空氣和廢氣監(jiān)測 課件 細菌總數(shù)的測定

任務4.3.6細菌總數(shù)的測定空氣和廢氣監(jiān)測技術任務4.3.6細菌總數(shù)的測定學習目標：1.了解室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)的來源及危害；2.掌握撞擊法測定室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)的方法及原理；3.學會撞擊式空氣微生物采樣器的使用方法；4.能正準確定室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)的含量，并能規(guī)范測定操作要點；5.能判斷測定結果的異?，F(xiàn)象并能解決；6.具有環(huán)保意識和節(jié)約意識，不浪費藥品試劑，不造成環(huán)境污染；7.保持實驗環(huán)境及實驗臺面和儀器的干凈整潔有序，符合規(guī)范要求。（一）室內(nèi)空氣中細菌的來源及危害

室內(nèi)微生物細菌有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、芽細胞、綠膿桿菌和螨蟲等。

細菌的傳播是引起各種疾病的根源，如感冒、過敏性肺炎、鼻炎、骨髓炎、哮喘、敗血癥、菌血癥以及各式化膿性感染等。特別是塵螨，是人體支氣管哮喘病的一種過敏源。一、基本知識（二）室內(nèi)空氣中細菌的限量與測定方法《室內(nèi)空氣質(zhì)量標準》（GB/T18883-2022）規(guī)定，室內(nèi)空氣中細菌菌落總數(shù)的限值為1500cfu/m3。測定方法有兩種，一種是撞擊法，另一種是自然沉降法。撞擊法因能采集懸浮在空氣中的微生物顆粒，并不受環(huán)境氣流影響，采樣量準確，靈敏度高，其采集空氣樣品更合理、穩(wěn)定、科學，國內(nèi)推廣用此法監(jiān)測空氣中的菌落總數(shù)。二、實訓操作（一）測定原理

采用撞擊式空氣微生物采樣器采樣，通過抽氣動力作用，使空氣通過狹縫或小孔而產(chǎn)生高速氣流，懸浮在空氣中的帶菌粒子撞擊到營養(yǎng)瓊脂平板上，經(jīng)37℃、48h培養(yǎng)后，計算出每立方米空氣中所含的細菌菌落數(shù)。（二）儀器與用品（1）高壓蒸汽滅菌器。（2）干熱滅菌器。（3）恒溫培養(yǎng)箱。（4）冰箱。（5）平皿（直徑9cm）。（6）制備培養(yǎng)基用一般設備：量筒，三角燒瓶，pH計或精密pH試紙等。（7）撞擊式空氣微生物采樣器。

要求：細菌捕獲率達95%；操作簡單，攜帶方便，性能穩(wěn)定，便于消毒。（三）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1.成分：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的成分如表4-11所示。2.制法：將上述成分混合，加熱溶解，校正pH至7.4，過濾分裝，121℃，20min高壓滅菌。營養(yǎng)瓊脂平板的制備參照采樣器使用說明。（四）測定分析過程1.采樣選擇有代表性的房間和位置設置采樣點。將采樣器消毒，以28.3L/min流量采集5～15min。采樣器使用按儀器使用說明進行。2.分析樣品采完后，將帶菌營養(yǎng)瓊脂平板置（36±1）℃恒溫箱中，培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)，并根據(jù)采樣器的流量和采樣時間，換算成每立方米空氣中的菌落數(shù)。以cfu/m3報告結果。（五）計算結果與表示

空氣中菌落總數(shù)為：（六）注意事項

制作營養(yǎng)瓊脂平板要無菌操作，培養(yǎng)基要嚴格按規(guī)定要求。采樣器要按規(guī)定做好消毒處理，并按儀器使用說明