酶制劑質(zhì)量要求第2部分脂肪酶制劑編制說明

《酶制劑質(zhì)量要求第2部分：脂肪酶制劑》編制說明入2019年國家標(biāo)準(zhǔn)制修訂計劃，項目編號20194226-T-469。全國食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化GB/T23535-2009《脂肪引導(dǎo)行業(yè)健康發(fā)展，根據(jù)行業(yè)需要，對脂肪酶準(zhǔn)化基礎(chǔ)研究攻關(guān)，組織開展《酶制劑質(zhì)量要求第2部分：脂肪酶制劑》國家標(biāo)準(zhǔn)的2022年1月-6月，對行業(yè)征集樣品感官、細(xì)度、干燥失重等指標(biāo)進(jìn)行普測，了解2023年1月-6月，開展脂肪酶活力測定方法的條件優(yōu)化工作，建立酶活力測定方我國加入WTO后，與國際貿(mào)易接軌，向世界先進(jìn)水平靠攏根據(jù)《國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會秘書處關(guān)于征求對<食品質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)清理結(jié)論（征），家標(biāo)準(zhǔn)清理工作。全國食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會工業(yè)發(fā)酵分技術(shù)委員會秘書處“本文件適用于微生物發(fā)酵生產(chǎn)的脂肪酶制劑產(chǎn)品的生產(chǎn)、檢驗和銷售?！备鶕?jù)標(biāo)準(zhǔn)中技術(shù)要求和試驗方法等引用文件料和加工助劑專家組（CER）法規(guī)關(guān)于酶制劑定義，規(guī)范了“脂肪酶活力”表述，增加了“脂肪酶活力單位”、“脂肪酶制劑”、“脂肪酶制劑活力”定義。其中，考慮脂肪酶制劑不同的使用條件和評價方式，“脂肪酶活力單位”增加“注：也可根據(jù)所采用的酶活力測定方法，另行約定相應(yīng)的酶活力單位”表述。按照GB/T1.1-2020規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)文本描述。色澤要求中，固體劑型和液體劑型均增加體劑型統(tǒng)一改為“無異味，有本品固有的發(fā)酵氣味”。制化等特點，單純酶活力技術(shù)要求不適應(yīng)產(chǎn)品規(guī)格多樣化發(fā)展趨勢，因此將“脂肪酶制定的酶活力規(guī)格執(zhí)行，提供相應(yīng)的測定方法條件。干燥失重指標(biāo)要求維持原標(biāo)準(zhǔn)不變，），GB/T23527-2009外，共收集了5家企業(yè)反饋的9份脂肪酶活力測定方法，同時整理了未觀察到直徑＞10μm液滴。四種乳化劑中表1乳化劑信息ABCDABCD圖1顯微鏡下四種乳化劑乳液表2四種乳化劑乳液液滴數(shù)量AB716；914；902；808；481；522；799；CD圖2四種乳化劑乳液液滴直徑范圍），兩次處理，間隔5min，每次處理3min），冰水浴控制溫度，處理過程中溫度不超過兩次處理，間隔5min，每次處理3min），冰水浴控制溫度，處理過程中溫度不超過經(jīng)觀察和統(tǒng)計，25%底物溶液顯微鏡觀察到的乳液液滴數(shù)量為418，20%底物溶液圖3橄欖油濃度25%與20%乳液液滴圖表3橄欖油濃度25%與20%乳液液滴數(shù)量名稱液滴數(shù)量（個）平均數(shù)（個）RSD2%滬試聚乙烯醇-20min磁力攪拌467；366；258；217；447；360；580；434；612；272；361；418±11327.15%（3-5-3）10倍-25%-30℃519；459；482；437；2%滬試聚乙烯醇-20min磁力攪拌（3-5-3）10倍-20%-30℃240；261；289；303；408；300±6521.66%表4橄欖油濃度25%與20%乳液液滴直徑>10μm7.84%；9.14%；8.29%；9.96%；8.65%；圖4橄欖油濃度25%與20%乳液液滴圖圖5橄欖油底物濃度的優(yōu)化底物乳化過程中，比較30℃以下和60℃條件下的乳化底物的乳化效果，并對同一底物乳化溫度控制在30℃時顯微鏡觀察到的乳液液滴直徑＜3μm的液滴占比為結(jié)果表明，乳化溫度為30℃以下和60℃時，平行性均滿足要求，但60℃乳化后的底物溶液所測得酶活力高于30℃以下的酶活力。結(jié)論：乳化劑乳化溫度應(yīng)控制在60℃。圖6乳化溫度為30℃以下與60℃時所測得酶活力表5脂肪酶制劑不同酶濃度的測定結(jié)果稀釋倍數(shù)樣品與對照消耗堿量之差（mL）測定酶活（U/g）2.944-3.092100412.212-2.4321148520001.636-1.7241127325001.358-1.5481236230000.762-0.848800835000.718-0.8328953表6脂肪酶制劑不同樣品與對照消耗堿量之差區(qū)間的結(jié)果樣品與對照消耗堿量之差區(qū)間（mL）0.718-3.0921.358-2.4321.636-2.432最小值（U/g）80081127311273最大值（U/g）123621236211485極差（U/g）4354211平均值（U/g）103541170711379標(biāo)準(zhǔn)差577RSD%16.00%4.93%1.31%圖7氫氧化鈉溶液最適消耗量結(jié)果顯示，磷酸鹽緩沖液與底物混合對pH值影響較小，在酶促反應(yīng)前圖8酶促反應(yīng)過程中pH值的變化然后于A、B杯中各加待測酶液1.00mL（A杯空白杯不計時直接加入，B杯按每30s間隔加入待測酶液，加入B1時秒表開始從0計時），加入時避免