THSPP 0018-2024 含多肽腐植酸水溶肥料

ICS65.020.20CCSB15團 體 標 準T/HSPP0018—2024含多肽腐植酸水溶肥料Water-solublefertilizercontainingpolypeptideandhumic-acids（發(fā)布稿）2024-08-24發(fā)布 2024-09-24實施湖北省植物保護學會 發(fā)布II目 次前 言 Ⅱ1、圍 12、范引文件 13、語定義 24、術(shù)求 25、驗法 36、驗則 57、識 68、裝運和存 6附錄A溶中多肽含量的測定 7II前 言《標準化工作導(dǎo)則第本文件由武漢綠之緣生物科技有限公司提出。本文件由湖北省植物保護學會歸口。PAGEPAGE1含多肽腐植酸水溶肥料范圍本標準規(guī)定了含多肽腐植酸水溶肥料的術(shù)語和定義、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、標識、包裝、運輸和貯存。本標準適用于將以動物源、植物源、微生物發(fā)酵的蛋白質(zhì)為主要原料經(jīng)提取后制備的多肽添加到固體或液體腐植酸水溶肥料中制成的含多肽腐植酸水溶肥料。規(guī)范性引用文件（適GB190 GB/T191 GB/T6680 GB/T8170 GB/T8569 GB/T9969 GB18382 -GB/T19524.1 GB/T19524.2 GB/T22924 ）GB38400 NY/T887 NY1106 NY/T1110 NY/T1973 pHNY/T1976 NY/T1978 NY/T3831-2021 《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》術(shù)語與定義下列術(shù)語與定義適用于本文件。多肽 polypeptide15%5000animalderivedpolypeptideplantderivedpolypeptide植物源多肽是大豆、小麥、玉米等植物來源的蛋白質(zhì)通過水解獲取的肽鏈及肽鏈片段。microbialmetabolicpolypeptide微生物代謝多肽是微生物菌利用培養(yǎng)基底物合成代謝獲取的肽鏈及肽鏈片段。humicacidswater-solublefertilizercontainingpolypeptide含有適量動物源多肽、植物源多肽、微生物代謝多肽的腐植酸水溶肥料。技術(shù)要求外觀均勻的固體或均相的液體，固體分為粉狀和顆粒狀，無明顯機械雜質(zhì)；液體無明顯沉淀和雜質(zhì)。技術(shù)指標含多肽腐植酸水溶肥料應(yīng)符合表1或表2的要求。限量指標含多肽腐植酸水溶肥料限量指標應(yīng)符合NY1110的要求。表1（）項目固體產(chǎn)品液體產(chǎn)品多肽含量≥0.5%5克/升腐植酸含量≥3.0%30克/升大量元素含量1≥20.0%200克/升水不溶物含量≤5.0%50克/升水分（H2O）含量2≤5.0%/pH值（1:250）4.0～10.04.0～10.01、大量元素指N+P2O5+K2O含量的總和，產(chǎn)品應(yīng)至少包含兩種大量元素。單一大量元素含量不低于2.0%或20克/升。2、水分以生產(chǎn)企業(yè)出廠檢驗數(shù)據(jù)為準。表2（）項目指標多肽含量≥0.5%腐植酸含量≥3.0%微量元素含量1≥6.0%水不溶物含量≤5.0%水分（H2O）含量2≤5.0%pH值（1:250）4.0～10.01、微量元素指銅、鐵、錳、鋅、硼、鉬含量的總和，產(chǎn)品應(yīng)至少包含一種微量元素，含量不低于0.05%的單一微量元素均應(yīng)計入微量元素含量中，鉬元素含量不高于0.5%。2、水分以生產(chǎn)企業(yè)出廠檢驗數(shù)據(jù)為準。試驗方法一般規(guī)定HG/T2843HG/T2843外觀目視法測定。1977按NY/T1977的規(guī)定執(zhí)行。19771974197419741974 1974 1974 1978 1978 1978 1978 1978 A 按NY1106。 按NY/T1115水溶肥料pH的測定按NY/T1115水溶肥料水分的測定按GB/T8576或GB/T8577的規(guī)定執(zhí)行，GB/T8577為仲裁法。 按NY/T1976檢驗規(guī)則:（袋GB/T6680的規(guī)定執(zhí)行。1000mL6.6 GB/T8170-2008中4.3.36.7 袋)標記及使用說明書GB18382。GB/T9969GB/T8569GB/T8569GB190和GB/T1912附錄 A （規(guī)范性）水溶肥料中多肽含量的測原理試樣用IEC氨基酸分析法（離子交換色譜法）測定游離氨基酸總含量。試樣用三氯乙酸預(yù)處理，去除沉淀大分子蛋白質(zhì)，提取多肽氨基酸和游離氨基酸，然后用鹽酸溶液全部水解得到酸溶蛋白，用IEC氨基酸分析法測定酸溶蛋白含量。多肽即為酸溶蛋白含量與游離氨基酸總含量的差值。試劑試驗用水應(yīng)符合GB/T6682中一級用水的規(guī)格。使用試劑除特殊規(guī)定外，均為分析純。檸檬酸鈉（Na3C6H5O7·2H2O）。鹽酸（優(yōu)級純）：12mol/L。乙二胺四乙酸二鈉溶液：10g/L。鹽酸水解溶液（6mol/L）：將500mL鹽酸（A.2.2）與500mL水混合，加1g苯酚，混勻。三氯乙酸溶液（150稱取150g三氯乙酸，加水溶解并定容至1000mL，混勻。檸檬酸鈉緩沖液[pH=2.2，C（Na+）=0.2mol/L]：稱取19.6g檸檬酸鈉（A.2.1），用水溶解并轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加入16.5mL鹽酸（A.2.2），硫二甘醇5.0mL，苯酚1g，用水定容并過濾。氨基酸標準儲備溶液：含天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸和精氨酸共17種氨基酸，各組分濃度均為2.5μmol/mL，應(yīng)使用有證標準溶液。氨基酸標準工作溶液：準確移取2mL的氨基酸標準儲備溶液（A.2.6）置于50mL容量瓶中，以檸檬酸鈉緩沖溶液（A.2.5）定容，各氨基酸組分濃度為100nmol/mL，用安瓿分裝密封，每支約1mL，在2℃~8℃下保存，有效期3個月。不同pH值和離子強度的檸檬酸鈉緩沖溶液與茚三酮溶液：按照儀器說明書配制或購買。液氮。天平：感量0.1mg和0.01mg。570nm和440nm光度檢測器。離心機：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。真空泵。噴燈。恒溫干燥箱：溫度可達110℃±2℃。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或濃縮器：可在室溫至65℃間調(diào)溫，控溫精度±1℃，真空度可低至33.3×10Pa（25mmHg）。固體樣品經(jīng)多次縮分后，取出約100g，將其迅速研磨至全部通過0.25mm孔徑篩，混合均勻，置于潔凈、干燥的容器中，用于測定。稱取上述固體試樣5g，精確至1mg，置于250mL具塞三角瓶中。在10℃~35℃件下，準確加入100mL三氯乙酸溶液（A.2.5）（如樣品形成小球或者團塊，先均質(zhì)后再振蕩提?。?。對于固態(tài)試樣，搖勻后，于150r/min振蕩30min。將上層溶液倒入100mL離心管中，在4000r/min條件下離心5min，上清液為試樣提取液；如上層溶液有漂浮物，需過濾。量取上述試樣提取液0.5mL~5.0mL（精確至0.1mg），置于20mL安瓿或水解管中，加適量水至溶液總體積為5mL，再加入10mL鹽酸水解溶液（A.2.4），置于液氮（A.2.10）中冷凍，使用真空泵抽真空至7Pa（≤5×10-2mmHg）后用噴燈封口或充氮氣1min后旋緊管蓋。將安瓿或水解管放在110℃±2℃恒溫干燥箱中，水解22h。冷卻、混勻、開管、過濾，用移液管精確吸取適量的濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或濃縮器中，在60℃下抽真空蒸發(fā)至干，必要時，加少許水，重復(fù)蒸干1次~2次。加入3~5檸檬酸鈉緩沖溶液（A.2.6）復(fù)溶，使試樣溶液中氨基酸濃度達到50~250nmol/mL，搖勻，過濾或離心，上清液待上機測定。注：當試樣中含有金屬元素時，則在“冷卻，混勻，開管”后吸取水解液2mL，準確加入10g/L的乙二胺四乙酸二鈉溶液（A.2.3）2mL，混勻，然后按“過濾，用移液管精確吸取適量的濾液……上清液待上機測定”進行操作。將氨基酸標準工作溶液（A.2.8）注入氨基酸分析儀，以不同pH值和離子強度的檸檬酸鈉緩沖溶液與茚三酮溶液（A.2.9）作為流動相和衍生劑，適當調(diào)整儀器操作程序及參數(shù)和洗脫用緩沖溶液試劑配比，應(yīng)符合JJG1064氨基酸分析儀檢定規(guī)程的要求，并保證蘇氨酸-絲氨酸，甘氨酸-丙氨酸以及亮氨酸-異亮氨酸分離度分別不得小于85%90%80%。注入制備好的試樣溶液和相應(yīng)的氨基酸標準工作溶液進行測定，每5個樣品（即10個單樣）為一組，組間插入氨基酸標準工作溶液（A.2.8）進行校準。以保留時間定性，單點外標法定量。試樣中氨基酸的峰面積應(yīng)在標準工作溶液相應(yīng)峰面積的30%~200%，否則應(yīng)用檸檬酸鈉緩沖溶液（A.2.6）稀釋后重測。按NY/T1975的規(guī)定測定游離氨基酸的含量，檢測結(jié)果保留兩位小數(shù)。酸溶蛋白含量以質(zhì)量分數(shù)ω1計，數(shù)值以百分率（%）表示，按式（A.1）計算：11式（A.1）中：k—氨基酸的種類數(shù)；n—試樣水解溶液稀釋倍數(shù)；Ai—試樣溶液中第i種氨基酸的峰面積；Vhv—試樣水解溶液體積，單位為毫升（mL）；ci—標準工作溶液中第i種氨基酸的濃度，單位為納摩爾/毫升（nmol/mL）；Mi—第i種氨基酸的摩爾質(zhì)量，單位為克/摩爾（g/mol）；Vst0—氨基酸標準溶液進樣體積，單位為微升（μL）；Asti—氨基酸標準溶液中第i種氨基酸的峰面積；m—試樣的質(zhì)量，單位為毫克（mg）；V0—試樣溶液進樣體積，單位為微升（μL）；以兩個平行試樣測定結(jié)果的算術(shù)平均值報告結(jié)果，保留兩位小數(shù)