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文檔簡介
PAGEPAGE30專題25細胞工程【5年高考】考點一植物細胞工程1.(2024江蘇單科,20,2分)為探究矮牽牛原生質體的培育條件和植株再生實力,某探討小組的試驗過程如圖。下列敘述正確的是 ()A.過程①獲得的原生質體需懸浮在30%蔗糖溶液中B.過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化C.過程③需用秋水仙素處理誘導細胞壁再生D.原生質體雖無細胞壁但仍保持細胞的全能性答案D2.(2024江蘇單科,8,2分)花藥離體培育是重要的育種手段。如圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖,下列敘述正確的是 ()A.為了防止微生物污染,過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB.過程②的培育基中需添加較高濃度的細胞分裂素以利于根的分化C.過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D.過程④應將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質上答案C3.(2024課標全國Ⅲ,38,15分)培育胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}。(1)利用胡蘿卜根段進行組織培育可以形成試管苗。用分化的植物細胞可以培育成完整的植株,這是因為植物細胞具有。
(2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,緣由是。
(3)從步驟⑤到步驟⑥須要更換新的培育基,其緣由是。在新的培育基上愈傷組織通過細胞的過程,最終可形成試管苗。
(4)步驟⑥要進行照光培育,其作用是。
(5)經組織培育得到的植株,一般可保持原品種的,這種繁殖方式屬于繁殖。
答案(1)全能性(或答:形成完整植株所需的全部基因)(2)形成層簡潔誘導形成愈傷組織(3)誘導愈傷組織形成和誘導愈傷組織分化形成試管苗所需的生長素和細胞分裂素的比例不同分化(或答:再分化)(4)誘導葉綠素的形成,使試管苗能夠進行光合作用(5)遺傳特性無性4.(2017海南單科,31,15分)甲、乙兩名同學分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培育技術繁殖該植物。回答下列問題:(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在肯定條件下進行組織培育,均能獲得試管苗,其原理是。
(2)甲、乙同學在誘導愈傷組織所用的培育基中,均加入肯定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到。若要用細胞作為材料進行培育獲得幼苗,該細胞應具備的條件是(填“具有完整的細胞核”“具有葉綠體”或“已轉入抗性基因”)。
(3)圖中A、B、C所示的是不同的培育結果,該不同結果的出現主要是由培育基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是。A中的愈傷組織是葉肉細胞經形成的。
(4)若該種植物是一種雜合體的珍貴花卉,要快速獲得與原植株基因型和表現型都相同的該種花卉,可用組織培育方法繁殖,在培育時,(填“能”或“不能”)采納經減數分裂得到的花粉粒作為外植體,緣由是。
答案(1)綠色葉片和白色花瓣的細胞具有全能性,在肯定條件下能發(fā)育成完整的植株(2)葡萄糖、果糖具有完整的細胞核(3)細胞分裂素、生長素脫分化(4)不能對雜合體的植株來說,其體細胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細胞的基因型不同。用花粉粒進行組織培育得到花卉基因型不同于原植株考點二動物細胞工程5.(2024天津,1,4分)在克隆哺乳動物過程中,通常作為核移植受體細胞的是去核的 ()A.卵原細胞 B.初級卵母細胞C.次級卵母細胞 D.卵細胞答案C6.(2024江蘇單科,23,3分)如圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT-),在HAT篩選培育液中不能正常合成DNA,無法生長。下列敘述正確的是(多選) ()A.可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合B.兩兩融合的細胞都能在HAT培育液中生長C.雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產D.細胞膜的流淌性是細胞融合的基礎答案ACD7.(2024江蘇單科,22,3分)如圖為細胞融合的示意圖,下列敘述正確的是(多選) ()A.若a細胞和b細胞是植物細胞,需先去分化再誘導融合B.a細胞和b細胞之間的融合須要促融處理后才能實現C.c細胞的形成與a、b細胞膜的流淌性都有關D.c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的全部基因答案BC8.(2024課標全國Ⅰ,38,15分)為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學以小鼠甲為試驗材料設計了以下試驗流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)上述試驗前必需給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是。
(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要試驗步驟:。
(3)為了得到能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞,須要進行篩選。圖中篩選1所采納的培育基屬于,運用該培育基進行細胞培育的結果是。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據的基本原理是。
(4)若要使能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖,可采納的方法有(答出2點即可)。
答案(1)誘導小鼠甲產生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞(2)取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞,加入培育液制成單細胞懸液(3)選擇培育基只有雜交瘤細胞能夠生存抗原與抗體的反應具有特異性(4)將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內增殖;將雜交瘤細胞在體外培育9.(2024課標全國Ⅲ,38,15分)2024年《細胞》期刊報道,中國科學家領先勝利地應用體細胞對非人靈長類動物進行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?;卮鹣铝袉栴}:(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指。通過核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細胞的染色體數目(填“減半”“加倍”或“不變”)。
(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植,胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度(填“大于”或“小于”)體細胞核移植,其緣由是。
(3)在哺乳動物核移植的過程中,若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體,通常,所得到的兩個克隆動物體細胞的常染色體數目(填“相同”或“不同”),性染色體組合(填“相同”或“不同”)。
答案(1)將動物的一個細胞核,移入一個已去掉細胞核的卵母細胞不變(2)小于胚胎細胞分化程度低,復原(表現)全能性相對簡潔(3)相同不同考點三胚胎工程10.(2024山東,14,2分)經遺傳改造的小鼠胚胎干細胞注入囊胚,通過胚胎工程的相關技術可以獲得具有不同遺傳特性的試驗小鼠。下列說法錯誤的是 ()A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B.體外受精前要對小鼠的精子進行獲能處理C.胚胎移植前要檢查胚胎質量并在囊胚或原腸胚階段移植D.遺傳改造的小鼠胚胎干細胞可以通過轉基因等技術獲得答案C11.(2017江蘇單科,11,2分)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培育液中添加H-Y單克隆抗體,篩選胚胎進行移植,以利用乳腺生物反應器進行生物制藥。下列相關敘述正確的是 ()A.H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細胞分泌B.應選用原腸胚做雌雄鑒別C.鑒別后的雄性胚胎可干脆做胚胎移植D.用H-Y抗原免疫母牛可獲得相應抗體答案D12.(2017江蘇單科,14,2分)下列關于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述,錯誤的是 ()A.精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培育的目的是使精子獲能B.小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng),注射相關激素有促進超數排卵的作用C.分割的胚胎細胞有相同的遺傳物質,因此發(fā)育成的個體沒有形態(tài)學差異D.注射到囊胚腔中的胚胎干細胞可以參加個體器官的發(fā)育答案C13.(2024海南單科,25,10分)某課題組用生物技術制備轉基因小鼠的過程,如圖所示?;卮鹣铝袉栴}。(1)通常把目的基因轉入雄原核而不是雌原核,從兩者形態(tài)差異上分析,緣由是。
(2)把桑椹(葚)胚植入假孕母鼠子宮前,須要對胚胎進行性別鑒定,目前最有效的方法是SRY-PCR法。操作的基本程序是:先從被測胚胎中取出幾個細胞,提取DNA,然后用位于Y染色體的性別確定基因,即SRY基因的一段堿基設計,以胚胎細胞中的DNA作為模板,進行PCR擴增,最終用SRY特異性探針檢測擴增產物。出現陽性反應者,胚胎為;出現陰性反應者,胚胎為。
(3)若目的基因的表達產物是某種特定的蛋白質,檢測目的基因在子代轉基因小鼠中是否勝利表達,常用的分子檢測方法是,檢測的基本思路是。
答案(1)雄性原核較大,更簡潔容納外源DNA(2)引物雄性小鼠雌性小鼠(3)抗原—抗體雜交技術從轉基因生物中提取蛋白質,用相應的抗體(對抗體進行同位素標記)進行抗原抗體雜交,假如出現雜交帶,表明目的基因已經表達勝利14.(2024江蘇單科,29,8分)利用基因編輯技術將病毒外殼蛋白基因導入豬細胞中,然后通過核移植技術培育基因編輯豬,可用于生產基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程,請回答下列問題:(1)對1號豬運用處理,使其超數排卵,收集并選取處在時期的卵母細胞用于核移植。
(2)采集2號豬的組織塊,用處理獲得分散的成纖維細胞,放置于37℃的CO2培育箱中培育,其中CO2的作用是。
(3)為獲得更多基因編輯豬,可在胚胎移植前對胚胎進行。產出的基因編輯豬的性染色體來自號豬。
(4)為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入4號豬并正常表達,可采納的方法有(填序號)。
①DNA測序 ②染色體倍性分析③體細胞結構分析 ④抗原—抗體雜交答案(1)促性腺激素減數其次次分裂中期(2)胰蛋白酶(膠原蛋白酶)維持培育液的pH(3)分割2(4)①④[老師專用題組]【5年高考】考點一植物細胞工程1.(2024山東,13,2分)兩種遠緣植物的細胞融合后會導致一方的染色體被排出。若其中一個細胞的染色體在融合前由于某種緣由斷裂,形成的染色體片段在細胞融合后可能不會被全部排出,未排出的染色體片段可以整合到另一個細胞的染色體上而留存在雜種細胞中。依據該原理,將一般小麥與耐鹽性強的中間偃麥草進行體細胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種,過程如圖所示。下列說法錯誤的是 ()A.過程①需運用纖維素酶和果膠酶處理細胞B.過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C.過程③中常用滅活的病毒誘導原生質體融合D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段答案C分析題圖可知,①過程是去除植物細胞的細胞壁,該過程須要運用纖維素酶和果膠酶處理細胞,A正確;結合題干信息分析,過程②的目的是使中間偃麥草原生質體中的染色體發(fā)生斷裂,斷裂后的染色體片段可能能保留在雜種植株中,從而可能培育出耐鹽小麥,B正確;過程③是原生質體融合的過程,該過程必需借助肯定的技術手段進行人工誘導,而人工誘導的方法有物理法和化學法,滅活的病毒用于動物細胞融合,C錯誤;結合題干信息和題圖中②的處理,可推斷耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段,D正確。2.(2013江蘇單科,11,2分)某種極具欣賞價值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植,可應用多種技術獲得大量優(yōu)質苗,下列技術中不能選用的是 ()A.利用莖段扦插誘導生根技術快速育苗B.采納花粉粒組織培育獲得單倍體苗C.采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D.采納幼葉、莖尖等部位的組織進行組織培育答案B本題考查對獲得大量優(yōu)質苗的多種技術手段的分析。為了使優(yōu)質苗的生物性狀不發(fā)生性狀分別,可采納莖段扦插誘導生根技術快速育苗,也可采納將幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進行植物組織培育獲得大量優(yōu)質苗;花粉粒是減數分裂的產物,利用花粉粒離體培育得到的是單倍體苗,其高度不育,且會發(fā)生性狀分別,因此B項方案不能選用。3.(2012廣東理綜,2,4分)培育草莓脫毒苗所采納的主要技術是 ()A.組織培育 B.細胞雜交C.顯微注射 D.核移植答案A本題主要考查現代生物技術應用的相關學問。由于植物分生組織中病毒很少或沒有病毒,常用莖尖通過組織培育技術培育脫毒苗;細胞雜交通常用于培育雜種個體;顯微注射技術常用于基因工程,培育轉基因生物;核移植技術常用于培育克隆動物。故只有A選項符合題意。4.[2024浙江7月選考,29(二),9分]回答與基因工程和植物克隆有關的問題:(1)自然農桿菌的Ti質粒上存在著一段DNA片段(T-DNA),該片段可轉移并整合到植物細胞染色體上。為便于轉基因植物在組織培育階段的篩選,設計重組Ti質粒時,應考慮T-DNA中要有可表達的目的基因,還須要有可表達的。
(2)結合植物克隆技術進行轉基因試驗,為獲得轉基因植株,農桿菌侵染的宿主一般要選用具有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性、及易被農桿菌侵染等特點的植物材料。若植物材料對農桿菌不敏感,則可用的轉基因方法。
(3)利用帶側芽的莖段獲得叢狀苗的過程與利用莖段誘導產生愈傷組織再獲得叢狀苗的過程相比,前者總培育時間,且不經驗過程,因而其遺傳性狀穩(wěn)定,是大多數植物快速繁殖的常用方法。
(4)與發(fā)芽培育基相比,配制轉基因叢狀苗生根培育基時,可依據實際狀況適當添加,促進叢狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織并進一步分化形成,最終形成根。還可通過變更MS培育基促進生根,如(A.提高蔗糖濃度B.降低培育基濃度C.提高大量元素濃度D.不添加瓊脂)。
答案(1)抗性基因(2)全能性表達充分顯微注射(3)短脫分化(4)生長素根的分生組織B解析(1)利用農桿菌轉化法培育轉基因植物時,為便于檢測Ti質粒中的T-DNA片段是否勝利導入植物細胞,T-DNA中既要有可表達的目的基因,也要有可表達的抗性基因。(2)為獲得轉基因植株,農桿菌侵染的宿主一般要選用易被農桿菌侵染,同時性狀優(yōu)良、具有較高的遺傳穩(wěn)定性和全能性表達充分的植物材料。轉基因植株培育中,還可采納顯微注射的方法導入目的基因。(3)利用帶側芽的莖段獲得叢狀苗的過程不經驗愈傷組織階段,因此不經驗脫分化的過程,其總培育時間較短。(4)與發(fā)芽培育基相比,生根培育基中可適當添加生長素,從而促進叢狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織并進一步分化形成根的分生組織,最終形成根。還可通過降低MS培育基的濃度促進生根,植物通過根的生長從外界獲得更多養(yǎng)分。5.(2015天津理綜,7,15分)DHA對腦神經發(fā)育至關重要。以A、B兩種單細胞真核藻為親本,利用細胞融合技術選育高產DHA融合藻。兩種藻特性如下表。親本藻優(yōu)勢代謝類型生長速率[g/(L·天)]固體培育基上藻落直徑DHA含量(‰)A藻自養(yǎng)0.06小0.7B藻異養(yǎng)0.14大無據表回答:(1)選育的融合藻應具有A藻與B藻的優(yōu)點。
(2)誘導融合前需用纖維素酶處理兩種藻,其目的是獲得。
(3)通過以下三步篩選融合藻,步驟可淘汰B藻,步驟可淘汰生長速率較慢的藻落,再通過步驟獲得生產所需的融合藻。
步驟a:視察藻落的大小步驟b:用不含有機碳源(碳源——生物生長的碳素來源)的培育基進行光照培育步驟c:測定DHA含量(4)以獲得的融合藻為材料進行甲、乙、丙三組試驗,結果如圖。①甲組條件下,融合藻產生[H]的細胞器是;丙組條件下產生ATP的細胞器是。
②與甲、丙兩組相比,乙組融合藻生長速率較快,緣由是在該培育條件下。
甲、乙兩組DHA產量均較高,但實際生產中往往采納甲組的培育條件,其緣由是。
答案(1)產生DHA、自養(yǎng)特性快速生長(2)原生質體(3)bac(4)①線粒體、葉綠體線粒體②融合藻既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)融合藻利用光能和簡潔的無機物即能生長,不需添加葡萄糖,可降低成本,也可防止雜菌生長解析(1)依據題干信息“利用細胞融合技術選育高產DHA融合藻”及表中信息可推斷,融合藻應既具有A藻的“自養(yǎng)”和“產DHA”的特點,又具有B藻“快速生長”的優(yōu)點。(2)誘導融合前需利用纖維素酶去掉兩種藻的細胞壁,從而獲得原生質體。(3)由于B藻是異養(yǎng)生物,只能利用有機碳源,故通過步驟b可以淘汰B藻。由于A藻生長慢、藻落小而B藻生長快、藻落大,可以通過步驟a視察藻落大小淘汰生長速率較慢的藻落。最終通過步驟c測定DHA含量較高的藻落即為生產所需的融合藻。(4)①分析坐標圖可知,甲組的融合藻既能進行光合作用又能進行呼吸作用,因此,產生[H]的細胞器有葉綠體和線粒體。丙組融合藻在黑暗中產生ATP的細胞器是線粒體。②乙組融合藻既能利用光能又能利用葡萄糖,屬于既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)的生物,因此乙組培育條件下融合藻較甲、丙兩組生長快。實際生產中采納甲組的培育條件而不采納乙組培育條件的緣由是:甲組融合藻在不添加葡萄糖的狀況下就能利用光能和簡潔的無機物生長,因此降低了成本,也可防止雜菌生長。6.(2014江蘇單科,29,9分)為了獲得植物次生代謝產物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培育基中懸浮培育。請回答下列問題:(1)外植體經誘導后形成愈傷組織的過程稱為。
(2)在愈傷組織懸浮培育時,細胞干重、蔗糖濃度和pH的變更如圖所示。細胞干重在12d后下降的緣由有;培育液中蔗糖的作用是、。
(3)多倍體愈傷組織細胞產生的次生代謝產物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細胞經處理,會產生染色體加倍的細胞。為檢測愈傷組織細胞染色體數目,壓片前常用纖維素酶和酶解離愈傷組織。若愈傷組織細胞(2n)經誘導處理后,視察到染色體數為8n的細胞,合理的說明是、。
(4)為了更好地獲得次生代謝產物,生產中采納植物細胞的固定化技術,其原理與酵母細胞固定化類似。下列說法正確的有(填序號)。
①選取旺盛生長的愈傷組織細胞包埋②必需在光照條件下培育③培育過程中需通空氣④固定化后植物細胞生長會變慢答案(9分)(1)脫分化(2)蔗糖濃度下降,pH降低供應能源調整滲透壓(3)秋水仙素(低溫)果膠經加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期經加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期(4)①③④解析(1)外植體經脫分化可形成愈傷組織。(2)分析坐標曲線圖,可見12d后培育液中的蔗糖濃度已降至較低,pH也有所下降,因此使得細胞生命活動受阻,細胞干重減小。培育液中的蔗糖可為培育的細胞供應能源,又可調整培育液的滲透壓。(3)二倍體愈傷組織經秋水仙素、低溫等人工誘導處理,可產生染色體數目加倍的細胞。植物細胞之間除纖維素外,還存在果膠層,因此可利用纖維素酶和果膠酶解離愈傷組織。愈傷組織細胞(2n)經人工誘導后,細胞中染色體數目加倍成4n,染色體數為4n的細胞進行有絲分裂,處于有絲分裂后期的細胞中染色體數為8n;若加倍到4n的細胞經誘導后接著加倍形成染色體數為8n的細胞,這樣的細胞再進行有絲分裂,在中期時會看到染色體數為8n的細胞。(4)通過愈傷組織獲得次生代謝產物時,需選擇生長旺盛的細胞,由于植物細胞進行需氧呼吸,培育過程需通入空氣。愈傷組織細胞沒有葉綠體,不進行光合作用,不需光照。植物細胞固定化后,與外界環(huán)境的物質交換實力降低,生長變慢。7.(2013天津理綜,9,15分)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用肯定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化,并丟失再生實力。再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據圖回答下列問題:(1)過程①所需的酶是。
(2)過程②后,在顯微鏡下視察融合的活細胞中有供體的存在,這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標記。
(3)原生質體培育液中須要加入相宜濃度的甘露醇以保持肯定的滲透壓,其作用是。原生質體經過再生,進而分裂和脫分化形成愈傷組織。
(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應剪取再生植株和植株的根尖,通過、、染色和制片等過程制成裝片,然后在顯微鏡下視察比較染色體的形態(tài)和數目。
(5)采納特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。如圖是用該引物對雙親及再生植株1~4進行PCR擴增的結果。據圖推斷,再生植株1~4中肯定是雜種植株的有。
(6)對雜種植株進行接種試驗,可篩選出具有高抗性的雜種植株。
答案(1)纖維素酶和果膠酶(2)葉綠體(3)保持原生質體完整性細胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥)解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌解析(1)去除細胞壁獲得原生質體須要用纖維素酶和果膠酶處理。(2)根細胞不含葉綠體,葉肉細胞含有葉綠體,因此通過PEG誘導融合的雜種細胞應含有葉綠體,以此作為初步篩選雜種細胞的標記。(3)原生質體失去了細胞壁的愛護作用,因此原生質體培育液中須要加入相宜濃度的甘露醇,使原生質體處于等滲溶液中,以維持原生質體正常形態(tài)。原生質體經過細胞壁再生,進而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)要推斷染色體變異的類型,應剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖,通過解離、漂洗、染色、制片等過程制成裝片,然后進行顯微視察比較染色體的形態(tài)和數目。(5)依據兩親本的差異性條帶,可知再生植株1、2和4既有花椰菜的條帶,又有黑芥的條帶,因此再生植株1、2和4肯定為雜種植株。(6)要篩選出高抗性的雜種植株,應進行相應的病原體接種試驗,即接種黑腐病菌。8.(2012課標,39,15分)為了探究6-BA和IAA對某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某探討小組在MS培育基中加入6-BA和IAA,配制成四種培育基(見下表),滅菌后分別接種數量相同、生長狀態(tài)一樣、消毒后的莖尖外植體,在相宜條件下培育一段時間后,統(tǒng)計再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n),結果如下表。培育基編號濃度/mg·L-1m/%n/個6-BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列問題:(1)依據植物的需求量,培育基中無機鹽的元素可分為和兩類。上述培育基中,6-BA屬于類生長調整劑。
(2)在該試驗中,自變量是,因變量是,自變量的取值范圍是。
(3)從試驗結果可知,誘導叢芽總數最少的培育基是號培育基。
(4)為了誘導該菊花試管苗生根,培育基中一般不加入(填“6-BA”或“IAA”)。
答案(1)大量元素微量元素細胞分裂素(2)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n)0~0.5mg·L-1(3)1(4)6-BA解析本題考查植物組織培育的相關學問。(1)植物組織培育常用MS培育基,其中,無機鹽的元素可分為大量元素和微量元素兩類,前者如N、P、K、Ca、Mg、S等,后者如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo等。MS培育基中還常須要添加能誘導細胞分裂、脫分化、再分化的生長素和細胞分裂素,常用的生長素有2,4-D、IAA、NAA等,常用的細胞分裂素有6-BA、KT等。(2)該試驗中,各組6-BA濃度均為0.5mg·L-1,IAA的濃度不相同,故自變量為IAA濃度,IAA濃度范圍為0~0.5mg·L-1。據表可知,該試驗因變量是再生叢芽外植體的比率(m)以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n)。(3)由表格中的數據可知,1號培育基誘導叢芽總數最少。(4)生長素常用于誘導細胞分裂和根的分化,6-BA一般用于誘導植物的愈傷組織分化出叢芽,故誘導菊花試管苗生根,培育基中一般不加入6-BA。考點二動物細胞工程9.(2014浙江理綜,3,6分)下列關于動物細胞培育的敘述,正確的是 ()A.連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型B.某些癌細胞在合適條件下能逆轉為正常細胞C.由多個祖細胞培育形成的細胞群為一個克隆D.未經克隆化培育的細胞系細胞具有相同的性狀答案B連續(xù)細胞系是發(fā)生轉化了的細胞系,大多數具有異倍體核型,A錯誤;癌細胞在合適條件下可以發(fā)生不定向的基因突變而逆轉為正常細胞,B正確;由一個單細胞培育形成的細胞群為一個克隆,C錯誤;未經克隆化培育的細胞系具有異質性,D錯誤。10.(2013重慶理綜,2,6分)如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關敘述,正確的是 ()A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應T淋巴細胞B.②中運用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C.③同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D.④是經篩選培育獲得的能分泌特異性抗體的細胞群答案D本題主要考查單克隆抗體制備的相關學問。①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細胞;②中運用聚乙二醇或滅活的病毒等,有利于雜交瘤細胞的形成;③同時具有漿細胞和骨髓瘤細胞的特性;④是經篩選培育獲得的能分泌特異性抗體的細胞群。故D項正確。11.(2017課標全國Ⅲ,38,15分)編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示?;卮鹣铝袉栴}:(1)現要通過基因工程的方法獲得蛋白乙,若在啟動子的下游干脆接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),則所構建的表達載體轉入宿主細胞后不能翻譯出蛋白乙,緣由是。
(2)某同學在用PCR技術獲得DNA片段B或D的過程中,在PCR反應體系中加入了DNA聚合酶、引物等,還加入了序列甲作為,加入了作為合成DNA的原料。
(3)現通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細胞增殖的作用,某同學做了如下試驗:將肯定量的含T淋巴細胞的培育液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為比照,培育并定期檢測T淋巴細胞濃度,結果如圖2。①由圖2可知:當細胞濃度達到a時,添加蛋白乙的培育液中T淋巴細胞濃度不再增加,此時若要使T淋巴細胞接著增殖,可采納的方法是。細胞培育過程中,培育箱中通常要維持肯定的CO2濃度,CO2的作用是。
②僅依據圖1、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段,則會降低其刺激T淋巴細胞增殖的效果。
答案(1)編碼乙的DNA序列起始端無ATG,轉錄出的mRNA無起始密碼子(2)模板dNTP(3)①進行細胞傳代培育維持培育液的pH②C解析本題借助圖示模型考查基因工程技術和動物細胞培育技術的相關學問,考查考生針對特定生物學問題,運用模型與建模要素、演繹與推理要素等科學思維素養(yǎng)分析圖示及曲線并綻開探討的實力。(1)由題干中編碼蛋白乙的DNA序列可知,編碼乙的DNA序列起始端無ATG,轉錄出的mRNA上沒有起始密碼子AUG。(2)PCR須要的條件包括引物、耐高溫的DNA聚合酶、DNA模板、四種游離的脫氧核苷酸等。(3)①動物細胞培育中,細胞具有貼壁生長以及接觸抑制的特點,當細胞濃度達到a時,若要使T淋巴細胞接著增殖,須要在培育基中加入胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理貼壁生長的細胞并分瓶進行傳代培育;動物細胞培育過程中,須要在培育箱中通入肯定濃度的CO2,CO2的作用是維持培育液的pH。②由圖2可知,加入蛋白丙刺激T淋巴細胞增殖的效果明顯比加入蛋白甲、乙時低;結合圖1中編碼蛋白丙與蛋白甲、乙的DNA序列可知,缺少C片段所編碼的肽段,會明顯降低蛋白刺激T淋巴細胞增殖的效果。12.(2016課標全國Ⅱ,40,15分)如圖表示通過核移植等技術獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)圖中A表示正常細胞核,染色體數為2n,則其性染色體的組成可為。過程①表示去除細胞核,該過程一般要在卵母細胞培育至適當時期再進行,去核時常采納的方法。②代表的過程是。
(2)經過多次傳代后,供體細胞中的穩(wěn)定性會降低。因此,選材時必需關注傳代次數。
(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,從遺傳物質的角度分析其緣由是。
(4)與克隆羊“多莉(利)”培育勝利一樣,其他克隆動物的勝利獲得也證明白。
答案(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(3)卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的性狀產生影響(4)動物已分化體細胞的細胞核具有全能性解析本題通過問題遞進的命題方式考查動物克隆的原理與操作,屬于對歸納與概括、演繹與推理等科學思維素養(yǎng)的考查。(1)因供體的性別不確定,故其細胞核內的性染色體組成為XX或XY;一般將卵母細胞培育到MⅡ中期,用顯微操作法將其細胞核去除;②代表的過程是胚胎移植。(2)通常傳代培育10代以內的細胞可以保持正常的二倍體核型,超過10代以后,供體細胞中遺傳物質的穩(wěn)定性會降低。(3)克隆動物細胞質中的遺傳物質來自卵母細胞的細胞質,細胞質中的遺傳物質對克隆動物的性狀會產生影響。(4)克隆動物的勝利可以證明動物已分化的體細胞的細胞核具有全能性。13.(2014課標全國Ⅰ,40,15分)某探討者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數),結果如下圖所示。若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數目為40條),并將該細胞與體外培育的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數目為60條)按肯定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導細胞融合,經篩選培育及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞?;卮鹣铝袉栴}:(1)制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上,則小鼠最少須要經過次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細胞的是小鼠,理由是。
(2)細胞融合試驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有,體系中出現多種類型細胞的緣由是。
(3)雜交瘤細胞中有個細胞核,染色體數目最多是條(不考慮有點分裂)。
(4)未融合的B淋巴細胞經多次傳代培育后都不能存活,緣由是。
答案(1)4YY小鼠的血清抗體效價最高(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%(3)1100(4)不能無限增殖解析(1)分析題圖可知,經4次免疫后,小鼠Y的血清抗體效價就可達到16000以上。三只免疫小鼠達到要求后,Y小鼠的血清抗體效價最高,故最適合用于制備B淋巴細胞。(2)細胞融合試驗中,由于細胞融合是隨機的,而且誘導融合率不行能達到100%,所以會有未融合的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞、融合的具有同種核的細胞和雜交瘤細胞三種類型。(3)雜交瘤細胞同時具有B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的核物質,但細胞核只有一個。由于雜交瘤細胞在分裂過程中染色體可能會丟失,故細胞核中染色體數目最多是40+60=100(條)。(4)B淋巴細胞已經分化,沒有無限增殖的潛能。14.(2013海南單科,31,15分)單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-1)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測HSV-1?;卮鹣铝袉栴}:(1)在制備抗HSV-1的單克隆抗體的過程中,先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白,一段時間后,若小鼠血清中抗的抗體檢測呈陽性,說明小鼠體內產生了反應,再從小鼠的中獲得B淋巴細胞。將該B淋巴細胞與小鼠的細胞融合,再經過篩選、檢測,最終可獲得所需的雜交瘤細胞,該細胞具有的特點是。
(2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體,可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的中使其增殖,再從中提取、純化獲得。
(3)通過上述方法得到的單克隆抗體可精確地識別這種HSV-1蛋白,其緣由是該抗體具有和等特性。
答案(15分)(1)HSV-1蛋白(1分)體液免疫(1分,其他合理答案也給分)脾臟(1分,其他合理答案也給分)骨髓瘤(1分)無限增殖且產生專一抗體(3分,其他合理答案也給分)(2)腹腔腹水(每空2分,共4分)(3)純度高(2分)特異性強(2分,其他合理答案也給分)解析(1)制備單克隆抗體時,須要先給小鼠注射特定抗原(HSV-1蛋白),當小鼠血清中抗HSV-1蛋白的抗體檢測呈陽性時,就可從小鼠脾臟中獲得B淋巴細胞,將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經過篩選和克隆化培育,最終獲得既能無限增殖又能產生專一抗體的雜交瘤細胞。(2)單克隆抗體的獲得有兩條途徑,一是從體外細胞培育液中提純獲得,二是將雜交瘤細胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖,再從腹水中提取、純化獲得。(3)單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、純度高等特點??键c三胚胎工程15.(2016江蘇單科,11,2分)印度沙漠貓是一種珍稀貓科動物,通過胚胎工程技術,可以讓家貓代孕而繁育,主要步驟如圖所示。下列相關敘述正確的是 ()A.步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分割B.誘導超數排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C.受精卵發(fā)育成早期胚胎所需養(yǎng)分主要來源于培育液D.步驟甲運用的培育液和早期胚胎培育液成分基本相同答案B步驟甲、乙分別是體外受精和胚胎移植,A項錯誤;誘導超數排卵所注射的激素是促性腺激素,該激素只作用于性腺細胞,B項正確;受精卵發(fā)育成早期胚胎所需養(yǎng)分主要來源于卵細胞,C項錯誤;步驟甲運用的培育液(獲能溶液或專用的受精溶液)與早期胚胎培育液成分不完全相同,D項錯誤。解題關鍵解答本題的關鍵在于理解試管動物培育的過程、超數排卵的激素作用特點、早期胚胎培育的養(yǎng)分物質來源以及幾種不同培育液的成分(獲能溶液、體外受精培育液、早期胚胎培育液)。16.(2014江蘇單科,2,2分)下列關于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述,正確的是 ()A.通過細胞分裂不斷增加細胞數量,并在肯定時期發(fā)生細胞分化B.胚胎發(fā)育過程中細胞不斷分裂,但不發(fā)生凋亡C.隨著細胞分裂次數的增加,蛙胚的有機物總量不斷增加D.發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和養(yǎng)分物質漸漸增加答案A蛙胚胎發(fā)育過程包括細胞分裂增加細胞數目和細胞分化產生形態(tài)、結構和生理功能不同的細胞,A正確;在胚胎發(fā)育過程中,也存在著細胞凋亡,B錯誤;蛙胚發(fā)育過程,細胞不斷進行呼吸作用,消耗有機物,有機物總量不斷削減,C錯誤;蛙胚在發(fā)育過程中從環(huán)境中獲得氧氣,但養(yǎng)分物質來自蛙胚本身,由于代謝不斷地被消耗而削減,D錯誤。錯因分析本題錯選答案高度集中在D選項,主要緣由可能是學生對卵生動物胚胎發(fā)育過程,以及胚胎發(fā)育過程中養(yǎng)分物質的來源不清晰。17.(2014江蘇單科,19,2分)杜泊羊以其生長速度快、肉質好等優(yōu)點,被稱為“鉆石級”肉用綿羊。科研工作者通過胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如圖所示,相關敘述正確的是 ()A.為了獲得更多的卵母細胞,需用雌激素對雌性杜泊羊進行處理B.從卵巢中采集的卵母細胞可干脆與獲能的精子進行體外受精C.為避開代孕綿羊對植入胚胎產生排斥反應,應注射免疫抑制劑D.為了進一步擴大繁殖規(guī)模,可通過胚胎分割技術獲得同卵雙胎答案D為了獲得更多的卵母細胞,需用促性腺激素對雌羊進行處理,A錯誤;從卵巢中采集的卵母細胞,都須要在體外經人工培育成熟后才能與獲能的精子受精,B錯誤;代孕綿羊與供體綿羊為同種動物,所以代孕綿羊對移入子宮的同種外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應,C錯誤;胚胎分割技術可提高胚胎的利用率,擴大繁殖規(guī)模,D正確。疑難點撥①為了獲得更多的卵母細胞,須要對雌性杜泊羊進行超數排卵處理,而超數排卵處理注射的是外源促性腺激素。②從卵巢中采集的卵母細胞尚未成熟,須要培育至減數其次分裂中期才能與獲能精子進行受精。③探討證明,受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫反應,這是胚胎工程重要的生理學基礎,因此無需給胚胎受體母羊注射免疫抑制劑。18.(2013江蘇單科,13,2分)軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病,基因型為HH的個體早期死亡。一對夫妻均為該病患者,希望通過胚胎工程技術協(xié)助生育一個健康的孩子。下列做法錯誤的是 ()A.首先經超排卵處理后進行體外受精B.從囊胚中分別細胞,培育后檢測基因型C.依據檢測結果篩選基因型為hh的胚胎D.將胚胎培育至原腸胚期后移植到子宮答案D本題考查胚胎工程技術的詳細應用。體外受精時首先要利用相關激素處理雌性個體促進其排出更多的卵子;由于該對夫婦均為軟骨發(fā)育不全患者,因此他們的孩子可能患病,也可能正常,因此應從囊胚中分別細胞,培育后檢測其基因型,然后依據檢測結果選擇基因型為hh的胚胎進行胚胎移植;進行胚胎移植的最佳時期為桑椹胚期或囊胚期,原腸胚階段的細胞分而程度高,移植勝利率低,所以一般不選用原腸胚期的胚胎進行移植。解后反思胚胎工程的學問點并不多,而且多為識記性學問,理解起來并不難,只要考生踏實復習,并將該學問點與前后有關內容親密聯系,形成學問體系,就應當有良好的學習效果。19.(2012浙江理綜,2,6分)下列關于高等哺乳動物受精與胚胎發(fā)育的敘述,正確的是 ()A.絕大多數精卵細胞的識別具有物種特異性B.卵裂球細胞的體積隨分裂次數增加而不斷增大C.囊胚的滋養(yǎng)層細胞具有發(fā)育全能性D.原腸胚發(fā)育分化形成內外兩個胚層答案A此題考查受精作用與胚胎發(fā)育的相關學問。精卵細胞的識別具有物種特異性,卵細胞受精時,一般只能接受同種生物的精子,A正確;受精卵起先的幾次卵裂,由于沒有接受外來養(yǎng)分物質,細胞數目雖在增加,但卵裂球細胞總體積并沒有增大,甚至略有減小,B錯誤;囊胚由滋養(yǎng)層和內細胞團組成,滋養(yǎng)層細胞沒有發(fā)育全能性,將來發(fā)育成胚胎的附屬結構或胚外結構,內細胞團細胞才具有發(fā)育全能性,C錯誤;原腸胚已有外、中、內三個胚層的分化,D錯誤。20.(2012江蘇單科,9,2分)通過胚胎移植技術,可以實現良種牛的快速繁殖。下列相關敘述正確的是 ()A.對供體和受體母牛都要進行相同激素處理B.受精和胚胎的早期培育都須要在體外進行C.對沖卵獲得的原腸胚檢查合格后方可移植D.胚胎分割移植實現同卵多胎的勝利率較低答案D本題主要考查胚胎移植的有關問題。常用孕激素對受體母牛進行同期發(fā)情處理,對供體母牛還要注射促性腺激素做超數排卵處理,故A錯;受精和早期胚胎培育可在雌性動物體內完成,也可以在體外完成,故B錯;對沖卵獲得的桑椹胚或囊胚檢查合格后方可移植,故C錯;胚胎分割移植最常見的是同卵雙胎,而同卵多胎的勝利率很小,故D對。21.(2011江蘇單科,18,2分)下列關于胚胎工程的敘述,錯誤的是 ()A.體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應溶液中受精B.受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進行胚胎移植C.早期胚胎培育與動物細胞培育的培育液通常都需加入血清D.試管嬰兒技術主要包括體外受精、早期胚胎培育和胚胎移植技術答案B胚胎工程中,受精卵一般發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段進行胚胎移植。22.(2011浙江理綜,2,6分)培育“試管山羊”的基本過程如下圖所示。若要培育勝利,下列敘述正確的是 ()受精卵早期胚胎代孕母羊試管山羊A.甲過程中可通過給母山羊注射有關激素使其超數排卵B.乙過程的目的之一是促進卵母細胞和精子的成熟C.丙過程與乙過程中應采納相同成分的培育液D.丁過程中早期胚胎須移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內答案A分析圖示可知,甲過程為卵母細胞的采集,一般用促性腺激素處理良種母山羊,使其超數排卵。乙過程為精子獲能以及受精,獲能的精子和成熟的卵子在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精。丙過程為早期胚胎培育,在發(fā)育培育液中進行。丁過程是胚胎移植,是指將早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物子宮內使之接著發(fā)育。故A項正確。23.(2015山東理綜,36,12分)治療性克隆對解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應具有重要意義。流程如下:(1)過程①采納的是細胞工程中的技術,過程②采納的是胚胎工程中的技術。
(2)體細胞進行體外培育時,所需氣體主要有O2和CO2,其中CO2的作用是維持培育液(基)的。
(3)假如克隆過程中需進行基因改造,在構建基因表達載體(重組載體)時必需運用和兩種工具酶?;虮磉_載體上除目的基因外,還需有基因,以便選出勝利導入基因表達載體的細胞。
(4)胚胎干細胞可以來自囊胚中的。在肯定條件下,胚胎干細胞可以分化形成不同的組織器官。若將圖中獲得的組織器官移植給個體(填“A”或“B”),則不會發(fā)生免疫排斥反應。
答案(1)(體細胞)核移植(早期)胚胎培育(2)pH(或酸堿度)(3)限制性(核酸)內切酶(或限制酶)DNA連接酶(注:兩空可顛倒)標記(4)內細胞團B解析(1)圖中①過程采納的是體細胞核移植技術;過程②為重組細胞經胚胎培育發(fā)育至早期胚胎的過程,利用了(早期)胚胎培育技術。(2)動物細胞培育時,氣體環(huán)境為95%的空氣和5%的CO2,CO2的作用是維持培育液(基)的pH。(3)構建基因表達載體時,需用的工具酶為限制酶和DNA連接酶。基因表達載體上除目的基因外,還須要有標記基因、啟動子、終止子等。標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。(4)囊胚中的內細胞團具有發(fā)育的全能性,可以作為胚胎干細胞的來源。通過核移植技術獲得的組織器官若移植給核供體,則不會發(fā)生免疫排斥反應。解題關鍵識別題圖中胚胎工程各步驟的名稱是解答本題的關鍵。24.(2015重慶理綜,8,20分)某課題組為解決本地奶牛產奶量低的問題,引進了含高產奶基因但對本地適應性差的純種公牛。(1)擬進行如下雜交:♂A(具高產奶基因的純種)×♀B(具相宜本地生長基因的純種)→C選擇B作為母本,緣由之一是胚胎能在母體內正常。若C中的母牛表現為相宜本地生長,但產奶量并未提高,說明高產奶是性狀。為獲得產奶量高且相宜本地生長的母牛,依據現有類型,最佳雜交組合是,后代中出現這種母牛的概率是(假設兩對基因分別位于不同對常染色體上)。
(2)用以上最佳組合,按以下流程可加速獲得優(yōu)良個體。精子要具有受精實力,需對其進行處理;卵子的成熟在過程中完成。在過程④的培育基中含有葡萄糖,其作用是。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛,過程⑤前應鑒定胚胎的。子代母牛的優(yōu)良性狀與過程的基因重組有關。
(3)為了提高已有胚胎的利用率,可采納技術。
答案(20分)(1)生長發(fā)育或胚胎發(fā)育隱性♂A×♀C1/8(2)獲能或增加活力③供能性別、高產奶和適應生長的基因②(3)胚胎分割解析(1)由于B是具有相宜本地生長基因的純合子,故選擇B作為母本,可使胚胎在母體內正常生長發(fā)育。讓B與純合的具有高產奶基因的A雜交得到C,C中的母牛的產奶量并未提高,可推知高產奶是隱性性狀,而C為雜合子。因引進的是含高產奶基因的純種公牛,故可選用♂A×♀C雜交組合,后代中高產奶且相宜本地生長的母牛的概率為1/2×1/2×1/2=1/8。(2)精子需進行獲能處理,才能具有受精實力。卵子的成熟在受精過程(過程③)中完成。胚胎培育中,葡萄糖的作用是供應能量。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛,在胚胎移植前應鑒定胚胎的性別、高產奶和適應生長的基因。經過過程②的基因重組產生同時含有高產奶基因和適應本地生長基因的卵細胞,是后代出現高產奶且相宜本地生長母牛的前提。(3)可通過胚胎分割技術提高已有胚胎的利用率。25.(2014福建理綜,33,10分)Rag2基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞??蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如圖:(1)步驟①中,在核移植前應去除卵母細胞的。
(2)步驟②中,重組胚胎培育到期時,可從其內細胞團分別出ES細胞。
(3)步驟③中,須要構建含有Rag2基因的表達載體??梢砸罁ag2基因的設計引物,利用PCR技術擴增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側進行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段干脆連接到表達載體,所選擇的表達載體上應具有
酶的酶切位點。(4)為檢測Rag2基因的表達狀況,可提取治療后小鼠骨髓細胞的,用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交試驗。
答案(1)細胞核(2)囊胚(3)核苷酸序列HindⅢ和PstⅠ(4)蛋白質解析(1)核移植是把體細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中。(2)囊胚期才有內細胞團。(3)可依據目的基因的核苷酸序列設計引物,要把目的基因和表達載體干脆連接,目的基因和表達載體應具有相同酶的酶切位點。(4)欲檢測Rag2基因的表達狀況,需提取治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質,進行抗原—抗體雜交試驗。26.(2013福建理綜,33,10分)克隆豬勝利率較低,與早期胚胎細胞的異樣凋亡有關。Bcl-2基因是細胞凋亡抑制基因,用PCR技術可以檢測該基因轉錄水平,進而了解該基因與不同胚胎時期細胞凋亡的關系??寺∝i的培育及該基因轉錄水平檢測流程如圖。請回答:(1)圖中重組細胞的細胞核來自細胞,早期胚胎移入受體子宮后接著發(fā)育,經桑椹胚、囊胚和胚最終發(fā)育為克隆豬。
(2)在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數,進而計算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數,從而反映出Bcl-2基因的轉錄水平。①圖中X表示過程。
②從基因組數據庫中查詢Bcl-2mRNA的核苷酸序列,以便依據這一序列設計合成用于PCR擴增,PCR擴增過程第一輪循環(huán)的模板是。
答案(1)體原腸(2)①反轉錄②引物Bcl-2cDNA解析(1)圖中重組細胞的細胞核來自良種豬的體細胞,胚胎發(fā)育過程中囊胚接著發(fā)育形成原腸胚。(2)以mRNA為模板形成DNA的過程為反轉錄(或逆轉錄)。PCR擴增的前提是須要有一段已知的核苷酸片段,以便依據這一序列合成引物。圖示可知,PCR擴增過程第一輪循環(huán)的模板是以mRNA為模板反轉錄形成的cDNA,因引物是依據Bcl-2mRNA的核苷酸序列合成,故模板實際是其中的Bcl-2cDNA。試題點評本題通過胚胎工程和基因工程的綜合學問,主要考查學生對基礎學問的識記和理解應用實力。27.(2012山東理綜,35,8分)毛角蛋白Ⅱ型中間絲(KIFⅡ)基因與絨山羊的羊絨質量親密相關。獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡潔流程如圖。(1)過程①中最常用的運載工具是,所須要的酶是限制酶和。
(2)在過程②中,用處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞。在培育過程中,將成纖維細胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中,CO2的作用是。
(3)在過程③中,用處理以獲得更多的卵(母)細胞。成熟卵(母)細胞在核移植前須要進行處理。
(4)從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術是。在胚胎移植前,通過技術可獲得較多胚胎。
答案(1)質粒DNA連接酶(2)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)維持培育基(液)的pH(3)促性腺激素(或促濾泡素,孕馬血清)去核(4)(早期)胚胎培育胚胎分割解析此題綜合考查基因工程、細胞工程、胚胎工程等學問。(1)構建基因表達載體時,一般需用同一種限制酶切割目的基因和載體,以產生相同黏性末端,并用DNA連接酶連接成重組表達載體。常用的載體是質粒。(2)利用胰蛋白酶或膠原蛋白酶可將動物組織分散成單個細胞。動物細胞培育時,需將細胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中,CO2的作用是維持培育液的pH。(3)運用超數排卵法可獲得更多的卵母細胞,常用的激素是促性腺激素或促濾泡素。成熟卵細胞在核移植前要進行去核處理。(4)核移植時獲得的重組細胞經過早期胚胎培育,可以獲得早期胚胎。為獲得更多胚胎,可以運用胚胎分割法。28.(2011福建理綜,32,10分)一對表現型正常的夫婦,生了一個鐮刀型細胞貧血癥(常染色體隱性遺傳病)患兒。在他們欲生育其次胎時,發(fā)覺妻子的雙側輸卵管完全堵塞,不能完成體內受精。醫(yī)生為該夫婦實施了體外受精和產前基因診斷,過程如圖。請回答:(1)過程①是指在體外進行的處理,從而使精子與卵子結合形成受精卵;過程②稱為。
(2)在對胎兒進行鐮刀型細胞貧血癥的產前基因診斷時,要先從羊水中的胎兒細胞提取物質③進行PCR擴增,然后用MstⅡ對擴增產物進行切割,產生多個片段的酶切產物。據此推斷,MstⅡ是一種酶。
(3)不同長度的酶切產物在電泳時移動的速率不同,形成不同的電泳條帶。該家庭成員的鐮刀型細胞貧血癥基因分析的電泳帶譜如④,據此推斷該胎兒為(正常/患者/攜帶者)。
答案(1)精子獲能胚胎移植(2)DNA限制性核酸內切(3)正常解析分析題中過程圖可發(fā)覺:過程①指的是精子獲能處理,②則代表胚胎移植;在產前基因診斷時,要先從羊水中的胎兒細胞提取DNA進行PCR擴增,然后用限制性核酸內切酶MstⅡ進行切割,以得到多種不同長度的酶切產物(基因);分析電泳帶譜可推斷,胎兒不含致病基因,表現應當正常?!?年模擬】時間:30分鐘分值:30分一、單項選擇題(每小題2分,共16分)1.(2025屆山東菏澤月考,14)如圖表示利用棉花葉肉細胞原生質體培育進行遺傳改良的過程。下列分析錯誤的是 ()A.①過程需用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B.②過程能定向誘導原生質體產生具有優(yōu)良性狀的突變C.通過①③過程葉肉細胞失去了其特有的結
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