安徽省淮北市濉溪縣2025屆高考仿真模擬生物試卷含解析

安徽省淮北市濉溪縣2025屆高考仿真模擬生物試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列與“中心法則”有關(guān)的敘述，錯誤的是（）A．核酸苷序列不同的基因可表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)B．基因轉(zhuǎn)錄形成的RNA產(chǎn)物中，可能存在氫鍵C．RNA聚合酶具有催化DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)形成的功能D．HIV的遺傳物質(zhì)可直接整合到宿主細(xì)胞的遺傳物質(zhì)中2．下列關(guān)于實驗操作的分析，正確的是（）A．撕取洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞，用臺盼藍(lán)和蔗糖溶液處理后無法觀察到質(zhì)壁分離現(xiàn)象B．觀察誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目變化時，低倍鏡找到染色體數(shù)目改變的細(xì)胞后換高倍鏡觀察C．將淀粉溶液和淀粉酶混勻后，滴加HCl或NaOH溶液用于研究pH對酶活性的影響D．檢測酵母菌數(shù)量時，靜置培養(yǎng)液再取樣，計數(shù)時不宜統(tǒng)計所有壓在方格界線上的菌體3．某小組同學(xué)利用油茶植株進(jìn)行了實驗，各組實驗結(jié)果及處理如下圖所示，其他環(huán)境條件相同且適宜。下列說法錯誤的是（）A．該實驗?zāi)康氖茄芯抗夂袭a(chǎn)物輸出對光合作用的影響B(tài)．該實驗材料應(yīng)選擇生長發(fā)育狀態(tài)相同的油茶植株C．該實驗的自變量是果實與葉片數(shù)目比D．該實驗結(jié)果中的凈光合速率是指實驗前后果實中有機(jī)物的積累量4．下列有關(guān)免疫學(xué)應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A．用人工標(biāo)記的抗體可以對組織內(nèi)相應(yīng)的抗原進(jìn)行檢測B．抑制T細(xì)胞增殖可降低異體器官移植的免疫排斥反應(yīng)C．注射動物血清的目的是刺激機(jī)體產(chǎn)生記憶細(xì)胞和抗體D．注射青霉素前進(jìn)行皮試能判斷機(jī)體是否對青霉素過敏5．正常人感染病毒后可引起發(fā)熱，下圖是發(fā)熱機(jī)理的一種假說，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．機(jī)體可通過皮膚毛細(xì)血管舒張的方式散熱B．人體發(fā)燒，體溫持續(xù)39℃時產(chǎn)熱量大于散熱量C．若同種病毒第二次入侵，產(chǎn)生的癥狀可能較輕D．利用此原理制備藥物使調(diào)定點下降，可使高燒患者體溫恢復(fù)到正常水平6．下列有關(guān)細(xì)胞物質(zhì)的敘述，正確的是A．脂質(zhì)具有構(gòu)成生物膜、調(diào)節(jié)代謝和儲存能量等生物學(xué)功能B．組成蛋白質(zhì)、核酸、糖原的單體都具有多樣性C．核糖體與酶、抗體、激素、神經(jīng)遞質(zhì)的合成都有關(guān)D．DNA是主要的遺傳物質(zhì)，可通過噬菌體侵染細(xì)菌的實驗來證明7．下圖為人體內(nèi)細(xì)胞間信息交流的某些方式的示意圖。以下敘述錯誤的是A．在A、B、C三圖中，靶細(xì)胞都是通過細(xì)胞膜上的受體接受信號分子B．從圖中可以看出細(xì)胞間的信息交流方式多種多樣C．細(xì)胞膜上有信息接受功能的物質(zhì)很可能為糖蛋白D．細(xì)胞間都是通過相鄰細(xì)胞的細(xì)胞膜的接觸傳遞信息8．（10分）豌豆花瓣紅色對白色顯性，由一對等位基因B/b控制。某豌豆植株比正常植株多一條發(fā)生缺失突變的染色體。如圖所示，僅獲得缺失染色體的花粉不育，而這樣的雌配子是可育的。減數(shù)分裂配對的三條染色體中，任意配對的兩條染色體分離時，另一條隨機(jī)移向細(xì)胞任一極。下列敘述正確的是（）A．用光學(xué)顯微鏡在該植物根尖臨時裝片中可以觀察到變異的細(xì)胞B．該植物產(chǎn)生可育雄配子的種類及比例為BB：Bb：B：b=1：2：2：1C．以該植株為父本與正常植株雜交，則1/2的子代含有缺失染色體D．若該植株自交，預(yù)測子一代的性狀分離比是紅花：白花=1：29二、非選擇題9．（10分）斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中選擇性表達(dá)，研究人員構(gòu)建了HuC基因的表達(dá)載體，并導(dǎo)入到斑馬魚細(xì)胞中研究其作用，請回答：（1）為獲取HuC基因，研究人員從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過_________獲得大量的DNA，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的______________。（2）DraⅢ，SnaBⅠ等是質(zhì)粒上不同限制酶的切割位點。為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的____________酶進(jìn)行切割，這樣做的原因是_________。不選擇NotⅠ酶切割的原因是_____________。（3）用Ca2+處理大腸桿菌，大腸桿菌細(xì)胞即能夠______________。實驗過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察________________________或者在培養(yǎng)基中添加______________，篩選出導(dǎo)入表達(dá)載體的大腸桿菌。10．（14分）患者男，48歲，發(fā)熱伴寒戰(zhàn)，入院進(jìn)行血液B超及CT檢查，疑似肝膿腫。其中細(xì)菌性肝膿腫的主要病原菌是：大腸埃希菌、克雷伯菌、鏈球菌、金黃色葡菊球菌、厭氧菌等。近年來，克雷伯桿菌感染導(dǎo)致的細(xì)菌性肝膿腫患者比例有增高的趨勢，為確定致病原因需要進(jìn)行細(xì)菌的培養(yǎng)及藥敏實驗檢查病原體種類。請回答下列問題：（1）細(xì)菌培養(yǎng)一般在30~37℃，pH調(diào)至____________，進(jìn)行無菌操作。對接種環(huán)等金屬用具，直接在灑精燈火焰的____________灼燒，可以迅速徹底地滅菌。（2）微生物接種的方法很多，最常用的方法有____________法。雖然這些技術(shù)的操作方法各不相同，但是，其核心都是防止雜菌的污染，保證____________________________________。（3）區(qū)分細(xì)菌種類可以通過多種途徑，如生化試驗IMVC試驗可用于腸道桿菌鑒定，其中大腸埃希菌、克雷伯菌鑒定結(jié)果分別是++--.--++；還可以通過菌落特征，如菌落的____________等的不同來區(qū)別。常用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目的方法是_____________，測定細(xì)菌數(shù)量的方法還有____________法，無論哪種方法得到的細(xì)菌數(shù)量都是____________值。11．（14分）咔唑（含N有機(jī)物）具有潛在致癌性，且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定難以清除。為了獲得高效降解咔唑的微生物，研究人員設(shè)計了如圖所示的實驗方案（①～⑦表示相應(yīng)的標(biāo)注操作過程）。請回答下列問題。（1）圖示所用的“CNFM+咔唑”培養(yǎng)基，屬于_________培養(yǎng)基。（2）②操作的接種采用______（實驗器具）。（3）④操作的接種采用_______方法，其中平板培養(yǎng)的目的是________。（4）在相同、適應(yīng)環(huán)境中進(jìn)行上述“多瓶培養(yǎng)”操作，可以初步確定_________的錐形瓶中含有高效降解咔唑的微生物。（5）為鑒定下圖1平板中的微生物種類，可作為鑒定依據(jù)的有______。（6）為了將圖1培養(yǎng)基中的真菌與細(xì)菌分離，新制了PDA培養(yǎng)基（含馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、蒸餾水）并加入青霉素（抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成）。接種時用絨布輕按圖1培養(yǎng)基表面，使絨布面沾上菌落，再將絨布輕按在新制培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)結(jié)果如圖2所示①比較圖1、2可知，圖1中菌落______（填編號）為細(xì)菌，判斷理由是______。②圖2中出現(xiàn)菌落5的原因可能是______（寫出三種）。12．細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、代謝、遺傳等都與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)，而對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用，首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。從紅細(xì)胞中提取和分離血紅蛋白的流程圖如下：回答下列問題。（1）流程圖中步驟A、B分別是____________，步驟B所用方法的原理是__________。（2）洗滌紅細(xì)胞的目的是_________，此過程中若離心速度過高和時間過長會導(dǎo)致________。（3）在利用凝膠色譜法純化血紅蛋白的過程中，色譜柱不能有氣泡存在，原因是__________。在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為1．0)的目的是______。（4）在上述實驗中利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的目的是_____________________。（5）下圖1、2是某同學(xué)利用電泳法和凝膠色譜法分離同一種樣品得到的結(jié)果，則在圖2中與圖中蛋白質(zhì)P對應(yīng)的是______________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

中心法則：（1）遺傳信息可以從DNA流向DNA，即DNA的復(fù)制；（2）遺傳信息可以從DNA流向RNA，進(jìn)而流向蛋白質(zhì)，即遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯．后來中心法則又補充了遺傳信息從RNA流向RNA以及從RNA流向DNA兩條途徑?！驹斀狻緼、由于密碼子具有簡并性，因此核苷酸序列不同的基因可表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)，A正確；B、基因轉(zhuǎn)錄形成的tRNA中存在雙鏈區(qū)，含有氫鍵，B正確；C、轉(zhuǎn)錄時RNA聚合酶具有解開DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的功能，并以DNA的一條鏈為模板合成RNA，C正確；D、HIV的遺傳物質(zhì)為RNA，故需通過逆轉(zhuǎn)錄形成DNA后才能整合到宿主細(xì)胞的染色體中，D錯誤。故選D。【點睛】本題考查中心法則及其發(fā)展，要求考生識記中心法則的主要內(nèi)容及后人對其進(jìn)行的補充和完善，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查。2、B【解析】

1、當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到外界溶液中，由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的伸縮性大，當(dāng)細(xì)胞不斷失水時，液泡逐漸縮小，原生質(zhì)層就會與細(xì)胞壁逐漸分離開來，即發(fā)生了質(zhì)壁分離；2、低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實驗：低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實驗的原理：低溫能抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍；該實驗的步驟為選材→固定→解離→漂洗→染色→制片；該實驗采用的試劑有卡諾氏液（固定）、改良苯酚品紅染液（染色），體積分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸溶液和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液（解離）。3、探究酵母菌種群數(shù)量的變化實驗中，實驗流程為：（1）酵母菌培養(yǎng)（液體培養(yǎng)基，無菌條件）→（2）振蕩培養(yǎng)基（酵母菌均勻分布于培養(yǎng)基中），滴加培養(yǎng)液時，應(yīng)先加蓋玻片，再在蓋玻片的邊緣滴加培養(yǎng)液→（3）觀察并計數(shù)→重復(fù)（2）、（3）步驟（每天計數(shù)酵母菌數(shù)量的時間要固定）→繪圖分析?！驹斀狻緼、臺盼藍(lán)可以將死細(xì)胞染色，不能將活細(xì)胞染色，而細(xì)胞壁具有全透性；所以撕取洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞，用臺盼藍(lán)和蔗糖溶液處理后，細(xì)胞如果是獲得，并且蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液濃度，可以觀察到藍(lán)色范圍變大，說明細(xì)胞發(fā)生了質(zhì)壁分離，A錯誤；B、觀察誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目變化時，低倍鏡找到染色體數(shù)目改變的細(xì)胞后換高倍鏡觀察，B正確；C、研究pH對酶活性的影響，需要先對酶和底物分別調(diào)節(jié)pH后再混合，C錯誤；D、檢測酵母菌數(shù)量時，需要將培養(yǎng)液振蕩搖勻再取樣，計數(shù)時壓在線上的菌種，按照記上不記下，記左不計右的原則，D錯誤。故選B。【點睛】本題綜合考查教材實驗，需要考生識記實驗的原理、材料、操作步驟、結(jié)果及結(jié)論。3、D【解析】

1．根據(jù)下圖中實驗處理可知，果實個數(shù)未變，葉片數(shù)逐漸增多，果與葉數(shù)目比越來越小；2．根據(jù)上圖中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組結(jié)果表明，果與葉數(shù)目比越大，葉片的凈光合速率越高，據(jù)此答題?！驹斀狻緼、果實發(fā)育需要較多的有機(jī)物，去除部分葉片后，剩余葉片的光合產(chǎn)物有機(jī)物輸出量增大，導(dǎo)致光合速率增大，據(jù)圖形分析可知，該實驗的目的是研究光合產(chǎn)物輸出對光合作用的影響，A正確；BC、該實驗的自變量是果實與葉片數(shù)目比，其余為無關(guān)變量，無關(guān)變量要保持相同且適宜，因此選取的實驗材料油茶植株生長發(fā)育狀態(tài)應(yīng)該相同，BC正確；D、該實驗結(jié)果中的凈光合速率是指實驗前后單位時間內(nèi)果實中有機(jī)物的積累量，D錯誤。故選D。4、C【解析】

體液免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：B細(xì)胞接受抗原刺激后，開始進(jìn)行一系列的增殖、分化，形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞；（3）效應(yīng)階段：漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)。細(xì)胞免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：吞噬細(xì)胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：T細(xì)胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，同時T細(xì)胞能合成并分泌淋巴因子，增強(qiáng)免疫功能；（3）效應(yīng)階段：效應(yīng)T細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng)?！驹斀狻緼、根據(jù)抗原和抗體特異性結(jié)合原理，用人工標(biāo)記的抗體可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行檢測，A正確；B、T細(xì)胞在特異性免疫中發(fā)揮重要作用，抑制T細(xì)胞增殖可降低異體器官移植的免疫排斥反應(yīng)，B正確；C、動物血清中含有相應(yīng)的抗體，因此注射動物血清是為了中和相應(yīng)的抗原，C錯誤；D、對青霉素過敏的人而言，青霉素是一種過敏原，進(jìn)入人體后，引起人體產(chǎn)生過敏反應(yīng)，所以注射青霉素前一定要進(jìn)行皮試，D正確。故選C。5、B【解析】

機(jī)體的體溫調(diào)節(jié)是神經(jīng)和激素（體液）共同調(diào)節(jié)的結(jié)果，與神經(jīng)調(diào)節(jié)相比體液調(diào)節(jié)反應(yīng)速度緩慢、作用范圍較廣、時間較長。在寒冷的條件下甲狀腺激素和腎上腺素含量增加，促進(jìn)新陳代謝，導(dǎo)致產(chǎn)熱量增多，以維持體溫正常。皮膚是與體溫調(diào)節(jié)相關(guān)的重要器官，其中血管舒張調(diào)節(jié)是為了增加散熱量，血管收縮是為了減少散熱量。產(chǎn)熱量=散熱量，體溫恒定。【詳解】A、皮膚毛細(xì)血管舒張有利于增加體表的血流量，是機(jī)體常見的散熱方式，A正確；B、人體體溫恒定時，機(jī)體的產(chǎn)熱量等于散熱量，B錯誤；C、同種病毒第二次入侵時，因為機(jī)體內(nèi)可能存在能特異性識別這種病毒的記憶細(xì)胞，其可以快速增殖分化產(chǎn)生大量漿細(xì)胞，迅速產(chǎn)生大量抗體，并快速阻止病毒的入侵，故產(chǎn)生的癥狀可能較輕，C正確；D、據(jù)圖可知，發(fā)熱時體溫升高的原因是下丘腦體溫調(diào)定點升高，故用藥物降低體溫調(diào)定點可以用來治療高燒，D正確。故選B?！军c睛】本題考查機(jī)體體溫調(diào)節(jié)和免疫的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識點間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能理論聯(lián)系實際，綜合運用所學(xué)知識解決社會生活中的一些生物學(xué)問題。6、A【解析】

A、脂質(zhì)中的磷脂是構(gòu)成細(xì)胞膜及細(xì)胞器膜的重要成分，膽固醇也是構(gòu)成細(xì)胞膜的重要成分，脂質(zhì)中的性激素具有調(diào)節(jié)代謝的作用，脂質(zhì)中的脂肪是細(xì)胞內(nèi)良好的儲能物質(zhì)，A項正確；B、組成蛋白質(zhì)的單體是氨基酸（約為20種），組成核酸的單體是8種核苷酸，組成糖原的單體是葡萄糖（1種），所以組成蛋白質(zhì)、核酸的單體都具有多樣性，組成糖原的單體不具有多樣性，B項錯誤；C、核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所，與絕大多數(shù)酶、抗體及蛋白質(zhì)類激素的合成都有關(guān)，C項錯誤；D、DNA是主要的遺傳物質(zhì)，但噬菌體侵染細(xì)菌的實驗只能證明噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA，D項錯誤。故選A?！军c睛】解答該題的易錯點在于：因不清楚“DNA是主要的遺傳物質(zhì)”的結(jié)論是如何形成的而誤選Ｄ。事實是：就整個生物界而言，絕大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)是DNA，所以DNA是主要的遺傳物質(zhì)。7、D【解析】

A、A、B、C三圖中，靶細(xì)胞都是通過細(xì)胞膜上的受體接受信號分子，A正確；

B、從圖中可以看出細(xì)胞間的信息交流方式多種多樣，B正確；

C、細(xì)胞膜上的受體化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白，C正確；

D、細(xì)胞間的信息傳遞形式有三種類型,一是通過化學(xué)物質(zhì),二是通過細(xì)胞膜直接接觸,三是通過胞間連絲,所以細(xì)胞間的信息交流不都是通過相鄰細(xì)胞的細(xì)胞膜的接觸傳遞信息，故D錯誤。

故選D。8、A【解析】

根據(jù)題意和圖示分析，含基因B的一條染色體發(fā)生缺失，且多了一條含基因B的正常染色體。BBb在減數(shù)分裂時，三條染色體可以隨機(jī)兩兩聯(lián)會，剩余的一條隨機(jī)移向一極，可產(chǎn)生BB、Bb、B、b四種配子。【詳解】A、染色體變異可以通過該植物根尖分生區(qū)臨時裝片用光學(xué)顯微鏡觀察，A正確；B、由于三條染色體可以隨機(jī)兩兩聯(lián)會，剩余的一條隨機(jī)移向一極，且僅獲得缺失染色體的花粉不育，故該植株減數(shù)分裂能可育雄配子的種類及比例為BB：Bb：B：b=1：2：1：1，B錯誤；C、據(jù)上分析可知，該植株減數(shù)分裂能可育雄配子的種類及比例為BB：Bb：B：b=1：2：1：1，其中BB及一半的Bb含有缺失染色體，與正常植株為母本，則雜交后代2/5植株含缺失染色體，C錯誤；D、由于可育的雄配子為BB：Bb：B：b=1：2：1：1，可育雄配子b占1/5，雌配子BB：Bb：B：b=1：2：2：1，即雌配子b占1/6，其后代白花bb=1/5×1/6=1/30，故子一代的性狀分離比是紅花：白花=29：1，D錯誤。故選A。二、非選擇題9、逆轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù)擴(kuò)增cDNA文庫EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接破壞標(biāo)記基因無法篩選（且沒有啟動子）吸收周圍環(huán)境中的DNA分子表達(dá)的綠色熒光蛋白菌落卡那霉素【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成目的基因，并通過PCR技術(shù)在體外擴(kuò)增可獲得大量的目的基因，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的cDNA文庫。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，不能破壞運載體上的啟動子、復(fù)制原點，以及運載體上需要保留標(biāo)記基因，為了防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接，常用不同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，結(jié)合圖示中各種限制酶的酶切位點可知，為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶進(jìn)行切割?？敲顾乜剐曰驗闃?biāo)記基因，若用NotⅠ酶切割，將會導(dǎo)致卡那霉素抗性基因被破壞，且切割后的質(zhì)粒會失去啟動子，使基因表達(dá)載體中缺少標(biāo)記基因無法選擇，且沒有啟動子無法轉(zhuǎn)錄，所以不選擇NotⅠ酶切割質(zhì)粒。（3）用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞，易于吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。由于綠色熒光蛋白表達(dá)后會發(fā)綠光，所以實驗過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察表達(dá)的綠色熒光蛋白菌落或者在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選出導(dǎo)入表達(dá)載體的大腸桿菌?！军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。10、中性或微堿性充分燃燒層平板劃線法和稀釋涂布平板培養(yǎng)物的純度大小、形狀、顏色稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(shù)估計【解析】

統(tǒng)計細(xì)菌數(shù)量的方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)，在統(tǒng)計菌落數(shù)目時，采用稀釋涂布平板法來培養(yǎng)細(xì)菌。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個細(xì)菌，但菌落數(shù)往往比活菌的試劑數(shù)目低，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計數(shù)。另一種方法是直接計數(shù)法，這種方法要借助顯微鏡，且統(tǒng)計的數(shù)目也包括死亡的細(xì)菌。【詳解】（1）微生物生命活動需要一定的條件，不同的微生物需要不同的培養(yǎng)溫度和pH，細(xì)菌生活的溫度一般在30~37℃，pH調(diào)至中性或微堿性，霉菌一般在25~28℃，pH調(diào)至酸性培養(yǎng)。接種時，對接種環(huán)等金屬用具通常用灼燒滅菌法，具體做法是：直接在灑精燈火焰的充分燃燒層灼燒。（2）微生物接種方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，還包括斜面接種和穿刺接種等方法。雖然這些技術(shù)的操作方法各不相同，但是其核心都是要防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度。（3）區(qū)分細(xì)菌種類可以通過多種途徑，如通過鑒別菌落的特征或通過生化試驗完成，故大腸埃希菌、克雷伯菌鑒定結(jié)果可通過菌落的大小、形態(tài)、顏色等的不同來區(qū)別。常用來統(tǒng)計活菌數(shù)量的方法是稀釋涂布平板法，顯微鏡直接計數(shù)也可以測定細(xì)菌數(shù)量，但都是估計值?！军c睛】熟知微生物培養(yǎng)的有關(guān)操作是解答本題的關(guān)鍵，另懂得菌落的含義以及菌落的特征是解答本題的另一關(guān)鍵！11、選擇移液管稀釋涂布平板法篩選出高效降解咔唑的微生物含咔唑濃度最低的菌落的大小、形狀、顏色和表面情況等3、4細(xì)菌無法在含青霉素的培養(yǎng)基中生長絨布未滅菌、被抗青霉素細(xì)菌污染、培養(yǎng)基滅菌不徹底【解析】

閱讀題干和題圖可知，本題是利用微生物培養(yǎng)的知識分離高效降解有機(jī)污染物的細(xì)菌，先分析題圖了解分離高效降解有機(jī)污染物的內(nèi)容，然后根據(jù)問題的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識點分析解答?！驹斀狻浚?）圖示所用的“CNFM+咔唑”培養(yǎng)基，只允許分解咔唑的微生物生長，具有選擇性，屬于選擇培養(yǎng)基；（2）從三角錐形瓶中準(zhǔn)確移取一定體積的液體所用的儀器為移液管；（3）從錐形瓶中取菌液接種，用稀釋涂布平板法可使接種細(xì)菌逐漸稀釋，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)，可能形成單個、獨立的菌落；再利用含咔唑的固體培養(yǎng)基進(jìn)行二次篩選，可以獲得高效降解咔唑的微生物；（4）在相同、適應(yīng)環(huán)境中進(jìn)行多瓶培養(yǎng)操作，瓶中咔唑的剩余量可以初步反應(yīng)篩選的微生物對咔唑的降解能力，剩余咔唑量最低的錐形瓶中，篩選的微生物的降解能力最高；（5）菌落特征是細(xì)菌分類的依據(jù)之一，所以可以通過觀察菌落特征鑒定或區(qū)分不同的菌種，如顏色、大小、干濕、氣味、表面情況等；（6）①由于細(xì)菌無法在含青霉素的培養(yǎng)基中生長