CD117CD34Ki-67在胃腸道間質(zhì)瘤中的表達及其意義

1/1CD117CD34Ki-67在胃腸道間質(zhì)瘤中的表達及其意義CD117、CD34、Ki-67在胃腸道間質(zhì)瘤中的表達及其意義陳金培摘要目的：

探討胃腸道間質(zhì)瘤的臨床病理和免疫組化特征。

方法：

觀察53例間質(zhì)瘤的病理形態(tài)特征，并用免疫組化Envison法檢測CD117、CD34、SMA、S-100、Ki-67的表達情況。

結(jié)果：

CD117陽性表達率為88.7％(47／53)，CD34表達率為81.1％(43／53)，SMA陽性表達率為50.9％（27/53），S-100陽性表達率為18.9％（10/53），Ki-67陽性表達率為67.9％（36/53）。

結(jié)論：

聯(lián)合檢測CD117與CD34可以提高間質(zhì)瘤的診斷準確性，Ki-67陽性表達與腫瘤大小和危險程度相關(guān)，可作為間質(zhì)瘤的預(yù)后指標。

關(guān)鍵詞：

胃腸道間質(zhì)瘤；病理學(xué)；免疫組化；CD117；CD34；Ki-67ExpressionofCD117andCD34inGastrointestinalStromalTumorChenJinpeiLiuGuoliangetal.DepartmentofPathologyGuangzhouFirstMunicipalPeoplesHospital,Guangzhou(510108),ChinaAbstract:ObjectiveTOinvestigatetheclinicopathologicandimmunohistochemicalfeaturesofintestinalstromaltumors(GIST).MethodsTheclinicopathologicfeatureswerestudiedandtheexpressionofCD117、CD34、SMA、S-100andKi-67wasdetectedwithimmunohistochemicalEnvisonstainingin53casesofGIST.ResultsOfthe53GIST,47caseswerepositivesforCD117(47/53,88.7％),43caseswerepositivesforCD34(43/53,81.1％),27caseswerepositivesforSMA(27/53,50.9％),10caseswerepositivesforS-100(10/53,18.9％),36caseswerepositivesforKi-67(36/53,67.9％).ConclusionThecombinationofCD117andCD34stainingisnecessaryforthediagnosisofGIST,Ki-67expressionandtumorsizeandthedegreeofriskassociatedstromaltumorsasaprognosticindicator.Keywords:gastrointestinal;stromal;tumors;pathology;immunohistochemistry;CD117;CD34;Ki-67胃腸道間質(zhì)瘤（gastrointestinalstromaltumors,GIST）是最常見的胃腸道間葉源性腫瘤。

目前認為是一組獨立起源于胃腸道間質(zhì)干細胞的腫瘤，實質(zhì)上由未分化或多潛能的梭形或上皮樣細胞組成。

長期以來一直被診斷為消化道平滑?。ㄈ猓┝龌颍◥盒裕┥窠?jīng)鞘瘤。

隨著免疫組化開展，國內(nèi)近年來報道的GIST病例逐漸增多。

臨床上對GIST的認識不斷加深，本文回顧性分析我院2005年1月-2008年12月收治的GIST53例。

探討GIST的臨床表現(xiàn)，病理形態(tài)特征，免疫組化表達及其意義。

作者單位：

1510180廣州市第一人民醫(yī)院病理科2510405廣州中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院1劉國榮1楊耀湘21資料與方法1．1標本來源收集廣州市第一人民醫(yī)院病理科2005年1月-2008年12月53例資料完整，診斷明確的原發(fā)性胃腸道間質(zhì)瘤標本。

1．2一般資料患者性別、年齡、腫瘤部位、癥狀、腫瘤大小等查自手術(shù)記錄和大體檢查記錄。

1．3試劑免疫組化抗體依次為CD117、CD34、SMA、S-1OO、Ki-67，其中CD117為濃縮型兔抗人單克隆抗體，稀釋比例為1：

100，購自深圳深達公司；Ki-67濃縮型鼠抗人單克隆抗體，稀釋比例為1：

100，購自上海長嘉生物科技有限公司；CD34、SMA、S-100均為即用型鼠抗人單克隆抗體，分別購自北京中杉公司、福州邁新生物技術(shù)有限公司、上海長島生物技術(shù)有限公司；抗體稀釋液及Envision試劑盒為Dako公司產(chǎn)品。

1．4方法標本經(jīng)10％甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，切片厚4m，HE染色，光鏡觀察，免疫組化用Envision兩步法。

石蠟標本常規(guī)切片，脫蠟至無水后，于抗體修復(fù)液中微波修復(fù)，詳細步驟按說明書進行。

染色設(shè)已知陽性對照，陰性對照用PBS液替代，DAB顯色，蘇木精復(fù)染。

1．5免疫組化結(jié)果判定CD117、CD34、SMA及S-100陽性信號為棕黃色、棕褐色，著色于胞漿，Ki-67表達于細胞核。

每例切片至少隨機選擇10個HPF，取平均值，每例切片陽性細胞數(shù)平均10％為陽性，否則為陰性。

1．6GIST良惡性判斷腫瘤危險程度的判定本組病例根據(jù)Fletcher原則判定腫瘤危險程度：

大小2cm，核分裂數(shù)5個／50HPF提示危險程度很低；2～5cm，核分裂數(shù)5個／50HPF提示低度危險；5cm，核分裂數(shù)6-1O個／50HPF或5～10cm，核分裂數(shù)5個／50HPF則為中度危險；5cm，核分裂數(shù)5個／50HPF或只要10cm或核分裂數(shù)10個／50HPF即視為高度危險。

1．7組織學(xué)分型參考Miettinen等組織分型將GIST分為梭形細胞型、上皮細胞型、混合細胞型。

1．8統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件包對本組試驗數(shù)據(jù)進行校正的X檢驗分析。

2結(jié)果2．1臨床病理學(xué)比較53例GIST中，男性23例，女性30例，年齡18-79歲，平均55.3歲。

病史2天至10年，平均3個月。

首發(fā)癥狀包括腹痛、腹脹29例，黑便18例，腹部腫塊3例，胸悶1例，排尿困難1例，腰骶部疼痛1例。

病變部位在胃30例，食管5例，小腸11例，大腸2例，腸系膜5例。

腫瘤危險程度:很低組16例，低組17例，中等組7例，高組13例。

腫瘤大?。?/p>

直徑＜2cm16例，2-5cm15例，5-10cm12例，＞10cm10例。

2．2組織學(xué)表現(xiàn)比較GIST瘤細胞主要有兩種形態(tài)：

梭形和上皮樣形。

大部分梭形瘤細胞界限不清，可呈纖細長梭形、胖梭形、短梭形變異，胞質(zhì)輕度或中度嗜伊紅，有核端空泡者細胞一端平鈍，主要呈交叉束狀、柵欄狀、漩渦狀排列。

上皮樣瘤細胞多數(shù)胞界清楚，細胞呈圓形、橢圓形或多邊形，胞質(zhì)豐富，輕度嗜伊紅、嗜堿或透明淡染，主要呈彌漫片狀排列。

其中梭形細胞型45例，上皮樣細胞型5例，混合型（梭形和上皮樣細胞）3例。

很低組病例細胞欠豐富，無或多張切片僅見1個核分裂相，無腫瘤性壞死、出血囊性變。

低組病例細胞豐富，輕度至中度異型，或出血或壞死，1例可見囊性變，2例未見核分裂，12例核分裂5個／50HPF，另3例5個／50HPF。

中等組病例細胞豐富，中度或高度異型，或出血或壞死，1例核分裂5個／50HPF，6例5個／50HPF。

高組病例細胞豐富密集，僅1例輕度異型，余皆為中度至高度異型。

1例未見核分裂，4例核分裂5個／50HPF，8例核分裂＞10個／50HPF。

2．3免疫組織化學(xué)CD117陽性表達率為88.7％(47／53)，CD34表達率為81.1％(43／53)，SMA陽性表達率為50.9％（27/53），S-100陽性表達率為18.9％（10/53），Ki-67陽性表達率為67.9％（36/53），CD117和CD34共同表達率為67.9％(36／53)。

CD117陽性表達率與腫瘤大小、核分裂數(shù)、危險程度、組織學(xué)類型、部位無關(guān)，其差異無顯著意義(P0．05，見表1)，CD34陽性表達率與腫瘤大小、核分裂數(shù)、危險程度、組織學(xué)類型無關(guān)，其差異無顯著意義（P＞0.05，見表2），但CD34陽性表達率與部位有關(guān)，其差異有顯著意義（P＜0.05，見表2），SMA陽性表達率與腫瘤大小、核分裂數(shù)、危險程度、組織學(xué)類型、部位無關(guān)，其差異無顯著意義(P0．05，見表3)，S-100陽性表達率與腫瘤大小、核分裂數(shù)、危險程度、部位無關(guān)，其差異無顯著意義（P＞0.05，見表3），但S-100陽性表達率與組織學(xué)類型有關(guān)，其差異有顯著意義（P＜0.05，見表4），Ki-67陽性表達率與核分裂數(shù)、組織學(xué)類型無關(guān)，其差異無顯著意義（P＞0.05，見表5），但Ki-67陽性表達率與腫瘤大小、危險程度、部位有關(guān)，其差異有顯著意義（P＜0.05，見表5）。

表1CD117在GIST中的表達CD117x值P值+-腫瘤直徑（cm）＜21332-51415-101022.7680.429＞10100核分裂數(shù)5/50HPF395-0.0220.983＞5/50HPF81危險程度很低133低152中等701.9100.591高121組織學(xué)類型梭形細胞型414上皮樣細胞型324.6550.098混合細胞型30部位食管41胃255小腸1103.2770.484大腸20系膜50表2CD34在GIST中的表達CD34x值P值+-腫瘤直徑（cm）＜21422-51145-101021.0460.790＞1082核分裂數(shù)5/50HPF377-1.2060.228＞5/50HPF63危險程度很低142低143中等521.0020.801高103組織學(xué)類型梭形細胞型369上皮樣細胞型410.7260.696混合細胞型30部位食管23胃291小腸6519.0190.002大腸11系膜50表3SMA在GIST中的表達SMAx值P值+-腫瘤直徑（cm）＜21152-55105-10574.5450.323＞1064核分裂數(shù)5/50HPF2123-1.0260.305＞5/50HPF63危險程度很低115低611中等255.5750.768高85組織學(xué)類型梭形細胞型2223上皮樣細胞型320.5270.768混合細胞型21部位食管50胃1515小腸475.8880.208大腸11系膜23表4S-100在GIST中的表達S-100x值P值+-腫瘤直徑（cm）＜24122-52135-10391.4730.688＞1019核分裂數(shù)5/50HPF935-0.6470.518＞5/50HPF18危險程度很低412低215中等161.1770.758高310組織學(xué)類型梭形細胞型639上皮樣細胞型1413.5440.001混合細胞型30部位食管23胃624小腸293.0560.548大腸02系膜05表5Ki-67在GIST中的表達Ki-67x值P值+-腫瘤直徑（cm）＜2792-5965-1010210.5510.014＞10100核分裂數(shù)5/50HPF2816-1.4650.917＞5/50HPF81危險程度很低79低116中等618.7680.033高121組織學(xué)類型梭形細胞型3015上皮樣細胞型321.5630.458混合細胞型30部位食管05胃219小腸8313.8040.008大腸20系膜503討論GIST是最常見的胃腸道非上皮來源性腫瘤，約占胃腸道腫瘤的1％，而占間葉性腫瘤的70％，其中60％-70％發(fā)生在胃，20％-30％發(fā)生在小腸，5％發(fā)生在結(jié)腸和直腸，發(fā)生于食管不足5％，偶見在網(wǎng)膜和腸系膜化及良惡性鑒別均存在爭議，對于診斷和治療的認識也有較大差異，尤其是惡性胃腸道間質(zhì)瘤(MGIST)，其預(yù)后相對較差，治療比較棘手。

而且GIST缺乏特異性的臨床表現(xiàn)，其癥狀與腫瘤的部位、大小和生長方式有關(guān)。

如腫瘤呈腔內(nèi)生長且突破黏膜則表現(xiàn)為潰瘍或出血，如腫塊較大且呈腔外生長則可能于病人體表觸及包塊或出現(xiàn)梗阻癥狀。

GIST的最終診斷主要依靠病理檢查和免疫組化結(jié)果。

研究證實，以往診斷的胃腸道平滑肌瘤和神經(jīng)鞘瘤多屬于GIST將胃腸道間葉來源的一大類梭形細胞腫瘤總稱為GIST型(良性、交界性、惡性)；(2)神經(jīng)型(惡性)；(3)平滑肌神經(jīng)混合型(惡性或潛在惡性)；(4)未定型(惡性或潛在惡性)。

目前，臨床上對于GIST的病理診斷趨于這一基本概念。

GIST的發(fā)生與位于11號染色體上的C-Kit基因突變密切相關(guān)，導(dǎo)致其編碼的蛋白CD117在細胞水平常常有過度表達。

C-Kit在GIST細胞中的陽性率達85％-94％，也就是說幾乎所有的GIST均有C-Kit表達。

因此，認為CD117是GIST的特征性標記物。

因此Miettinen等瘤和神經(jīng)鞘瘤以及神經(jīng)纖維瘤的富于細胞且表達CD117的梭形、上皮樣或多形性的間葉源性腫瘤。

我們采用CD117等抗體標志結(jié)果支持這一觀點。

但盡管本組CD117陽性率很[1]。

目前對其起源、分[2-3]。

Rosai[4]，共分為4型：

(1)平滑肌[5]已建議將GIST定義為胃腸道除外平滑肌腫高，但仍有6例失表達，說明CD117在GIST發(fā)生發(fā)展過程中個別病例可能丟失。

本組47例GIST的CD117陽性表達在危險程度統(tǒng)計處理無顯著性差異，也說明了CD117表達與腫瘤分化程度無關(guān)。

在45例梭型細胞型、5例上皮樣細胞型、3例混合細胞型，各型CD117蛋白陽性表達統(tǒng)計處理無顯著差別，說明瘤細胞分型與免疫組化(主要是CD117陽性)無關(guān)。

CD34是較早應(yīng)用于GISTs的研究中的一種造血前體細胞抗原。

最初有人在GIST中檢查到CD34，并且有較高的表達率。

約有70％-80％的GIST的CD34表達為陽性，但在內(nèi)皮細胞、纖維原細胞及其他的一些腫瘤如卡博肉瘤、纖維源性腫瘤中也有CD34表達Ki-67是一種反映細胞分裂和增殖活性的標志物，已為臨床廣泛應(yīng)用。

有研究表明，Ki-67有重要意義，是有效的預(yù)后判斷指標，Ki-67的高水平表達與不良的病理學(xué)特征和侵襲行為有關(guān)，檢測Ki-67簡單、方便，易于推廣，是判斷GIST危險程度的一個有效指標，當部分GIST形態(tài)學(xué)判斷危險程度有困難時，結(jié)合Ki-67的結(jié)果不失為一個簡單有效的手段。

本組研究表明Ki-67陽性表達與GIST的危險程度有關(guān)，陽性表達率越高，危險程度越高。

其陽性表達也與腫瘤大小相關(guān)，腫瘤越大，陽性率越高。

Ki-67可用來判斷腫瘤的預(yù)后，在臨床可作為GIST的預(yù)后指標。

從本文結(jié)果得出CD117、CD34、SMA、S-100陽性表達與腫瘤大小無關(guān)，但Ki-67陽性表達與腫瘤大小呈正相關(guān)；CD117、CD34、SMA、S-100、Ki-67陽性表達均與核分裂數(shù)無關(guān)；CD117、CD34、SMA、S-100陽性表達與腫瘤危險程度無關(guān)，但Ki-67陽性表達與腫瘤危險程度呈正相關(guān)；CD117、CD34、SMA、Ki-67陽性表達與腫瘤組織學(xué)類型無關(guān)，但S-100陽性表達與組織學(xué)類型相關(guān)；CD117、SMA、S-100陽性表達與GIST發(fā)生部位無關(guān)，但CD34、Ki-67陽性表達與腫瘤發(fā)生部位相關(guān)。

研究還表明CD117與SMA、S-100、Ki-67表達均有顯著相關(guān)，說明CD117在GIST中是一個比較敏感指標。

本組CD34陽性率為81.1％，CD34陽性的病例大多數(shù)CD117亦陽性，偶爾有CD34陽性而CD117陰性者，兩者呈互補性表達。

所以，聯(lián)合CD34和CD117檢測，可以提高GIST的診斷準確率，但它們在GIST中總陽性表達無明顯差異性,對于CD117和CD34全陰性的病例，即使形態(tài)學(xué)上很接近GIST，但一般臨床上也不診斷為GIST。

在鑒別診斷上，本組S-100大部分病例無表達，在少部分病例中有灶性表達，與CD117陽性比較有顯著性差異，由此可與神經(jīng)源性腫瘤相鑒別。

本組有一半的病例（27/53）SMA陽性表達