臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)技術(shù)-13-第十三章 腦脊液檢驗(yàn)

第十三章腦脊液檢驗(yàn)本章內(nèi)容第一節(jié)腦脊液的標(biāo)本采集與處理第二節(jié)腦脊液理學(xué)檢驗(yàn)第三節(jié)腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)第四節(jié)腦脊液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗(yàn)第五節(jié)腦脊液檢驗(yàn)的臨床意義腦脊液（cerebrospinalfluid，CSF）主要是由腦室脈絡(luò)叢通過(guò)主動(dòng)分泌和超濾作用以及腦室的室管膜和蛛網(wǎng)膜下腔產(chǎn)生，循環(huán)流動(dòng)于腦室、蛛網(wǎng)膜下腔和脊髓中央管中的一種無(wú)色透明液體。成年人：約120m1～180m1，新生兒：約10ml～60ml（1）緩沖保護(hù)作用（2）運(yùn)輸（3）調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓力和pH的穩(wěn)定性（4）參與神經(jīng)內(nèi)分泌總?cè)萘可碜饔猛ㄟ^(guò)對(duì)腦脊液的檢驗(yàn)，可了解腦脊液的改變，達(dá)到對(duì)中樞神經(jīng)系疾病的診斷、治療和預(yù)后判斷的目的。第一節(jié)腦脊液的標(biāo)本采集與處理一、標(biāo)本采集腦脊液標(biāo)本的采集一般由臨床醫(yī)師通過(guò)腰椎穿刺采集★每管2ｍL腦脊液第1管化學(xué)與免疫學(xué)檢查第2管微生物檢查第3管常規(guī)檢查★疑有惡性腫瘤，另采集1管作脫落細(xì)胞檢查。二、標(biāo)本處理1、應(yīng)立即送檢，并于1小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)完畢。

2、若不能及時(shí)檢查，需在2～4℃環(huán)境下保存，4小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)。

3、標(biāo)本放置過(guò)久可導(dǎo)致細(xì)胞破壞、葡萄糖等化學(xué)成分分解、細(xì)菌溶解等，影響檢驗(yàn)結(jié)果。第二節(jié)腦脊液理學(xué)檢驗(yàn)一、顏色（一）檢測(cè)原理肉眼觀察腦脊液顏色變化，分別以無(wú)色、乳白色、紅色、棕色、黑色、綠色等描述。（二）參考區(qū)間

無(wú)色或淡黃色。（三）臨床意義當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有炎癥、損傷、腫瘤或梗阻時(shí)，破壞了血-腦脊液屏障，使腦脊液成分發(fā)生改變，而導(dǎo)致其顏色發(fā)生變化。表

腦脊液的顏色變化及臨床意義二、透明度（一）檢測(cè)原理肉眼觀察腦脊液透明度變化，分別以“清晰透明”、“微渾”、“渾濁”等描述。（二）參考區(qū)間

清晰透明。（三）腦脊液的臨床意義透明度與其所含有的細(xì)胞和細(xì)菌數(shù)量有關(guān)?；撔阅X膜炎時(shí)，腦脊液呈明顯乳白色渾濁。結(jié)核性腦膜炎時(shí)，腦脊液呈毛玻璃樣渾濁。穿刺損傷帶入紅細(xì)胞，腦脊液可呈輕微的紅色渾濁。表

腦脊液新鮮出血與陳舊性出血的鑒別三、凝固性（一）檢測(cè)原理肉眼觀察腦脊液放置是否有沉淀、凝塊或薄膜。（二）參考區(qū)間放置12～24小時(shí)后無(wú)薄膜、凝塊或沉淀。（三）臨床意義腦脊液形成凝塊或薄膜與其所含的蛋白質(zhì)，尤其是與纖維蛋白原的含量有關(guān)?；撔阅X膜炎的腦脊液靜置1～2小時(shí)內(nèi)即可出現(xiàn)凝固或沉淀物結(jié)核性腦膜炎的腦脊液靜置12～24小時(shí)，可見(jiàn)液面由纖細(xì)的薄膜形成。神經(jīng)梅毒的腦脊液可有小絮狀凝塊。蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液呈黃色膠樣凝固。腦脊液同時(shí)存在膠樣凝固、黃變癥和蛋白質(zhì)-細(xì)胞分離（蛋白質(zhì)明顯增高，細(xì)胞正?；蜉p度增高）稱為Froin-Nonne綜合征，這是蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液特點(diǎn)。四、比重（一）檢測(cè)原理常用折射儀檢測(cè)比重。（二）參考區(qū)間腰椎穿刺：1.006～1.008；腦室穿刺：1.002～1.004；小腦延髓池穿刺：1.004～1.008。（三）臨床意義1.增高主要見(jiàn)于化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎等顱內(nèi)各種炎癥性病變；腦腫瘤、腦出血、腦積水等顱內(nèi)非炎癥性病變；高血壓、動(dòng)脈硬化等顱外因素等。2.減低主要見(jiàn)于腦脊液循環(huán)受阻；腦脊液分泌減少；腦脊液流失過(guò)多等因素。第三節(jié)腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)（細(xì)胞學(xué)、病原學(xué)檢查）一、細(xì)胞學(xué)檢查（一）檢測(cè)原理1.細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)（1）儀器計(jì)數(shù)法。（2）顯微鏡計(jì)數(shù)法：直接計(jì)數(shù)法和稀釋計(jì)數(shù)法。2.白細(xì)胞計(jì)數(shù)（1）儀器計(jì)數(shù)法。（2）顯微鏡計(jì)數(shù)法：直接計(jì)數(shù)法和稀釋計(jì)數(shù)法。3.白細(xì)胞分類(lèi)（1）儀器分類(lèi)法。（2）顯微鏡分類(lèi)法：①直接分類(lèi)法：?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞所占的比例，以百分?jǐn)?shù)表示。②染色分類(lèi)法制備涂片后Wright染色。（二）方法評(píng)價(jià)1.細(xì)胞計(jì)數(shù)（1）儀器計(jì)數(shù)法精密度高、速度快、報(bào)告及時(shí)。形態(tài)學(xué)報(bào)警，必須進(jìn)行顯微鏡計(jì)數(shù)法復(fù)查。（2）顯微鏡計(jì)數(shù)法操作繁瑣，但可作為校正儀器的參考方法。表

腦脊液白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)2.白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)（三）質(zhì)量控制1.細(xì)胞計(jì)數(shù)：（1）及時(shí)檢查（2）校正（3）形態(tài)（4）辨別2.分類(lèi)計(jì)數(shù)：（1）離心速度不宜過(guò)快、時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。（2）細(xì)胞涂片應(yīng)厚薄均勻，固定時(shí)間不能太長(zhǎng)，更不能高溫固定。（四）參考區(qū)間紅細(xì)胞：無(wú)；白細(xì)胞：成人（0～8）×106/L，

兒童（0～15）×106/L；有核細(xì)胞分類(lèi)：多為淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞（7:3）內(nèi)皮細(xì)胞偶見(jiàn)。圖

腦脊液中淋巴細(xì)胞圖

腦脊液中中性粒細(xì)胞（五）臨床意義1.腦脊液細(xì)胞數(shù)增高的程度及細(xì)胞種類(lèi)的臨床意義表

腦脊液細(xì)胞數(shù)增高及細(xì)胞分類(lèi)的臨床意義2.腔壁細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和污染細(xì)胞檢查的臨床意義。表

腦脊液腔壁細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和污染細(xì)胞檢查的臨床意義圖

腦脊液脈絡(luò)叢細(xì)胞圖

腦脊液原始粒細(xì)胞（急性粒細(xì)胞白血?。?/p>

圖

腦脊液腫瘤細(xì)胞（胃癌轉(zhuǎn)移）二、病原學(xué)檢查（一）檢測(cè)原理1.細(xì)菌（1）顯微鏡檢查（2）細(xì)菌培養(yǎng)（3）ELISA法2.寄生蟲(chóng)（1）顯微鏡檢查（2）腦囊蟲(chóng)檢查3.梅毒螺旋體檢查（二）質(zhì)量控制1.苛養(yǎng)菌宜在床邊采集和接種腦脊液標(biāo)本，同時(shí)作涂片檢查，以獲得初步診斷。2.顱內(nèi)膿腫需考慮標(biāo)本在厭氧條件下轉(zhuǎn)運(yùn)和培養(yǎng)。（三）參考區(qū)間陰性（四）臨床意義1.細(xì)菌檢查：排除污染因素，檢出細(xì)菌均視為有病原菌感染。2.寄生蟲(chóng)檢查：檢出寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵和蟲(chóng)體即可診斷為寄生蟲(chóng)病。第四節(jié)腦脊液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗(yàn)一、蛋白質(zhì)（一）檢測(cè)原理1.蛋白質(zhì)定性檢查常用方法：潘迪試驗(yàn)（Pandy試驗(yàn)）硫酸銨試驗(yàn)（Ross-Jone試驗(yàn)、Nonne-Apelt試驗(yàn)）

Lee-Vinson試驗(yàn)2.蛋白質(zhì)定量檢測(cè)常用方法：磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法雙縮脲法、染料結(jié)合法、免疫學(xué)法表

腦脊液蛋白質(zhì)定性檢查原理（二）方法評(píng)價(jià)1.蛋白質(zhì)定性檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表13-4-2。表13-4-2

腦脊液蛋白質(zhì)定性檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)2.蛋白質(zhì)定量檢測(cè)方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表13-3-3。表13-3-3

腦脊液蛋白質(zhì)定量檢測(cè)方法學(xué)評(píng)價(jià)（三）質(zhì)量控制1.蛋白質(zhì)定性檢查（1）假陽(yáng)性（2）假陰性（3）紅細(xì)胞過(guò)多時(shí)，須離心處理。（4）Pandy試驗(yàn)過(guò)于敏感2.蛋白質(zhì)定量檢測(cè)（1）如有多量細(xì)胞或渾濁，應(yīng)先離心取上清液測(cè)定。（2）蛋白質(zhì)濃度過(guò)高，稀釋后重新檢測(cè)。（3）注意磺基水楊酸-硫酸鈉法手工測(cè)定。（四）參考區(qū)間1.蛋白質(zhì)定性：陰性或極弱陽(yáng)性。2.蛋白質(zhì)定量：腰椎穿刺：0.2～0.4g/L；腦室穿刺：0.05～0.15g/L；小腦延髓池穿刺：0.1～0.25g/L。（五）臨床意義腦脊液蛋白含量增高，是血腦屏障被破壞的標(biāo)志，常見(jiàn)于：

1.中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥

2.神經(jīng)根病變

3.椎管內(nèi)梗阻

4.其他

二、葡萄糖（一）檢測(cè)原理多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。（二）方法評(píng)價(jià)1.葡萄糖氧化酶法反應(yīng)特異性低。2.己糖激酶法特異性和準(zhǔn)確性。（三）質(zhì)量控制1.將標(biāo)本用量加倍可提高檢測(cè)的靈敏度。2.病理情況下腦脊液常含有細(xì)胞和細(xì)菌，應(yīng)在留取標(biāo)本后及時(shí)檢測(cè)。3.不能及時(shí)處理需要加適量防腐劑預(yù)防假性降低。（四）參考區(qū)間腰椎穿刺：2.5～4.4mmol/L；腦室穿刺：3.0～4.4mmol/L；小腦延髓池穿刺：2.8～4.2mmol/L。（五）臨床意義腦脊液葡萄糖的高低與血糖濃度、血-腦脊液屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有關(guān)。1.生理性變化（1）早產(chǎn)兒及新生兒（2）飽餐或靜脈注射葡萄糖后2.病理性變化（1）增高：見(jiàn)于①腦或蛛網(wǎng)膜下腔出血所致的血性腦脊液；②病毒性腦膜炎或腦炎；③急性顱腦外傷、中毒、缺氧、腦出血等所致丘腦下部損傷等；④糖尿病等。（2）減低：見(jiàn)于①細(xì)菌性腦膜炎和真菌性腦膜炎，以化膿性腦膜炎早期減低最明顯；葡萄糖含量越低，則預(yù)后越差；②腦腫瘤；③神經(jīng)梅毒；④腦寄生蟲(chóng)??；⑤低血糖。三、氯化物（一）檢測(cè)原理測(cè)定的方法有硝酸汞滴定法、電量分析法、硫氰酸汞比色法、離子選擇性電極法等。臨床常用電極法。（二）方法評(píng)價(jià)腦脊液氯化物檢測(cè)的方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表13-4-4。表13-3-4腦脊液氯化物檢測(cè)的方法學(xué)評(píng)價(jià)（三）質(zhì)量控制1.離子選擇性電極法應(yīng)及時(shí)擦去或更換電極。2.電量分析法可選用純?cè)噭┻M(jìn)行空白校正，通過(guò)預(yù)電解除去雜質(zhì)。（四）參考區(qū)間成人：120～130mmol/L；兒童：111～123mmol/L。（五）臨床意義腦脊液氯化物含量約為血漿的1.2～1.3倍。1.減低：見(jiàn)于①細(xì)菌性或真菌性腦膜炎早期等；②細(xì)菌性腦膜炎的后期；③嘔吐、腎上腺皮質(zhì)功能減退癥和腎臟病變；④病毒性腦炎、脊髓灰質(zhì)炎、腦腫瘤。2.增高：主要見(jiàn)于腎炎、心力衰竭、尿毒癥、脫水和漿液性腦膜炎等。四、酶臨床檢測(cè)常用酶：天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）乳酸脫氫酶（LD）腺苷脫氨酶（ADA）肌酸激酶（CK）溶菌酶（LZM）（二）質(zhì)量控制1.避免溶血出現(xiàn)假性增高。2.避免高溫、劇烈振蕩果。（三）參考區(qū)間腦脊液主要酶參考區(qū)間見(jiàn)表13-4-5。（一）檢測(cè)原理除溶菌酶外多用酶速率法，溶菌酶多數(shù)采用比濁法進(jìn)行測(cè)定。（四）臨床意義表13-4-5腦脊液主要酶參考區(qū)間及濃度增高的臨床意義五、蛋白電泳（一）檢測(cè)原理常用乙酸纖維薄膜電泳法、瓊脂糖凝膠電泳法。（二）方法評(píng)價(jià)1.電泳條件與血清蛋白電泳相同。2.若采用等電聚焦電泳可提高電泳圖譜的分辨率。3.高效毛細(xì)管電泳法，分辨率更強(qiáng)，且腦脊液標(biāo)本無(wú)需濃縮。（三）質(zhì)量控制標(biāo)本在高分子聚乙二醇或右旋糖酐透析液中需濃縮（四）參考區(qū)間前白蛋白：3%～6%；白蛋白：50%～70%；α1球蛋白4%～6%；α2球蛋白：4%～9%；β球蛋白：7%～13%；γ球蛋白：7%～8%。蛋白商（球蛋白/白蛋白比值）：0.4～0.8。（五）臨床意義1.腦脊液蛋白電泳的臨床意義見(jiàn)表13-4-6。表13-4-6腦脊液蛋白電泳的臨床意義2.蛋白商變化（1）增高：主要見(jiàn)于腦脊髓灰質(zhì)炎、神經(jīng)梅毒、多發(fā)性硬化癥、亞急性梗死性全腦膜炎等。（2）減低：主要見(jiàn)于脊髓壓迫癥、腦瘤、化膿性腦膜炎急性期等。六、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）正常腦脊液中免疫球蛋白含量極少,主要為IgG。（一）檢測(cè)原理主要有免疫電泳法、免疫散射比濁法和免疫擴(kuò)散法。（二）方法評(píng)價(jià)1.凝膠沉淀試驗(yàn)操作繁瑣、靈敏度低，耗時(shí)長(zhǎng)等2.免疫比濁法靈敏、快速且能自動(dòng)化測(cè)定。（三）參考區(qū)間IgG：10～40mg/L；IgA：0～6mg/L；IgM：0～0.22mg/L；IgE：極少量。（四）臨床意義表13-4-7腦脊液中免疫球蛋白增高的臨床意義七、髓鞘堿性蛋白（

myelinbasicprotein,MBP）（一）檢測(cè)原理MBP是神經(jīng)組織獨(dú)有的一種蛋白質(zhì)，具有很強(qiáng)的組織和細(xì)胞特異性，是腦組織實(shí)質(zhì)性損傷的特異性標(biāo)記。測(cè)定多采用放射免疫法和ELISA法。（二）參考區(qū)間<4μg/L。（三）臨床意義1.MBP增高：見(jiàn)于惡性神經(jīng)鞘瘤、多