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文檔簡介

2025屆江蘇省無錫市市北高中高三最后一卷生物試卷注意事項1.考生要認真填寫考場號和座位序號。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結(jié)束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列關(guān)于藍藻和黑藻的敘述,正確的是()A.都是生產(chǎn)者,都有細胞壁B.光合色素都分布在類囊體膜中C.都以DNA為主要的遺傳物質(zhì)D.在細胞分裂時,都會發(fā)生染色質(zhì)和染色體的轉(zhuǎn)化2.減數(shù)分裂過程中,遵循分離定律的基因、遵循自由組合定律的基因、因為交叉而互換的基因分別在()A.同源染色體上;非同源染色體上;同源染色體的非姐妹染色單體上B.同源染色體上;非同源染色體上;同源染色體的姐妹染色單體上C.姐妹染色單體上;同一條染色體上;非姐妹染色單體上D.姐妹染色單體上;非同源染色體上;非同源染色體的姐妹染色單體上3.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.配制固體培養(yǎng)基時,所加的瓊脂是從紅藻中提取的脂類B.劃線操作時,不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連C.分離計數(shù)時,可用平板劃線法對需計數(shù)的微生物進行分離D.純化培養(yǎng)時,培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的搖床上培養(yǎng)4.下列關(guān)于生物學(xué)實驗說法正確的是()A.亞硝酸鹽對550nm波長的光有最大吸收率,可用光電比色法定量測量其含量B.將酶用一定的方法固定化后通常能提高酶的催化效率C.誘導(dǎo)原生質(zhì)體細胞壁再生時必須降低甘露醇溶液濃度D.用劃線分離法對細菌進行計數(shù)時每個平板的單菌落數(shù)量應(yīng)控制在20個以內(nèi)5.2019年7月以來,澳大利亞多地林火肆虐,過火面積超過1000萬公頃。持續(xù)數(shù)月的大火,已造成包括澳大利亞國寶考拉在內(nèi)的超過10億只野生動物喪生。下列說法正確的是()A.對受災(zāi)的考拉應(yīng)采取就地保護的措施B.單位面積生態(tài)系統(tǒng)多樣性的價值最高的是森林C.火災(zāi)會改變當?shù)厝郝溲萏娴乃俣群头较駾.火災(zāi)過后地區(qū)進行的是次生演替,很快能恢復(fù)到原來的生態(tài)系統(tǒng)6.當人體注射了用禽流感病毒蛋白制備的疫苗后,體內(nèi)不會發(fā)生的反應(yīng)是A.吞噬(巨噬)細胞處理和呈遞抗原B.產(chǎn)生針對該禽流感病毒蛋白的抗體C.效應(yīng)T細胞消滅被疫苗感染的細胞D.形成能識別禽流感病毒的記憶細胞二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)某動物黑色毛和棕色毛這一對相對性狀分別由常染色體上的基因B、b決定,同時X染色體上基因I會抑制黑色與棕色色素的形成,從而使毛色變白,基因i無此作用。請回答下列相關(guān)問題。(1)種群中黑色雌性個體的基因型為________________,白色個體的基因型共有______________種。(2)群體中,理論上棕色雄性個體數(shù)_______________(填“多于”“等于”或“少于”)棕色雌性個體,理由是_____________________________。(3)現(xiàn)有基因型為BBX1Y的個體與純合棕色雌性雜交,F(xiàn)1出現(xiàn)了黑色雌性個體。推測變異的原因可能是:①發(fā)生了基因突變;②發(fā)生了X染色體上I基因片段的缺失。某學(xué)生采用F1黑色雌雄個體相互交配的方式對變異原因進行研究,判斷其能否依據(jù)交配后代的表現(xiàn)型及比例確定變異原因,并闡述你的理由:___________________________________________________________________。8.(10分)某種鳥的羽毛顏色有白色、粉色和紅色三種表現(xiàn)型,由兩對獨立遺傳的等位基因A、a和B、b控制。A基因決定紅色素的合成,A基因?qū)基因為完全顯性;B、b基因位于Z染色體上,W染色體上無相應(yīng)的等位基因,b基因純合(ZbW視為純合子)時紅色素會淡化成粉色?;卮鹣铝袉栴}:(1)將一只純合白色羽毛雄鳥與一只粉色羽毛雌鳥雜交,發(fā)現(xiàn)F1代全為紅色。據(jù)此分析,親代雌鳥的基因型為___,F(xiàn)1代雄鳥能產(chǎn)生____種基因型的配子。將F1代個體隨機交配,在F2代紅色雄鳥中,雜合子所占的比例為____。(2)若一只基因型為AaZbW的鳥,通過減數(shù)分裂產(chǎn)生了一個基因型為AAZb的生殖細胞,這可能是由于在形成配子過程中的____時期染色體分離異常導(dǎo)致的;一般情況下,與該配子同時產(chǎn)生的另外3個細胞的基因型應(yīng)該是____。(3)雛鳥通常難以直接區(qū)分雌雄,采用某些類型的純合親本雜交,全部子代雛鳥都可以直接通過羽毛顏色來分辨雌雄,請寫出這些純合親本組合所有可能的基因型:____。9.(10分)科研人員利用基因編輯技術(shù)刪除小鼠母本基因組的相關(guān)印記區(qū)域,培育出了由母本單倍體干細胞融合發(fā)育而來的孤雌生殖小鼠,為探索生殖奧秘作出了貢獻。過程見下圖:(1)上圖孤雌小鼠的獲得,用到動物細胞培養(yǎng)_________、_________、_________胚胎移植等生物技。(2)孤雌小鼠培育過程中需要用基因編輯技術(shù)刪除母本基因組的相關(guān)印記區(qū)域。為了檢測刪除是否成功,在分子水平需要應(yīng)用______________________________技術(shù)進行檢測。(3)常用的基因編輯系統(tǒng)是crispr-cas9,其過程為:先讓一段RNA與特征DNA序列結(jié)合,由此引導(dǎo)Cas9酶對特征DNA序列切割。因為“一段RNA”能與特征DNA序列_________,才能特異性結(jié)合。Cas9酶作用于特征DNA序列的____________________(填DNA分子的相關(guān)結(jié)構(gòu))。(4)上圖中的“卵母細胞”應(yīng)處于________________(時期)。應(yīng)用卵母細胞培育孤雌小鼠容易成功,其原因是_______________________。并且由上述卵母細胞發(fā)育而來的胚胎能在代孕母鼠體內(nèi)存活的原因是____________。10.(10分)2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由SARS-CoV-2病毒引起的,能否快速、準確地檢測出病原體成為疾病防控的關(guān)鍵。請回答:(1)下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程??茖W(xué)家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術(shù)稱為RT-PCR。(2)進行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與_____________互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。熒光信號達到設(shè)定的閾值時,經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明含有病毒的概率越____________。(4)一次核酸檢測歷時需16小時,為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術(shù),這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體.請寫出生產(chǎn)這種抗體的思路:__________________。11.(15分)某科研人員從野生型紅眼果蠅(2N=8)中分離出紫眼突變體,并進行了以下實驗:實驗一:紫眼雌果蠅x野生型紅眼雄果蠅→F1均為紅眼→F2中紅眼:紫眼=3:1實驗二:紫眼雄果蠅x野生型紅眼雌果蠅→F1均為紅眼→F2中紅眼:紫眼=3:1(1)根據(jù)上述實驗結(jié)果,下列關(guān)于眼色基因存在部位的假設(shè),不成立的是_________。①眼色基因位于細胞質(zhì)中②眼色基因只位于X染色體上③眼色基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段④眼色基因只位于Y染色體上⑤眼色基因位于常染色體上(2)研究者讓實驗一的F1紅眼雄果蠅與親本紫眼雌果蠅雜交,若子代中雌果蠅均表現(xiàn)為紫眼、雄果蠅均表現(xiàn)為紅眼,則(1)小題中的假設(shè)_________成立;如果利用該假設(shè)進一步分析實驗一和實驗二中F2的實驗結(jié)果,則具體的實驗結(jié)果應(yīng)該是__________。(3)若(1)小題中的假設(shè)⑤成立,則子代中雌雄果蠅表現(xiàn)為___________。(4)果蠅的細眼(B)粗眼(b)也是一對相對性狀B/b基因位于X染色體上。一只粗眼雌果蠅(XbXb)與一只細眼雄果蠅(XBY)交配,子代中出現(xiàn)了一只粗眼雌果蠅,該粗眼雌果蠅的基因型可能是________[選填合適序號:①XbXbY(雌果蠅)②X-Xb(一條X染色體部分缺失)③XbXb]。能確定該粗眼雌果蠅基因型的簡單實驗方法是___________________。

參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、A【解析】

藍藻是原核生物,沒有被核膜包圍的細胞核,沒有復(fù)雜的細胞器,只有核糖體一種細胞器,含有葉綠素和藻類素,能進行光合作用合成有機物,屬于生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)者;黑藻是真核生物,有成形的細胞核,有復(fù)雜的細胞器,能進行光合作用合成有機物,也屬于生產(chǎn)者?!驹斀狻緼、藍藻是原核生物,黑藻是真核生物,都能進行光合作用,都具有細胞壁,都是生產(chǎn)者,A正確;B、藍藻的光合色素分布在質(zhì)膜上,B錯誤;C、細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)就是DNA,無主次之分,C錯誤;D、藍藻無染色體,D錯誤。故選A?!军c睛】本題考查原核細胞和真核的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同,首先明確藍藻是原核生物,黑藻是真核生物;其次要求識記原核細胞和真核細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同,能運用所學(xué)的知識準確判斷各選項。2、A【解析】

基因分離定律和自由組合定律的實質(zhì):進行有性生殖的生物在進行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程中,位于同源染色體上的等位基因隨同源染色體分離而分離,分別進入不同的配子中,隨配子獨立遺傳給后代,同時位于非同源染色體上的非等位基因進行自由組合?!驹斀狻繐?jù)上分析可知,遵循分離定律的基因是位于同源染色體上的等位基因,遵循自由組合定律的基因是位于非同源染色體上的非等位基因,因為交叉而互換的基因是位于同源染色體非姐妹染色單體上,A正確。故選A。3、B【解析】

進行培養(yǎng)的微生物主要有病毒、細菌、放線菌、真菌等。微生物培養(yǎng)需要用到培養(yǎng)基,根據(jù)微生物的不同種類和生活習性來配制特定的培養(yǎng)基。微生物培養(yǎng)成功的關(guān)鍵在于無菌操作,如果培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基不能徹底滅菌或培養(yǎng)過程中有雜菌污染,容易導(dǎo)致實驗失敗。篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基。微生物接種的主要方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法?!驹斀狻緼、配制固體培養(yǎng)基時,所加的瓊脂是從紅藻中提取的多糖,A錯誤;B、劃線時要避免最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連,因為最后一區(qū)的菌種是最少的,而第一區(qū)的菌種是最致密的,如果連在一起可能影響單個菌落的分離效果,B正確;C、分離計數(shù)時,應(yīng)采用稀釋涂布平板法,C錯誤;D、搖床應(yīng)在液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時使用,培養(yǎng)皿中的是固體培養(yǎng)基,D錯誤。故選B。【點睛】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識,要求學(xué)生識記培養(yǎng)基制備的方法步驟,掌握實驗操作過程中的相關(guān)注意點,同時識記無菌技術(shù)的主要內(nèi)容等。4、C【解析】

固定化酶是指用物理學(xué)或化學(xué)的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具有酶活性的酶復(fù)合物。在催化反應(yīng)中,它以固相狀態(tài)作用于底物,反應(yīng)完成后,容易與水溶性反應(yīng)物和產(chǎn)物分離,可被反復(fù)使用?!芭莶说碾缰坪蛠喯跛猁}的測定”活動中,可通過配制標準顯色液用光電比色法進行亞硝酸鹽含量。【詳解】A、是亞硝酸鹽與相應(yīng)試劑反應(yīng)后形成的玫瑰紅色染料在550nm波長處有最大的吸收速率,A錯誤;B、固定化酶不能提高酶的催化效率,應(yīng)該提高的是酶的利用率,B錯誤;C、甘露醇溶液濃度過高,會破壞原生質(zhì)體的形態(tài),C正確;D、平板劃線法不能用于菌落的計數(shù),D錯誤。故選C。5、C【解析】

演替的概念:隨著時間的推移,一個群落被另一個群落代替的過程類型項目初生演替次生演替起點在一個從來沒有被植物覆蓋的地面,或者是原來存在過植被、但被徹底消滅了的地方在原有植被雖已不存在,但原有土壤條件基本保留,甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體的地方時間經(jīng)歷的時間漫長經(jīng)歷的時間短影響因素自然因素人類活動較為關(guān)鍵實例裸巖、冰川泥、火山巖上的演替火災(zāi)后的草原、棄耕農(nóng)田上的演替【詳解】A、由于棲息地遭受火災(zāi),因此對受災(zāi)的考拉應(yīng)采取遷地保護的措施,A錯誤;B、物種多樣性直接對生態(tài)系統(tǒng)多樣性價值起主要作用,而森林與其他生態(tài)系統(tǒng)相比,物種多樣性未必是最高的,故單位面積生態(tài)系統(tǒng)多樣性的價值最高的未必是森林,B錯誤;C、火災(zāi)作為自然因素,改變了當?shù)厝郝溲萏娴乃俣群头较?,C正確;D、火災(zāi)過后地區(qū)進行的是次生演替,與初生演替相比演替的速度快,演替過程中群落的物種組成會發(fā)生變化,故未必是原來的生態(tài)系統(tǒng),D錯誤。故選C。6、C【解析】A.在特異性免疫發(fā)生的時都有吞噬(巨噬)細胞處理和呈遞抗原,A不符合題意;B.產(chǎn)生針對該禽流感病毒蛋白的抗體,在疫苗注射后會發(fā)生,B不符合題意;C.禽流感病毒蛋白制備的疫苗只有抗原的特點沒有侵染細胞的特點,故效應(yīng)T細胞消滅被疫苗感染的細胞不會發(fā)生,C符合題意;D.形成能識別禽流感病毒的記憶細胞,會在體內(nèi)發(fā)生,D不符合題意。故選C。二、綜合題:本大題共4小題7、BBXiXi、BbXiXi9多于在B基因不存在的情況下,雌性的兩條X染色體上同時具有i基因時才會出現(xiàn)棕色,而雄性的一條X染色體上有基因時就會出現(xiàn)棕色不能因為無論是基因突變還是染色體發(fā)生X染色體含片段缺失,交配后代中黑色:棕色的比例均為3∶1【解析】

題意分析:根據(jù)題干信息黑色毛和棕色毛這一對相對性狀分別由常染色體上的基因B、b決定,同時X染色體上基因I會抑制黑色與棕色色素的形成,從而使毛色變白,基因i無此作用,可知群體中白色個體的基因型有B—XIX-、B—XIY、bbXIX-、bbXIY;黑色個體基因型為、B—XiXi、B—XiY;棕色個體的基因型為bbXiXi、bbXiY。【詳解】(1)由分析可知,種群中黑色雌性個體的基因型為BBXiXi、BbXiXi,白色個體的基因型共有9種,分別為BBXIXI、BbXIXI、BBXIXi、BbXIXi、BBXIY、BbXIY、bbXIXI、bbXIXi、bbXIY。(2)群體中,在B基因不存在的情況下,雌性的兩條X染色體上同時具有i基因時才會出現(xiàn)棕色,而雄性的一條X染色體上有基因時就會出現(xiàn)棕色,據(jù)此可知,理論上棕色雄性個體數(shù)多于棕色雌性個體。(3)現(xiàn)有基因型為BBXIY的個體與純合棕色雌性bbXiXi,雜交,F(xiàn)1的基因型為BbXIXi(白色)、BbXiY(黑色),然而卻出現(xiàn)了黑色雌性個體,該個體出現(xiàn)的原因如果是基因突變,則黑色雌性個體的基因型為BbXiXi;如果為X染色體上I基因片段的缺失導(dǎo)致,則黑色雌性個體的基因型為BbXXi;若讓該黑色雌性個體與F1黑色雄性個體相互交配,則無論是基因突變還是染色體發(fā)生X染色體含片段缺失,導(dǎo)致的黑色雌性個體的雜交結(jié)果都是黑色∶棕色=3∶1,所以根據(jù)上述方式無法判斷變異發(fā)生的原因?!军c睛】認真分析題干信息是解答本題的重點,關(guān)注基因決定性狀過程中的相互作用的信息是突破本題的關(guān)鍵!8、AAZbW45/6減數(shù)第二次分裂Zb、aW、aWAAZbZb×AAZBW、AAZbZb×aaZBW、aaZbZb×AAZBW【解析】

本題考查伴性遺傳、自由組合定律,考查伴性遺傳規(guī)律、自由組合定律的應(yīng)用。明確ZW型性別決定的生物雌雄個體的性染色體組成和伴性遺傳規(guī)律是解答本題的關(guān)鍵?!驹斀狻?1)純合白色羽毛雄鳥aaZ-Z-與一只粉色羽毛雌鳥A-ZbW雜交,F(xiàn)1代全為紅色A-ZB-,據(jù)此可判斷親代雄鳥的基因型為aaZBZB,雌鳥的基因型為AAZbW,F(xiàn)1代雄鳥基因型為AaZBZb,減數(shù)分裂時兩對基因的遺傳遵循自由組合定律,F(xiàn)1代雄鳥能產(chǎn)生4種基因型的配子。F1代雌鳥基因型為AaZBW,F(xiàn)1代個體隨機交配,在F2代紅色雄鳥A-ZBZ中,純合子比例為(1/3)×(1/2)=1/6,則雜合子所占的比例為1—1/6=5/6。(2)一只基因型為AaZbW的鳥,通過減數(shù)分裂產(chǎn)生了一個基因型為AAZb的生殖細胞,根據(jù)該生殖細胞中含有AA基因可判斷這是由于減數(shù)第二次分裂后期姐妹染色單體未正常分離導(dǎo)致的;正常情況下,減數(shù)第一次分裂過程中同源染色體分離導(dǎo)致等位基因分離,減數(shù)第二次分裂后期姐妹染色單體分離,據(jù)此可判斷與該配子同時產(chǎn)生的另外3個細胞的基因型應(yīng)該是Zb、aW、aW。(3)通過子代雛鳥羽毛顏色來分辨雌雄,應(yīng)使雌雄性個體表現(xiàn)型不同,根據(jù)伴性遺傳規(guī)律,則純合親本基因型可能為AAZbZb×AAZBW(后代粉紅色均為雌性,紅色均為雄性)、AAZbZb×aaZBW(后代粉紅色均為雌性,紅色均為雄性)、aaZbZb×AAZBW(后代粉紅色均為雌性,紅色均為雄性)?!军c睛】遺傳概率計算中的“算少不算多”:計算第(1)小題最后一空時,F(xiàn)2代紅色雄鳥的基因型有4種,其中有一種純合子,三種雜合子,計算純合子比例較為簡便,因此計算雜合子比例時可先求出純合子比例,然后再求雜合子比例。9、基因工程動物細胞核移植早期胚胎培養(yǎng)DNA分子雜交技術(shù)堿基互補配對磷酸二酯鍵MⅡ中期(減數(shù)第二次分裂中期)卵母細胞體積大,易操作;含促使細胞核表達全能性的物質(zhì);卵母細胞所含營養(yǎng)物質(zhì)豐富代孕母鼠子宮對外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)【解析】

1、孤雌生殖也稱單性生殖,即卵不經(jīng)過受精也能發(fā)育成正常的新個體的生殖方式。2、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ):(1)供體與受體相同的生理變化,為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境;(2)哺乳動物早期胚胎形成后,在一定時間內(nèi)不會與母體子宮建立組織上的聯(lián)系,而是出于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供了可能;(3)受體子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能;(4)移植入受體的胚胎能與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但移入受體的供體胚胎的遺傳特性不會受到影響?!驹斀狻浚?)識圖分析可知,整個過程中用基因編輯技術(shù)刪除相關(guān)的基因印跡區(qū)域,該過程中使用的Cas9酶類似于限制酶的作用,因此屬于基因工程的操作,經(jīng)編輯后的細胞用動物細胞培養(yǎng)成多個細胞或組織,利用核移植技術(shù)使卵母細胞與新核融合,體外培養(yǎng)胚胎至桑椹胚或囊胚后移植胚胎進入代孕母鼠體內(nèi)。(2)驗證基因是否刪除成功,需要利用DNA分子雜交技術(shù)進行檢測。(3)讓一段RNA與目標特征DNA序列的堿基互補配對后兩者才能結(jié)合。Cas9酶與DNA的基因靶點結(jié)合時發(fā)生了構(gòu)象變化,酶功能區(qū)對靶標DNA的反向鏈進行定位切割DNA分子的磷酸二酯鍵,刪除基因。(4)傳統(tǒng)的細胞核移植技術(shù)中,受體卵母細胞處于減數(shù)第二次分裂中期。因為卵母細胞體積大,易操作;含促使細胞核表達全能性的物質(zhì);卵母細胞所含營養(yǎng)物質(zhì)豐富。由于代孕母鼠子宮對外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),使得胚胎能在代孕母鼠體內(nèi)存活的生理基礎(chǔ)?!军c睛】本題以孤雌生殖小鼠的培養(yǎng)過程為背景,考查基因工程、核移植技術(shù)、胚胎移植等知識點,要求學(xué)生掌握核移植的操作過程和選擇卵母細胞的原因,把握基因工程的操作過程和鑒定目的基因的方法,理解限制酶的作用部位,能夠依據(jù)該知識點把握題干中Cas9酶的作用,識記和理解胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)。10、逆轉(zhuǎn)錄(或:反轉(zhuǎn)錄)逆轉(zhuǎn)錄酶Taq酶(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物目的基因大①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞;③將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】

1.將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性、低溫復(fù)性、適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈式反應(yīng)規(guī)律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴增而變化熒光信號強度,求得Ct值,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。2.單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術(shù)來制備,單克隆抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞,雜交瘤細胞既能產(chǎn)生抗體,又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群,可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【詳解】(1)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄,故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術(shù)稱為RT-PCR。(2)RT-PCR是擴增DNA的過程,因為加入的模板是RNA,故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系,從而實現(xiàn)了相關(guān)基因的擴增。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與目的基因互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。若熒光信號達到設(shè)定的閾值時,經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明擴增次數(shù)少,說明更多的熒光探針與目的基因進行了堿基互補配對,可推測獲得的核酸產(chǎn)物中含有病毒的概率越大。(4)若采用抗原-抗體雜交技術(shù)進行病毒檢測,需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體,單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢,故設(shè)計的思路是設(shè)法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細胞,步驟如下:①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒),目的是要獲得能能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細胞;②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞;③將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中可以提取大量的單克隆抗體?!军c睛】熟知

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