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目錄白膜法制備血小板條件(tiáojiàn)分離白膜分離血小板共十五頁(yè)1.白膜法制備(zhìbèi)血小板條件獻(xiàn)血員條件:隨機(jī)無(wú)要求。運(yùn)輸條件:18-22℃血袋要求及品牌:四聯(lián)袋血小板專用袋(有透氣功能)離心機(jī)要求:大型低溫離心機(jī)(賀利氏6000i)時(shí)間要求:采血2小時(shí)內(nèi)開始制作(zhìzuò),6小時(shí)內(nèi)完成制作存儲(chǔ)條件:20℃~24℃震蕩保存72小時(shí)共十五頁(yè)2.分離(fēnlí)白膜2.1裝杯離心⑴對(duì)全血進(jìn)行(jìnxíng)血小板計(jì)數(shù),目的是計(jì)算出該全血中血小板總量。⑵裝杯時(shí)需要將血袋豎直塞滿離心杯,防止未豎直而出現(xiàn)紅細(xì)胞掛壁現(xiàn)象。建議多墊水袋或者空袋子。裝完后將塞口紅細(xì)胞敲下去。放入離心機(jī)離心.共十五頁(yè)2.2離心完成后上機(jī)操作⑴將離心后好的血液往外拿時(shí)一定要注意輕拿輕放,防止白膜層嚴(yán)重晃蕩。⑵上機(jī)掛袋將全血袋掛在稱重(chēnɡzhònɡ)一位置掛桿上,需要注意的是血袋不能緊貼住設(shè)備前壁,這樣更利于分離白膜層。共十五頁(yè)
2.3程序控制第一步分漿步驟:利用光感控制,紅細(xì)胞液面上升至M1
光感位置停止,分漿步驟結(jié)束。第二步分離白膜步驟:利用重量控制,白膜重量達(dá)到
44g,分離白膜步驟結(jié)束。第三步排氣步驟:利用時(shí)間控制,目的是將血漿袋內(nèi)的空氣排除至全血袋內(nèi)。第四步回漿至白膜袋:利用重量控制,白膜重量增加
39g血漿,回漿步驟結(jié)束。以上為整個(gè)分離白膜步驟,白膜量可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)試,以達(dá)到最佳效果,實(shí)現(xiàn)(shíxiàn)白膜定量。共十五頁(yè)2.4制備完成后對(duì)白膜的處理(chǔlǐ)
將白膜袋靜置在22℃左右室溫條件下一小時(shí)。目的是使白膜塊解聚。解聚完成后裝杯進(jìn)行第二次離心。共十五頁(yè)
2.5離心參數(shù)的調(diào)整方法⑴肉眼觀察(guānchá)
離心后的血液從離心機(jī)取出來后,首先對(duì)離心效果有一個(gè)大概的判斷,先觀察白膜層:如果白膜層聚集太厚,說明離心力過高;反則離心力過輕。如圖:⑵對(duì)血漿進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)
對(duì)血漿進(jìn)行血小板計(jì)數(shù),如果血漿中血小板總量多則說明離心力輕;根據(jù)以上兩個(gè)判斷就可以正確調(diào)整白膜離心參數(shù)。共十五頁(yè)3.分離(fēnlí)血小板
3.1裝杯離心
因?yàn)榘啄ち糠浅I?,所以裝杯的時(shí)候(shíhou)一定要注意需要用硬東西將白膜豎起來離心,如圖:
同樣道理,將導(dǎo)管口紅細(xì)胞敲下去,然后進(jìn)行離心。共十五頁(yè)
3.2離心完成后上機(jī)操作⑴將離心后好的白膜往出拿時(shí)一定要注意輕拿輕放,防止紅細(xì)胞層晃蕩。稍微晃蕩起來的可以掛在設(shè)備上沉淀(chéndiàn)一會(huì),待紅細(xì)胞層清晰時(shí)再開始執(zhí)行程序。如圖:⑵掛導(dǎo)管時(shí)盡量使A卡鉗導(dǎo)管留的長(zhǎng)點(diǎn),這樣血小板袋離A卡鉗距離縮短。因?yàn)槌绦蚩刂剖鞘褂玫目ㄣQ光感控制,這樣可以盡最大量的分離血小板。共十五頁(yè)
3.3
程序控制分離(fēnlí)血小板步驟采用的是光感和重量聯(lián)合控制:程序中設(shè)定兩個(gè)控制條件:血小板的重量達(dá)到60g;紅細(xì)胞上升到E1光感位置(A卡鉗光感)。兩個(gè)條件有一個(gè)滿足時(shí),程序結(jié)束。并且程序中都設(shè)置流速調(diào)節(jié)控制,這樣做既保證了血小板重量的準(zhǔn)確,同時(shí)控制了血小板中紅細(xì)胞的混入量。共十五頁(yè)3.4離心參數(shù)調(diào)整⑴肉眼觀察
離心后的血液從離心機(jī)取出來(chūlái)后,首先對(duì)離心效果有一個(gè)大概的判斷,先觀察分層:如果能看出來(chūlái)輕微白膜層,說明離心力有點(diǎn)重或者是離心時(shí)間長(zhǎng),如果發(fā)現(xiàn)血小板中懸浮有紅細(xì)胞,則證明離心力輕或者離心時(shí)間過短了。⑵對(duì)殘留紅細(xì)胞進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)
對(duì)殘留的紅細(xì)胞進(jìn)行血小板計(jì)數(shù),如果紅細(xì)胞中血小板總量多,則證明離心力大或者離心時(shí)間長(zhǎng);⑶對(duì)成品血小板進(jìn)行計(jì)數(shù)對(duì)成品血小板計(jì)數(shù),血小板中紅細(xì)胞的量超標(biāo)的話說明第二次離心力過輕。結(jié)合以上三種判斷方法就可以正確調(diào)整第二次離心參數(shù)。
共十五頁(yè)
3.4
血小板得率的計(jì)算(jìsuàn)成品血小板總量=成品血小板計(jì)數(shù)×成品血小板體積;全血血小板總量=全血血小板計(jì)數(shù)×全血體積;血小板得率=(成品血小板計(jì)數(shù)×成品血小板體積)÷(全血血小板計(jì)數(shù)×全血體積)血小板中紅細(xì)胞總量=血小板中紅細(xì)胞計(jì)數(shù)×血小板體積共十五頁(yè)3.5合格血小板要求(yāoqiú)血小板容量為25-30ml/200ml;50-60ml/400ml.
血小板含量≥2.0X1010/200ml;4.0X1010/400ml.紅細(xì)胞混入量≤1.0X109/200ml;2.0X109/400ml
共十五頁(yè)3.6血小板儲(chǔ)存
將制備好的成品血小板放置(fàngzhì)在血小板震蕩箱中保存。保存溫度為18-24℃,保存72小時(shí)。
共十五頁(yè)內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)目錄。時(shí)間要求:采血2小時(shí)內(nèi)開始制作,6小時(shí)內(nèi)完成制作。⑴將離心(líxīn)后好的血液往外拿時(shí)一定要注意輕拿輕放,防止白膜層嚴(yán)重晃蕩。第四步回漿至白膜袋:利用重量控制,白膜
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