檢驗科sop-生化室作業(yè)指導(dǎo)書(SOP)

ABCD人民醫(yī)院檢驗科程序文件文件編號：版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容關(guān)于發(fā)布《程序文件》的聲明生效日期：20060808郾城微檢綜合門診部生化檢驗作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2編制：劉桂菊審核：周風霞編輯日期：2017年8月20日生效日期：2017年8月30日郾城微檢綜合門診部檢驗科檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容目錄生效日期：2017.8.30頁碼：目錄序號主題內(nèi)容編號頁號1血清總膽紅素測定2血清直接膽紅素測定3血清總蛋白測定（雙縮脲法）4血清白蛋白測定（溴甲酚綠法）5血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定6血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定血清g-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定血清堿性磷酸酶測定血清α-淀粉酶測定血清葡萄糖測定（己糖激酶法）血清尿素氮測定血清肌酐測定（酶法）血清尿酸測定（TBHBA法）血清總膽固醇側(cè)定（酶法）血清甘油三酯測定（酶試劑法）血清載脂蛋白A1測定血清載脂蛋白B測定血清高密度脂蛋白膽固醇測定血清低密度脂蛋白膽固醇測定血清肌酸激酶(CK)測定血清肌酸激酶MB同工酶測定血清乳酸脫氫酶DGKC法測定血清乳酸脫氫酶測定編號頁號血清a-羥丁酸脫氫酶測定血清總膽汁酸循環(huán)酶法測定Xxx冰箱操作維護規(guī)程Xxx純水機操作維護規(guī)程MH-480生化分析儀操作維護規(guī)程離心機操作維護規(guī)程檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容修訂頁生效日期：2017.8.30頁碼：修訂頁序號文件編號頁碼需更改的內(nèi)容更改內(nèi)容批準人批準日期123456789101112131415161718192021檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清總膽紅素(T-BIL)測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清總膽紅素(T-BIL)測定1.實驗原理血清中的膽紅素分為直接（結(jié)合）膽紅素和間接（未結(jié)合）膽紅素。大多數(shù)方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法膽紅素測量法1，一些改良的方法已被用來增進反應(yīng)。這些改良的方法是使直接膽紅素直接和重氮化合物進行反應(yīng)，生成一種有顏色的化合物，而間接膽紅素需要一種溶劑，如表面活性劑后才能進行反應(yīng)。申能總膽紅素試劑是改良的重氮法。使用一種穩(wěn)定的重氮鹽，2,4-二氯苯胺重氮鹽（DCA），與膽紅素反應(yīng)，形成紅色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm時的吸光度與標本中總膽紅素的濃度成正比。膽紅素+DCA紅色偶氮化合物表面活性劑2.標本： 2.1病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清、肝素或EDTA血漿，應(yīng)避光保存。3.標本存放：15～25℃保存可穩(wěn)定2天；2～8℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定3個月，如冰凍保存，不可反復(fù)凍融！。4.標本運輸：常溫條件下避光保存運輸。5.標本拒收標準：標本溶血、細菌污染、脂血、非避光保存運輸?shù)臉吮尽?.實驗材料6.1試劑：申能總膽紅素試劑盒劑1＋試劑2）6.1.1試劑組成試劑1：6×64ml磷酸緩沖液40mmol/L氯化鈉9g/L表面活性劑,穩(wěn)定劑適量試劑2：6×16ml2,4-二氯苯胺重氮鹽1mmol/L鹽酸30mmol/L表面活性劑適量6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存試劑避光保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個月。試劑2必需避光保存。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：此試劑為體外診斷用，不要入口，毒性還末確定；警告！腐蝕劑！不要入口；避免和眼睛，皮膚或衣服接觸，如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘，接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護。6.2校準品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準品對自動分析儀進行校準，參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件6.3質(zhì)控品：參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-64000生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件。8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件。9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果無需手工計算，以μmol/L報告。手工測定計算方法為：△Au總膽紅素(μmol/L)=×校準液濃度△As12.參考值范圍：嬰兒：出生24小時內(nèi)＜150μmol/L出生第2天22-193μmol/L出生第3天12-217μmol/L出生第4～6天1.7-216μmol/L兒童：＞一個月3.4-17μmol/L成年人：1.7-21μmol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素非極性很強，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血（肝前黃疸）、實質(zhì)的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會導(dǎo)致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細胞破碎增多，使60～70%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測方法能檢測總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測定主要檢測水溶性的結(jié)合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計游離膽紅素的含量。14.操作性能14.1線性范圍：1.2～513μmol/L14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法5，CS-64000批內(nèi)精密度小于3%或SD≤0.07，總精密度小于5%或SD≤0.10。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)批間精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)樣品115.220.4643.05樣品114.880.4082.74樣品217.440.4052.32樣品219.660.6863.49樣品382.600.7850.95樣品379.522.2742.8614.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對247個樣品進行T-BIL檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.00x-0.00mol/L；r=1.000。14.4靈敏度：本試劑的檢測限為1.2μmol/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍：1.2～513μmol/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為513μmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。16.病危報警值的處理當新生兒血清標本測定結(jié)果總膽紅素〉340μmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。17.方法局限性17.1本法線性上限為513μmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：當樣品中抗壞血酸濃度≤1704μmol/L，血紅蛋白濃度≤5.00g/L，甘油三酯濃度≤22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清直接膽紅素(T-BIL)測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清直接膽紅素（D-BIL）測定1.實驗原理直接膽紅素與2,4-二氯苯胺重氮鹽形成重氮化合物，在酸性條件下呈紅色。2.標本：2.1病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清、肝素或EDTA血漿，應(yīng)避光保存。3.標本存放：15～25℃保存可穩(wěn)定2天；2～8℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定3個月，如冰凍保存，不可反復(fù)凍融！。4.標本運輸：常溫條件下避光保存運輸。5.標本拒收標準：標本溶血、細菌污染、脂血、非避光保存運輸?shù)臉吮尽?.實驗材料6.1試劑：申能總膽紅素試劑盒試劑＋試劑26.1.1試劑組成試劑1：16×64mlEDTA-Na20.07mmol/L氯化鈉6.6g/L氨基磺酸70mmol/L試劑2：6×16ml2,4-二氯苯胺重氮鹽0.09mmol/L鹽酸130mmol/LEDTA-Na20.02mmol/L6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個月。試劑2必需避光保存。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：此試劑為體外診斷用。警告！腐蝕劑！不要入口。避免和眼睛，皮膚或衣服接觸。如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘。接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護。6.2校準品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準品對自動分析儀進行校準，參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件6.3質(zhì)控品：參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法以TruCalU復(fù)合校準品校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果無需手工計算，以μmol/L報告。手工測定計算方法為：△Au直接膽紅素(μmol/L)=×校準液濃度△As12.參考值范圍：≤6.8mol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素非極性很強，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血（肝前黃疸）、實質(zhì)的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會導(dǎo)致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細胞破碎增多，使60～70%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測方法能檢測總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測定主要檢測水溶性的結(jié)合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計游離膽紅素的含量。14.操作性能14.1線性范圍：1.7～171mol/L14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法5，AU1000批內(nèi)精密度小于4%或SD≤0.04，總精密度小于5%或SD≤0.07。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)批間精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)樣品16.00.203.34樣品16.20.193.12樣品212.80.121.00樣品213.00.191.46樣品336.40.260.71樣品335.40.461.3014.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對85個樣品進行DBIL檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=0.95x+0.68μmol/L；r=0.995。14.4靈敏度：1.7mol/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍：1.7～171μmol/L15超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為171mol/L。樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。16.病危報警值的處理無。17.方法局限性17.1本法線性上限為171mol/L。樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：當樣品中抗壞血酸濃度≤1704μmol/L，甘油三酯濃度≤22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。血紅蛋白濃度≥0.50g/L將產(chǎn)生干擾。18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清總蛋白測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清總蛋白液體(TP)雙縮脲法測定實驗原理雙縮脲比色終點法。在堿性條件下，蛋白與銅離子生成紫藍色復(fù)合物。顯色強度和蛋白濃度成正比。OH—蛋白質(zhì)+Cu2+﹥紫紅色復(fù)合物2.標本采集2.1病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清或血漿。3.標本存放20～25℃保存可穩(wěn)定6天；4～8℃保存可穩(wěn)定4周；-20℃保存至少可穩(wěn)定1年。4.標本運輸室溫條件下運輸5.標本拒收標準：細菌污染的不能做測定。6.實驗材料:6.1上海申能總蛋白測定試劑盒貨號劑1＋試劑26.1.1試劑組成試劑1（R1）：6×64ml氫氧化鈉80mmol/L酒石酸鉀鈉12.8mmol/L試劑2（R2）：6×16ml氫氧化鈉100mmol/L酒石酸鉀鈉16mmol/L碘化鉀15mmol/L硫酸銅6mmol/L6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于2～25℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為24個月。試劑不可冰凍。開蓋后應(yīng)避免污染。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：試劑中含有氫氧化鈉，不可入口！如與皮膚及粘膜接觸，請立即用大量水沖洗。使用試劑時應(yīng)采取必要的防護。6.2校準品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品總蛋白校準值或標準品標準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以g/L報告。12.參考值范圍[g/L]成人：66～88兒童/青少年：男女1～30天42～6241～631～6個月44～6647～676個月～1歲56～7955～701～18歲57～8057～80（注：各實驗室應(yīng)有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：總蛋白檢測對于多種疾病的診斷都有價值。肝臟蛋白合成缺陷、腎功能損傷引起蛋白丟失、腸道吸收不良或營養(yǎng)不良時總蛋白濃度下降。而在慢性炎癥疾病、肝硬化和脫水時總蛋白濃度升高。14.操作性能14.1線性范圍：0.5～150g/L14.2精密度：重復(fù)性的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU1000批內(nèi)重復(fù)性小于3%，總不精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天間精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)樣品152.70.50.91樣品152.40.61.06樣品270.50.71.01樣品270.71.11.53樣品31040.80.80樣品31041.41.3214.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對68個樣品進行TP檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.00x-0.7g/L；r=0.997。14.4靈敏度：本試劑的檢測限為0.5g/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍0～150g/L，如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為150g/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。16.病危報警值的處理無。17.方法局限性17.1本法線性上限為150g/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：靜脈滴注大量右旋糖酐的病人血清或血漿，使用雙縮脲方法的檢測結(jié)果會明顯增高，請選用其它方法（如凱氏定氮法）；當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度11.3mmol/L時沒有觀察到干擾18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清白蛋白溴甲酚綠法測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清白蛋白（ALB）溴甲酚綠（BCG）法測定實驗原理在pH值4.2時，白蛋白和溴甲酚綠染料結(jié)合產(chǎn)生藍綠色復(fù)合物，在630nm處比色，顏色的深度與白蛋白濃度成正比。pH4.2白蛋白+溴甲酚綠綠色化合物2.標本采集2.1病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清、肝素或EDTA血漿。3.標本存放留取標本后請盡快分離血清/血漿。在室溫條件下（15～25℃）可以穩(wěn)定一周，在冰箱保存的條件下（2～8℃）穩(wěn)定一個月，-20℃保存至少可以穩(wěn)定3個月。4.標本運輸室溫條件下運輸5.標本拒收標準：細菌污染的不能做測定。6.實驗材料:6.1上海申能白蛋白測定試劑盒（貨號：11202271701，8×70ml）6.1.1試劑組成檸檬酸鹽緩沖液pH4.230mmol/L溴甲酚綠(BCG)0.26mmol/L表面活性劑適量6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于2～25℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為24個月。試劑不可冰凍。開蓋后應(yīng)避免污染。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：避免試劑與皮膚及粘膜接觸。6.2校準品：參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件6.3質(zhì)控品：參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品白蛋白校準值或標準品標準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果。手工測定計算方法為：Au白蛋白(g/L)=×校準液濃度As12.參考值范圍成人35～52g/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：白蛋白是血漿中多種物質(zhì)重要的結(jié)合與運輸?shù)鞍祝⑹蔷S持血漿滲透壓的主要組分。血清白蛋白可用于眾多疾病的診斷。血清白蛋白升高通常見于脫水的。血清白蛋白降低多見于營養(yǎng)不良、腎臟疾病，肝臟疾病，感染性疾病，嚴重的燒傷和癌癥。白蛋白的定量測定有助于對肝臟疾病如肝硬化的診斷與監(jiān)視。此外，白蛋白量反映了個體的健康與營養(yǎng)狀況，因此可用于營養(yǎng)不良的診斷及老年住院患者的預(yù)后評估。14.操作性能14.1線性范圍2～60g/L14.2精密度：重復(fù)性的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU1000批內(nèi)重復(fù)性小于3%，總不精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天間精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)樣品135.20.30.91樣品133.50.51.58樣品245.00.51.12樣品243.20.61.44樣品368.91.21.79樣品367.31.11.6014.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對59個樣品進行ALB檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.00x-1.1g/L；r=0.99814.4靈敏度：2g/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍：2～60g/L，如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。15.超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為60g/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。16.病危報警值的處理17.方法局限性17.1本法線性上限為60g/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度4.00g/L，甘油三酯濃度5.63mmol/L時沒有觀察到干擾。18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定（IFCC推薦法）實驗原理國際臨床化學(xué)學(xué)會(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測法。ALTLDH（乳酸脫氫酶）L-丙氨酸+-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸LDH（乳酸脫氫酶）丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是為了穩(wěn)定ALT活性，避免樣品中因內(nèi)源性磷酸吡哆醛不足造成測定結(jié)果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特別監(jiān)護病人的結(jié)果)[1]2.標本： 2.1病人準備：12小時禁食。2.2類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標本存放：3天內(nèi)的活性損失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；標本穩(wěn)定性：-20℃保存至少可穩(wěn)定4周。4.標本運輸：常溫條件下保存運輸。5.標本拒收標準：標本溶血、細菌污染的標本。6.實驗材料6.1試劑申能ALT測定試劑盒（貨號：141270171701試劑16×64ml試劑26×16ml）6.1.1試劑組成試劑1（R1）：Tris緩沖液pH7.5100mmol/LL-丙氨酸500mmol/LLDH（乳酸脫氫酶） ≥1200U/L試劑2（R2）：a-酮戊二酸 15mmol/LNADH 0.18mmol/L磷酸吡哆醛試劑：Good’s緩沖液pH9.60.7mmol/L磷酸吡哆醛 0.09mmol/L6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。6.2校準品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品ALT校準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以U/L報告。12.參考值范圍[4]不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛女性<31U/L10～35U/L男性<41U/L10～50U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義[1,2]：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）舊稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT），天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）。它們是氨基轉(zhuǎn)移酶類的典型代表。氨基轉(zhuǎn)移酶催化氨基從氨基酸轉(zhuǎn)移給-酮酸的反應(yīng)。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及肝組織損害等都有關(guān)。因此同時進行ALT和AST的檢測，可用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率用于肝病的鑒別診斷。比率<1預(yù)示中度的肝損傷；比率>1和嚴重肝病有關(guān)，常見慢性肝病。14.操作性能14.1線性范圍4～800U/L14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU1000批內(nèi)精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。不含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品122.80.703.08樣品122.21.386.22樣品242.60.681.60樣品244.81.172.62樣品399.30.920.92樣品31011.021.00含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)批間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品133.30.992.96樣品133.81.253.71樣品272.11.361.88樣品272.02.042.83樣品31331.761.32樣品31282.772.1614.3方法學(xué)比較：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對78個樣品進行ALT活力檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對80個樣品進行ALT活力檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.994。14.4靈敏度：本試劑的檢測限為4U/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍4U/L-800U/L15.超出范圍結(jié)果處理本法對ALT活力檢測的最大ΔA/min在340、334nm為0.16,在365nm為0.08。當樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1：9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10。16.病危報警值的處理17.方法局限性17.1本法對ALT活力檢測的最大ΔA/min在340、334nm為0.16,在365nm為0.08。當樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1：9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10。17.2干擾物質(zhì)：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度4.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶IFCC推薦方法測定1.實驗原理：國際臨床化學(xué)學(xué)會(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測法。L-天門冬氨酸+-酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+H+MDH蘋果酸脫氫酶L-蘋果酸+NAD++H2O2.標本： 2.1病人準備：12小時禁食。2.2類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標本存放：3天內(nèi)的活性損失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<10%；標本穩(wěn)定性：-20℃保存至少可穩(wěn)定3個月。4.標本運輸：常溫條件下保存運輸。5.標本拒收標準：標本溶血、細菌污染的標本。6.實驗材料6.1試劑：申能AST測定試劑盒（貨號：141260171701試劑1：6×64ml；試劑2：6×16ml）6.1.1試劑組成試劑1（R1）：Tris緩沖液pH7.880mmol/LL-天門冬氨酸 240mmol/LMDH(蘋果酸脫氫酶)≥600U/LLDH(乳酸脫氫酶) ≥600U/L試劑2(R2)：a-酮戊二酸 12mmol/LNADH 0.18mmol/L磷酸吡哆醛試劑：Good’s緩沖液pH9.60.7mmol/L磷酸吡哆醛0.09mmol/L6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。6.2校準品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品AST校準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果。不使用校準品進行AST活力檢測，可以直接使用ΔA/min均值乘以計算因子得到結(jié)果，但是這樣所得結(jié)果的可靠性不如使用校準品。計算ALT活力的計算因子見下表：ΔA/min×因子=AST活力[U/L]底物起始的反應(yīng)（37℃）樣品起始的反應(yīng)（37℃）340nm21431745334nm21841780365nm3971323512.參考值范圍[4]不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛女性<31U/L10～35U/L男性<37U/L10～50U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義[1,2]丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）舊稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT），天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）。它們是氨基轉(zhuǎn)移酶類的典型代表。氨基轉(zhuǎn)移酶催化氨基從氨基酸轉(zhuǎn)移給-酮酸的反應(yīng)。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及肝組織損害等都有關(guān)。因此同時進行ALT和AST的檢測用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率可用于肝病的鑒別診斷。比率<1預(yù)示中度的肝損傷；比率>1和嚴重肝病有關(guān)，常見慢性肝病。14.操作性能14.1線性范圍2-800U/L。14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU1000批內(nèi)精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。不含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品125.10.823.25樣品125.71.134.40樣品251.31.573.06樣品248.60.671.38樣品31160.900.77樣品31150.800.69含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品143.61.102.51樣品144.01.593.61樣品274.51.792.41樣品277.03.053.97樣品31743.181.83樣品31873.371.8014.3方法學(xué)比較：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對78個樣品進行AST活力檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=0.98x-0.51U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對80個樣品進行AST活力檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=0.97x-0.79U/L；r=0.995。14.4靈敏度：本試劑的檢測限為2U/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍2-800U/L。15.超出范圍結(jié)果處理：本法對AST活力檢測的最大ΔA/min在340、334nm為0.16，在365nm為0.08。當樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10。16.病危報警值的處理無。17.方法局限性17.1本法對AST活力檢測的最大ΔA/min在340、334nm為0.16,在365nm為0.08。當樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10。17.2干擾物質(zhì)：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。紅細胞內(nèi)富含AST，因此溶血血清檢測結(jié)果明顯偏高。18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清淀粉酶測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清堿性磷酸酶（ALP）磷酸對硝基苯酚法測定實驗原理堿性磷酸酶的活性由在pH值為10.4，2-氨基-2甲基-1-丙醇（AMP）存在的情況下測量p-硝基-磷酸苯酯（pNPP）的轉(zhuǎn)換速率決定。ALPpNPP+AMP﹥pNP+AMP-PO4在410/480nm測定pNP的生成速率，它與標本中ALP的活性成正比。2.標本采集與處理：2.1病人準備：無特殊要求。2.2標本類型：標本最好是無溶血的血清或肝素化的血漿。2.3血清分離：應(yīng)在收集后兩小時內(nèi)分離出來。避免使用含EDTA或草酸鹽的血漿。3.標本存放：2～3天內(nèi)的活性損失：15～25℃保存：<10%；標本穩(wěn)定性：4～8℃保存穩(wěn)定7天；-20℃保存至少可穩(wěn)定2個月標本。如果分析延遲8小時以上，最好把血清冷藏。冷凍的血清在融解后會表現(xiàn)出血清值的顯著降低。4.標本運輸：常溫條件下運輸5.標本拒收標準：細菌污染的不能做測定。6.實驗材料：6.1上海申能ALP測定試劑盒試劑16×64ml＋試劑26×16ml）6.1.1試劑組成試劑1：2-氨基-2甲基-1-丙醇（AMP）緩沖液0.90mol/L（pH:10.4）醋酸鎂1.6mmol/L硫酸鋅0.4mmol/LHEDTA2.0mmol/L試劑2：磷酸對硝基酚16.0mmol/L6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：原試劑避光保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：堿性磷酸酶試劑中含疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜。反應(yīng)過程中產(chǎn)生的對硝基苯酚有毒性，切勿吸入、吞食、接觸皮膚或粘膜。若反應(yīng)液與皮膚或粘膜接觸，請速用水沖洗。6.2校準品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品ALP校準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果。不使用校準品進行ALP活力檢測，可以直接使用ΔA/min均值乘以計算因子得到結(jié)果，但是這樣所得結(jié)果的可靠性不如使用校準品。計算ALP活力的計算因子見下：ΔA/min×因子=ALP活力[U/L]底物起始的反應(yīng)（37℃）樣品起始的反應(yīng)（37℃）05nm3433275712.參考值范圍成年人[4]男性20～50歲53～128U/L男性60歲以上56～119U/L女性20～50歲42～98U/L女性60歲以上53～141U/L兒童[5]男性女性1～30天75～319U/L48～406U/L1個月～1歲82～383U/L124～341U/L1歲～3歲104～345U/L108～317U/L4歲～6歲93～309U/L96～297U/L7歲～9歲86～315U/L69～325U/L10歲～12歲42～362U/L51～332U/L13歲～15歲74～390U/L50～162U/L16歲～18歲52～171U/L47～119U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義[1,2]：堿性磷酸酶（ALP）是一種在堿性條件下具有較強活性的水解酶，并以多種形態(tài)存在于血液中，其大多來自骨骼的成骨細胞和肝臟，也來源于其他一些組織例如腎臟、胎盤、腸、睪丸、胸腺、肺及腫瘤。在兒童生長期和妊娠期，血清中ALP生理性活性增高，骨疾病與肝膽疾病等引起ALP病理性活性增高。在肝膽疾病中引起ALP活性增高的原因包括膽道梗阻，例如因膽結(jié)石、腫瘤或炎癥造成的膽汁郁積。在傳染性肝炎中也可發(fā)現(xiàn)ALP活性增高。在骨疾病中，Paget病、骨軟化癥（佝僂?。⒐寝D(zhuǎn)移瘤和甲狀旁腺功能亢進等，使成骨活性升高引起ALP活力增高。14.操作性能14.1線性范圍2～850U/L14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的典型方法5，AU1000批內(nèi)不精密度小于5%，總不精密度小于10%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則7。批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)批間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品197.81.151.18樣品11031.061.02樣品21891.820.96樣品21881.040.55樣品32351.680.72樣品32361.640.7014.3方法學(xué)比較：本公司試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對78個樣品進行ALP活力檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.999。14.4靈敏度：本試劑的檢測限為2U/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍：2～850U/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法對ALP活力檢測的最大ΔA/min在405nm為0.25。當樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10。16.病危報警值的處理17.方法局限性17.1本法對ALP活力檢測的最大ΔA/min在405nm為0.25。當樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測定，結(jié)果乘以10。17.2干擾物質(zhì)：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度2.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清葡萄糖（氧化酶法）測定生效日期：2017.8.30頁碼：血清葡萄糖（GLU）氧化酶測定法實驗原理樣品中的葡萄糖在試劑中葡萄糖氧化酶（GOD）的催化作用下氧化生成葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶(POD)的催化下與苯胺類色原物質(zhì)和4-氨基安替比林作用產(chǎn)生水和醌亞胺色素，醌亞胺色素的生成量與樣品中葡萄糖的含量成正比，通過測定特定波長反應(yīng)最終生成的色素量，可以計算樣品中葡萄糖的濃度。2.標本： 2.1病人準備：12小時禁食。2.2類型：血清或血漿（EDTA，肝素或氟化鈉），標本最好不要溶血。迅速分離血清或血漿，減少紅細胞糖酵解時葡萄糖的損失。隨機收集尿樣。3.標本存放：血清、血漿應(yīng)在血液采集1小時內(nèi)，盡早分離。加入糖分解抑制劑（NaF，KF）后的穩(wěn)定性：15～25℃保存可穩(wěn)定1天,4～8℃保存可穩(wěn)定7天。血清中的葡萄糖，無溶血，無細菌污染，沒有添加的防腐劑，在25℃下可穩(wěn)定8個小時，在4℃下可穩(wěn)定72小時。尿樣應(yīng)保存在2～8℃下并盡快進行分析。腦脊髓液如果避免蒸發(fā)可在2～8℃下穩(wěn)定至少5天，5天內(nèi)不檢驗的標本應(yīng)在收集后立即儲存在-20℃的條件下。4.標本運輸：常溫條件下保存運輸。5.標本拒收標準：細菌污染、超時送檢的的標本。6.實驗材料6.1試劑迪瑞血糖測定試劑盒試劑14×50ml＋試劑21×50ml）6.1.1試劑組成試劑1：過氧化物酶375U\L4-羥基苯甲酸15mmol/L4-氨基安替比林0.75mmol/L磷酸鹽緩沖液110mmol/L試劑2：葡萄糖氧化酶6KU/L磷酸鹽緩沖液110mmol/L6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：此試劑為體外診斷用。不要入口，吞下有害。保護劑為疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜，與下水管中的鉛反應(yīng)形成爆炸性化合物，即使只含有少量的疊氮鈉，如排向下水道請用大量的水沖洗。6.2校準品：建議使用試劑盒配套的校準品，以純化水和校準品進行2點校準測定。測定后儀器自動擬合成校準曲線。當試劑號更換或質(zhì)控失控時。需要重新校準。具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：美康MH-880生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗美康MH-880生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗美康MH-880生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品血糖校準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以mmol/L報告。手工測定計算方法為：Au 葡萄糖濃度（mmol/L）＝×校準液濃度 As12.參考值范圍：（mmol/L）新生兒 臍帶血 3.5～8.81小時 2.0～5.52小時2.2～4.95～14小時1.9～4.310～28小時2.6～4.544～52小時2.7～4.4兒童（空腹）1～6歲4.1～7.07～19歲3.9～5.9成人（空腹）3.9～6.11參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：檢測血清或血漿中葡萄糖主要用于糖尿病的診斷和治療監(jiān)視，還可用于檢出新生兒低血糖癥、排除胰島細胞癌以及評估各種疾病碳水化合物代謝狀況。血清葡萄糖水平可能會異常高（高血糖）或異常低（低血糖）。葡萄糖測量用于診斷和治療碳水化合物代謝紊亂，包括糖尿病，新生兒低血糖，自發(fā)性低血糖，郎格罕氏島細胞癌等。葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，懷孕的婦女中很常見。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之間或一天之中有一個顯著的變化。腦脊髓液（CSF）葡萄糖的測定幫助區(qū)別病毒性腦膜炎與細菌性腦膜炎；細菌性腦膜炎和結(jié)核性腦膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至50%血清葡萄糖），病毒性腦膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性腦膜炎（腫瘤細胞在腦膜中廣泛滲透）也使CSF葡萄糖值在正常值以下。14.操作性能14.1線性范圍：0mmol/L～30mmol/L14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU1000批內(nèi)精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)批間精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)樣品15.050.0470.94樣品13.650.0772.11樣品26.500.0590.91樣品26.720.1422.11樣品316.100.1270.79樣品316.540.2961.7914.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對76個樣品進行GLU檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.00x+0.00mmol/L；r=0.998。14.4靈敏度：本試劑的檢測限為0.1mmol/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍：0.1～28mmol/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為30mmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:10稀釋，重新測定，結(jié)果乘以11。16.危急值的處理：女性及嬰兒的血糖測定值<2.2mmo/L或者>22.2mmol/L；男性的血糖測定值<2.7mmo/L或>22.2mmol/L；新生兒的血糖測定值<1.6mmo/L或>16.6mmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。17.方法局限性17.1本法線性上限為30mmol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:10稀釋，重新測定，結(jié)果乘以11。17.2干擾物質(zhì)：使用試劑起始法，當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0主題內(nèi)容血清尿素氮谷氨酸脫氫酶測定法生效日期：2017.8.30頁碼：血清尿素氮（BUN）谷氨酸脫氫酶測定法實驗原理脲酶-谷氨酸脫氫酶（Urease-GLDH）連續(xù)監(jiān)測法。尿素被脲酶水解產(chǎn)氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反應(yīng)生成谷氨酸，NADH同時被氧化成NAD＋。NADH的減少和樣品中尿素濃度成正比。本法是連續(xù)監(jiān)測法。脲酶尿素+2H2O2NH4＋+2HCO3－谷氨酸脫氫酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADHL-谷氨酸+NAD＋+H2O2標本：2.1病人準備：血清無特殊要求。要留取24小時尿樣。2.2類型：血清、血漿（不可使用肝素銨）、新鮮尿液。無溶血和凝塊的血清，如果必須使用血漿，建議使用無銨離子的抗凝血劑，如EDTA和肝素鈉。用新鮮尿液作樣品時，用蒸餾水作1:100稀釋。3.標本存放：血清或血漿穩(wěn)定性：4～25℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定1年。尿液穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定2天；4～8℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定1個月。4.標本運輸：常溫條件下保存運輸。5.標本拒收標準：細菌污染的標本。6.實驗材料6.1試劑：申能尿素測定試劑盒劑1：6×64ml＋試劑2：6×16ml）6.1.1試劑組成試劑1：Tris緩沖液pH7.8120mmol/Lα-酮戊二酸7mmol/LADP0.6mmol/L谷氨酸脫氫酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L試劑2：NADH0.25mmol/L6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存試劑保存于2～25℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：此試劑為體外診斷用。不要入口，吞下有害。保護劑為疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜，與下水管中的鉛反應(yīng)形成爆炸性化合物，即使只含有少量的疊氮鈉，如果排向下水道請用大量的水沖洗。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。6.2校準品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品尿素氮校準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果，以mmol/L報告。將尿素量乘以系數(shù)2.8可以換算成尿素氮量；將尿素氮量乘以系數(shù)0.357可以換算成尿素量。手工測定計算方法為：Au尿素氮濃度（mmol/L）＝×校準液濃度As12.參考值范圍血清/血漿[1]成人（mmol/L）全球2.8～7.2女性<50歲2.6～6.7女性>50歲3.5～7.5男性<50歲3.2～7.3男性>50歲3.0～9.2兒童1～3歲1.8～6.04～13歲2.5～6.014～19歲2.9～7.5尿素/肌酐比率[1]25～40[(mmol/L)/(mmol/L)]尿液[2]0.43～0.72mol/d（注：各實驗室應(yīng)有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：尿素是蛋白質(zhì)分解代謝的含氮終產(chǎn)物。高尿素血癥或氮血癥表現(xiàn)為血液中尿素水平升高。鑒別腎前和腎后氮血癥時可以同時檢測尿素和肌酐。因脫水、蛋白質(zhì)代謝增加、皮質(zhì)醇治療或腎臟灌注減少等引起的腎前氮血癥，表現(xiàn)為尿素水平升高而肌酐水平正常。由泌尿管道阻塞引起的腎后氮血癥，表現(xiàn)為尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度較小。發(fā)生腎病時，腎小球濾過作用明顯下降或蛋白質(zhì)攝入量大于200g/天都會導(dǎo)致尿素濃度升高。尿素氮的檢測用于診斷和治療某些腎臟疾病和代謝紊亂。尿素氮大約占血液中非蛋白氮的75%。它通過肝臟中的氨進行合成，是蛋白質(zhì)脫氨作用的產(chǎn)物。通過腎小球從血液中過濾尿素到尿中，是消除體內(nèi)多余氮的主要方法。血液尿素氮（BUN）水平是腎功能以及腎前狀態(tài)和腎后狀態(tài)的度量標準，腎前因素引起的BUN的升高包括心臟代償失調(diào)，缺水或增加的蛋白質(zhì)分解代謝。水平增加的腎臟因素有急性腎小球腎炎，慢性腎炎，多囊腎，腎纖維化和腎小管壞死。任何類型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的腎后因素1。腎小球清除尿素和肌酸酐，但是，尿素隨后部分地被腎小管重吸收，然而肌酸酐卻不會。因此，血清尿素氮和血清肌酸酐測定經(jīng)常同時用于腎功能的不同診斷中。14.操作性能14.1線性范圍：0.3～50mmol/L14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU1000批內(nèi)不精密度小于3%，總不精密度小于5%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)天間精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)樣品14.960.275.41樣品15.230.305.79樣品28.770.273.13樣品28.770.343.87樣品319.480.251.27樣品319.480.552.8614.3方法學(xué)比較：本公司的試劑(y)與某商品化試劑(x)，同時對68個樣品進行Urea檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=0.99x+0.176mmol/L；r=0.999。14.4靈敏度：本試劑的檢測限為0.3mmol/L。14.5病人結(jié)果可報告范圍：0.3～50mmol/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限血清/血漿為50mmol/L、尿液為5mol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%的氯化鈉溶液作1:2稀釋，重新測定，結(jié)果乘以3。16.病危報警值的處理：當尿素氮測定值>36mmol/L時，在經(jīng)過復(fù)查等確認手段處理后應(yīng)及時向臨床主管醫(yī)生匯報。17.方法局限性17.1本法線性上限血清/血漿為50mmol/L、尿液為5mol/L。如樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%的氯化鈉溶液作1:2稀釋，重新測定，結(jié)果乘以3。17.2干擾物質(zhì)：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。銨離子會影響檢測結(jié)果，因此收集血漿時勿用肝素銨抗凝！18.補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。檢驗科生化作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：YCWJZHMZB-2版本/修訂號：A/0生效日期：2017.8.30主題內(nèi)容血清肌酐（酶法）測定頁碼：血清肌酐（Creatine）酶法測定實驗原理樣本中的肌酐在試劑中肌酐酰胺水解酶的催化下水解成肌酸，肌酸在試劑中肌酸脒基水解酶的催化作用下，被水解成肌氨酸和尿素，肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下，生成肌氨酸與水和氧反應(yīng)，產(chǎn)生甘氨酸、甲醛和過氧化氫。生成的過氧化氫在過氧化物酶的催化下與苯胺類色原物質(zhì)和4-氨基安替比林作用產(chǎn)生水和醌亞胺色素的生成量與樣本中總肌酐的含量成正比，通過測定特定波長處反應(yīng)最終生成的色素量，可計算出樣品中總肌酐的濃度。2.標本采集2.1病人準備：早晨空腹采血（空腹12小時左右），靜脈采血。2.2類型：血清，肝素血漿，尿液。2.3血漿樣本應(yīng)采用EDTA抗凝，應(yīng)不溶血。樣本采集后應(yīng)盡快分析。3.標本存放：血清、血漿的穩(wěn)定性：4～25℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存至少可穩(wěn)定3個月。尿液的穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定2天；4～8℃保存可穩(wěn)定6天；-20℃保存可穩(wěn)定6個月對尿液用蒸餾水作1:49稀釋后檢測，結(jié)果乘50后報告。4.標本運輸：常溫條件下運輸5.標本拒收的標準：細菌污染的標本不能作測定。6.實驗材料6.1長春迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司試劑1：4×50ml＋試劑2：1×50ml）。6.1.1試劑組成：試劑1（R1）：Tris緩沖液100mmol/L、N-乙基-N磺基羥丙基-間-甲苯胺2mmol/、氯化鉀20mmol/、肌酸脒基水解酶400KU/L、肌氨酸氧化酶8KU/、辣根過氧化物酶700U/L.試劑2（R2）：Tris緩沖液100mmol/L、乙酸酶2mmol/L、4-氨基安替比林1.2mmol/L、肌酐酰胺水解酶40ku/L.6.1.2試劑準備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～25℃，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項：1.1本品僅用于體外診斷。1.2避免測試中途添加試劑。1.3試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比列改變。1.4若試劑混濁，不能再使用。6.2校準品：建議使用試劑盒配套的校準品，以純化水和校準品進行2點校準測定。測定后儀器自動擬合成校曲線。當試劑批號更換或質(zhì)控失控時、需要重新校準。6.3質(zhì)控品：建議使用迪瑞公司的質(zhì)控品，進行質(zhì)量控制。實驗室自行建立質(zhì)控區(qū)間和限值。若質(zhì)控值失控，每個實驗室應(yīng)采取糾正措施。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標本進行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法：以TruCalU復(fù)合校準品肌酐校準值校準儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠檢測結(jié)果，以mmol/L報告。12.參考值范圍血清/血漿[1]女性45～84mmol/L男性59～104mmol/L尿液[1]女性177～195mmol/L男性210～230mmol/L13.臨床意義：肌酐是通過腎臟經(jīng)由腎小球濾過作用排泄的廢物。健康人血漿中肌酐的濃度相當穩(wěn)定，與每天水的攝取量、活動和生成尿量無關(guān)。因此血漿肌酐水平升高常指示排泄量的降低，即腎功能受損。肌酐清除率能較好地評估腎小球濾過率（GFR），通過它能較好地檢出腎病和監(jiān)視腎功能。為此，在規(guī)定的時間內(nèi)同時收集血清和尿液，進行肌酐檢測。肌酐經(jīng)腎小球濾過后不被腎小管重吸收,通過腎小管排泄。在腎臟疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至腎臟實質(zhì)性損害,血清肌酐值才增高。在正常腎血流條件下，肌酐值如升高至176～353μmol/L,提示為中度至嚴重的腎損害。所以,血肌酐測定對晚期腎臟病臨床意義較大。14.操作性能14.1線性范圍：0μmol/L～2500μmol/L14.2精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU1000批內(nèi)不精密度小于3%，總不精密度小于5%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)批間精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)樣品171.62.63.63樣品169.84.56.45樣品2141.41.20.87樣品2137.93.32.38樣品3506.54.30.85樣品3507.44.20.8314.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對68個樣品進行Crea檢測，將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=1.01x-2.65mol/L；r=1.000。14.