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試管凝集反應(yīng)微生物基礎(chǔ)試管凝集試驗(yàn)用試管凝集反應(yīng)測定抗血清效價(jià)大腸桿菌抗血清大腸桿菌菌懸液生理鹽水試管試管架移液管水浴鍋1.抗血清的稀釋123456789100.5mL生理鹽水1.抗血清的稀釋1:10稀釋的大腸桿菌抗血清0.5mL加入第1管吸取0.5mL加入第2管混勻后吸取0.5mL加入第3管混勻后從第9管中吸取0.5mL棄去第10管不加血清作為對(duì)照1.抗血清的稀釋123456789101:201:401:801:1601:3201:6401:12801:25601:51202.加入抗原0.5mL大腸桿菌菌懸液血清稀釋倍數(shù)相應(yīng)加大一倍123456789103.抗原抗體反應(yīng)各管混合液振搖混勻置37℃水浴鍋中水浴4h或在室溫中過夜觀察結(jié)果4.結(jié)果觀察與效價(jià)判斷10號(hào)管為生理鹽水對(duì)照管,管中的抗原(細(xì)菌)應(yīng)分散,無凝集塊沉淀而呈混濁菌懸液。4.結(jié)果觀察與效價(jià)判斷試驗(yàn)管如有凝集,管底可見到凝集塊。液體上部澄清、半澄清或混濁度降低,管底凝集塊輕搖即浮起,呈片塊狀。4.結(jié)果觀察與效價(jià)判斷凝集強(qiáng)弱的判斷(以“+”表示)“++++”:很強(qiáng),表示細(xì)菌完全凝集,凝集塊完全沉于管底,菌液澄清。“+++”:很強(qiáng),表示細(xì)菌絕大部分凝集,凝集塊小沉于管底,菌液有輕微混濁?!?+”:中等強(qiáng)度,表示細(xì)菌部分凝集沉于管底,凝集塊呈顆粒狀,菌液半澄清。“+”:弱,表示細(xì)菌少數(shù)凝集,菌液混濁?!?”:不凝集,菌液混濁與生理鹽水對(duì)照管同。血清的效價(jià)就是呈現(xiàn)50%凝集(即“++”反應(yīng))的最高血清稀釋倍數(shù)符號(hào)凝集強(qiáng)弱“++++”很強(qiáng),表示細(xì)菌完全凝集,凝集塊完全沉于管底,菌液澄清?!?++”很強(qiáng),表示細(xì)菌絕大部分凝集,凝集塊小沉于管底,菌液有輕微混濁?!?+”中等強(qiáng)度,表示細(xì)菌部分凝集沉于管底,凝集塊呈顆粒狀,菌液半澄清
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