安徽省黃山市徽州區(qū)一中2025屆高三3月份第一次模擬考試生物試卷含解析

安徽省黃山市徽州區(qū)一中2025屆高三3月份第一次模擬考試生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1．下列可以稱為種群密度的是（）A．浙江省嘉興市的人口數(shù)量 B．池塘中一立方米內(nèi)魚的數(shù)量C．一個蜂巢中所有工蜂數(shù)量 D．穩(wěn)定型生物種群的個體數(shù)量2．將生長狀態(tài)一致的某種植物幼苗分成甲、乙兩組，分別移人同種適宜的營養(yǎng)液中在光下培養(yǎng)，并給甲組的營養(yǎng)液適時(shí)通人空氣，乙組不進(jìn)行通氣處理。一定時(shí)間后測得甲組的根對a離子的吸收速率遠(yuǎn)大于乙組的。由此說明根細(xì)胞對a離子的吸收過程屬于（）A．主動運(yùn)輸 B．被動運(yùn)輸C．自由擴(kuò)散 D．協(xié)助擴(kuò)散3．如圖表示甲狀腺素(T)的作用機(jī)理，R是甲狀腺素的受體蛋白，下列敘述正確的是（）A．每個甲狀腺素分子含3個碘原子 B．甲狀腺素的受體在細(xì)胞核內(nèi)合成C．甲狀腺素通過影響DNA復(fù)制發(fā)揮作用 D．圖中的細(xì)胞可以是全身各組織細(xì)胞4．果醋飲料被譽(yù)為“第六代黃金飲品”，是集營養(yǎng)、保健、食療等功能為一體的新型飲料。下列有關(guān)果醋制作的敘述，錯誤的是（）A．從變酸的葡萄酒表面獲得菌膜，可以分離得到醋酸菌B．當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌先將酒精變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿酑．在果醋制作過程中，應(yīng)嚴(yán)格控制發(fā)酵溫度在30~35℃D．在果醋制作過程中，發(fā)酵液表面應(yīng)添加一層液體石蠟，以利于發(fā)酵5．冠狀病毒具有包裹在蛋白質(zhì)衣殼外的一層包膜，這層包膜主要來源于宿主細(xì)胞膜(磷脂層和膜蛋白)，還含有一些病毒自身的糖蛋白，可與宿主細(xì)胞膜融合。下列相關(guān)推理錯誤的是（）A．包膜的存在有利于維護(hù)病毒結(jié)構(gòu)的完整性，無包膜病毒更容易被滅活B．病毒包膜具有抗原性，可以幫助病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞C．冠狀病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞的方式與噬菌體是相同的D．子代病毒的形成，需要宿主細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體參與6．下列有關(guān)基因重組的敘述，正確的是（）A．基因重組是隨機(jī)的不定向的B．基因重組發(fā)生在受精作用過程中C．基因重組可以產(chǎn)生新的性狀D．基因重組是生物變異的根本來源二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）克隆豬成功率較低，與早期胚胎細(xì)胞異常凋亡有關(guān)。Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可以檢測該基因轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞淍亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如圖。請回答：(1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自____細(xì)胞，早期胚胎移入受體子宮繼續(xù)發(fā)育，經(jīng)桑椹胚、囊胚和____胚最終發(fā)育為克隆豬。(2)在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù)，進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平。①圖中X表示____過程。②從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成____用于PCR擴(kuò)增，PCR過程第一輪循環(huán)的模板是____。8．（10分）擬南芥種子萌發(fā)時(shí)，下胚軸頂端形成彎鉤（頂勾，如圖1），在破土而出時(shí)起到保護(hù)子葉與頂端分生組織的作用。為研究生長素（IAA）與頂端彎曲的關(guān)系，科研人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。（1）擬南芥種子萌發(fā)時(shí)，頂端分生組織產(chǎn)生的IAA運(yùn)輸至頂勾處，促進(jìn)細(xì)胞的_________生長。由于IAA的作用具有_________性，低濃度促進(jìn)生長，高濃度抑制生長，頂勾兩側(cè)細(xì)胞生長狀況不同，因而彎曲度發(fā)生改變。（2）科研人員發(fā)現(xiàn)一株TMK基因缺失的突變體（tmk突變體），用_________法將含TMK基因的T-DNA轉(zhuǎn)入tmk突變體中，分別測定三種不同擬南芥種子萌發(fā)時(shí)，頂勾處的彎曲度，得到圖2所示結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示_________。（3）科研人員進(jìn)一步測定了三種植株頂勾彎曲處內(nèi)外側(cè)（如圖3）的細(xì)胞長度，結(jié)果如圖4。據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測，tmk突變體頂勾彎曲度改變的原因是其頂勾彎曲處_________。（4）科研人員推測，不同濃度的IAA可能通過TMK蛋白調(diào)控細(xì)胞生長（機(jī)理見圖5），在IAA濃度較高時(shí)，tmk突變體無法剪切TMK蛋白。一種從分子水平證實(shí)這一推測的思路是：測定并比較_________植株的頂勾彎曲處_________（填內(nèi)側(cè)或外側(cè)）細(xì)胞的_________量。9．（10分）某人被困荒野一天，斷水?dāng)嗉Z，在焦慮和恐懼中持續(xù)找路，最終找到出路。分析以下生理過程。（1）此人一天未進(jìn)食，血糖濃度基本穩(wěn)定，其血糖的主要來源是___________。（2）此人焦慮、恐懼和心跳加快的生理過程與___________調(diào)節(jié)機(jī)制有關(guān)。（3）此人缺水導(dǎo)致___________升高，尿量減少，其調(diào)節(jié)過程是：___________。10．（10分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達(dá)到防治目的，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種?；卮鹣铝袉栴}：（1）通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴(kuò)增出cDNA。在PCR過程中，兩個引物是_____酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測方法是_____。11．（15分）VNN1基因（1542bp）與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān)，GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應(yīng)波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進(jìn)行鼠源GFP-VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究，回答下列問題：（l）為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列，并設(shè)計(jì)引物。上游引物：5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點(diǎn)），下游引物：5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?（下劃線為BamHI酶切位點(diǎn)），之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR的原理是________。擴(kuò)增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接，需用________（填具體酶）切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用________酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。（2）GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________，其作用是________。用之前相同的限制酶對GFP-VNNI重組質(zhì)粒切割后，進(jìn)行電泳鑒定時(shí)得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明________。（3）IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應(yīng)的受體結(jié)合，激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對細(xì)胞分泌IL-6的影響，由此說明________________，同時(shí)發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達(dá)有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

種群密度是指單位面積或體積內(nèi)某一種群個體的數(shù)量，是種群結(jié)構(gòu)最基本的參數(shù)。單位面積或體積內(nèi)種群個體數(shù)量越多，種群密度越高?！驹斀狻緼、一定區(qū)域面積如浙江省嘉興市的人口數(shù)量可表示種群密度，A正確；B、魚的種類有很多，一立方米內(nèi)的魚包含多種魚，不是一個種群，B錯誤；C、種群密度應(yīng)是單位面積或體積中同種生物所有個體的數(shù)量，而一個蜂巢中所有工蜂只是蜂群中的部分個體，C錯誤；D、種群密度是種群的最基本的數(shù)量特征，與年齡組成無關(guān)，D錯誤。故選A。2、A【解析】

小分子物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞胶吞攸c(diǎn)：名

稱運(yùn)輸方向載體能量實(shí)

例自由擴(kuò)散（簡單擴(kuò)散）高濃度低濃度不需不需水,CO2,O2,甘油,苯、酒精等協(xié)助擴(kuò)散（易化擴(kuò)散）高濃度低濃度需要不需紅細(xì)胞吸收葡萄糖主動運(yùn)輸?shù)蜐舛雀邼舛刃枰枰∧c絨毛上皮細(xì)胞吸收氨基酸,葡萄糖等【詳解】分析題意可知，甲組的營養(yǎng)液適時(shí)通入空氣，乙組不進(jìn)行通氣處理。一定時(shí)間后測得甲組的根對a離子的吸收速率遠(yuǎn)大于乙組的。說明根對a離子的吸收和有氧呼吸有關(guān)，是消耗能量的，應(yīng)該是主動運(yùn)輸，A正確。故選A。3、D【解析】

看圖可知，甲狀腺素的受體位于細(xì)胞核內(nèi)，其作用機(jī)制主要是通過影響基因的轉(zhuǎn)錄而引起生物學(xué)效應(yīng)的?！驹斀狻緼、每個甲狀腺素分子含4個碘原子，A錯誤；B、受體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，其合成場所是細(xì)胞質(zhì)中的核糖體，B錯誤；C、甲狀腺素通過影響DNA的轉(zhuǎn)錄發(fā)揮作用，C錯誤；D、甲狀腺素幾乎可以作用于全身所有的細(xì)胞，D正確。故選D。4、D【解析】

果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，在制作過程中需通入氧氣；當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌可將葡萄糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?；醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃?！驹斀狻緼、在變酸的酒的表面觀察到的菌膜，就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，A正確；B、當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，B正確；C、醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃，C正確；D、醋酸菌是好氧菌，在發(fā)酵液表面添加一層液體石蠟，不利于發(fā)酵，D錯誤。故選D。【點(diǎn)睛】本題考查果醋的制作，要求考生識記參與果醋制作的微生物及其代謝類型，掌握果醋制作的原理及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。5、C【解析】

病毒一般由蛋白質(zhì)外殼和核酸組成，根據(jù)題意可知，冠狀病毒除了具有以上結(jié)構(gòu)外，還具有包裹在蛋白質(zhì)衣殼外的一層包膜，這層包膜主要來源于宿主細(xì)胞膜(磷脂層和膜蛋白)，還含有一些病毒自身的糖蛋白，可與宿主細(xì)胞膜融合，侵染宿主細(xì)胞進(jìn)行增殖。【詳解】A、根據(jù)以上分析可知，冠狀病毒不僅具有蛋白質(zhì)外殼和核酸，還具有類似于細(xì)胞膜的包膜，包膜的存在有利于維護(hù)病毒結(jié)構(gòu)的完整性，無包膜保護(hù)的病毒更容易被滅活，A正確；B、根據(jù)題意，病毒包膜來源于宿主細(xì)胞膜，還含有一些病毒自身的糖蛋白，因此具有抗原性，且利用包膜與宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜融合，可以幫助病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞，B正確；C、噬菌體的結(jié)構(gòu)只有蛋白質(zhì)外殼和核酸，沒有包膜結(jié)構(gòu)，通過吸附后將核酸注入宿主細(xì)胞，因此二者進(jìn)入宿主細(xì)胞的方式不同，C錯誤；D、子代病毒的形成，需要利用宿主細(xì)胞的核糖體合成病毒的蛋白質(zhì)，如膜蛋白和糖蛋白等，因此需要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的參與，D正確。故選C。6、A【解析】

基因重組：（1）概念：在生物體進(jìn)行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合。（2）類型：①自由組合型：減數(shù)第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合。②交叉互換型：減數(shù)第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。（3）意義：①形成生物多樣性的重要原因之一。②是生物變異的來源之一，對生物的進(jìn)化也具有重要的意義?！驹斀狻緼、突變和基因重組是隨機(jī)的、不定向的，是生物進(jìn)化的原始材料，A正確；B、基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，B錯誤；C、基因重組不能產(chǎn)生新的性狀，只能將原有性狀進(jìn)行重組組合，C錯誤；D、基因突變是生物變異的根本來源，D錯誤。故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查基因重組的相關(guān)知識，要求考生識記基因重組的概念、類型及意義，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。二、綜合題：本大題共4小題7、體原腸反轉(zhuǎn)錄引物Bcl-2cDNA【解析】

分析題圖：圖示表示克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程。圖中涉及動物體細(xì)胞核移植技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植及PCR技術(shù)，其中mRNA→cDNA的X過程為逆轉(zhuǎn)錄過程。【詳解】（1）圖中卵母細(xì)胞是受體細(xì)胞，良種豬的體細(xì)胞是供體細(xì)胞提供細(xì)胞核，形成重組細(xì)胞；早期胚胎發(fā)育經(jīng)過桑椹胚、囊胚和原腸胚，最終形成克隆豬。

（2）①mRNA→cDNA的過程表示反轉(zhuǎn)錄過程。

②PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是已知Bcl-2基因或者Bcl-2mRNA的核苷酸，以便合成引物；條件包括模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶，根據(jù)題中流程圖，第一輪循環(huán)的模板式Bcl-2cDNA?！军c(diǎn)睛】本題以社會熱點(diǎn)為素材，結(jié)合克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程圖，考查胚胎工程和基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生對核移植、早期胚胎發(fā)育、PCR技術(shù)的理解和應(yīng)用能力。8、伸長兩重農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化tmk突變體的頂勾彎曲減小，轉(zhuǎn)入TMK基因可部分恢復(fù)頂勾彎曲內(nèi)側(cè)細(xì)胞生長加快tmk突變體和野生型內(nèi)側(cè)TMK蛋白C端量、細(xì)胞核內(nèi)磷酸化蛋白X和促進(jìn)生長基因的表達(dá)【解析】

1、生長素類通常是通過促進(jìn)細(xì)胞的伸長來促進(jìn)植物生長的，在生產(chǎn)上的應(yīng)用有促進(jìn)扦插的枝條生根、促進(jìn)果實(shí)發(fā)育、防止落花落果等。2、赤霉素的生理作用是促進(jìn)細(xì)胞伸長，從而引起莖桿伸長和植物增高，此外它含有防止器官脫落和解除種子、塊莖休眠，促進(jìn)萌發(fā)等作用。3、生長素的作用表現(xiàn)為兩重性：既能促進(jìn)生長，也能抑制生長；既能促進(jìn)發(fā)芽，也能抑制發(fā)芽；既能防止落花落果，也能疏花疏果。生長素所發(fā)揮的作用，因?yàn)闈舛取⒅参锛?xì)胞的成熟情況和器官的種類不同而有較大的差異?！驹斀狻浚?）由分析可知，生長素是通過促進(jìn)細(xì)胞伸長來促進(jìn)生長的，可推測頂端分生組織產(chǎn)生的IAA運(yùn)輸至頂勾處，促進(jìn)細(xì)胞的伸長生長。在頂勾處，由于重力的影響，近地側(cè)生長素濃度高，遠(yuǎn)地側(cè)生長素濃度低，由于IAA的作用具有兩重性，低濃度促進(jìn)生長，高濃度抑制生長，頂勾兩側(cè)細(xì)胞生長狀況不同，因而彎曲度發(fā)生改變。（2）科研人員發(fā)現(xiàn)一株TMK基因缺失的突變體（tmk突變體），基因工程中將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法實(shí)現(xiàn)，故此在這里用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將含TMK基因的T-DNA轉(zhuǎn)入tmk突變體中，然后分別測定三種不同擬南芥種子萌發(fā)時(shí)，頂勾處的彎曲度，根據(jù)圖2的結(jié)果可知tmk突變體的頂勾彎曲減小，轉(zhuǎn)入TMK基因可部分恢復(fù)頂勾彎曲。（3）圖4的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因前后頂勾處外側(cè)細(xì)胞伸長基本沒變化，只是缺失突變體頂勾處內(nèi)側(cè)細(xì)胞伸長比轉(zhuǎn)基因后更快，故此得出結(jié)論，tmk突變體頂勾彎曲度改變的原因是其頂勾彎曲處內(nèi)側(cè)細(xì)胞生長加快。（4）圖5顯示在IAA濃度較高時(shí)，TMK蛋白C端被剪切，然后TMK蛋白C端進(jìn)入細(xì)胞促進(jìn)了核內(nèi)蛋白X的磷酸化，進(jìn)而抑制了促進(jìn)生長因子的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞伸長生長被抑制，而tmk突變體無法剪切TMK蛋白，故此頂勾內(nèi)側(cè)細(xì)胞伸長比野生型快，為了驗(yàn)證這一推測，需要測定并比較tmk突變體和野生型植株的頂勾彎曲處內(nèi)側(cè)細(xì)胞的TMK蛋白C端量、細(xì)胞核內(nèi)磷酸化蛋白X和促進(jìn)生長基因的表達(dá)量，依次來驗(yàn)證上述推測?！军c(diǎn)睛】能夠結(jié)合所學(xué)的關(guān)于生長素生理作用的知識，利用題中的相關(guān)信息進(jìn)行合理的分析、推理和綜合是解答本題的關(guān)鍵！9、肝糖原分解、脂肪等非糖物質(zhì)的轉(zhuǎn)化神經(jīng)—體液調(diào)節(jié)細(xì)胞外液滲透壓人體缺水時(shí)，細(xì)胞外液滲透壓升高，下丘腦滲透壓感受器興奮，下丘腦控制垂體釋放抗利尿激素增多，促進(jìn)腎小管和集合管重吸收水分，尿量減少【解析】

1、血糖調(diào)節(jié)：（1）血糖來源：食物中糖類的消化吸收；肝糖原分解；脂肪等非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化；（2）血糖去向：氧化分解；合成糖原；轉(zhuǎn)化為脂肪、某些氨基酸等；2、體內(nèi)水少或吃的食物過咸時(shí)→細(xì)胞外液滲透壓升高→下丘腦感受器受到刺激→垂體釋放抗利尿激素多→腎小管、集合管重吸收增加→尿量減少。同時(shí)大腦皮層產(chǎn)生渴覺（飲水）。【詳解】（1）血糖的來源有食物中糖類消化吸收、肝糖原分解、脂肪等非糖物質(zhì)的轉(zhuǎn)化，一天未進(jìn)食，則血糖來源于肝糖原分解、脂肪等非糖物質(zhì)的轉(zhuǎn)化。（2）人體焦慮、恐懼時(shí)，腎上腺素分泌增加，呼吸頻率加快，心率加快，神經(jīng)系統(tǒng)也可直接調(diào)節(jié)使心跳加快，因此該過程與神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)密切相關(guān)。（3）人體缺水時(shí)，細(xì)胞外液滲透壓升高，下丘腦滲透壓感受器興奮，下丘腦控制垂體釋放抗利尿激素增多，促進(jìn)腎小管和集合管重吸收水分，尿量減少?！军c(diǎn)睛】本題主要考查血糖調(diào)節(jié)、水鹽平衡調(diào)節(jié)等、神經(jīng)調(diào)節(jié)和激素調(diào)節(jié)的關(guān)系等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生識記和理解能力，屬于中檔題。10、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【解析】

1、有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。（4）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）在PCR過程中，兩個引物是熱穩(wěn)定DNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，由于DNA分子含有內(nèi)含子、非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列，因此逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA中缺少該序列，所以出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)。（2）用PCR技術(shù)擴(kuò)增X基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少酶切產(chǎn)物自身環(huán)化。（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，將質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞常用顯微注射法，這也是將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法。（4）若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，分子水平上可采用抗原-抗體雜交法進(jìn)行檢測?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，識記PCR技術(shù)的原理和過程，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。11、DNA雙鏈復(fù)制HindⅢ酶和B