邊境口岸鼠疫檢測實驗室建設(shè)規(guī)范第2部分：鼠疫快速篩查實驗室

1邊境口岸鼠疫檢測實驗室建設(shè)規(guī)范第2部分：鼠疫快速篩查實驗室本文件規(guī)定了邊境口岸鼠疫快速篩查實驗室建設(shè)規(guī)范總體要求。本文件適用于邊境口岸鼠疫快速篩查實驗室建設(shè)的要點和管理要求。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB53046生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范GB19489實驗室生物安全通用要求WS233病原微生物實驗室生物安全通用準(zhǔn)則SN/T國境口岸傳染病快速檢測技術(shù)規(guī)范WS279鼠疫診斷標(biāo)準(zhǔn)3人員要求3.1檢測人員3.1.1數(shù)量要求鼠疫快速篩查實驗室必須配置與出入境口岸人員以及來自疫區(qū)國家風(fēng)險評估程度、口岸的復(fù)雜性相適應(yīng)的專業(yè)人員（特指醫(yī)學(xué)相關(guān)專業(yè)背景人員或經(jīng)培訓(xùn)考核合格人員每班次至少有1名為專業(yè)人員。3.1.2資格要求滿足海關(guān)總署對相關(guān)崗位的資格要求。從事快速檢測的人員須具備相關(guān)醫(yī)學(xué)檢驗或生物學(xué)技術(shù)或公共衛(wèi)生專業(yè)背景；或者經(jīng)過相關(guān)專業(yè)培訓(xùn)、并取得上崗證的人員。3.1.3培訓(xùn)要求必須保證檢測人員接受崗前培訓(xùn)，通過資格考核；保證在崗專業(yè)人員每年至少參加兩次以上專業(yè)學(xué)習(xí)、培訓(xùn)或演練。3.1.4備案要求從事快速檢測的人員應(yīng)在衛(wèi)生檢疫主管部門和口岸監(jiān)管主管部門備案。3.1.5技術(shù)能力熟悉鼠疫風(fēng)險的處置程序，具備實施前期處置的能力；掌握快速檢測設(shè)備操作規(guī)程；熟練掌握快速檢測的基本操作技能。23.1.6個人防護(hù)能力掌握個人防護(hù)用品種類及要求；掌握生物安全一、二、三級防護(hù)水平分級及適用情況；掌握防護(hù)用品的穿脫程序。防護(hù)方法和裝備參照海關(guān)總署衛(wèi)生檢疫司編《衛(wèi)生檢疫標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)指引》（2019版)《第二十一節(jié)進(jìn)出境人員衛(wèi)生檢疫個人防護(hù)作業(yè)指引》。3.2管理保障人員3.2.1總體要求鼠疫快速篩查實驗室配置至少一名管理保障人員；能夠保障實驗室設(shè)施、設(shè)備持續(xù)正常運轉(zhuǎn)；試劑、消毒劑及相關(guān)耗材符合專業(yè)要求并滿足供應(yīng)；能夠進(jìn)行儀器設(shè)備檢定校準(zhǔn)、日常維護(hù)等。為了防止進(jìn)入污染區(qū)的工作人員發(fā)生暴露，經(jīng)過培訓(xùn)的管理保障人員需在穿脫防護(hù)用品等生物安全操作過程中給予監(jiān)督、指導(dǎo)及幫助；管理保障人員需充分知曉如何穿脫防護(hù)用品的程序，能夠處理發(fā)生暴露后的相關(guān)事件。3.2.2資格要求管理保障人員需由具備醫(yī)學(xué)背景專業(yè)人員、或經(jīng)過相關(guān)專業(yè)培訓(xùn)取得上崗資格證書的人員擔(dān)任，并定期考核換證。3.2.3培訓(xùn)要求管理保障人員需接受崗前培訓(xùn)，資格考核后獲取上崗證書；在崗專業(yè)人員每年至少參加兩次以上專業(yè)學(xué)習(xí)、培訓(xùn)或演練，并在上級衛(wèi)生檢疫主管部門和口岸監(jiān)管主管部門備案。3.2.4技術(shù)能力應(yīng)做到“三知四會”：知鼠疫相關(guān)知識，知鼠疫疫情風(fēng)險，知業(yè)務(wù)要求，會選擇防護(hù)用品，會穿脫，會污染控制，會應(yīng)急處置。熟悉鼠疫風(fēng)險的處置程序，具備實施前期處置的能力；掌握快速檢測設(shè)備操作規(guī)程；熟練掌握快速檢測的基本操作技能。3.2.5個人防護(hù)能力掌握個人防護(hù)用品種類及要求；掌握生物安全一、二、三級防護(hù)水平分級及適用情況；掌握防護(hù)用品的穿脫程序。3.3考核要求3.3.1生物安全考核操作人員需熟練掌握生物安全相關(guān)知識；熟悉生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作流程；熟練掌握消毒原則和技術(shù)；掌握意外事件和生物安全事故的應(yīng)急處置原則和上報程序。3.3.2操作培訓(xùn)考核操作人員能夠熟練掌握現(xiàn)場配備的各種快速檢測方法，每年進(jìn)行至少一次現(xiàn)場采樣與檢測、醫(yī)療廢棄物處置、終末消毒的全流程操作考核。4場所、設(shè)備、試劑要求4.1場所要求鼠疫快速檢測要求在具備二級生物安全條件下進(jìn)行。4.2設(shè)備要求34.2.1儀器設(shè)備類型生物安全柜（II級）、高壓滅菌器、醫(yī)用冷藏冷凍箱、高速冷凍離心機、UPT上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀、便攜式熒光定量PCR儀、其他快速檢測設(shè)備（依條件配備）、輔助設(shè)備配備：各量程微量移液器、小型水浴器或干浴器、瞬時離心機等。4.2.2儀器設(shè)備總體要求設(shè)備配備以便攜、操作過程樣品暴露少、不開或少開蓋兒，減少氣溶膠產(chǎn)生為原則。其中，生物安全柜要有年檢合格證；高壓滅菌器要有高壓指示條或生物指示劑，且年度計量合格。進(jìn)出境人員采樣設(shè)備見海關(guān)總署衛(wèi)生檢疫司編《衛(wèi)生檢疫標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)指引》（2019版）《第九節(jié)進(jìn)出境人員生物樣本采集、送檢作業(yè)指引》附件3《各類采樣操作所需采樣物品》。4.3試劑要求試劑種類：鼠疫菌F1抗原膠體金、鼠疫菌F1抗體膠體金、上轉(zhuǎn)發(fā)光法抗原、抗體檢測試劑、鼠疫菌核酸快速試劑。4.4檢測方法4.4.1快速膠體金檢測4.4.1.1總體要求具有鼠疫菌F1抗原檢測法試劑，補充配備F1抗體檢測法試劑，并做好相應(yīng)檢測記錄。4.4.1.2操作方法從冰箱中取出膠體金檢測卡平衡至室溫，樣品處理、檢測步驟依照所選用的產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作。4.4.2UPT上轉(zhuǎn)熒光法檢測4.4.2.1總體要求具有鼠疫菌上轉(zhuǎn)發(fā)光法抗原、抗體檢測試劑，并做好相應(yīng)檢測記錄。4.4.2.2操作方法開機儀器自檢，設(shè)置樣本ID進(jìn)行測量,待試劑卡托架出倉后插入試劑卡，測量結(jié)束可讀取檢測結(jié)果并按需打印。4.4.3其他檢測方法（包括但不限于快速核酸等檢測方法）4.4.3.1總體要求操作方法簡便易行，結(jié)果準(zhǔn)確且容易判讀，并做好檢測記錄。常見檢測方法有間接血凝試驗（IHA)測定鼠疫F1抗體、反相血凝試驗（RIHA）測定鼠疫F1抗原、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA)檢測鼠疫抗體及抗原、快速鼠疫核酸檢測等方法。4.4.3.2操作方法快速鼠疫核酸檢測方法可使用便攜式實時熒光定量PCR儀，按商品化核酸檢測試劑盒說明書/相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)試劑配制和加樣，或者使用免提核酸熒光PCR檢測試劑，按操作說明進(jìn)行熒光定量PCR儀擴增循環(huán)參數(shù)、反應(yīng)體積的設(shè)置和熒光通道的選擇，設(shè)定基線和閾值，根據(jù)擴增曲線和Ct值判定檢測結(jié)果。其他快速檢測方法見WS279中的操作說明。45樣本采集、保存、運輸5.1樣本采集血液：血液樣本采集雙份樣本：無抗凝劑（紅管）血液2管，5毫升/管；EDTA抗凝劑（紫管）2管，2毫升/管，用于現(xiàn)場檢測及送樣。具體操作見海關(guān)總署衛(wèi)生檢疫司編《衛(wèi)生檢疫標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)指引》（2019版）《第九節(jié)進(jìn)出境人員生物樣本采集、送檢作業(yè)指引》附件4《采樣操作指南》。5.2樣本保存血液：現(xiàn)場檢測前于4℃冷藏保存，檢測后吸出血清（血漿）于-20℃冷凍保存。5.3樣本運輸樣本的保存和運輸按照海關(guān)總署衛(wèi)生檢疫司編《衛(wèi)生檢疫標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)指引》（2019版）《第九節(jié)進(jìn)出境人員生物樣本采集、送檢作業(yè)指引》附件5《高致病性病原微生物相關(guān)感染性標(biāo)本的包裝運輸》要求進(jìn)行，用于核酸檢測的樣本一周內(nèi)保存于-20℃低溫冰箱，并按照要求送樣。6陽性結(jié)果的處置6.1報告：迅速報告