園藝植物生物技術(shù)整合版

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第一章緒論

1.什么是生物技術(shù)(biotechnology)Pl

答：生物技術(shù)(biotechnology)是以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合其他基礎(chǔ)學(xué)科

的科學(xué)原理，利用生物(或生物組織、細(xì)胞、器官、染色體、基因、核酸片段

等)的特性和功能，設(shè)計(jì)、構(gòu)建具有預(yù)期性能的新物質(zhì)或新品系，加工生產(chǎn)產(chǎn)

品或提供服務(wù)的綜合性技術(shù)。

生物技術(shù)包括傳統(tǒng)生物技術(shù)與現(xiàn)代生物技術(shù)。傳統(tǒng)生物技術(shù)是指通過(guò)微生物的

初級(jí)發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)產(chǎn)品，如醬油、醋、酒、面包、奶酪、酸奶等食品的制作技

術(shù)?，F(xiàn)代生物技術(shù)是指以現(xiàn)代生物學(xué)理論為基礎(chǔ)，以基因工程為核心的一系列

技術(shù)的總稱。

生物技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)林牧漁、醫(yī)藥食品、輕工業(yè)、化學(xué)工業(yè)和能源等領(lǐng)

域，與人民生活息息相關(guān)。

2.什么是園藝植物生物技術(shù)(biotechnologyinhorticulturalplants)Pl

答：園藝植物生物技術(shù)(biotechnologyinhorticulturalplants)以園藝植

物為材料，利用生物技術(shù)，創(chuàng)造或改良種質(zhì)或生物制品的一門技術(shù)，它是園藝學(xué)

和生物技術(shù)的交叉技術(shù)學(xué)科，是在植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞工程、植物染色體

工程、植物基因工程、植物分子標(biāo)記和生物信息學(xué)等現(xiàn)代生物技術(shù)手段基礎(chǔ)上

產(chǎn)生和發(fā)展起來(lái)的。這些先進(jìn)的現(xiàn)代生物技術(shù)在園藝科學(xué)上的應(yīng)用構(gòu)成了園藝

植物生物技術(shù)的主要內(nèi)容。

3.園藝植物生物技術(shù)的主要內(nèi)容有哪些P1——5

答：①園藝植物組織培養(yǎng)(也稱園藝植物離體培養(yǎng))

指無(wú)菌和人工控制的環(huán)境條件下，利用人工培育基，對(duì)園藝植物的胚胎（成熟

和未成熟的胚、胚乳、胚珠、子房等）、器官、（根、莖、葉、花、果實(shí)、種

子等）、組織（分生組織、形成層、韌皮部、表皮、表層、薄壁組織、髓部

等）、細(xì)胞（體細(xì)胞、生殖細(xì)胞等）、原生質(zhì)體等進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其再生發(fā)

育成完整植株的過(guò)程。植物細(xì)胞全能性是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。

②園藝植物細(xì)胞工程

指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過(guò)某種工程手段，以植物細(xì)

胞為基本單位，在離體條件下進(jìn)行培養(yǎng)、增殖，或人為地使細(xì)胞某些生物學(xué)特

性按人們的意愿發(fā)生改變，從而達(dá)到改良品種和創(chuàng)造新品種，加速植物繁殖或

獲得某種有用物質(zhì)的過(guò)程。

③園藝植物染色體工程

培養(yǎng)獲得單倍體，通過(guò)染色體加倍，迅速獲得純系；誘導(dǎo)多倍體，通過(guò)選育直

接獲得多倍體品種；通過(guò)染色體交換、附加或易位，獲得染色體代換

系、附加系或易位系。

④園藝植物基因工程

是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將

不同來(lái)源的基因（或DNA分子），按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜交DNA

分子，然后導(dǎo)入園藝植物細(xì)胞，以改良園藝植物原有的遺傳特性，獲得新種質(zhì)

或新品種。

⑤園藝植物分子標(biāo)記

廣義分子標(biāo)記是指可遺傳的并可檢測(cè)的DNA序列或蛋白質(zhì)。狹義的分子標(biāo)記是

指能反映園藝植物個(gè)體或種群間基因組中某種差異特征的DNA片段。

4.你認(rèn)為園藝植物生物技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)有哪些P11——13

答：①產(chǎn)業(yè)化步伐加快，②由轉(zhuǎn)移抗性性狀向優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)等多種優(yōu)良性狀發(fā)

展，③常規(guī)育種與生物技術(shù)緊密結(jié)合的實(shí)用化進(jìn)程加速（分子標(biāo)記技術(shù)、胚挽

救技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù)、單倍體培養(yǎng)技術(shù)、體細(xì)胞無(wú)性系變異與篩選技術(shù)），

④基因表達(dá)與功能研究更加深入

植物組織培養(yǎng)部分（第2—6章）

一.主要名詞概念

1.植物細(xì)胞全能性：植物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有一套完整的基因組，并具有發(fā)

育成完整植株的潛能。

2.脫分化：離體培養(yǎng)下，已經(jīng)分化的細(xì)胞，組織或器官莖細(xì)胞分裂或不分裂，

失去原有的結(jié)構(gòu)和功能而恢復(fù)分生狀態(tài)，形成無(wú)組織結(jié)構(gòu)的細(xì)胞團(tuán)或愈傷組

織。

3.再分化:脫分化的細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)在適宜條件下可重新分化，形成另一種或幾種

細(xì)胞，組織，器官，甚至完整的植株。

4.器官發(fā)生途徑:培養(yǎng)條件下的組織或細(xì)胞團(tuán)分化形成不定根，不定芽等器官的

過(guò)程。

5體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑:外植體中體細(xì)胞誘發(fā)并形成胚胎的過(guò)程。

6.外植體:用于培養(yǎng)的園藝植物的細(xì)胞，組織，器官，胚胎，原生質(zhì)體通常稱為

外植體。

7.褐化現(xiàn)象:植物體內(nèi)酚類物質(zhì)在外植體被切割后氧化形成醍類物質(zhì)，使培養(yǎng)基

變褐。

8.看護(hù)培養(yǎng):在培養(yǎng)皿中先加入一定體積的固體培養(yǎng)基，在其上放一塊幾毫米大

小的愈傷組織，再在其上放一張無(wú)菌濾紙，最后把外植體放在濾紙上。培養(yǎng)基

通過(guò)愈傷組織和濾紙為外植體供給營(yíng)養(yǎng)。

9.分批培養(yǎng):把細(xì)胞分散到一定容積的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，當(dāng)培養(yǎng)物增值到一定量

時(shí)，轉(zhuǎn)接繼代，建立起單細(xì)胞培養(yǎng)物。

10.連續(xù)培養(yǎng):在培養(yǎng)過(guò)程中不斷注入新鮮培養(yǎng)基，同時(shí)排放相同體積的舊培養(yǎng)

基，保持反應(yīng)器內(nèi)培養(yǎng)液的體積不變，是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)連續(xù)得到補(bǔ)充，細(xì)胞的生長(zhǎng)

和增值得以連續(xù)進(jìn)行。

1L體細(xì)胞雜交:將不同的植株的原生質(zhì)體，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞。

12.雄核發(fā)育：適宜的離體培養(yǎng)條件下，花粉的發(fā)育可偏離活體時(shí)的正常發(fā)育而

轉(zhuǎn)向抱子體發(fā)育，經(jīng)胚狀體途徑或器官發(fā)生途徑形成完整植株。

13.雌核發(fā)育：胚胎的發(fā)育僅在母體遺傳的控制下進(jìn)行的一種發(fā)育方式。

14.非整倍體：核染色體數(shù)不是染色體基數(shù)的整數(shù)倍，而是發(fā)生個(gè)別染色體數(shù)目

增減的生物體。

15.代換系：生物體的染色體被異源種屬染色體所代換的品系叫代換系。

16.異位系：某染色體的一個(gè)區(qū)段移接到非同源的另一染色體上，染色體相互發(fā)

生片段交換的植株叫相互異位系，染色體片段只從一方移接到另一方染色體上

的植株叫簡(jiǎn)單異位系。

17.附加系：非同種或異種染色體導(dǎo)入受體中，這種染色體在受體中增加的技術(shù)

叫染色體附加，具有附加染色體的品系叫附加系。

18.限制生長(zhǎng)保存：改變培養(yǎng)物生長(zhǎng)的外界環(huán)境條件，限制離體保存材料的生長(zhǎng)

速度，使細(xì)胞生長(zhǎng)降至最小限度，但不死亡，從而達(dá)到延長(zhǎng)繼代培養(yǎng)時(shí)間的目

的。

19.超低溫保存：指在一80度至一195度甚至更低溫度下保存生物材料。

20.體細(xì)胞無(wú)性系變異:植物外植體在組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于受到非生物因子的誘

導(dǎo)發(fā)生變異，進(jìn)而導(dǎo)致再生植株發(fā)生遺傳變異的現(xiàn)象稱為植物體細(xì)胞無(wú)性系變

異。

二.各章需掌握的主要內(nèi)容

1.植物組織培養(yǎng)的類型有哪些植株再生途徑主要有哪些（P15~17）

答：植物組織培養(yǎng)的類型：㈠按照外植體的不同可分為：①胚胎培養(yǎng)，②器官

培養(yǎng)，③組織培養(yǎng)，④細(xì)胞培養(yǎng)，⑤原生質(zhì)體培養(yǎng)。㈡按照培養(yǎng)及性質(zhì)不同可

分為：①固體培養(yǎng)，②液體培養(yǎng)，③半液半固體培養(yǎng)。㈢按照培養(yǎng)方法不同可

分為：①靜置培養(yǎng)，②振蕩培養(yǎng)，③看護(hù)培養(yǎng)，④飼喂培養(yǎng)，⑤微室培養(yǎng)。

植株再生途徑：器官發(fā)生途徑、體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑、原球莖發(fā)生途徑。

2、完整的植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室包括哪些部分每一部分具有哪些功能需要配備哪

些儀器設(shè)備自己能獨(dú)立設(shè)計(jì)一個(gè)組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。（此題答案為老師課件上的，

相關(guān)內(nèi)容在課本P19）

答：一、完整的植物組織培養(yǎng)室通常包括洗滌室、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室、緩沖室、接種

室、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室等部分?？梢愿鶕?jù)實(shí)際需要和條件進(jìn)行設(shè)計(jì)。

二、組培室各部分功能和所需儀器設(shè)備：

（1）化學(xué)實(shí)驗(yàn)室：用于培養(yǎng)器皿的清洗、培養(yǎng)基的配制、分裝和滅菌、試管

苗的出瓶及整理等工作。

冰箱、天平、高壓滅菌鍋、pH計(jì)、干燥箱、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、水槽、涼干架、藥

品柜、離心機(jī)、水浴鍋、微波爐、電爐、磁力攪拌器、蠕動(dòng)泵、移液器、各種

率離器皿（燒小量筒、容量瓶、試劑瓶、三角瓶等）及培養(yǎng)基分裝用品等。.

細(xì)

胞

滅接種室學(xué)

化學(xué)實(shí)驗(yàn)室實(shí)

,培養(yǎng)室驗(yàn)

滌菌室

…緩沖室

室——室

(3)阜室：主要用于植物才的培養(yǎng)。

培養(yǎng)架及燈管、搖床（振蕩器）、空調(diào)、自動(dòng)定時(shí)器、加濕及除濕器、光

照培養(yǎng)箱、溫濕度計(jì)燈等。

（4）細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室：主要用于培養(yǎng)材料的顯微觀察及照相等。

體視顯微鏡、普通顯微鏡、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡、配套顯微照相裝

置、普通相機(jī)或數(shù)碼相機(jī)、切片機(jī)及配套制片及染色用品等。

3、培養(yǎng)基的組成成分包括哪些常用的植物激素和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑有哪些需掌握化學(xué)

名稱和縮寫(xiě)符號(hào)。（p21）

答：一、通常植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基包括以下六大類成分，即礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)、有

機(jī)成分、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、碳源、瓊脂以及其他附加物等。

二、常用的植物激素及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物涉及五大類植物激素：

1、生長(zhǎng)素類：IAA、IBA、NAA、2,4-D

2、細(xì)胞分裂類：6-BA、KT（Kin）、ZT、2ip

3、赤霉素類：GA3、GA4、GA7

4、脫落酸:ABA

5、乙烯：ETH

4、莖尖培養(yǎng)的概念，以種苗繁殖為目的的莖尖培養(yǎng)包括哪些階段各階段對(duì)培養(yǎng)

基條件有何要求（此題答案為老師課件上的）

答：莖尖培養(yǎng)又稱分生組織培養(yǎng)，把莖尖的分生組織或包括有此分生組織的莖

尖分離進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)的方法。（百度百科釋義）

莖尖培養(yǎng)的階段：1、起始培養(yǎng)階段2、增殖培養(yǎng)階段3、生根培養(yǎng)階段4、馴

化移栽階段

各階段對(duì)培養(yǎng)基的要求：①起始培養(yǎng)階段：A、培養(yǎng)基類型：MS、B5>White

B、碳源的影響：蔗糖、葡萄糖等C、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)：細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)

素類、赤霉素類、其他有機(jī)化合物。②增殖培養(yǎng)階段：A、細(xì)胞分裂素濃度直接

影響增殖的效果，通常使用濃度低于起始培養(yǎng)階段；B、添加少量的生長(zhǎng)素，如

NAA或IAA有利于維持無(wú)菌苗適宜的激素平衡，促進(jìn)增殖。③生根培養(yǎng)階段：

培養(yǎng)基成分對(duì)不定根形成的影響。A、礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)：76%的植物可以在MS,1/2MS,

1/3MS培養(yǎng)基上正常生根。低鹽有利于生根（White,Knop）,提高Ca濃度有

促進(jìn)作用。B、碳源的影響：多數(shù)植物在20~30gLT蔗糖有利于生根。無(wú)蔗糖

生根減少，濃度影響根重。C、植物激素及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)：生長(zhǎng)素類：通常為

生根必需。細(xì)胞分裂素：通常有抑制作用，使用濃度較低。ABA和GA：

ABA/GA3高比值促進(jìn)生根。④馴化移栽階段：洗去培養(yǎng)基，生根苗培養(yǎng)基中由

于帶有蔗糖而易滋生細(xì)菌和真菌。選擇適宜的馴化基質(zhì)：透氣保水性要好。蛭

石、泥炭、珍珠巖等。

5、莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒的原理是什么影響脫毒效果的主要因素有哪些病毒檢

測(cè)方法包括哪些其他脫毒方法還有哪些?

答：一、脫毒原理：（p38）病毒在植物體內(nèi)的分布不均勻，越靠近頂端區(qū)

域，帶毒越少，頂端分生組織（mm）不帶病毒或含病毒量極低。因此，分離分

生組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，可以獲得無(wú)病毒種苗。

二、影響脫毒效果的主要因素：

脫毒效果與莖尖大小的關(guān)系：脫毒效果和莖尖分生組織大小直接相關(guān)，莖尖分

生組織越小，脫毒率越高，但生長(zhǎng)速度慢。如草莓莖尖切取時(shí)，脫毒率達(dá)到

100%,而切取時(shí)，脫毒率為50%。因此，脫毒培養(yǎng)時(shí)，需要兼顧脫毒率、成活

率及莖尖發(fā)育成完整植株的能力。既要脫除病毒，也要使莖尖分生組織迅速生

長(zhǎng)發(fā)育。一般莖尖分生組織大小以為適宜。

三、病毒檢測(cè)方法：（P41）①形態(tài)檢測(cè)法②指示植物法③血清鑒定法④分子生

物學(xué)檢測(cè)法，包括核酸雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)、雙鏈核糖核酸分析。⑤電子

顯微鏡檢測(cè)。

四、其他脫毒方法：（p40）①花器官培養(yǎng)脫毒，②珠心胚培養(yǎng)脫毒，③化學(xué)脫

毒，④超低溫處理脫毒，⑤合并熱處理、莖尖培養(yǎng)或微嫁接脫毒。

6、種苗離體快繁中污染發(fā)生的原因主要有哪些如何控制污染的發(fā)生（此題答案

為老師課件上的）

答：一、污染發(fā)生的原因：（1）培養(yǎng)基和接種用具滅菌不徹底；（2）外植體

滅菌不徹底；（3）操作時(shí)人為帶入；（4）接種室環(huán)境不潔凈；（5）超凈工作

區(qū)域不潔凈。

二、控制污染的措施：（1）滅菌時(shí)充分排凈鍋內(nèi)冷空氣；（2）接種器具充分

灼燒；（3）污染外植體及時(shí)挑出，滅菌后倒掉。外植體材料少可二次處理；

（4）接種時(shí)用75%乙醇擦拭雙手和培養(yǎng)容器，操作區(qū)不放置過(guò)多的培養(yǎng)容器;

（5）接種室定期熏蒸或消毒液處理；并采用紫外燈進(jìn)行空氣殺菌；（6）超凈工

作臺(tái)定期清洗過(guò)濾網(wǎng)。

7、原生質(zhì)體分離中材料預(yù)處理方法有哪些原生質(zhì)體分離常用的酶類有哪些：原

生質(zhì)體如何分離和如何純化原生質(zhì)體培養(yǎng)方法有哪些？

答：一、預(yù)處理方法：（p88）①低溫處理。以葉片等外植體為試材時(shí)，將其置

于4℃下，黑暗中處理廠2天，起源升值的產(chǎn)量高，均勻一致，分裂頻率高。

②等滲溶液處理。把材料放在等滲溶液中（如13%甘露醇）數(shù)小時(shí)，再放到酶

液中分離原生質(zhì)體，能提高其產(chǎn)量和活性，尤其是多酚化合物含量高的植物，

如蘋(píng)果、梨等，采用這種方法處理效果好。

二常用的酶類有：A.纖維素酶B.果膠酶C.崩潰酶D.半纖維素酶

三、分離：（p90）原生質(zhì)體分離有機(jī)械法及酶消化法，前者產(chǎn)量極低而不多

用、后者又分一步法及二步法。一步法是將材料在21―28C用纖維素酶

及果膠酶混合液一次性處理2—24h。二步法是將材料先用果膠酶降解胞間膠

層得到單細(xì)胞，再用纖維素酶脫壁而釋放原生質(zhì)體。

四、純化：①離心法②漂浮法③界面法④滴洗法

五、1.培養(yǎng)方法：（p91）（1）固體培養(yǎng)：平板培養(yǎng)法（2）液體培養(yǎng)：A.

淺層培養(yǎng)法B.懸滴培養(yǎng)法C.雙層培養(yǎng)法D.看護(hù)培養(yǎng)法

8.原生質(zhì)體融合方法有哪些雜種細(xì)胞如何篩選（p93）

答：原生質(zhì)體融合的方法包括化學(xué)誘導(dǎo)融合方法和物理誘導(dǎo)融合方法。

A.化學(xué)誘導(dǎo)融合包括：（1）鹽類融合法（2）高PH—高鈣離子法（3）PEG法

B.誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的物理因素有顯微操作、離心震蕩、激光照射以及電融合

等。其中電融合應(yīng)用最為普遍。

9.離體小抱子發(fā)育（雄核發(fā)育）途徑有哪些花粉分離方法有哪些影響花藥和花

粉培養(yǎng)的主要因素有哪些培養(yǎng)適宜時(shí)期是哪個(gè)時(shí)期預(yù)處理的方法有哪些（98）

答：（1）根據(jù)小抱子最初幾次分裂方式的不同，可將花藥和花粉培養(yǎng)中雄核發(fā)

育的途徑歸納為：小胞子發(fā)育途徑（途徑I）、營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑（途徑

II）、生殖細(xì)胞發(fā)育途徑（途徑HI）、生殖細(xì)胞和營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞共同發(fā)育途徑

（途徑IV）。

（2）花粉分離的方法：1.花藥漂浮培養(yǎng)自然釋放法2.機(jī)械分離法

（3）影響花藥和花粉培養(yǎng)的主要因素：1.供體植株基因型2.小胞子發(fā)育時(shí)

期3.供體植株的生理狀態(tài)4.預(yù)處理5.培養(yǎng)基成分6.培養(yǎng)條件7.接種密度和方

向

（4）培養(yǎng)適宜時(shí)期：對(duì)大多數(shù)園藝植物而言，小胞子發(fā)育到單核期左右是適

宜培養(yǎng)的小泡子發(fā)育時(shí)期。

（5）預(yù)處理方法：主要方法有低溫、熱激、化學(xué)藥劑、高滲透壓和離心等。

以低溫處理最為常用和有效。

10.植物染色體加倍的方法有哪些化學(xué)方法誘導(dǎo)加倍常用試劑有哪些影響加倍的

因素包括哪些多倍體鑒定方法有哪些（P104—109）

答：（1）加倍方法：1.浸種法2.浸芽法3.滴苗法4.涂抹法5.套罩法6.

毛細(xì)管法

（2）常用試劑：秋水仙素、氨磺靈、氟樂(lè)靈、APM

（3）影響因素：1.外植體2.加倍劑類型3.加倍劑的濃度和處理時(shí)間4.

加倍劑的加入時(shí)間5.助劑

（4）鑒定方法：1.形態(tài)學(xué)鑒定2.細(xì)胞學(xué)鑒定3.生理生化鑒定4.分子生

物學(xué)鑒定

11.限制生長(zhǎng)保存的方法有哪些超低溫保存的基本程序是什么（p58）

答：（1）限制生長(zhǎng)保存的方法：改變培養(yǎng)環(huán)境（如降低培養(yǎng)溫度、減少培養(yǎng)

瓶?jī)?nèi)氧氣含量、減少光照等）、提高培養(yǎng)基滲透壓、加入生長(zhǎng)抑制劑、饑餓

法、失水干燥保存等。（不確定）

（2）超低溫保存基本程序：包括材料準(zhǔn)備、預(yù)處理、冷凍處理、冷凍儲(chǔ)

存、解凍和再培養(yǎng)。

12.體細(xì)胞無(wú)性系變異的來(lái)源有哪些無(wú)性系變異的發(fā)生與哪些因素有關(guān)（p68）

答：（1）主要有兩種來(lái)源：1.外植體細(xì)胞中預(yù)先存在而在再生植株中表現(xiàn)出

來(lái)的變異

2.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中誘導(dǎo)產(chǎn)生的變異

（2）因素：1.培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件2.植株再生途徑

3.培養(yǎng)時(shí)間和繼代頻率4.母本植株的遺傳狀態(tài)

基因工程部分（第7—11章）

第七章園藝植物基因工程的基礎(chǔ)知識(shí)與技術(shù)

1.遺傳工程（geneticengineering）的基本概念是什么Pl14

答：基因工程（geneticengineering）是將外源基因通過(guò)體外重組后倒入受體

細(xì)胞內(nèi)，是這個(gè)基因能在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，轉(zhuǎn)錄，翻譯，表達(dá)的系列操作技術(shù)

的總稱。

2.遺傳信息的物質(zhì)載體是什么主要類型P114

答：載體：核酸

主要類型：核酸分為兩類：一類為脫氧核糖核酸(DNA),另一類為核糖核

酸(RNA)

3.DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能有何特點(diǎn)DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)P114-P115

答:DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指DNA分子中脫氧核甘酸(dAMP,dCMP,dGMP,dTMP)按照

一定的排列順序，通過(guò)磷酸二酯鍵連接形成的多核甘酸。由于核甘酸之間的差

異僅僅是堿基的不同，故又稱為堿基順序。核甘酸的連接方式是一個(gè)核甘酸的

5,位磷酸與下一位核甘酸的3'-0H形成3，，5,-磷酸二酯鍵，構(gòu)成不分支

的線性大分子，其中磷酸基和戊糖基構(gòu)成DNA鏈的

骨架，可變部分是堿基排列順序，因此習(xí)慣上以堿基名稱的簡(jiǎn)寫(xiě)形勢(shì)作為核昔

酸順序的代表符號(hào)。

DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)即雙螺旋結(jié)構(gòu)。DNA分子由兩條反向平行的多聚核甘酸鏈圍

繞同一中心軸盤曲而成，兩條鏈均為右手螺旋，鏈呈反平行走向，一條走向是

5,一3',另一條是3,一5，。DNA鏈的骨架由脫氧核糖基和磷酸基構(gòu)成，位

于雙螺旋的外側(cè)，堿基配對(duì)位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)。兩條多聚核甘酸鏈以堿基之間

形成氫鍵配對(duì)而相連，即A與T配對(duì)兒，形成兩個(gè)氫鍵，G與C配對(duì)，形成三

個(gè)氫鍵。堿基相互配對(duì)又叫堿基互補(bǔ)。堿基對(duì)平面與螺旋軸幾乎垂直，相鄰堿

基對(duì)沿軸轉(zhuǎn)36,上升。每個(gè)螺旋結(jié)構(gòu)含10bp,螺旋的距為。DNA兩股鏈之間的

螺旋形成凹槽，一條淺的，叫小溝，一條深的，叫大溝。大溝是蛋白質(zhì)識(shí)別

DNA堿基序列發(fā)生作用的基礎(chǔ)，是蛋白質(zhì)和DNA可結(jié)合而發(fā)生作用。

4.真核生物信使RNA(mRNA)的結(jié)構(gòu)與功能P116

答：結(jié)構(gòu)：mRNA的5,端被加上一個(gè)甲基化的鳥(niǎo)甘酸殘基帽子，在mRNA3,端

多了一段長(zhǎng)100~200個(gè)腺甘酸［poly(A)］的尾巴結(jié)構(gòu)。mRNA從5'端到3'端

的結(jié)構(gòu)依次是5,帽子結(jié)構(gòu)，5,非編碼區(qū)，決定多肽氨基酸序列的編碼區(qū)，

3'端非編碼區(qū)和多聚腺甘酸尾巴。

功能：3'端［poly（A）］結(jié)構(gòu)可能與增加轉(zhuǎn)錄活性以及mRNA趨于相對(duì)穩(wěn)定有

關(guān)。mRNA的5'端帽子結(jié)構(gòu)主要有以下3方面的功能：①封閉mRNA的5'端，

使其沒(méi)有游離的5,磷酸，這種結(jié)構(gòu)有抗5,-外切核酸酶降解的作用，使mRNA

更穩(wěn)定。②作為mRNA與核糖體結(jié)合的信號(hào)，無(wú)帽子結(jié)構(gòu)的mRNA不能與核糖體

的40s亞基結(jié)合。③可能與蛋白質(zhì)合成的正確起始作用有關(guān)。

5.什么叫tRNA與rRNAP116—P117

答：tRNA：tRNA是細(xì)胞內(nèi)分子質(zhì)量最小的一類核酸，由70—120核甘酸組成，

各種tRNA無(wú)論在一級(jí)結(jié)構(gòu)上，還是在二級(jí)，三級(jí)結(jié)構(gòu)上均有一些共同點(diǎn)。tRNA

中含有10%~20%的稀有堿基。tRNA約占細(xì)胞總RNA的15%。tRNA的作用是3'

端攜帶相應(yīng)的氨基酸將其轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體上以供蛋白質(zhì)合成。

rRNA是細(xì)胞內(nèi)含量最多的RNA,約占RNA總量的80%以上。rRNA分子是蛋

白質(zhì)合成工廠的核糖體的組分。核糖體由rRNA分子和蛋白質(zhì)組成，并在大部分

細(xì)胞中大量存在。典型的真核生物核糖體包含40s和60S兩個(gè)亞基。大亞基包

含3種rRNA（28S,和5S）與49條多肽。小亞基只包含一個(gè)18S的rRNA和33條

多肽。各種生物核蛋白體小亞基中的rRNA具有相似的二級(jí)結(jié)構(gòu)。

6.什么是遺傳中心法則（可以圖示）P118

答：DNA通過(guò)復(fù)制把遺傳信息由親代傳遞給子代，在后代生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，DNA

通過(guò)轉(zhuǎn)錄將遺傳信息轉(zhuǎn)入RNA中，RNA又通過(guò)翻譯將遺傳信息表達(dá)為特異的蛋

白質(zhì)，以執(zhí)行各種生命功能，這就是著名的的“中心法則”。在某些情況下，

RNA也可作為遺傳信息的攜帶者，進(jìn)行自我復(fù)制，還有許多包含由RNA分子構(gòu)

成的基因組反轉(zhuǎn)錄病毒，通過(guò)反轉(zhuǎn)錄的方式將遺傳信息傳遞給DNA,單鏈RNA

分子被轉(zhuǎn)換為雙鏈DNA拷貝，隨后插入宿主細(xì)胞基因組。

圖略

7.什么叫限制性核酸內(nèi)切酶根據(jù)識(shí)別位點(diǎn)嚴(yán)格專一性可分為哪三類P119

答：限制性內(nèi)切核酸酶是一類能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中某一特定核甘酸序列，

并能對(duì)核酸內(nèi)部的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一種內(nèi)切核酸酶。

類型：I型酶，II型酶，HI型酶

I型酶能識(shí)別專一的核甘酸序列，并在識(shí)別點(diǎn)附近切割雙鏈，但切割序列沒(méi)有

專一性。

n型酶識(shí)別位點(diǎn)（回文序列）嚴(yán)格專一，并在識(shí)別位點(diǎn)內(nèi)將雙鏈切斷。（最具

實(shí)用價(jià)值）

in型酶識(shí)別位點(diǎn)嚴(yán)格專一（不是回文序列），但切點(diǎn)不專一，往往不在識(shí)別

位點(diǎn)內(nèi)部。

9.什么叫DNA連接酶（百度）

答：是一種封閉DNA鏈上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的催化DNA鏈的

5'-P04與另一DNA鏈的3'-0H生成磷酸二酯鍵。

11.什么是反轉(zhuǎn)錄酶常用有哪些主要用途（P121）

答：反轉(zhuǎn)錄酶（reversetranscriptase）是以RNA為模板指導(dǎo)脫氧核甘酸

合成互補(bǔ)DNA的酶。常用兩類：①AMV：二鏈多肽。具5'—3'DNA活性。具很

強(qiáng)的RNA酶活性（用途：降解與DNA雜交的RNA）；②M—MJV：?jiǎn)坞摹NaseH

活性弱。（用途：合成較長(zhǎng)cDNA）。

12.植物基因工程常用載體的作用理想載體應(yīng)具備條件根據(jù)功能可分為哪幾類

(P123)

答：作用：把外源DNA帶進(jìn)宿主細(xì)胞，并使之在細(xì)胞內(nèi)建立穩(wěn)定的遺傳狀

態(tài)，在細(xì)胞內(nèi)繁殖、傳代或進(jìn)行表達(dá)。條件：①能自主復(fù)制，即外源DNA插入

后也如此。②載體應(yīng)具備可供選擇的遺傳標(biāo)記，可以借助于這些標(biāo)記容易地把

轉(zhuǎn)化的細(xì)胞與未轉(zhuǎn)化的分開(kāi)，把重組分子與非重組分子所轉(zhuǎn)化的細(xì)胞相區(qū)別，

便于進(jìn)行重組體篩選和堅(jiān)定。③載體分子的合適位置上必須有供外源DNA插入

的位點(diǎn)，即克隆位點(diǎn)。④載體本身應(yīng)盡量小，不含或盡量少含多余DNA部分，

這樣可以容納較大外源DNA。⑤載體的特征應(yīng)是充分掌握的，包括基因和酶切

位點(diǎn)的準(zhǔn)確位置，以及它的核甘酸序列。功能分類：①克隆載體：主要是對(duì)目

的基因克隆，建立DNA文庫(kù)和cDNA文庫(kù)，其上有復(fù)制子即可②表達(dá)載體：能使

目的基因在宿主細(xì)胞表達(dá)充分③穿梭載體：可在原核細(xì)胞中復(fù)制，也可在真核

細(xì)胞中擴(kuò)增表達(dá)。

13.質(zhì)粒載體的基本特性常用質(zhì)粒載體種類(P123124)

答：質(zhì)粒(plasmid)存在于多種細(xì)菌中，是能自主復(fù)制的雙鏈環(huán)狀DNA分

子，是染色體外獨(dú)立的遺傳因子。除含有DNA復(fù)制原點(diǎn)外，還產(chǎn)生抗生素、低

抗抗菌素、降解有機(jī)化合物，產(chǎn)生大腸菌素，內(nèi)毒素，或限制性和修飾性的酶

等基因。

常用種類：PBR322和pUC系列質(zhì)粒。

14.下列符號(hào)含義：AmpR,Tetr,Cmr,Kanr(P124)

答：①抗氨茉青霉素標(biāo)記②抗四環(huán)素標(biāo)記③抗氯霉素標(biāo)記④抗卡那霉素標(biāo)記

16.什么是YeastArtificialchromosome>BacterialArtificial

chromosome

答：①是酵母人工染色體(YeastArtificialchromosome,YAC)。是目前

能容納最大外源DNA片段的載體。(P126)

②細(xì)菌人工染色體(BacterialArtificialchromosome,BAC)指一種

以F質(zhì)粒(F-plasmid)為基礎(chǔ)建構(gòu)而成的細(xì)菌染色體克隆載體，長(zhǎng)用來(lái)克隆

150kb左右大小的DNA片段，最多可保存300kb個(gè)堿基對(duì)。(百度)

17.什么是PCRPCR反應(yīng)原理、主要體系與主要步驟

答：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechainreaction,PCR)o是利用酶促反

應(yīng)體外合成特異DNA片段的新方法。反應(yīng)原理：由高溫變性、低溫退火和適溫

延伸三部。

反應(yīng)體系：PCR反應(yīng)緩沖液；模板DNA；底物dNTP濃度；引物；DNA聚合酶

及其濃度

主要步驟：在高溫(95C)下，待擴(kuò)增的靶DNA雙鏈?zhǔn)軣嶙冃猿蔀閮蓷l單

鏈DNA模版；再在低溫(37~55℃)下，兩條人工合成的寡核甘酸引物與互補(bǔ)的

單鏈DNA模版退火結(jié)合形成部分雙鏈；最后將溫度升到72℃左右保溫，以引物

3,端為合成起點(diǎn)，以4種脫氧核甘酸(dNTP)為原料，沿模版以5,一3,方

向延伸，合成心得互補(bǔ)鏈。這樣，每一雙蓮的DNA模板，經(jīng)過(guò)一次解鏈、退

火、延伸3個(gè)步驟的熱循環(huán)后就成了兩條DNA分子。如此反復(fù)，PCR產(chǎn)物以2"

的指數(shù)形式迅速擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)25~30個(gè)循環(huán)后，理論上可使模板DNA擴(kuò)增10~107

倍以上。

18.什么是RT-PCR與實(shí)時(shí)定量PCR(realtimePCR)D133

RT-PCR：以mRNA為模板，反應(yīng)體系中，加入反轉(zhuǎn)錄酶，RNA經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄酶

反轉(zhuǎn)錄為cDNA,再以cDNA為模板進(jìn)行的PCR反應(yīng)稱為RT-PCR。RT-PCR具有很

高的敏感性，可以用來(lái)分析不同組織或是相同組織不同發(fā)育階段中mRNA表達(dá)狀

況的相關(guān)性。

實(shí)時(shí)定量PCR：是一種在反應(yīng)體系中加入熒光集團(tuán)，運(yùn)用Taq酶的5'-3'

外切核酸酶活性和熒光能量傳遞技術(shù)，巧妙地把核酸擴(kuò)增，雜交，光譜分析和

實(shí)時(shí)檢測(cè)技術(shù)結(jié)合在一起，借助于熒光信號(hào)的積累來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，

最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知核酸模板進(jìn)行定量分析的方法?？煞譃榻^對(duì)定量和相

對(duì)定量?jī)煞N。

19.Southern印跡雜交、Northern雜交、Western雜交主要檢測(cè)對(duì)象是什么

P135

Northern雜交用于分析RNA；Southern雜交用于分析DNA；Western雜交用

于分析。

第八章園藝植物基因的分離與克隆

1.什么是GMOsGMOs:Geneticallymodifiedorganisms（即轉(zhuǎn)基因作物）

轉(zhuǎn)基因作物：通過(guò)基因工程技術(shù)導(dǎo)入某種基因的植物、動(dòng)物、微生物。所謂轉(zhuǎn)

基因生物，即為了達(dá)到特定的目的而將DNA進(jìn)行人為改造的生物。通常的做法是

提取某生物具有特殊功能（如抗病蟲(chóng)害、增加營(yíng)養(yǎng)成分）的基因片斷，通過(guò)基因技

術(shù)加入到目標(biāo)生物當(dāng)中。（百度）

2.第一代與第二代轉(zhuǎn)基因作物有何特點(diǎn)

第一代轉(zhuǎn)基因作物是抗病、抗蟲(chóng)、抗除草劑轉(zhuǎn)基因作物。第二代轉(zhuǎn)基因作物主

要目的是提高作物產(chǎn)品的品質(zhì)，增加營(yíng)養(yǎng)保健。更豐富的微量元素，維生素和

蛋白質(zhì)，低脂肪，低膽固醇，抗癌，藥用。（ppt上內(nèi)容）

3.園藝植物基因工程技術(shù)主要步驟（ppt±）

目的基因分離與克隆一目的基因修飾（啟動(dòng)子，終止子）一植物表達(dá)載體構(gòu)建-

-遺傳轉(zhuǎn)化（Ti介導(dǎo)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化，植物DNA病毒介導(dǎo)

的轉(zhuǎn)化，電激，基因槍，花粉管通道法）一轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞的篩選一植株再生一

轉(zhuǎn)基因植株鑒定（PCR,southern或western雜交，表型檢測(cè)）一發(fā)放或進(jìn)一

步培育新優(yōu)品種

4.什么是基因geneP118五

基因是實(shí)體，它的物質(zhì)基礎(chǔ)是DNA或RNA,基因是具有一定遺傳效應(yīng)的DNA分

子中特定的核甘酸序列，它是遺傳信息傳遞和性狀分化，發(fā)育的依據(jù)，基因是

可分的。根據(jù)基因的產(chǎn)物可將基因分為結(jié)構(gòu)基因，調(diào)節(jié)基因，無(wú)翻譯產(chǎn)物基

因。簡(jiǎn)言之，基因是一個(gè)含有特定遺傳信息的核甘酸序列，它是遺傳物質(zhì)的最

小功能單位。

5.基因的4個(gè)基本特性（ppt）

①都有固定的一級(jí)結(jié)構(gòu)，即核甘酸序列

②每一個(gè)基因在染色體均占有特定的位置（座位）

③均有特定轉(zhuǎn)錄模式（編碼mRNA或

④大多數(shù)基因均有特定的功能

6.基因文庫(kù)的定義及類型（課本pl38）

基因文庫(kù)（genelibrary）是一組DNA或cDNA序列克隆的集合體。

園藝植物基因組文庫(kù)是指來(lái)自園藝植物基因組全部DNA片段組成的基因文庫(kù)。

一般要求所構(gòu)建的植物基因組文庫(kù)必須符合以下幾個(gè)基本條件：①文庫(kù)能夠覆

蓋整個(gè)基因組②插入的DNA片段比較大③文庫(kù)易于保存且比較穩(wěn)定

基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)(genomiclibrary)和cDNA文庫(kù)(cDNAlibrary)o

7.基因組DNA文庫(kù)構(gòu)建主要流程(課本pl38)

①載體的制備②大片段基因組DNA的制備③大片段DNA與克隆載體的連接④載

體的遺傳轉(zhuǎn)化⑤克隆的挑取、驗(yàn)證⑥文庫(kù)的擴(kuò)增、分裝于保存

8.cDNA口

第一鏈的

純化述NA樣品的制備GUNA

合成雙鏈cDNA的合成cDNA的甲基化銜接頭與cDNA相連接

制備cDNA文庫(kù)

9.什么是基因序列同源克隆(pl52)與圖位克隆Map-basdecloning

不同物種間基因和基因順序具有保守性?；蛐蛄型幢Ｊ匦裕翰煌N植物,

行駛類似功能的基因，其一級(jí)結(jié)構(gòu)可能相同或極其相似。據(jù)此，從一種生物中

分離獲得的基因可被用作探針，來(lái)分離另一生物與之相應(yīng)的同源基因。(ppt)

圖位克隆(Map-basdecloning)又稱定位克隆(positionalcloning),是根據(jù)

目標(biāo)基因在染色體上位置進(jìn)行基因克隆的一種方法。圖位克隆的原理是首先找

到一個(gè)與目標(biāo)基因相連的DNA分子標(biāo)記，然后通過(guò)染色體步移技術(shù)克隆分離出

目標(biāo)基因。(書(shū)本pl44)

第九章園藝植物遺傳轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建

1.有效的植物遺傳轉(zhuǎn)化載體必須具備的功能(ppt)

①能作為媒介將外源基因?qū)胫参锛?xì)胞，并且整合到宿主細(xì)胞的基因組DNA

上。

②能提供被宿主細(xì)胞的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)所識(shí)別的DNA序列，即啟動(dòng)子和復(fù)制子

起始位點(diǎn)，以保證外源基因能在植物細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)。

2.AgrobacteriumtumefaciensAgrobacteriumrhizogenes是什么植物體遺

傳轉(zhuǎn)化中常用的質(zhì)粒載體(ppt)

Agrobacteriumtumefaciens：根癌農(nóng)桿菌

Agrobacteriumrhizogenes：發(fā)根農(nóng)桿菌

Ti質(zhì)粒載體，Ri質(zhì)粒載體

3、Ti質(zhì)粒的主要結(jié)構(gòu)P159

答：根據(jù)功能不同可以將Ti質(zhì)粒劃分為4個(gè)區(qū)段：1、與基因轉(zhuǎn)移相關(guān)的T-

DNA區(qū)；2、激活T-DNA的轉(zhuǎn)移，使農(nóng)桿菌對(duì)植物表現(xiàn)出侵染性的毒性區(qū)，即

Vir區(qū)；3、調(diào)控Ti質(zhì)粒在農(nóng)桿菌間發(fā)生結(jié)合轉(zhuǎn)移的Con區(qū)；4、調(diào)控Ti質(zhì)粒

自我復(fù)制的Ori區(qū)

4、什么是"卸甲載體"(disarmedvector)P159

卸甲載體是無(wú)毒的Ti質(zhì)粒載體，又稱。nc-載體，是將Ti質(zhì)粒的T-DNA區(qū)中的

有致瘤作用的one基因切除，即“卸甲”，以此作為遺傳轉(zhuǎn)化載體時(shí)，不會(huì)影

響植物的生長(zhǎng)。

5、什么叫共整合載體(co-integratedvector)P161

指中間載體與改造后的受體Ti質(zhì)粒之間，通過(guò)同源重組所產(chǎn)生的一種復(fù)合型載

體。由于該載體的T-DNA區(qū)與Ti質(zhì)粒的Vir區(qū)連鎖，因此又稱為順式載體。

6、什么叫雙元載體(binaryvector)系統(tǒng)其特點(diǎn)是什么P164

是指由兩個(gè)分別含有T-DNA區(qū)和Vir區(qū)的相容性突變Ti質(zhì)粒構(gòu)成的雙質(zhì)粒系

統(tǒng)。

特點(diǎn)：1、可以在大腸桿菌和根癌瘤桿菌中復(fù)制，并且和Ti質(zhì)粒是相容的；2、

具有Ti質(zhì)粒的左右兩側(cè)或右側(cè)的邊緣區(qū)序列，使DNA可以轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞；

3、邊緣區(qū)序列內(nèi)包含植物選擇標(biāo)記嵌合基因，用于轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性株的初步篩選；

4、帶有抗生素基因，一般是Kan，基因，可以作為細(xì)菌轉(zhuǎn)化子的選擇記號(hào)。

7、載體構(gòu)建中常用的選擇標(biāo)記基因（selectablemarkergene）概念與基本

特點(diǎn)列舉1-2種常用的選擇標(biāo)記基因。

概念：選擇標(biāo)記基因是指其編碼產(chǎn)物能夠使轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、組織具有對(duì)抗生素或

除草劑及其他一些脅迫物質(zhì)的抗性，或者使轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、組織具有代謝的優(yōu)越

性，從而在含有這些選擇試劑的培養(yǎng)基中能夠繼續(xù)存活，進(jìn)而將轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、

組織從大量的細(xì)胞或組織中篩選出來(lái)的一類基因。

特點(diǎn)：1、編碼一種不存在于正常植物細(xì)胞中的酶；2、基因較小，可構(gòu)成嵌合

基因；3、能在轉(zhuǎn)化細(xì)胞中得到充分表達(dá)；4、檢測(cè)容易，并能定量分析；5、選

擇劑最好能夠抑制植物細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，但并不殺死細(xì)胞，因?yàn)樗兰?xì)胞往往對(duì)

鄰近細(xì)胞有很強(qiáng)的抑制作用；6、標(biāo)記基因的表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)為轉(zhuǎn)化細(xì)胞提供抵抗選

擇劑抑制的作用，選擇培養(yǎng)基中使用的抗代謝物（即選擇劑）對(duì)轉(zhuǎn)化細(xì)胞再生

植株的生長(zhǎng)發(fā)育不應(yīng)有明顯的影響；7、最好有一種簡(jiǎn)便方法可以檢測(cè)選擇標(biāo)記

基因在轉(zhuǎn)化細(xì)胞或植株中的表達(dá)。

舉例：Kan「（卡那霉素抗性基因）、Tet「（四環(huán)素抗性基因）、Amp「（氨茉青霉素抗

性基因）

8、載體構(gòu)建中常用的報(bào)告基因(reportergene)概念與基本特點(diǎn)列舉「2種

常用的報(bào)告基因。

是指其編碼產(chǎn)物能夠被快速地測(cè)定，通過(guò)它的表達(dá)來(lái)標(biāo)定目的基因是否導(dǎo)入到

受體細(xì)胞、組織、器官中的一類特殊用途的基因。

特點(diǎn)：1、其產(chǎn)物在原植物中不存在，并對(duì)宿主植物細(xì)胞無(wú)毒性；2、表達(dá)產(chǎn)物

應(yīng)有適度的穩(wěn)定性以利于檢測(cè)；3、檢測(cè)手段高度敏感，檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、靈敏并

可以定量；4、檢測(cè)過(guò)程應(yīng)不具有破壞性。

舉例：6-葡萄糖甘酸酶(GUS基因)、綠色熒光蛋白(GFP)基因

9、什么叫正義表達(dá)載體與反義表達(dá)載體

正義表達(dá)載體：是遺傳轉(zhuǎn)化載體中最常構(gòu)建的一種載體類型，是目的基因以全

長(zhǎng)或功能單元正向的方式連接于植物啟動(dòng)子下游，轉(zhuǎn)化植物后，在啟動(dòng)子的驅(qū)

動(dòng)下，實(shí)現(xiàn)外源基因的表達(dá)。

反義表達(dá)載體：將目的基因按照3,-5'的方向反向連接到啟動(dòng)子后，通過(guò)在

植物中進(jìn)行的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，獲得一個(gè)與原基因mRNA完全互補(bǔ)的序列，進(jìn)而與內(nèi)源

基因形成雙鏈mRNA結(jié)構(gòu)，從而阻止內(nèi)源基因的翻譯過(guò)程，達(dá)到抑制基因表達(dá)的

目的。

第十章園藝植物遺傳轉(zhuǎn)化

1、什么叫植物遺傳轉(zhuǎn)化(plantgenetictransformation)?

植物遺傳轉(zhuǎn)化是應(yīng)用分子重組技術(shù)、細(xì)胞組織培養(yǎng)技術(shù)或種質(zhì)系統(tǒng)轉(zhuǎn)化技

術(shù)，有目的地將外源基因或DNA片段插入到受體植物基因組中，并使其在后代

植株中得得以表達(dá)的過(guò)程。

2、什么是植物遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)（receptorsystem）常用的遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)

有哪些

植物遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)：是指用于轉(zhuǎn)化的外植體通過(guò)組織培養(yǎng)途徑或其他非

組織培養(yǎng)途徑，能高效、穩(wěn)定地再生無(wú)性系，并能接受外源DNA整合，對(duì)轉(zhuǎn)化

選擇抗生素敏感的再生系統(tǒng)。

常用的遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)：組織受體系統(tǒng)、原生質(zhì)體受體系統(tǒng)、生殖細(xì)胞受體

系統(tǒng)

3、什么叫園藝植物遺傳轉(zhuǎn)化中外源DNA直接轉(zhuǎn)化法并列舉

外源DNA直接轉(zhuǎn)化法：通過(guò)物理或化學(xué)方法直接將外源目的基因?qū)胫参锘?/p>

因組中

物理方法：電穿孔轉(zhuǎn)化法、基因槍轉(zhuǎn)化法、激光微束穿孔轉(zhuǎn)化法、體內(nèi)注射

法、超聲波法等

化學(xué)方法：PEG、脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法

4、什么是基因槍轟擊法（微彈轟擊技術(shù)micro-projectilebombardment）＞葉

盤轉(zhuǎn)化法Leaf-discmethod優(yōu)缺點(diǎn)

基因槍轟擊法：是利用火藥爆炸、高壓氣體和高壓放電作為驅(qū)動(dòng)力，將包

裹有生物活性DNA的金屬小顆粒加速，高速轟擊植物組織或細(xì)胞，是外源基因

實(shí)現(xiàn)穿壁并導(dǎo)入受體細(xì)胞中，然后通過(guò)細(xì)胞和組織培養(yǎng)技術(shù)，再生出新的植株

類型的技術(shù)。

優(yōu)點(diǎn)：（1）無(wú)宿主限制，特別適宜那些由原生質(zhì)體再生植株較為困難和對(duì)

農(nóng)桿菌感染不敏感的單子葉植物，提高單子葉植物的轉(zhuǎn)化效率。

(2)操作簡(jiǎn)單，可控程度高，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要調(diào)控微彈的速度和射入濃

度，命中特定層次的細(xì)胞，提高遺傳轉(zhuǎn)化效率

(3)靶受體類型廣泛，不受基因型限制，能轉(zhuǎn)化所有具有分生潛力的植物

的任何組織或細(xì)胞

(4)可將外源基因?qū)刖€粒體、葉綠體等植物細(xì)胞的細(xì)胞器，重復(fù)性好，

獲得外源基因能穩(wěn)定表達(dá)的轉(zhuǎn)基因株系，這是目前質(zhì)體轉(zhuǎn)化研究中最常用和最

有效的DNA導(dǎo)入方法。

缺點(diǎn)：基因槍轟擊法因轟擊的隨機(jī)性導(dǎo)致轉(zhuǎn)化的效率極低；成本高；出現(xiàn)非

轉(zhuǎn)化體和嵌合體的比率大；基因插入往往是多拷貝隨機(jī)整合到受體基因組中，

可能發(fā)生多種方式的重排，也可能會(huì)因?yàn)榕c植物本身序列同源而相互作用，導(dǎo)

致轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默，因而遺傳穩(wěn)定性差；轟擊過(guò)程中可能造成外

源基因的斷裂，使插入的基因成為無(wú)活性的片段。

(非官方)葉盤轉(zhuǎn)化法：多種農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒介導(dǎo)的植物基因轉(zhuǎn)化方法之一

優(yōu)點(diǎn)：利用天然的載體系統(tǒng)，成功率高，效果好；轉(zhuǎn)移的外源基因常為單拷

貝整合，很少發(fā)生甲基化和轉(zhuǎn)基因沉默，遺傳穩(wěn)定，并且符合孟德?tīng)栠z傳定

律；費(fèi)用低，方法簡(jiǎn)單，易于操作；與基因槍法結(jié)合使用，效果更佳；適用寄

主范圍廣，幾乎所有的雙子葉植物都可采用此法。

缺點(diǎn)：大多數(shù)單子葉植物，尤其是禾本科作物對(duì)農(nóng)桿菌不敏感，限制了它的

應(yīng)用范圍；農(nóng)桿菌侵染后的外植體再生階段脫菌比較困難，需要長(zhǎng)期使用抗生

素，給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)麻煩。

(此法屬于載體介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化法，優(yōu)缺點(diǎn)來(lái)自載體介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化法)

5、什么是園藝植物遺傳轉(zhuǎn)化中載體介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化法(vector-mediated

transformation)基本步驟優(yōu)缺點(diǎn)

載體介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化法：通過(guò)將目的基因連接在植物表達(dá)載體上，隨著載體

DNA的轉(zhuǎn)移而將外源目的基因整合到植物基因中的方法。

基本步驟：(1)含重組Ti質(zhì)粒的工程菌培養(yǎng)及轉(zhuǎn)化

(2)選擇合適的外植體

(3)工程菌與外植體共培養(yǎng)

(4)外植體脫菌及篩選培養(yǎng)

(5)轉(zhuǎn)化植株再生及鑒定

優(yōu)點(diǎn)：利用天然的載體系統(tǒng)，成功率高，效果好；轉(zhuǎn)移的外源基因常為單拷

貝整合，很少發(fā)生甲基化和轉(zhuǎn)基因沉默，遺傳穩(wěn)定，并且符合孟德?tīng)栠z傳定

律；費(fèi)用低，方法簡(jiǎn)單，易于操作；與基因槍法結(jié)合使用，效果更佳；適用寄

主范圍廣，幾乎所有的雙子葉植物都可采用此法。

缺點(diǎn)：大多數(shù)單子葉植物，尤其是禾本科作物對(duì)農(nóng)桿菌不敏感，限制了它的

應(yīng)用范圍；農(nóng)桿菌侵染后的外植體再生階段脫菌比較困難，需要長(zhǎng)期使用抗生

素，給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)麻煩。

6、什么是園藝植物遺傳轉(zhuǎn)化中種質(zhì)轉(zhuǎn)化法有何特點(diǎn)列舉常用的轉(zhuǎn)化方法

(P188)

以植物自身種質(zhì)細(xì)胞為媒介，將外源DNA導(dǎo)入完整植物細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)遺傳轉(zhuǎn)

化的技術(shù)稱為種質(zhì)轉(zhuǎn)化系統(tǒng)(germlinetransformation),該技術(shù)也稱為生

物媒體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)或整株活化(inplantatransformation)o該技術(shù)具有如下

特點(diǎn)：1.目的DNA可以是裸露的DNA,也可以是總DNA或重組質(zhì)粒DNA,還可以

是某些DNA片段2.轉(zhuǎn)化過(guò)程依靠植物自身的種質(zhì)系統(tǒng)或細(xì)胞結(jié)構(gòu)來(lái)實(shí)現(xiàn)，不需

要細(xì)胞分離、組織培養(yǎng)和再生植株等復(fù)雜技術(shù)3.方法簡(jiǎn)單易行，并與常規(guī)育種

緊密結(jié)合。它已發(fā)展稱為一種頗有潛力的轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。具體方法包括植物原位真

空滲入法、花粉管通道法和浸泡轉(zhuǎn)化法等。

7.園藝植物遺傳轉(zhuǎn)化植株常用鑒定方法有哪些(pl90)

(-)利用選擇標(biāo)記基因和報(bào)告基因鑒定

1.抗生素抗性基因鑒定2.除草劑抗性基因鑒定3.顯色或發(fā)光基因鑒定

(二)利用重組DNA分子特征鑒定

1.重組DNA分子酶切圖譜鑒定技術(shù)鑒定雜交技術(shù)鑒定

(三)利用外源基因的轉(zhuǎn)錄或表達(dá)鑒定

雜交與點(diǎn)雜交技術(shù)鑒定雜交技術(shù)鑒定3.蛋白質(zhì)免疫測(cè)定技術(shù)鑒定

8.什么是轉(zhuǎn)基因植物中外源基因沉默(pl93)

園藝植物遺傳轉(zhuǎn)化的目的是獲得能高效表達(dá)、穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因株系，但大量

的試驗(yàn)表明，導(dǎo)入并整合進(jìn)受體基因組中的外源基因在轉(zhuǎn)化體的當(dāng)代或其后代

中出現(xiàn)表達(dá)受到抑制，甚至并不完全表達(dá)的現(xiàn)象，稱為轉(zhuǎn)基因沉默(transgene

silencing)o轉(zhuǎn)基因沉默分為轉(zhuǎn)錄水平上的基因沉默(TGS)和轉(zhuǎn)錄后水平上

的基因沉默(PTGS)

第十一章轉(zhuǎn)基因技術(shù)在園藝植物育種的應(yīng)用

1.園藝植物基因工程主要應(yīng)用領(lǐng)域有哪些(p202)

轉(zhuǎn)基因技術(shù)在園藝植物育種上的應(yīng)用主要表現(xiàn)為，一是可提高作物產(chǎn)量和改善

作物的抗蟲(chóng)、抗病、抗除草劑等抗逆能力；二是改善園藝產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和食

用風(fēng)味，如營(yíng)養(yǎng)成分含量、風(fēng)味品質(zhì)、延遲貨架壽命和保存時(shí)間，以及用食品

工程菌生產(chǎn)食品添加劑和功能因子等。(或?qū)懸弧⑴嘤共∑贩N二、培育抗蟲(chóng)

品種三、培育抗逆品種四、培育抗除草劑品種五、培育耐儲(chǔ)運(yùn)品種六、創(chuàng)

造雄性不育材料七、改良產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)八、改變花卉作物的花型和花色九、

提高光合速率和固氮能力十、改良其他性狀

第12?15章

1.什么是遺傳標(biāo)記，理想的遺傳標(biāo)記需具備哪些特點(diǎn)(p233)

遺傳標(biāo)記是指園藝植物基因型特殊的、易于識(shí)別的表現(xiàn)形式，包括外部形

態(tài)、染色體結(jié)構(gòu)與數(shù)目、生物大分子結(jié)構(gòu)與序列等方面的變異，而所有的遺傳

標(biāo)記則構(gòu)成了園藝植物的遺傳多態(tài)性。

理想的遺傳標(biāo)記具備的特點(diǎn)：1.多態(tài)性高，標(biāo)記數(shù)目多，提供的信息量大

2.共顯性遺傳，能區(qū)分純合基因型與雜合基因型3.表現(xiàn)中性，不影響目標(biāo)性狀

表達(dá)，與不良性狀無(wú)必然連鎖4.表現(xiàn)穩(wěn)定，不受植株內(nèi)外環(huán)境的影響5.經(jīng)濟(jì)方

便，易于觀察記載

2.什么是分子標(biāo)記分子標(biāo)記具備什么特點(diǎn)

廣義的分子標(biāo)記(molecularmarker)是指具有遺傳多態(tài)性的生物大分

子，包括DNA標(biāo)記和生化標(biāo)記；狹義的分子標(biāo)記專指直接反應(yīng)DNA核甘酸序列

多態(tài)性的DNA標(biāo)記。

1.多態(tài)性高，標(biāo)記數(shù)目多，提供信息量大。2.共顯性遺傳，能區(qū)分純合基

因型與雜交基因型。3.表現(xiàn)中性，不影響目標(biāo)性狀表達(dá)，與不良性狀無(wú)必然連

鎖。4.表現(xiàn)穩(wěn)定，不受植物內(nèi)外環(huán)境的影響。5.經(jīng)濟(jì)方便，易于觀察記載。

3.分子標(biāo)記產(chǎn)生多態(tài)性的分子基礎(chǔ)是什么

園藝植物分子標(biāo)記多態(tài)性的分子基礎(chǔ)主要有三種:

1.DNA序列酶切位點(diǎn)（或PCR引物結(jié)合位點(diǎn)）處的堿基發(fā)生突變，導(dǎo)致酶切

位點(diǎn)（或PCR引物結(jié)合位點(diǎn)）消失、酶切引物（或擴(kuò)增產(chǎn)物）減少。

序列酶切位點(diǎn)（或PCR引物結(jié)合位點(diǎn)）之間缺失（或插入）了一段核甘酸

序列，或者是酶切位點(diǎn)（或PCR引物結(jié)合位點(diǎn)）之間的串聯(lián)重復(fù)單元數(shù)數(shù)目發(fā)

生了改變，導(dǎo)致酶切產(chǎn)物（或PCR引物結(jié)合位點(diǎn)）片段長(zhǎng)度發(fā)生改變。

3.單核甘酸突變，即DNA序列發(fā)生了單堿基轉(zhuǎn)換（如一種喀咤置換了另一種口密

陡或一種喋吟置換了另一種喋吟）或顛換（喋吟與喀咤互換）

4.什么是RFLPRFLP標(biāo)記有何特點(diǎn)RFLP技術(shù)的基本步驟是怎樣的

RFLP：利用限制性內(nèi)切核酸酶切割不同生物個(gè)體的DNA,根據(jù)含有與雜交

探針的同源序列的酶切片段的長(zhǎng)度來(lái)檢測(cè)DNA序列差異的技術(shù)。

RFLP標(biāo)記有何特點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)：1.結(jié)果可靠，這是由限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別序列的專一性決定的。2.

結(jié)果穩(wěn)定。標(biāo)記的等位基因間是共顯性的。4.非等位基因間不存在基因互作，

標(biāo)記互不干擾。5.變異在數(shù)量上幾乎不受限制。

缺點(diǎn)：1.需要高純度DNA。2.所需設(shè)備多，檢測(cè)步驟多，技術(shù)較復(fù)雜，周

期長(zhǎng)，成本高。3.通常用到同位素，對(duì)人體有一定傷害。4.具有種屬特異性，

且只適應(yīng)單拷貝和低拷貝基因。5.多態(tài)信息含量低。

RFLP技術(shù)的基本步驟：

1.提取高純度的核酸植物基因組DNAo2.利用限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA,

獲得長(zhǎng)度不同的DNA片段。3.利用瓊脂糖凝膠電泳分離這些片段，使不同長(zhǎng)度

的片段處于凝膠的不同位置，形成連續(xù)的電泳譜帶。4.將凝膠放入堿性緩沖

液，使DNA分子由雙鏈變性為單鏈。5.利用毛細(xì)管作用將單鏈DNA分子由凝膠

轉(zhuǎn)移并固定到固相支持物上，稱為轉(zhuǎn)膜。6.用P或者生物素標(biāo)記準(zhǔn)備好的同

源探針、并將其變性為單鏈。7.將標(biāo)記好的探針與硝酸纖維膜或尼龍膜上的

DNA片段進(jìn)行雜交，然后洗去為雜交的單鏈探針。8.利用放射自顯影或免疫技

術(shù)檢測(cè)雜交信號(hào)，顯示雜交帶，如果雜交帶的位置有差異，那么這種差異就是

RFLPO

4.什么是RAPDRAPD標(biāo)記有何特點(diǎn)

RAPD（隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA）：基于PCR基礎(chǔ)之上的一種可對(duì)整個(gè)未知序

列的基因組進(jìn)行多態(tài)性分析的分子技術(shù)。操作步驟與常規(guī)PCR基本相似，只是

引物不同。（百度）

RAPD標(biāo)記有何特點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：1.所需模板DNA量少，對(duì)DNA質(zhì)量要求不高。2.分析程序簡(jiǎn)單，不

涉及放射性同位素。3.不需了解目的的基因的DNA序列，不需要設(shè)計(jì)專門的引

物。4.引物在不同物種間具有通用性。5.引物合成商品化，成本低。6.可用引

物數(shù)量多，覆蓋整個(gè)基因組，多態(tài)性檢出率高。

缺點(diǎn)：1.退火溫度低，PCR反應(yīng)受環(huán)境條件影響較大，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性

低、重復(fù)性差。2.大部分RAPD標(biāo)記表現(xiàn)顯性，不能區(qū)分雜合與純合基因

型，不能提供完整的遺傳信息。3.存在共遷移過(guò)程問(wèn)題，同一條帶中可

能含有長(zhǎng)度相同而序列不同的片段。

6.什么是AFLPAFLP標(biāo)記有何特點(diǎn)

AFLP擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性選擇性擴(kuò)增園藝植物基因組DNA的雙酶切片

段，檢測(cè)的多態(tài)性是酶切位點(diǎn)的變化或酶切片段間DNA序列的插入與缺失，其

實(shí)質(zhì)是RFLP和PCR兩項(xiàng)技術(shù)的結(jié)合，既有RFLP的可靠性，也有PCR的靈敏

性。

特點(diǎn)（缺點(diǎn)）：對(duì)基因組DNA和限制酶的質(zhì)量要求高，酶切不完全可能會(huì)出

現(xiàn)假陽(yáng)性；

操作步驟較多，對(duì)實(shí)驗(yàn)技能要求較高，成本也較高；大多數(shù)為顯性標(biāo)記，并且

很能鑒別等位基因；該技術(shù)已申請(qǐng)專利，只能用于非盈利性的科學(xué)研究。

7.什么是SSRSSR標(biāo)記有何特點(diǎn)

sSR稱為微衛(wèi)星或簡(jiǎn)單序列重復(fù)SSR兩側(cè)是高度保守的單拷貝序

列，可根據(jù)SSR兩側(cè)序列設(shè)計(jì)一引物，利用PCR技術(shù)對(duì)SSR本身進(jìn)行特

異性擴(kuò)增，經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后，擴(kuò)增片段長(zhǎng)短的變化可以顯示該物

種不同基因型DNA在每個(gè)SSR位點(diǎn)上的多態(tài)性，這種多態(tài)性便是SSR標(biāo)

記。

特點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：多態(tài)性高；共顯性遺傳，能區(qū)分純合和雜合基因型；操作簡(jiǎn)單，快

捷；技術(shù)重復(fù)性好，結(jié)果穩(wěn)定可靠；所需DNA量少，且對(duì)其質(zhì)量不高。

缺點(diǎn)：需要根據(jù)標(biāo)記兩端的DNA序列信息設(shè)計(jì)特異引物，比較耗時(shí)費(fèi)

力，要檢測(cè)多個(gè)基因不現(xiàn)實(shí)；具有物種特異性，不同的物種均需要開(kāi)發(fā)其相應(yīng)

的SSR標(biāo)記。

8.什么是SNPSNP標(biāo)記有何特點(diǎn)

SNP單核甘酸多態(tài)性是指園藝植物基因組由于單個(gè)核甘酸變異而引

起的DNA序列多態(tài)性，包括單堿基的轉(zhuǎn)換，顛換以及單堿基的插入或缺失。

(理論上，SNP在一個(gè)核甘酸位置可以有四種堿基形式，即具有四個(gè)等

位基因，但實(shí)際上SNP多表現(xiàn)為雙等位基因，稱為雙等位基因標(biāo)記。)

特點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：雙等位基因標(biāo)記，便于自動(dòng)化分析；分布廣泛，數(shù)量豐富，遺傳穩(wěn)

定；共顯性遺傳；某些SNP位于基因編碼區(qū)，直接影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能，

可能直接控制重要性狀的變異；檢測(cè)技術(shù)已實(shí)現(xiàn)了半自動(dòng)化或全自動(dòng)化。

9.分子標(biāo)記在園藝植物上都用哪些應(yīng)用

分子遺傳圖譜構(gòu)建和基因定位；分子標(biāo)記輔助選擇育種；遺傳多樣性和親

緣關(guān)系分析；核心種質(zhì)構(gòu)建；園藝植物品種鑒定與純度分析。

11、什么是核心種質(zhì)核心種質(zhì)具備的特征有哪些(書(shū)P243)

(1)核心種質(zhì)：能最大限度地代表種質(zhì)資源遺傳多樣性的最小數(shù)量種質(zhì)資源，

從而提高種質(zhì)的保存、評(píng)價(jià)與利用效率，而核心種質(zhì)以外的種質(zhì)資源則作為保

留種質(zhì)(reservecollection)保存。

⑵特征：異質(zhì)性、代表性、實(shí)用性和動(dòng)態(tài)性等。

①異質(zhì)性：核心種質(zhì)彼此間的相似性要盡可能小,應(yīng)最大限度地避免遺傳

重復(fù)。

②代表性：核心種質(zhì)應(yīng)代表本物種及其近緣種盡可能多的生態(tài)和遺傳多樣

性，而不是全部種質(zhì)資源的簡(jiǎn)單壓縮。

③實(shí)用性：核心種質(zhì)的規(guī)模急劇減小，應(yīng)極大地提高對(duì)其保存、評(píng)價(jià)與利

用的效率,使符合需要的資源能更容易地被篩選出來(lái)。

@動(dòng)態(tài)性：隨著研究的深入、對(duì)資源認(rèn)識(shí)的加深以及應(yīng)用需求的變化，核

心種質(zhì)與保留種質(zhì)之間應(yīng)保持材料上的動(dòng)態(tài)交流與調(diào)整,使整個(gè)種質(zhì)資源的萱

理和利用更方便。

12、什么是暫時(shí)性分離群體什么是永久性分離分離群體（概念為112班14號(hào)自

己組織語(yǔ)言定義，詳情見(jiàn)書(shū)P239）

（1）暫時(shí)性分離群體：以單株為分離單位，自交后遺傳組成發(fā)生變化無(wú)法永久

保存和使用的（用于構(gòu)建園藝植物分子遺傳圖譜的）分離群體。主要有K、

F2>BC等分離群體。

⑵永久性分離群體：以株系為分離單位，以不同株系間具基因型差異但株系

內(nèi)部基因型相同且純合故自交不分離為理論基礎(chǔ)，自交或近交后可永久保存和

使用的（用于構(gòu)建園藝植物分子遺傳圖譜的）分離群體。

13、什么重組自交系（書(shū)P240）什么是近等位基因系（書(shū)P241）

（1）重組自交系：F2單粒傳代法（singleseeddescent,SSD）經(jīng)多代自交而

建立的一種作圖群體。

（2）近等基因系（NIL）：只有個(gè)別基因或性狀差異的一系列品系。（式一系

列回交過(guò)程的產(chǎn)物）

14、什么是DH群體（書(shū)P240）

通過(guò)R植株花藥離體培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生單倍體植株后將其染色體加倍產(chǎn)生的一

類純合的永久性群體。

15、什么是分子標(biāo)記輔助選擇（MAS）（書(shū)P24DMAS在園藝植物育種中的應(yīng)用

和優(yōu)越性有哪些（十二章李英老師ppt）

（i）MAS（molecularassistantselection）：能夠借助分子標(biāo)記對(duì)目標(biāo)性狀的

基因型進(jìn)行選擇。

⑵應(yīng)用及優(yōu)越性：

①可以在植物發(fā)育的任何階段進(jìn)行選擇,對(duì)目標(biāo)性狀的選擇不受基因表達(dá)

和環(huán)境的影響，可在早代進(jìn)行準(zhǔn)確的選擇，加速育種進(jìn)程,提高育種效率

②共顯性標(biāo)記可區(qū)分純合體和雜合體,不需下代再鑒定,而且在分離世代能

快速準(zhǔn)確地鑒定植株的基因型

③可有效地對(duì)抗病性、抗逆性和根部性狀等表型鑒定困難的性狀進(jìn)行基因

型鑒定

@可聚合多個(gè)有利基因提高育種效率

⑤克服不良性狀連鎖，有利于導(dǎo)入遠(yuǎn)緣優(yōu)良基因

16、什么是集團(tuán)分離分析法（BSA）（第十二章李英老師ppt）

BSA（分離體分組混合分析法或混合分組分析法，又稱集團(tuán)分離分析法，

BulkedSegregationAnalysis）：基于將分離群體中的個(gè)體依據(jù)研究的目標(biāo)性狀

（如抗病和染?。┓殖蓛山M，在每組群體中把各個(gè)個(gè)體的DNA等量混合，形成

兩個(gè)DNA混合池為原理的近等基因池法。它克服了許多植物不易獲得近等基因

系的缺點(diǎn)。

17、什么是生物信