，選擇調(diào)查對象的要求不完全相同4．2019年11月3日，杭州馬拉松圓滿落下帷幕。下列有關(guān)運(yùn)動員在奔跑過程中的生理調(diào)節(jié)的敘述，正確的是（）A．馬拉松跑者運(yùn)動后產(chǎn)生大量乳酸導(dǎo)致血漿pH明顯下降B．馬拉松跑者聽到發(fā)令槍聲后奔跑，這個過程中存在電信號—化學(xué)信號的轉(zhuǎn)換C．奔跑過程中，位于人體垂體的溫覺感受器能感受到溫度的變化D．馬拉松跑者大量失鹽導(dǎo)致內(nèi)環(huán)境滲透壓下降，使得機(jī)體尿量減少5．下列有關(guān)酶的探究實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A酶的高效性用FeCl3和過氧化氫酶分別催化等量H2O2分解，待H2O2完全分解后，檢測產(chǎn)生的氣體總量B酶的專一性用淀粉酶催化淀粉水解，檢測是否有大量還原糖生成C溫度對酶活性影響用α-淀粉酶分別在100℃、60℃和0℃下催化淀粉水解，充分反應(yīng)后，用碘液檢測淀粉水解程度DpH對酶活性的影響用淀粉酶在不同pH條件下催化淀粉水解，用斐林試劑檢測A．A B．B C．C D．D6．如圖為某家族關(guān)于兩種遺傳病的系譜圖，已知甲病由顯性基因控制。不考慮X、Y染色體的同源區(qū)段，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．甲病為常染色體顯性遺傳病，乙病為伴X染色體隱性遺傳病B．如果Ⅲ-2與Ⅲ-3婚配，生出正常孩子的概率是7/32或5/24C．Ⅱ-3為雜合子的概率是1或1/2D．如果Ⅲ-2與一表現(xiàn)正常的女子婚配，可通過遺傳咨詢避免生出患甲病的男孩二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）為發(fā)展農(nóng)村農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的同時又保護(hù)環(huán)境，農(nóng)業(yè)專家設(shè)計了如下生態(tài)農(nóng)業(yè)模式，請分析回答：（1）推動該生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)循環(huán)的能量有____________________，從能量流動的角度分析，建立該生態(tài)系統(tǒng)的目的是____________________。（2）碳在生物群落內(nèi)部以__________的形式流動。食用菌在該生態(tài)系統(tǒng)中的作用是_______________。（3）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中為減少農(nóng)藥對環(huán)境的污染，人們可利用一些特殊的化學(xué)物質(zhì)擾亂某些動物的雌雄交配，降低有害動物種群的__________，從而降低種群密度，這屬于__________防治。8．（10分）透明質(zhì)酸酶是一種能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸的活性，從而提高組織中液體滲透能力的酶。如圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)獲得新透明質(zhì)酸酶基因的過程，NcoⅠ和XhoⅠ為限制酶。請分析回答下列問題：（1）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，其作用是__________________；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的_________________，對所連接的DNA兩端堿基序列_______（有/沒有）專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，最可能的原因是________________。（2）透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進(jìn)行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個核苷酸）為____________________。（3）人體細(xì)胞間質(zhì)有基膜粘連蛋白、多糖（如透明質(zhì)酸）、蛋白多糖等成分。鏈球菌等致病菌在侵染人體時，可產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶。試分析透明質(zhì)酸酶在鏈球菌侵染過程中的作用是_________________，其意義可能是_____________________。9．（10分）利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白，近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1表示基因工程常用的一種質(zhì)粒?；卮鹩嘘P(guān)問題：（1）SphⅠ和SacⅠ兩種限制酶識別并切割不同的DNA序列，將目的基因和質(zhì)粒都通過SphⅠ和SacⅠ切割，可以避免_______________。拼接成重組質(zhì)粒，需要加入_______________酶才能完成。（2）各限制酶在該質(zhì)粒上分別只有一處識別序列，有關(guān)質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度如下表所示。已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0.5kb，則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長度為_____kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2.4kb（圖1所示），結(jié)合圖2分析目的基因上ClaI、PstⅠ兩種限制酶的切割位點(diǎn)分別為___________（填“a和b”或“b和a”）。質(zhì)粒重組質(zhì)粒BglⅡ6.0kb7.1kbClaⅠ6.0kb2.3kb，4.8kbPstⅠ6.0kb1.5kb，5.6kb（3）在篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體菌時，培養(yǎng)基中加入適量的________________，使導(dǎo)入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都能在該培養(yǎng)基上生長。為了進(jìn)一步篩選，可以利用抗原-抗體雜交的方法，若出現(xiàn)______________，則該受體菌可以作為工程菌。（4）若要對藥用蛋白的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，可利用____________工程對目的基因進(jìn)行修飾。10．（10分）下表是篩選異養(yǎng)型細(xì)菌的培養(yǎng)基配方，請分析回答下列問題：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2gFeCl20.1gX1g維生素微量瓊脂15g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100mL（1）苯胺是致癌物質(zhì)，土壤中有分解苯胺的異養(yǎng)型細(xì)菌，此培養(yǎng)基中的成分X除了為目的菌提供能源外，還能提供__________和_______，該培養(yǎng)基從功能看屬于________培養(yǎng)基。制備固體培養(yǎng)基時調(diào)節(jié)pH在__________步驟后；對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是__________。（2）圖1是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖。則獲得圖B效果的接種方法是__________。運(yùn)用A所示接種方法統(tǒng)計的菌落常常比活菌的實(shí)際數(shù)目__________。（3）在探究“酵母菌種群數(shù)量變化”實(shí)驗(yàn)中，已知每個計數(shù)室由25×16＝400個小格組成，容納液體的總體積為0.4mm3，觀察到圖2中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e5個中格共有酵母菌80個，則1ml樣液中約有酵母菌__________個。11．（15分）請回答下列與生物工程有關(guān)的問題：（1）基因工程中常利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，此過程需要在________酶的作用下進(jìn)行，主要利用了_________原理。此過程的前提是要有____________序列，以便根據(jù)這一序列合成_______。（2）在基因表達(dá)載體中，______是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出_______。（3）哺乳動物核移植可以分為體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植。但實(shí)際操作中，利用體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度很大，其原因是_________________________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

據(jù)圖甲分析，隨著載畜量的增加，生產(chǎn)者的凈生產(chǎn)量先增加后減少，合理的載畜量為A-C點(diǎn)。

據(jù)圖乙分析，出生率和死亡率的差值為種群的增長速率，隨著種群數(shù)量的增加，種群增長速率先增加后減少為0，因此種群數(shù)量變化呈現(xiàn)S型曲線。【詳解】A、從圖乙可知，F(xiàn)點(diǎn)時出生率等于死亡率，種群數(shù)量基本不變，年齡結(jié)構(gòu)為穩(wěn)定型，A錯誤；B、由圖甲可知，A-C段隨著載畜量的增加，生產(chǎn)者的凈生產(chǎn)量增加，即適量的放牧可增加草原中生產(chǎn)者的凈生產(chǎn)量，B正確；C、從圖乙可知，F(xiàn)點(diǎn)之前出生率大于死亡率，種群數(shù)量持續(xù)增加，F(xiàn)點(diǎn)時種群數(shù)量達(dá)到最大，即該環(huán)境所能維持的種群最大值（K值），C正確；D、從圖甲可知，從C點(diǎn)以后生產(chǎn)者的凈生產(chǎn)量低于不放牧的草原，生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)將受到破壞，D正確。故選A。2、B【解析】

1、卵裂期的特點(diǎn)是細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，每個細(xì)胞的DNA含量不變，數(shù)量增加，胚胎總體積基本不增加，每個子細(xì)胞的體積在變小。2、囊胚：細(xì)胞開始分化，其中個體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注：囊胚的擴(kuò)大會導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化]。3、原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。【詳解】A、卵裂期細(xì)胞進(jìn)行的是有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量增加，每個細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不變，A錯誤；B、胚胎發(fā)育過程中早期胚胎具有全能性，還沒分化，囊胚期開始出現(xiàn)細(xì)胞分化，胚胎移植一般需發(fā)育到桑椹胚或囊胚期，B正確；C、囊胚期并沒有形成原腸腔，原腸胚時期才出現(xiàn)原腸腔，C錯誤；D、利用臍帶血中的造血干細(xì)胞進(jìn)行自體移植時，不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，不需要給予免疫抑制藥物，D錯誤。故選B。3、D【解析】

1、分析題圖可知，基因1經(jīng)①轉(zhuǎn)錄形成M1（mRNA），經(jīng)②翻譯形成血紅蛋白，構(gòu)成正常紅細(xì)胞或鐮刀型紅細(xì)胞；基因2經(jīng)①轉(zhuǎn)錄形成M2（mRNA），經(jīng)②翻譯形成酪氨酸酶，酪氨酸酶作用于酪氨酸形成黑色素。2、基因?qū)π誀畹目刂疲夯?通過控制蛋白質(zhì)的合成直接控制生物的性狀，基因2通過控制酶的合成，控制代謝過程，進(jìn)而控制生物的性狀?！驹斀狻緼、由分析可知，過程①②分別表示轉(zhuǎn)錄和翻譯過程，轉(zhuǎn)錄主要發(fā)生在細(xì)胞核中，翻譯主要發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)的核糖體上，A錯誤；B、由于M1和M2是由不同的基因轉(zhuǎn)錄形成的，所以M1和M2在堿基排列順序上有差異，mRNA的結(jié)構(gòu)均為單鏈結(jié)構(gòu)，B錯誤；C、由圖示可知，基因1控制生物的性狀屬于直接控制，基因2控制生物的性狀屬于間接控制，兩者控制方式不同，C錯誤；D、調(diào)查白化病的發(fā)病率應(yīng)該從人群中調(diào)查，調(diào)查白化病的遺傳方式應(yīng)該從患者家系中調(diào)查，故調(diào)查對象的要求不完全相同，D正確。故選D。4、B【解析】

多細(xì)胞動物絕大多數(shù)細(xì)胞并不能直接與外部環(huán)境接觸，他們周圍的環(huán)境就是動物體內(nèi)細(xì)胞外面的液體，叫做細(xì)胞外液，也稱為內(nèi)環(huán)境，包括血漿、組織液和淋巴等。血漿中含有多種無機(jī)鹽，包括Na+、K+、Ca2+、Mg2+等離子以及Cl-、HCO3-、H2PO4-等負(fù)離子，這些離子對于維持血漿的正常濃度，酸堿平衡和神經(jīng)肌肉的興奮性等都是非常重要的。內(nèi)環(huán)境的任何變化都會引起機(jī)體自動調(diào)節(jié)組織和器官的活動，使他們產(chǎn)生一些反應(yīng)來減少內(nèi)環(huán)境的變化，由這種通過調(diào)節(jié)反應(yīng)形成的動物機(jī)體內(nèi)部環(huán)境相對穩(wěn)定的狀態(tài)，叫做穩(wěn)態(tài)。要維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，動物體就必須能及時感知內(nèi)環(huán)境的變化，并及時做出反應(yīng)加以調(diào)整，這些活動都依靠神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的活動來完成?！驹斀狻緼、血漿中存在緩沖物質(zhì)，如碳酸氫鈉，磷酸氫鈉等可使血液的酸堿度不會發(fā)生很大的變化，從而維持在相對穩(wěn)定的狀態(tài)，A錯誤；B、馬拉松跑者聽到發(fā)令槍聲后奔跑，這個過程中涉及到神經(jīng)系統(tǒng)的反射活動，該反射為聽覺感受器→傳入神經(jīng)→神經(jīng)中樞→傳出神經(jīng)→效應(yīng)器肌肉，有多個中間神經(jīng)元的參與，在神經(jīng)元之間涉及到電信號—化學(xué)信號的轉(zhuǎn)換，B正確；C、奔跑過程中，位于人體下丘腦的溫覺感受器能感受到溫度的變化，C錯誤；D、馬拉松跑者大量出汗，水份減少，滲透壓升高，此時抗利尿激素增多，腎小管集合管重吸收水增多，尿量減少，D錯誤。故選B。5、C【解析】

酶的特性：（1）高效性：酶的催化效率大約是無機(jī)催化劑的107～1013倍。（2）專一性：每一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)。（3）作用條件較溫和：高溫、過酸、過堿都會使酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞，使酶永久失活；在低溫下，酶的活性降低，但不會失活?！驹斀狻緼、用FeCl3和過氧化氫酶分別催化等量H2O2分解，在相同時間內(nèi)檢測產(chǎn)生的氣體量，A錯誤；B、驗(yàn)證酶的專一性，實(shí)驗(yàn)需要鑒定淀粉和蔗糖是否被淀粉酶分解，用斐林試劑進(jìn)行檢測，B錯誤；C、探究溫度對a-淀粉酶活性的影響，自變量為溫度，可以設(shè)置低于最適溫度、最適溫度和高于最適溫度至少三種溫度下，檢測底物水解的情況，可用碘液檢測，C正確；D、探究pH影響酶的催化活性，底物不能用淀粉，因?yàn)榈矸墼谒嵝詶l件下水解，D錯誤。故選C。6、B【解析】

由題意可知，甲病由顯性基因控制，Ⅱ-2是甲、乙病患者，其母親I-1和女兒Ⅲ-1均正常，可推出甲病為常染色體顯性遺傳病。Ⅱ-3和Ⅱ-4都不患乙病，但Ⅲ-4患乙病，說明乙病為隱性遺傳病，且可能是常染色體隱性遺傳病或伴X隱性遺傳病?！驹斀狻緼、由以上分析可知，甲病為常染色體顯性遺傳病，乙病可能是常染色體隱性遺傳病或伴X隱性遺傳病，A錯誤；B、假設(shè)甲病的基因用A、a表示，乙病用基因B、b表示。若乙病為常染色體隱性遺傳病，則Ⅲ-2基因型為AaBb，與Ⅲ-3基因型為1/3AaBB、2/3AaBb，他們婚配生出正常孩子概率是1/4x（1-1/4x2/3）=5/24；若乙病為伴X隱性遺傳病，則Ⅲ-2基因型為，與Ⅲ-3基因型為1/2、1/2，他們婚配生出正常孩子概率是1/4x（1-1/4x1/2）=7/32，B正確；C、若乙病為常染色體隱性遺傳病，則Ⅱ-3基因型為AaBb，若乙病為伴X隱性遺傳病，則Ⅱ-3的基因型為，故Ⅱ-3一定為雜合子，C錯誤；D、甲病屬于常染色體顯性遺傳病，Ⅲ-2關(guān)于甲病的基因型為Aa，無法通過遺傳咨詢避免生出患病男孩，D錯誤。故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查遺傳系譜圖的分析，要求考生能夠推出相關(guān)個體的基因型并能計算出生育正常后代的概率。二、綜合題：本大題共4小題7、生產(chǎn)者（農(nóng)作物）光合作用固定的太陽能和投入的飼料所含有機(jī)物中的化學(xué)能實(shí)現(xiàn)能量的多級利用，提高能量的利用率（含碳的）有機(jī)物將植物枯枝敗葉及遺體和沼渣中的有機(jī)物分解為無機(jī)物（返回?zé)o機(jī)環(huán)境）出生率生物【解析】

生物防治：生物防治是利用物種間的相互關(guān)系，以一種或一類生物抑制另一種或另一類生物的方法。它是降低雜草和害蟲等有害生物種群密度的一種方法。它的最大優(yōu)點(diǎn)是不污染環(huán)境。生物防治方法主要包括：1.?利用微生物防治。2.?利用寄生性天敵防治。3.?利用捕食性天敵防治。生物防治優(yōu)點(diǎn)：對環(huán)境污染小，能有效保護(hù)天敵，發(fā)揮持續(xù)控災(zāi)作用，成本低、對人畜安全、害蟲不易產(chǎn)生抗性、減少化學(xué)農(nóng)藥用量、節(jié)約能源。【詳解】（1）生產(chǎn)者（農(nóng)作物）固定的能量是流入生態(tài)系統(tǒng)的總能量，對于人工生態(tài)系統(tǒng)來講還包括人工投入的有機(jī)物中的能量，所以推動該生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)循環(huán)能量包括生產(chǎn)者（農(nóng)作物）光合作用固定的太陽能和投入的飼料所含有機(jī)物中的化學(xué)能，從能量流動的角度分析，該生態(tài)系統(tǒng)的建立實(shí)現(xiàn)了能量的多級利用，進(jìn)而提高了生態(tài)系統(tǒng)中的能量利用率。（2）碳在生物群落內(nèi)部以（含碳的）有機(jī)物的形式流動，而碳循環(huán)是以二氧化碳的形式在無機(jī)環(huán)境和生物群落之間不斷往復(fù)循環(huán)的，食用菌是該生態(tài)系統(tǒng)中的分解者，能將植物枯枝敗葉及遺體和沼渣中的有機(jī)物分解為無機(jī)物（返回?zé)o機(jī)環(huán)境），供植物吸收利用。（3）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，人們可利用一些特殊的化學(xué)物質(zhì)擾亂某些動物的雌雄交配，降低了有害動物種群的出生率，從而降低種群密度，進(jìn)而達(dá)到了防治有害動物的目的，這屬于生物防治。【點(diǎn)睛】本題易錯空為第一空和最后一空，錯因是不明白推動物質(zhì)循環(huán)的含義，并且忽略人為提供飼料中的能量，最后一空的錯因是混淆生物防治的概念，導(dǎo)致不能正確作答。8、供重組DNA的鑒定和選擇（或鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來）磷酸二酯鍵沒有（毛霉、酵母菌）是真核細(xì)胞，有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，能夠?qū)δ康幕虻谋磉_(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工-CTCGAG-或-GAGCTC-分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的主要成分（或分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸）破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵（或?yàn)榧?xì)菌提供能源物質(zhì)）【解析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。分析圖解可知，圖中目的基因的中間存在NcoⅠ限制酶的切割位點(diǎn)，因此進(jìn)行重疊延伸PCR是為了防止限制酶NcoI破壞目的基因?！驹斀狻浚?）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，對所連接的DNA兩端堿基序列沒有專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，因?yàn)槊购徒湍妇鸀檎婧松?，有對目的基因表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，產(chǎn)生的透明質(zhì)酸酶是具有生物活性的。（2）XhoI限制酶識別的序列及位點(diǎn)是5，-CTCGAG-3，中的C、T位點(diǎn)，透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進(jìn)行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個核苷酸）為-CTCGAG-或-GAGCTC-。（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)時先取出動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），再剪碎，再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時間使其分散成單個細(xì)胞。鏈球菌等致病菌在侵染人體時，可產(chǎn)生多種酶，如透明質(zhì)酸酶等，能分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸，從而破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵(或?yàn)榧?xì)菌提供能源物質(zhì))【點(diǎn)睛】本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求學(xué)生能夠掌握基因工程的工具以及工具酶的作用部位，掌握基因工程的原理和操作步驟等，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題。9、目的基因和切割后質(zhì)粒的自身環(huán)化DNA連接1.6a和b氨芐青霉素雜交帶（抗原-抗體復(fù)合物）蛋白質(zhì)（第二代基因）【解析】

基因工程的工具酶有限制酶和DNA連接酶，一般用同種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，但容易造成自身環(huán)化現(xiàn)象?！驹斀狻浚?）目的基因通過SphⅠ和SacⅠ切割產(chǎn)生的末端不同，可避免自身環(huán)化，質(zhì)粒通過SphⅠ和SacⅠ切割，可避免切割后的質(zhì)粒重新結(jié)合而環(huán)化；目的基因和質(zhì)粒結(jié)合，需要DNA連接酶連接磷酸二酯鍵將缺口連接起來。（2）根據(jù)表格信息，質(zhì)粒為6.0kb，減去被切除的長度為0.5kb的片段，則剩余的為5.5kb，而重組質(zhì)粒為7.1kb，說明插入的目的基因長度為7.1-5.5=1.6(kb)；質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長度為2.4kb，減去被切取的片段長度為0.5kb后為1.9kb，插入的目的基因長度為1.6kb，所以重組質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長度為1.9+1.6=3.5(kb)，又根據(jù)表格信息，通過ClaⅠ切割重組質(zhì)粒，產(chǎn)生了2.3kb片段，通過PstⅠ切割重組質(zhì)粒，產(chǎn)生了1.5kb片段。設(shè)PstⅠ切割位點(diǎn)為a，ClaⅠ切割位點(diǎn)為b，則會出現(xiàn)圖3中所示結(jié)果，而2.3+1.5=3.8，3.8﹥3.6，說明a為ClaI切割位點(diǎn)、b為PstⅠ切割位點(diǎn)，反之則不成立。（3）重組質(zhì)粒的抗四環(huán)素基因已經(jīng)由于目的基因的插入而破壞，但氨芐青霉素基因完整，培養(yǎng)基中若加入適量的氨芐青霉素，含普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的受體菌都能存活，而沒有導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌會死亡而淘汰；若受體菌成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒，并且目的基因正常表達(dá)，則可以產(chǎn)生所需的藥用蛋白，通過抗原-抗體雜交的方法，若出現(xiàn)雜交帶，則該受體菌可以作為工程菌；通過蛋白質(zhì)工程對目的基因進(jìn)行修飾，從而實(shí)現(xiàn)對已有的藥用蛋白進(jìn)行改造?！军c(diǎn)睛】一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切點(diǎn)進(jìn)行切割。本題的難點(diǎn)在第2問，要根據(jù)表中各限制酶的切割片段進(jìn)行計算。10、碳源氮源選擇溶化高壓蒸汽滅菌法平板劃線法少106【解析】

據(jù)圖表分析：1、圖A的接種方法是稀釋涂布平板法，圖B的接種方法是平板劃線法。2、表中所給的培養(yǎng)基配方是細(xì)菌的固體培養(yǎng)基配方，表中已知成分中缺少碳源和氮源，必須由X物質(zhì)提供。3、微生物培養(yǎng)