寧夏銀川九中2025屆高三第三次測評生物試卷含解析

寧夏銀川九中2025屆高三第三次測評生物試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．科研人員利用秋水仙素干擾植物小孢子的有絲分裂過程，結(jié)果如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是A．生殖細胞的形成需要經(jīng)過不均等分裂B．生殖細胞的形成經(jīng)歷細胞分裂和分化C．高濃度秋水仙素可抑制紡錘體的形成D．分裂結(jié)束生殖細胞中染色體數(shù)目減半2．成熟篩管細胞內(nèi)有線粒體，但無細胞核和核糖體等結(jié)構(gòu)，可通過胞間連絲與伴胞細胞相通。成熟篩管細胞的作用是運輸有機物。下列與篩管細胞相關(guān)的敘述不合理的是（）A．能獨立合成代謝所需要的酶B．通過胞間連絲進行信息交流C．運輸有機物的過程需要消耗能量D．其結(jié)構(gòu)能提高運輸有機物的效率體現(xiàn)了結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的生命觀3．miRNA是人體的一類內(nèi)源性非編碼RNA，長度為19-25個核苷酸。某miRNA能抑制W基因控制的W蛋白的合成，其形成和發(fā)揮作用的過程如下圖。敘述正確的是（）A．miRNA指導(dǎo)合成的肽鏈最多含8個氨基酸B．圖中①和②過程都只能發(fā)生A與U配對，不能發(fā)生T與A配對C．若miRNA不發(fā)揮作用，W基因mRNA同時結(jié)合多個核糖體合成多條相同肽鏈D．miRNA通過抑制W基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而抑制W蛋白的合成4．IL-6R基因編碼的IL-6R是細胞膜上的一種受體蛋白，研究發(fā)現(xiàn)，IL-6R基因的過度表達會激活胞內(nèi)信號分子STAT3蛋白，形成二聚體轉(zhuǎn)移到細胞核內(nèi)，誘導(dǎo)靶基因的異常表達，引發(fā)惡性腫瘤。下列敘述的錯誤的是（）A．IL-6R的作用說明細胞膜有進行細胞間的信息交流的功能B．IL-6R基因過度表達前后，細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)有明顯差別C．二聚體通過核孔轉(zhuǎn)移到核內(nèi)實現(xiàn)了細胞質(zhì)向細胞核的信息傳遞D．二聚體誘導(dǎo)的靶基因?qū)儆谠┗?，該基因只在腫瘤細胞中表達5．某植株的一條染色體發(fā)生缺失突變，獲得該缺失染色體的花粉不育，缺失染色體上具有紅色顯性基因B，正常染色體上具有白色隱性基因b（見下圖）。如以該植株為父本，測交后代中部分表現(xiàn)為紅色性狀。下列解釋最合理的是A．減數(shù)分裂時染色單體1或2上的基因b突變?yōu)锽B．減數(shù)第二次分裂時姐妹染色單體3與4自由分離C．減數(shù)第二次分裂時非姐妹染色單體之間自由組合D．減數(shù)第二次分裂時非姐妹染色單體之間交叉互換6．圖甲為利用酵母菌釀制葡萄酒的實驗裝置，在其他條件相同且適宜的情況下，測得一段時間內(nèi)裝置中相關(guān)物質(zhì)含量的變化如曲線乙所示，下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述不正確的是（）A．圖乙中曲線①、②可分別表示裝置甲中O2濃度、酒精濃度的變化B．用裝置甲進行果醋發(fā)酵時，需同時打開閥a、bC．果酒、果醋和腐乳制作所需的適宜溫度均為30℃D．果酒、果醋和腐乳制作所用的菌種不全是原核生物7．下圖表示某基因表達的過程，下列敘述正確的是A．合成②時需要DNA聚合酶與基因中的啟動部位結(jié)合B．細胞核內(nèi)產(chǎn)生的②需要在細胞溶膠內(nèi)進行加工C．③的移動方向是從右向左D．④是以DNA上的某基因區(qū)段為模板轉(zhuǎn)錄而來8．（10分）下列關(guān)于植物的克隆技術(shù)的敘述，錯誤的是（）A．高度成熟和分化的植物細胞，仍保持了恢復(fù)到分生狀態(tài)的能力B．由于遺傳性的差異，不同種類植物細胞全能性的表達程度不相同C．適當配比的營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑可誘導(dǎo)愈傷組織的形成D．二倍體植物的花粉培養(yǎng)得到單倍體的過程屬于器官培養(yǎng)二、非選擇題9．（10分）夏季晴朗無云的某天，某種植物光合作用強度變化曲線如圖所示。請回答下列問題：（1）植物葉肉細胞中光合作用暗反應(yīng)的場所是______________，若在最適條件時，突然降低CO2濃度，短時間內(nèi)NADPH/NADP+的比值將_______________“降低”、“升高”或“不變”）。（2）據(jù)圖分析，該植物一天中有機物積累最多的時刻是______________（填圖中字母），在12點左右出現(xiàn)光合作用強度“低谷”，此時直接限制光合作用的因素是______________（“溫度”、“光照強度”或“CO2濃度”）（3）研究表明：干旱條件下氣孔開度減小不是由缺水直接引起的，而是由ABA引起的，某研究小組以該種植物的ABA缺失突變體(不能合成ABA)植株為材料，進行了如下實驗：①取ABA缺失突變體植株在正常條件下測定氣孔開度，經(jīng)干旱處理后，再測定氣孔開度，預(yù)期結(jié)果是______________。②將上述植株分成兩組，一組用______________進行處理，另一組作為對照組，一段時間后，分別測定兩組的氣孔開度，預(yù)期結(jié)果是______________。10．（14分）圖甲是褐色雛蝗在1947-1951年的種群密度變化動態(tài)（用該種群數(shù)量的對數(shù)值lgn表示種群密度，n代表種群數(shù)量），圖乙是草原上某種田鼠的種群數(shù)量變化曲線。請分析回答下列問題：（注：“·”表示卵，“+”表示幼蟲，“o”表示成蟲）（1）自然界中褐色雛蝗種群的增長曲線呈_____型，與1948年相比，1950年該種群內(nèi)個體間生存斗爭的強度______（填減少、不變或增強）。（2）要調(diào)查草原上該田鼠的種群密度應(yīng)采用_____法，假如調(diào)查結(jié)果比實際值偏大，原因可能是_____________________________。（3）依據(jù)圖乙，防治田鼠應(yīng)在_____點時進行，bc段時該種群的年齡組成類型是____。11．（14分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。12．2019年11月18日上午，中國誕生了第一塊“人造肉”，即“細胞培養(yǎng)肉”。下圖是“細胞培養(yǎng)肉”生物制造流程圖，請結(jié)合所學(xué)知識回答下列問題：（l）生物制造“細胞培養(yǎng)肉”的第一步，就是要獲取肌肉干細胞，所謂的“干細胞”，是指動物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有____能力的細胞。（2）“細胞培養(yǎng)肉”生物制造的關(guān)鍵技術(shù)是動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。①進行動物細胞培養(yǎng)時，需要用____酶將從動物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個細胞。在適宜環(huán)境中培養(yǎng)，細胞懸液中的細胞很快貼附在瓶壁上，稱為______________。②在適宜條件下，培養(yǎng)瓶中的細胞進行有絲分裂，數(shù)量不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的____。（3）一般的動物細胞培養(yǎng)需要向培養(yǎng)基中添加一定量的血清，以保證____；還需要添加一定量的抗生素，以防____。但從食品安全的角度考慮，在生物制造“細胞培養(yǎng)肉”時，這兩種成分均不能添加。（4）“細胞培養(yǎng)肉”生物制造過程中，肌肉細胞培養(yǎng)需要利用合適的支架體系，請推測其原因：____。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

據(jù)圖分析，無秋水仙素處理的為對照組，小孢子分裂產(chǎn)生了營養(yǎng)細胞（L基因表達）和生殖細胞（L基因不表達）；與對照組相比，高濃度秋水仙素處理的小孢子沒有分裂，只產(chǎn)生1個營養(yǎng)細胞，沒有產(chǎn)生生殖細胞；低濃度的秋水仙素處理的小孢子分裂產(chǎn)生2個營養(yǎng)細胞，沒有生殖細胞產(chǎn)生?！驹斀狻緼、據(jù)圖分析可知，無秋水仙素處理的時，生殖細胞與營養(yǎng)細胞形成時，細胞分裂是不均等的，A正確；B、小孢子經(jīng)過分裂產(chǎn)生了生殖細胞和營養(yǎng)細胞，且生殖細胞中L基因不表達，而營養(yǎng)細胞中L基因表達，說明生殖細胞的形成經(jīng)歷細胞分裂和分化，B正確；C、高濃度秋水仙素可抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致細胞不能完成分裂，只能形成1個營養(yǎng)細胞，C正確；D、圖示分裂為有絲分裂，產(chǎn)生的生殖細胞中染色體數(shù)目不變，D錯誤。故選D。2、A【解析】

成熟的篩管細胞無細胞核和核糖體，只有細胞質(zhì)，不能合成蛋白質(zhì)。【詳解】A、成熟的篩管細胞無細胞核和核糖體等結(jié)構(gòu)，不能獨立合成代謝所需要的酶，A錯誤；B、根據(jù)題意可知，篩管細胞與伴胞細胞通過胞間連絲相連，故推測其可以通過胞間連絲進行信息交流，B正確；C、運輸有機物的過程需要消耗能量，由ATP直接供能，C正確；D、成熟的篩管細胞無細胞核，但有線粒體，可以提高運輸有機物的效率，體現(xiàn)了結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的生命觀，D正確。故選A。3、C【解析】

當RNA聚合酶與DNA分子的某一啟動部位結(jié)合后，啟動DNA轉(zhuǎn)錄形成RNA。根據(jù)題圖可知，miRNA基因在核內(nèi)轉(zhuǎn)錄成mRNA后，經(jīng)過初步加工，然后通過核孔到達細胞質(zhì)中，在細胞質(zhì)中與蛋白質(zhì)結(jié)合形成miRNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體，該復(fù)合體與W基因的mRNA結(jié)合，從而導(dǎo)致W基因mRNA翻譯過程受阻。【詳解】A、miRNA是非編碼RNA，即不會編碼蛋白質(zhì)，A錯誤；B、①過程為轉(zhuǎn)錄，能發(fā)生A-U配對，也能發(fā)生T-A配對，②為翻譯，只能發(fā)生A-U配對，B錯誤；C、mRNA上同時結(jié)合多個核糖體，其模板為同一條mRNA，合成的多條肽鏈相同，C正確；D、miRNA蛋白質(zhì)復(fù)合物作用到了W基因的mRNA上，只能抑制X基因的翻譯，不會抑制W基因的轉(zhuǎn)錄，D錯誤。故選C?！军c睛】本題考查學(xué)生對遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯等相關(guān)知識的識記和理解能力。解決此類問題需要學(xué)生熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識，系統(tǒng)、全面地構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)，據(jù)此從圖示中提取信息準確判斷各選項。4、D【解析】

癌細胞形成的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變，其特征為：能無限增殖；癌細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變；癌細胞表面發(fā)生變化，細胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少，使細胞間黏著性降低，易于在體內(nèi)擴散轉(zhuǎn)移。【詳解】A、IL-6R是細胞膜上的一種受體蛋白，細胞膜實現(xiàn)信息交流功能多數(shù)是通過受體與信號分子結(jié)合來實現(xiàn)，A正確；B、IL-6R基因過度表達從而引發(fā)惡性腫瘤，使得細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)有明顯變化，B正確；C、二聚體的轉(zhuǎn)移實現(xiàn)了細胞質(zhì)向細胞核的信息傳遞，C正確；D、由題意“形成的二聚體轉(zhuǎn)移到細胞核內(nèi)，誘導(dǎo)靶基因的異常表達，引發(fā)惡性腫瘤”，可知復(fù)合物誘導(dǎo)的靶基因?qū)儆谝职┗?，D錯誤。故選D?！军c睛】本題的知識點是癌細胞的特征，細胞癌變的機理和誘發(fā)因素，對癌細胞的特征的記憶及對細胞癌變機理的理解是解題的關(guān)鍵。5、D【解析】減數(shù)第一次分裂，同源染色體分離，染色單體1或2發(fā)生突變可能，但不是最合理的，只有減數(shù)第一次分裂時，非姐妹染色單體的交叉互換，基因B移到正常染色體上后代才會出現(xiàn)紅色性狀，BC減數(shù)第二次分裂，染色單體無論如何變化，產(chǎn)生的花粉都不可育，所以答案D?？键c定位：考查減數(shù)分裂中，染色體的行為。6、C【解析】

題圖分析：圖甲為利用酵母菌釀制葡萄酒的實驗裝置，其中充氣口a是在連接充氣泵進行充氣用的；排氣口b是在酒精發(fā)酵時用來排出CO2的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。圖乙表示圖甲發(fā)酵裝置中相關(guān)物質(zhì)含量的變化。①物質(zhì)隨發(fā)酵時間延長逐漸下降，②物質(zhì)隨發(fā)酵時間延長逐漸上升?！驹斀狻緼、酵母菌開始進行有氧呼吸，不斷消耗氧氣，因此曲線①表示裝置甲中O2濃度的變化，酵母菌發(fā)酵過程中不斷產(chǎn)生酒精，因此曲線②表示裝置甲中酒精濃度的變化，A正確；B、果醋發(fā)酵時需要氧氣，因此用裝置甲進行果醋發(fā)酵時，需同時打開閥a、b，B正確；C、果酒、果醋和腐乳的制作所需的適宜溫度分別是18~25℃，30～35℃，15~18℃，C錯誤；D、果酒、腐乳制作所用的菌種分別是酵母菌、毛霉，都是真核生物，果醋制作所用的菌種是醋酸菌，是原核生物，D正確。故選C。7、D【解析】

合成②為轉(zhuǎn)錄過程，需要RNA聚合酶結(jié)合啟動部位，A錯誤；細胞核內(nèi)產(chǎn)生的②mRNA，需要在細胞核內(nèi)加工，B錯誤；根據(jù)連接在核糖體上的肽鏈的長度可知，③過程核糖體沿著mRNA由左向右移動，C錯誤；④是tRNA，由DNA轉(zhuǎn)錄形成的，D正確。故選：D。8、D【解析】

植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理為植物體細胞的全能性，即已經(jīng)分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能；培養(yǎng)過程的順序是：離體植物器官、組織或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化形成根、芽等器官進而形成新的植物體?！驹斀狻緼、高度成熟和分化的植物細胞，含有本物種的全套遺傳信息，仍保持了恢復(fù)到分生狀態(tài)的能力，A正確；B、由于遺傳性的差異，不同種類植物細胞全能性的表達程度不相同，B正確；C、適當配比的營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑（生長素和細胞分裂素）可誘導(dǎo)愈傷組織的形成，C正確；D、二倍體植物的花粉培養(yǎng)得到單倍體的過程屬于細胞培養(yǎng)，而二倍體植物的花藥培養(yǎng)得到單倍體的過程屬于器官培養(yǎng)，D錯誤。故選D。二、非選擇題9、葉綠體基質(zhì)升高ECO2濃度干旱處理前后氣孔開度不變ABAABA處理組氣孔開度減小，對照組氣孔開度不變【解析】

本圖為典型的夏季晴朗一天光合作用的變化曲線圖，圖中BC段由于光照過強，溫度過高，導(dǎo)致植物氣孔關(guān)閉，二氧化碳吸收減少，從而導(dǎo)致光合速率下降。圖中縱軸表示二氧化碳的凈吸收量，即為凈光合速率，因此圖中A、E兩點時為光補償點，此時光合速率等于呼吸速率?！驹斀狻浚?）植物葉肉細胞中光合作用暗反應(yīng)的場所是葉綠體基質(zhì)，若在最適條件時，突然降低CO2濃度，則CO2與C5固定形成的C3減少，C3還原消耗的NADPH減少，短時間內(nèi)NADPH的生成速率不變，所以短時間內(nèi)NADPH/NADP+的比值將升高。（2）據(jù)圖分析，AE時間段內(nèi)凈光合速率大于0，植物一直在積累有機物，而E時刻光合速率=呼吸速率，所以該植物一天中有機物積累最多的時刻是E。BC段由于光照過強，溫度過高，導(dǎo)致植物氣孔關(guān)閉，二氧化碳吸收減少，從而導(dǎo)致光合速率下降，所以在12點左右出現(xiàn)光合作用強度“低谷”，此時直接限制光合作用的因素是CO2濃度。（3）①若干旱條件下氣孔開度減小不是由缺水直接引起的，而是由ABA引起的，則ABA缺失突變體植株經(jīng)干旱處理前后氣孔開度應(yīng)不變。②為了進一步證明氣孔開度是由于ABA引起的，需將上述植株分成兩組，一組用ABA進行處理，另一組用等量的清水處理作為對照組，一段時間后，分別測定兩組的氣孔開度，預(yù)期結(jié)果是ABA處理組氣孔開度減小，對照組氣孔開度不變。【點睛】本題考查光合作用和過程及影響因素，意在考查考生對所學(xué)知識的理解和實驗變量分析能力。10、S減少標志重捕法調(diào)查期間非標記個體部分遷出或調(diào)查期間標志物脫落或調(diào)查期間標記個體被捕食）a增長型【解析】

1、“J”型曲線：指數(shù)增長函數(shù)，描述在食物充足，無限空間，無天敵的理想條件下生物無限增長的情況。2、自然界的資源和空間總是有限的，當種群密度增大時，種內(nèi)競爭就會加劇，以該種群為食的動物的數(shù)量也會增加，這就使種群的出生率降低，死亡率增高，有時會穩(wěn)定在一定的水平，形成“S”型增長曲線．在環(huán)境條件不受破壞的情況下，一定空間中所能維持的種群最大數(shù)量稱為環(huán)境容納量，又稱為K值。【詳解】（1）自然界中種群的增長曲線呈“S”型，與1948年相比，1950年種群數(shù)量減少，所以種群內(nèi)個體間生存斗爭的強度減少。（2）田鼠活動能力強，活動范圍廣，所以調(diào)查時采用標志重捕法調(diào)查種群密度。調(diào)查中被標志后的動物更難捕捉，標記個體部分遷出或調(diào)查期間標志物脫落，會導(dǎo)致重捕數(shù)中的標記數(shù)偏小，導(dǎo)致調(diào)查結(jié)果比實際值偏大。（3）防止田鼠在a點進行，盡量減少田鼠的數(shù)量，bc段種群數(shù)量不斷增加，所以此時年齡組成是增長型?！军c睛】本題考查種群數(shù)量增長變化和種群密度的調(diào)查方法，解答（2）時需要考生結(jié)合標志重捕法的計算公式分析實驗誤差的產(chǎn)生。11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細胞導(dǎo)入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?！驹斀狻浚?）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術(shù)。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實驗中的對照原則，若要比較新蛋白A的表達效率是否提高，則需設(shè)置三組實驗實驗變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)?？赡墚a(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原——抗體雜交方法檢測并比較三組受