2023-2024學(xué)年山東日照市高二下學(xué)期期中考試生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1山東日照市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期中考試試題注意事項(xiàng)：1.答題前，考生將自己的姓名、考生號、座號填寫在相應(yīng)位置，認(rèn)真核對條形碼上的姓名、考生號和座號，并將條形碼粘貼在指定位置上。2.選擇題〖答案〗必須使用2B鉛筆（按填涂樣例）正確填涂，非選擇題〖答案〗必須使用0.5毫米黑色簽字筆書寫，繪圖時，可用2B鉛筆作答，字跡工整、筆跡清楚。3.請按照題號在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的〖答案〗無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。保持卡面清潔，不折疊、不破損。－、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有－個選項(xiàng)符合題目要求。1.腐乳是我國古代勞動人民創(chuàng)造出的一種經(jīng)過微生物發(fā)酵制作的大豆食品。下列敘述錯誤的是（）A.腌制腐乳的鹵湯中加入的一定濃度的酒精能夠起到滅菌作用B.若制作過程中溫度過低會導(dǎo)致毛霉菌絲不易進(jìn)入豆腐塊深層C.微生物產(chǎn)生酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸D.腐乳的風(fēng)味因豆腐含水量、發(fā)酵條件以及輔料的不同而不同〖答案〗A〖祥解〗影響腐乳的風(fēng)味和質(zhì)量的因素是鹽的用量，酒的用量，發(fā)酵溫度，發(fā)酵時間等；鹽的濃度過低，不足以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高，會影響腐乳的口味。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過腌制并配入各種輔料，使蛋白酶作用緩慢，促進(jìn)其他生化反應(yīng)，生成腐乳的香氣?！驹斘觥緼、腐乳制作時，鹵湯中加酒精可以抑制微生物的生長，起消毒的作用，A錯誤；B、溫度為15～18℃適合毛霉生長，溫度過低，毛霉的菌絲生長緩慢，不易進(jìn)入豆腐塊的深層，B正確；C、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，C正確；D、因豆腐的含水量、發(fā)酵條件及加輔料的不同，可制成不同風(fēng)味的腐乳，D正確。故選A。2.圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細(xì)菌，能夠在土壤中獨(dú)立固定氮?dú)??？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中圓褐固氮菌的分離、計(jì)數(shù)和鑒定，并將之用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。下列說法正確的是（）A.選擇培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基不需要加碳源和氮源B.為促進(jìn)圓褐固氮菌的生長，需將培養(yǎng)基pH調(diào)至酸性C.通過計(jì)算可知每克土壤中的固氮菌數(shù)約為1.8×108個D.將種子與自生固氮菌拌種后播種，可減少化肥使用〖答案〗D〖祥解〗微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、依題意，圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細(xì)菌，能夠在土壤中獨(dú)立固定氮?dú)?。因此，選擇培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基不需要加氮源，要加碳源，A錯誤；B、圓褐固氮菌是細(xì)菌，細(xì)菌適宜在中性或弱堿性條件下生存，因此，為促進(jìn)圓褐固氮菌的生長，需將培養(yǎng)基pH調(diào)至中性或弱堿性，B錯誤；C、每克土壤中的固氮菌數(shù)約為：個，C錯誤；D、依題意，圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細(xì)菌，能夠在土壤中獨(dú)立固定氮?dú)?。因此，將種子與自生固氮菌拌種后播種，可減少化肥使用，D正確。故選D。3.進(jìn)行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基組分及含量如下表所示。下列分析正確的是（）組分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂蒸餾水含量1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mLA.由表中成分可知，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.葡萄糖和瓊脂都可以為尿素分解菌提供碳源C.常用高壓蒸汽滅菌法對配制好的培養(yǎng)基滅菌D.只有尿素分解菌能夠在該選擇培養(yǎng)基上生長〖答案〗C〖祥解〗培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，篩選和分離微生物需要使用選擇培養(yǎng)基，微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作?！驹斘觥緼、根據(jù)表格成分可知，含有瓊脂，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，A錯誤；B、瓊脂一般不可以為尿素分解菌提供碳源，只起到凝固劑的作用，B錯誤；C、配制培養(yǎng)基需要采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，即在121℃、100kPa條件下處理15～30min,C正確；D、以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長出的不都是尿素分解菌，還有可能是自生固氮菌，D錯誤。故選C。4.啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成，其主要工藝流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.制麥時需浸泡大麥，加入脫落酸有利于淀粉酶的形成B.糖化后煮沸，主要是為了終止酶的作用并對糖漿滅菌C.圖中發(fā)酵階段，要始終保持嚴(yán)格的無菌、無氧的環(huán)境D.生產(chǎn)精釀啤酒需對發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行更徹底的過濾和消毒〖答案〗B〖祥解〗分析題圖，啤酒生產(chǎn)需經(jīng)過制麥、糖化、發(fā)酵等主要環(huán)節(jié)。酵母菌可進(jìn)行有氧呼吸獲得大量能量，從而快速繁殖，又可以進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2?！驹斘觥緼、浸泡大麥的目的是提高自由水/結(jié)合水的比例，進(jìn)而提高細(xì)胞代謝速率和淀粉酶的形成，而加入脫落酸促進(jìn)休眠，不利于淀粉酶的形成，A錯誤；B、糖化后煮沸，主要是為了終止酶的作用并對糖漿滅菌，B正確；C、為了縮短發(fā)酵時間，發(fā)酵初期應(yīng)適當(dāng)提供氧氣，有利于酵母菌有氧呼吸快速繁殖，C錯誤；D、生產(chǎn)精釀啤酒一般不添加食品添加劑，不進(jìn)行過濾和消毒處理等，D錯誤。故選B。5.“手指植物”是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出的瓶裝觀賞植物。下列敘述錯誤的是（）A.可用酒精、次氯酸鈉對生理狀況良好的外植體進(jìn)行消毒B.外植體接種時要注意插入方向且應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.脫分化過程需要在適宜的溫度和充足的光照條件下進(jìn)行D.該技術(shù)屬于無性繁殖，可保持觀賞植物的優(yōu)良遺傳特性〖答案〗C〖祥解〗使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等?！驹斘觥緼、在進(jìn)行組織培養(yǎng)時，可先后使用酒精、次氯酸鈉對生理狀況良好的外植體進(jìn)行消毒，以防止外植體表面的雜菌污染，A正確；B、外植體接種時要注意插入方向，防止形態(tài)學(xué)上下端顛倒，且應(yīng)在酒精燈火焰旁等無菌區(qū)域進(jìn)行，B正確；C、脫分化過程應(yīng)遮光，C錯誤；D、該技術(shù)屬于無性繁殖，可保持優(yōu)良品種的遺傳特性，D正確。故選C。6.研究發(fā)現(xiàn)，雪蓮次生代謝物對急性酒精肝損傷具有較好的防治作用，利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)雪蓮次生代謝物的大致流程如下圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.從雪蓮中提取的次生代謝物不是雪蓮生長所必需的B.圖中培養(yǎng)單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)所用的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基C.可將培養(yǎng)的細(xì)胞置于低滲溶液中漲破以提取次生代謝物D.利用該技術(shù)生產(chǎn)雪蓮次生代謝物不受季節(jié)和氣候的影響〖答案〗C〖祥解〗（1）次生代謝不是生物生長所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環(huán)境和時間條件下才合成，具有產(chǎn)量小，應(yīng)用廣泛的特點(diǎn)。（2）植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)，它不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制，因此對于社會、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義?！驹斘觥緼、初生代謝是生物生長和生存所必需的，次生代謝不是生物生長所必需的，A正確；B、圖中培養(yǎng)單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)體的目的為增加細(xì)胞數(shù)量，獲取大量雪蓮次生代謝物，因此該過程使用的是液體培養(yǎng)基，B正確；C、圖中細(xì)胞為植物細(xì)胞，由于細(xì)胞壁對細(xì)胞壁的支持保護(hù)作用，在低滲溶液中不會被漲破，C錯誤；D、植物細(xì)胞培養(yǎng)是在人工構(gòu)建的環(huán)境中進(jìn)行，因此使用該方法獲得次生代謝產(chǎn)物具有不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制等優(yōu)點(diǎn)，D正確。故選C。7.動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)之一。下列敘述錯誤的是（）A.將動物組織分散成單個細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程都需要95%氧氣和5%CO2的氣體條件C.培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等D.向培養(yǎng)的體細(xì)胞中轉(zhuǎn)入相關(guān)因子可能會使其轉(zhuǎn)化為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞〖答案〗B〖祥解〗動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體條件：95%空氣和5%CO2，取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斘觥緼、將動物組織分散成單個細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，A正確；B、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程都需要95%空氣和5%CO2的氣體條件，B錯誤；C、培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等，C正確；D、向培養(yǎng)的體細(xì)胞中轉(zhuǎn)入相關(guān)因子可能會使其轉(zhuǎn)化為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，D正確。故選B。8.研究人員將可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞注射到與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，經(jīng)培養(yǎng)最終得到了具有高比例胚胎干細(xì)胞的嵌合體猴，過程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.胚胎干細(xì)胞具有分化為獼猴體內(nèi)任何一種類型細(xì)胞的潛能B.胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織中C.需將供體獼猴的胚胎干細(xì)胞注入到桑葚胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部位D.嵌合體猴僅部分位置發(fā)出綠色熒光可能是基因重組的結(jié)果〖答案〗A〖祥解〗胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞，是高度未分化的細(xì)胞。如果進(jìn)行體外培養(yǎng)，能夠無限的增殖和分化。胚胎肝細(xì)胞還可以分化成多功能的細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞具有多能性，可以分化成多種組織的能力但是無法獨(dú)自發(fā)育成一個個體細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞被稱為一種“全能”細(xì)胞，可以分化成所有類型的細(xì)胞，并且攜帶生物體的全套遺傳信息?！驹斘觥緼、胚胎干細(xì)胞被稱為一種“全能”細(xì)胞，攜帶生物體的全套遺傳信息，具有分化成任何一種類型細(xì)胞的潛能，A正確；B、干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，B錯誤；C、需將供體獼猴的胚胎干細(xì)胞注入到囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部位，C錯誤；D、嵌合體猴中，由胚胎干細(xì)胞增殖分化形成的組織可發(fā)出綠色熒光，D錯誤。故選A。9.科研人員從供體母牛耳朵上采集細(xì)胞，注入到去核的卵母細(xì)胞中構(gòu)建成重構(gòu)胚，再將發(fā)育的胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)，最終獲得了克隆?！皦▔ā?。下列敘述錯誤的是（）A.進(jìn)行核移植前，通常需將采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到MⅡ期B.梯度離心法可在不穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下對卵母細(xì)胞去核C.Ca2+載體、乙醇等處理能使耳細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞發(fā)生融合D.克隆?！皦▔ā钡倪z傳物質(zhì)與供體牛的遺傳物質(zhì)并不完全相同〖答案〗C〖祥解〗動物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)?！驹斘觥緼、進(jìn)行核移植前，通常需將采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到MⅡ期，A正確；B、目前動物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用去核辦法有：梯度離心、紫外線短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等。這些方法是在不穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下對卵母細(xì)胞去核或使其中的DNA變性，B正確；C、Ca2+載體、乙醇等處理的目的是激活重構(gòu)胚，要使耳細(xì)胞和去核的卵母細(xì)胞發(fā)生融合，使用的是聚乙二醇融合法、電融合法雞滅活病毒誘導(dǎo)法，C錯誤；D、克隆?！皦▔ā钡倪z傳物質(zhì)與供體牛的遺傳物質(zhì)并不完全相同，原因是“墾墾”的核遺傳物質(zhì)來自供體牛，“墾墾”的質(zhì)遺傳物質(zhì)來自供體牛和卵母細(xì)胞，D正確。故選C。10.研究人員利用細(xì)胞工程和基因編輯技術(shù)成功培育出了孤雄小鼠，實(shí)現(xiàn)了哺乳動物的同性繁殖，操作流程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.上述實(shí)驗(yàn)說明精子轉(zhuǎn)化來的ahESC具有發(fā)育的全能性B.卵母細(xì)胞去除的“核”其實(shí)是紡錘體—染色體復(fù)合物C.基因編輯的目的是將ahESC的Y染色體變?yōu)閄染色體D.理論上最終得到孤雄小鼠的性染色體組成為XX或YY〖答案〗B〖祥解〗精子激活轉(zhuǎn)化成ahFSC，通過基因編輯技術(shù)獲得具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC，從而得到孤雄小鼠?！驹斘觥緼、上述實(shí)驗(yàn)說明精子轉(zhuǎn)化來的ahESC的細(xì)胞核具有發(fā)育的全能性，A錯誤；B、卵母細(xì)胞去除的“核”其實(shí)是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；C、精子激活轉(zhuǎn)化成ahFSC，通過基因編輯技術(shù)獲得具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC，沒有改變?nèi)旧w，C錯誤；D、理論上孤雄小鼠是由去核細(xì)胞、精子（X或Y）、具卵細(xì)胞細(xì)胞核的ahESC（X或Y）組成，性染色體組成為XX、XY或YY，D錯誤。故選B。11.杜泊羊生長速度快，肉質(zhì)好?？蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工程實(shí)現(xiàn)了杜泊羊的快速繁殖，其主要流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.采集的精子需要在體外進(jìn)行獲能處理，才能獲得受精能力B.可以使用免疫抑制劑來降低代孕羊?qū)χ踩肱咛サ呐懦夥磻?yīng)C.用分割針將原腸胚均分后再進(jìn)行移植可以提高胚胎的利用率D.操作時要用激素對當(dāng)?shù)仄胀ㄑ蜻M(jìn)行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理〖答案〗A〖祥解〗體外受精主要操作步驟（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：方法一：對小型動物一般用促性腺激素處理，使其排出更多的卵子，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。方法二：對大型動物是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞，在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精（或從剛屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞）（2）精子的采集和獲能：在體外受精前，要對精子進(jìn)行獲能處理。獲能方法：培養(yǎng)法和化學(xué)法。（3）受精：獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程?！驹斘觥緼、采集的精子需要在體外進(jìn)行獲能處理，使其產(chǎn)生相應(yīng)的生理變化，才能獲得受精能力，A正確；B、受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此不需要注射免疫抑制劑，B錯誤；C、用分割針將桑葚胚或者囊胚均分后再進(jìn)行移植可以提高胚胎的利用率，C錯誤；D、操作時要用激素對當(dāng)?shù)仄胀ㄑ蜻M(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對杜泊母羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理，D錯誤。故選A。12.下表為常用的限制性內(nèi)切核酸酶（限制酶）及其識別序列和切割位點(diǎn)，由此推斷下列敘述錯誤的是（）限制酶名稱識別序列和切割位點(diǎn)限制酶名稱識別序列和切割位點(diǎn)BamHⅠG↓GATCCSmaⅠCCC↓GGGHindⅡGTY↓RACSau3AⅠ↓GATC注：Y為C或T，R為A或G。A.能被BamHI識別并切割的DNA也能被Sau3AI識別和切割B.經(jīng)HindⅡ、SmaI切割后的片段可以由T4DNA連接酶連接C.有些限制酶的識別序列只有一種，有些限制酶識別序列有多種D.經(jīng)BamHI、Sau3AI切割后連接形成的片段不能被BamHI識別〖答案〗D〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種?！驹斘觥緼、Sau3AI和BamHI切割位點(diǎn)和識別核苷酸序列相同，能被BamHI識別并切割的DNA也能被Sau3AI識別和切割，A正確；B、HindⅡ、SmaI切割后形成的是平末端，T4DNA連接酶可以連接具有平末端的DNA片段，B正確；C、有些限制酶的識別序列只有一種，有些限制酶識別序列有多種，如HindⅡ限制酶的識別序列為GTY↓RAC，其中Y＝C或T，R＝A或G，說明其識別序列不只一種，C正確；D、BamHI切割G↓GATCC，Sau3AI切割↓GATC，故二者切割后產(chǎn)生的黏性末端是相同的，因此二者切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠相連，連接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AI切割，但是BamHI不一定能切割，D錯誤。故選D。13.某同學(xué)利用洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)。下列敘述錯誤的是（）A.也可以選擇豬肝、雞血等作為實(shí)驗(yàn)材料，提取方法可能稍有不同B.將洋蔥研磨液過濾后，置于4℃冰箱中幾分鐘后，DNA出現(xiàn)在沉淀物中C.向DNA提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后，出現(xiàn)的白色絲狀物為DNAD.鑒定時，先將絲狀物溶于2mol/LNaCl溶液，再加入二苯胺并進(jìn)行沸水浴加熱〖答案〗B〖祥解〗（1）DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色；（2）DNA粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)中，不同操作步驟中加水的作用不同，破碎細(xì)胞獲取含DNA的濾液時，加蒸餾水的目的是使血細(xì)胞漲破；出去濾液中的雜質(zhì)時，加蒸餾水的目的是降低NaCl溶液濃度使DNA析出?！驹斘觥緼、不同類型的生物材料（如植物細(xì)胞、動物細(xì)胞、微生物）中DNA的提取過程雖有相似之處，但也存在差異。例如，使用雞血作為實(shí)驗(yàn)材料時，通常利用紅細(xì)胞破裂釋放出的DNA進(jìn)行提取，而不需要研磨和去除細(xì)胞壁的過程，A正確；B、在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，通常首先通過研磨和加入適量的洗滌劑與食鹽溶液來釋放細(xì)胞中的DNA，并破壞細(xì)胞膜和其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)。然后，在此混合液中DNA會溶解在溶液中，并隨同蛋白質(zhì)、多糖等其他物質(zhì)一起存在。DNA在一定濃度的NaCl溶液中溶解度較高，所以初步處理后的濾液經(jīng)過離心或靜置后，DNA不會形成沉淀，而是在溶液中，B錯誤；C、在DNA提取過程中，當(dāng)加入高濃度酒精后，DNA會因不溶于酒精而析出，形成白色的絮狀或絲狀沉淀，這就是粗提取得到的DNA，C正確；D、鑒定DNA時，常用的方法之一就是二苯胺顯色反應(yīng)，需要將DNA樣品溶解在適當(dāng)?shù)腘aCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，在沸水中加熱后，若存在DNA，則反應(yīng)液會變?yōu)樗{(lán)色，D正確。故選B。14.蘋果切開后顏色會加深的現(xiàn)象稱為“褐變”?！昂肿儭笔怯捎诙喾友趸复呋喾宇愇镔|(zhì)生成棕色色素所致，培育抗褐變轉(zhuǎn)基因蘋果的操作流程如圖。下列敘述正確的是（）A.圖中的目的基因?yàn)槎喾友趸富?，?biāo)記基因?yàn)榭敲顾乜剐曰駼.目的基因的表達(dá)依賴上游的啟動子，標(biāo)記基因表達(dá)則不需要啟動子C.步驟③是獲得轉(zhuǎn)基因蘋果的核心工作，常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.可通過PCR技術(shù)檢測蘋果的染色體DNA上是否成功插入了目的基因〖答案〗D〖祥解〗題圖分析：過程①為構(gòu)建目的基因表達(dá)的載體，過程②為獲取受體細(xì)胞，過程③為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，過程④為脫分化，過程⑤為再分化?！驹斘觥緼、要想獲得抗褐變的轉(zhuǎn)基因蘋果，應(yīng)以抑制多酚氧化酶表達(dá)的基因作為目的基因，同時以卡那霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，A錯誤；B、啟動子的作用是驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄，目的基因的表達(dá)依賴上游的啟動子，標(biāo)記基因表達(dá)也需要啟動子，B錯誤；C、過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟，C錯誤；D、檢測蘋果的染色體DNA上是否成功插入了目的基因可利用PCR技術(shù)，D正確。故選D。15.生物技術(shù)的安全性和倫理問題是社會關(guān)注的熱點(diǎn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.某些轉(zhuǎn)基因食品中的DNA會與人體細(xì)胞的DNA發(fā)生基因重組B.將α‐淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物，可防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播C.生殖性克隆是利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞D.試管嬰兒必需的技術(shù)有體外受精、植入前的遺傳學(xué)診斷和胚胎移植等〖答案〗B〖祥解〗（1）轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。（2）中國政府：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對治療性克隆人?！驹斘觥緼、一般轉(zhuǎn)基因食品中的DNA不會與人體細(xì)胞的DNA發(fā)生基因重組，A錯誤；B、將α-淀粉酶基因與目的基因轉(zhuǎn)入植物中，由于α-淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏而使花粉失活，因此可以防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播，B正確；C、生殖性克隆是通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個體，C錯誤；D、試管嬰兒對植入前胚胎一般不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，而設(shè)計(jì)試管嬰兒往往為了避免后代患某種遺傳病，需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，故試管嬰兒必需的技術(shù)有體外受精和胚胎移植等，D錯誤。故選B。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個或多個選項(xiàng)符合題目要求，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.雙層平板法是先在培養(yǎng)皿中倒入底層固體培養(yǎng)基，凝固后形成底層平板；再倒入由宿主細(xì)菌、噬菌體以及瓊脂含量較低的培養(yǎng)基組成的混合液，形成上層平板。培養(yǎng)一段時間后，在上層平板上觀察到由于噬菌體侵染周圍細(xì)菌而形成的空斑，即噬菌斑（通常一個噬菌斑來自一個噬菌體），根據(jù)噬菌斑的數(shù)目可計(jì)算噬菌體的數(shù)量。下列敘述錯誤的是（）A.需先調(diào)節(jié)滅菌后培養(yǎng)基的pH，然后再進(jìn)行倒平板B.需使用滅菌后的涂布器將混合液均勻涂布在底層平板上C.利用雙層平板法統(tǒng)計(jì)出的噬菌體數(shù)量往往比實(shí)際值偏大D.可用雙層平板法來檢測噬菌體和細(xì)菌間是否存在寄生關(guān)系〖答案〗ABC〖祥解〗雙層平板法的優(yōu)點(diǎn)：①加了底層培養(yǎng)基后，可使原來底面不平的玻璃皿的缺陷得到了彌補(bǔ)；②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上，因此不僅每一噬菌斑的大小接近、邊緣清晰，而且不致發(fā)生上下噬菌斑的重疊現(xiàn)象；③因上層培養(yǎng)基中瓊脂較稀，故形成的噬菌斑較大，更有利于計(jì)數(shù)?！驹斘觥緼、配制培養(yǎng)基時，要先調(diào)pH再滅菌，然后進(jìn)行倒平板，A錯誤；B、依題意，由宿主細(xì)菌、噬菌體以及瓊脂含量較低的培養(yǎng)基組成的混合液直接倒入底層平板上，形成上層平板，不需要再用涂布器涂布，B錯誤；C、在計(jì)數(shù)時，有可能噬菌體入侵細(xì)菌后還未裂解細(xì)菌，未形成噬菌斑。因此，利用雙層平板法統(tǒng)計(jì)出的噬菌體數(shù)量往往比實(shí)際值偏小，C錯誤；D、依題意，噬菌體侵染周圍細(xì)菌會形成的空斑，即噬菌斑。若噬菌體不侵染周圍細(xì)菌就不會形成空斑。因此，可以通過觀察上層平板上是否會有噬菌斑來檢測噬菌體和細(xì)菌間是否存在寄生關(guān)系，D正確。故選ABC。17.果醋需要10%~12%的糖發(fā)酵得到，而宣木瓜原液含糖量僅5%左右。以宣木瓜為材料制作果醋時，果實(shí)軟化、破碎打漿后向溶液中加入白砂糖，接種酵母菌，敞口培養(yǎng)一天左右轉(zhuǎn)為密閉發(fā)酵。當(dāng)酒精濃度穩(wěn)定后，接種醋酸菌，進(jìn)行醋酸發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（）A.加入白砂糖是為了給酵母菌發(fā)酵提供充足碳源B.敞口培養(yǎng)的目的是為酵母菌大量繁殖提供氧氣C.醋酸發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量CO2，因此需定時排氣D.醋酸發(fā)酵所需的溫度比酵母菌發(fā)酵所需要的溫度高〖答案〗C〖祥解〗（1）參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。在有氧的情況下酵母菌生長繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。（2）參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！驹斘觥緼、酒精發(fā)酵前加入的白砂糖主要是為酵母菌提供碳源，有利于提高酒精的生成量，A錯誤；B、敞口的目的是提供氧氣，為了酵母菌的繁殖，酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生CO2，當(dāng)大量CO2產(chǎn)生時表明酵母菌的數(shù)量已大幅增加，B正確；C、酒精發(fā)酵成醋酸過程中沒有二氧化碳，不需要定時排氣，C錯誤；D、醋酸發(fā)酵所需的溫度（30-35℃）比酵母菌發(fā)酵所需要的溫度（18-30℃）高，D正確。故選C。18.某團(tuán)隊(duì)利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了三倍體無核柑橘，方法是：首先處理由二倍體柑橘的花粉離體培養(yǎng)得到的愈傷組織，獲得原生質(zhì)體；然后處理二倍體柑橘幼葉細(xì)胞獲得原生質(zhì)體；隨后誘導(dǎo)兩種原生質(zhì)體融合，培養(yǎng)一段時間后檢測再生愈傷組織細(xì)胞中的DNA含量，結(jié)果如下圖所示（融合的原生質(zhì)體僅發(fā)生兩兩融合）。下列說法正確的是（）A.融合的原生質(zhì)體需放在無菌水中培養(yǎng)，以防止雜菌污染B.DNA相對含量為25、50的細(xì)胞來自未融合的原生質(zhì)體C.培養(yǎng)DNA相對含量為75的細(xì)胞可獲得三倍體無核柑橘D.通過該實(shí)驗(yàn)也可以獲得四倍體柑橘的愈傷組織細(xì)胞〖答案〗CD〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)?！驹斘觥緼、融合的原生質(zhì)體需放在無菌水中培養(yǎng)，會導(dǎo)致細(xì)胞滲透吸水，甚至漲破，融合的原生質(zhì)體應(yīng)放在等滲溶液中，A錯誤；B、由圖分析可知，DNA相對含量為50的細(xì)胞，也可能是兩個花粉細(xì)胞融合形成的細(xì)胞中的DNA含量，B錯誤；C、細(xì)胞中DNA含量為75，說明含有三個染色體組，應(yīng)是花粉細(xì)胞和二倍體細(xì)胞融合形成的細(xì)胞，將該細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)可獲得三倍體無核柑橘，C正確；D、DNA相對含量為100的細(xì)胞，是二倍體細(xì)胞和二倍體細(xì)胞的融合體，將該細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，可獲得四倍體柑橘的愈傷組織細(xì)胞，D正確。故選CD。19.對RNA病毒的檢測可采用RT-PCR技術(shù)。RT-PCR是將RNA的逆轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。檢測時，先提取病毒RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄生成cDNA，然后在同一反應(yīng)體系中進(jìn)行PCR。下列敘述正確的是（）A.RNA提取液中需添加RNA酶抑制劑，目的是防止RNA被降解B.RT-PCR反應(yīng)體系中加入的DNA聚合酶和逆轉(zhuǎn)錄酶均需耐高溫C.PCR利用DNA熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合D.PCR反應(yīng)的延伸過程中，DNA聚合酶只能從引物的3'端連接核糖核苷酸〖答案〗AC〖祥解〗PCR原理：在高溫作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、在RNA提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是抑制RNA酶的活性，防止RNA被降解，A正確；B、RT-PCR技術(shù)首先經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，從RNA合成cDNA，再以cDNA為模板，在耐高溫的DNA聚合酶作用下擴(kuò)增合成目的片段，逆轉(zhuǎn)錄酶不需耐高溫，PCR反應(yīng)體系加熱至95℃時，逆轉(zhuǎn)錄酶會變性失活，B錯誤；C、在PCR技術(shù)的過程中包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個步驟，因此DNA兩條鏈的解旋過程不需要解旋酶的催化，而是利用了DNA在高溫下變性的原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合，C正確；D、延伸過程中耐高溫DNA聚合酶從引物的3'端連接脫氧核苷酸，不消耗ATP，D錯誤。故選AC。20.雙向啟動子可同時結(jié)合兩個RNA聚合酶來驅(qū)動基因的表達(dá)，研究人員為檢測雙向啟動子的作用效果，構(gòu)建了下圖所示的表達(dá)載體，并進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列分析正確的是（）A.為了插入GUS基因，需用SalI和SphI酶切整合了LUC基因的質(zhì)粒B.可以通過在培養(yǎng)基中添加潮霉素來篩選成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞C.圖中GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時的模板鏈不是DNA分子的同一條鏈D.可通過觀察培養(yǎng)基中是否同時出現(xiàn)熒光和藍(lán)色物質(zhì)來確認(rèn)雙向啟動子的作用〖答案〗BCD〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、如果用SphI酶切已整合了雙向啟動子及LUC基因的質(zhì)粒時就會破壞LUC基因，A錯誤；B、如果成功導(dǎo)入含有潮霉素抗性基因的基因表達(dá)載體，受體細(xì)胞就具有抗潮霉素的能力，在含有潮霉素的培養(yǎng)基上能生存，因此可以篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的微生物受體細(xì)胞，B正確；C、轉(zhuǎn)錄是從5'→3'方向進(jìn)行的，由圖可知，雙向啟動子位于GUS基因和LUC基因之間，所以GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時的模板鏈不是DNA分子的同一條鏈，C正確；D、雙向啟動子如果正常表達(dá)，就會合成熒光素酶和β-葡萄糖苷酶，催化底物分別產(chǎn)生熒光或生成藍(lán)色物質(zhì)，從而確定雙向啟動子的作用，D正確。故選BCD。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.產(chǎn)黃青霉菌是一種自然界中廣泛存在的霉菌，是生產(chǎn)青霉素的重要工業(yè)菌種。當(dāng)產(chǎn)黃青霉菌處于葡萄糖濃度不足的環(huán)境中時，會分泌青霉素。工業(yè)上生產(chǎn)青霉素的發(fā)酵工程流程如圖所示。（1）由圖中分離純化的結(jié)果推測，該過程中采用的分離純化方法是_____。剛分離獲得的菌種不會直接加入主發(fā)酵罐，而是先進(jìn)行母種培養(yǎng)，其目的是_____。（2）圖中主發(fā)酵過程中要隨時取樣檢測培養(yǎng)基中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，同時，要嚴(yán)格控制______（答出三點(diǎn)）等發(fā)酵條件，因?yàn)榄h(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖，而且會影響微生物代謝產(chǎn)物的形成。（3）隨著主發(fā)酵過程的進(jìn)行，需要適時向發(fā)酵罐內(nèi)“補(bǔ)料”，補(bǔ)充的培養(yǎng)基成分有磷酸二氫鈉、葡萄糖等，其中磷酸二氫鈉的功能是______（答出兩點(diǎn)）。為使產(chǎn)黃青霉菌處于“半饑餓”狀態(tài)，延長青霉素的合成期，“補(bǔ)料”添加葡萄糖時應(yīng)采取的方式是________（從添加的量與頻次角度回答）。〖答案〗（1）①.稀釋涂布平板法②.增加菌種數(shù)量（2）pH、溫度、溶解氧（3）①.提供無機(jī)鹽；維持培養(yǎng)液的pH②.少量多次添加〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。（1）由發(fā)酵工程流程圖中平板上菌落的分布，可推知分離純化菌種采用的方法是稀釋涂布平板法。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，因此稀釋涂布平板法可用于菌落計(jì)數(shù)；由于發(fā)酵過程中需要的菌種數(shù)量大，因此將分離后的菌種先進(jìn)行菌種的擴(kuò)大化培養(yǎng)，即進(jìn)行“母種培養(yǎng)”以增加菌種數(shù)量。（2）在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程。要及時添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溶氧量、pH和溫度等發(fā)酵條件。環(huán)境條件的變化不僅會影響微生物的生長繁殖，也會影響微生物的代謝途徑，影響微生物代謝物的形成。（3）磷酸二氫鈉是培養(yǎng)基中的無機(jī)鹽之一，除此之外還可以作為緩沖劑調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；葡萄糖容易被菌體氧化并產(chǎn)生抑制抗生素合成酶形成的物質(zhì)、一次性添加過量會影響青霉素的合成，因此“補(bǔ)料”添加葡萄糖時易采用多次少量添加的方法。22.兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個細(xì)胞中的染色體在融合前發(fā)生斷裂，產(chǎn)生的染色體片段會由于整合到另一個細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，科研人員將苜蓿的耐寒基因轉(zhuǎn)入油菜細(xì)胞中，實(shí)驗(yàn)流程如下圖。（1）圖中過程a常用______酶對油菜細(xì)胞和苜蓿細(xì)胞進(jìn)行處理，以獲得兩種細(xì)胞的原生質(zhì)體。過程c中可以用化學(xué)誘導(dǎo)劑______誘導(dǎo)兩種原生質(zhì)體融合。（2）過程d中雜種細(xì)胞可以培育成再生植株，其原因是______。獲得再生植株的過程中，若愈傷組織在誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上未形成芽但分化出了根，原因可能是生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值______（填“偏高”或“偏低”）。（3）利用特異性引物對油菜和苜?；蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，然后利用上述特異性引物對再生植株進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果如下圖。據(jù)圖判斷，再生植株①~④中一定是雜種植株的是______。進(jìn)一步檢測發(fā)現(xiàn)，植株②沒有表現(xiàn)出耐寒性狀，由此推測耐寒基因可能位于圖中大小為_______bp的DNA片段上?！即鸢浮剑?）①.纖維素酶和果膠②.聚乙二醇（2）①.植物細(xì)胞的全能性②.偏高（3）①.①②④②.1000〖祥解〗分析題圖：a表示去壁過程，常用酶解法；b表示用紫外線照射使苜蓿的染色體斷裂；c表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體間的融合，形成雜種細(xì)胞；d表示植物組織培養(yǎng)；⑤表示篩選出耐寒油菜。（1）過程a常用纖維素酶和果膠酶對油菜細(xì)胞和苜蓿細(xì)胞進(jìn)行處理，去除細(xì)胞壁，獲得兩種細(xì)胞的原生質(zhì)體。過程c表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體間的融合，形成雜種細(xì)胞，常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。（2）過程d表示植物組織培養(yǎng)，之所以雜種細(xì)胞可以培育成再生植株，其原因是植物細(xì)胞的全能性。生長素和細(xì)胞分裂素的濃度、比例等都會影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向，若生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值偏高時，愈傷組織在誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上不會形成芽但分化出了根。（3）根據(jù)題意，雜種植株應(yīng)同時具有油菜和苜蓿的DNA片段，根據(jù)圖譜，普通小麥含有堿基對為300和600的DNA片段，苜蓿含有堿基對為1000、1300和1500的片段；再生植株3，只含有長度為300和600的片段，與油菜一致；1、2、4既含有油菜DNA片段，又含有苜蓿DNA片段，為雜種植株；由于植株②沒有表現(xiàn)出耐寒性狀，故耐寒基因1300bp的DNA片段上，植株①和④具有耐寒性，但④不具有1500bp的DNA片段，二者都具有1000bp的DNA片段，說明耐寒基因可能位于圖中大小為1000bp的DNA片段上。23.Graves?。℅D）是一種自身免疫性甲狀腺疾病，主要表現(xiàn)為甲狀腺功能亢進(jìn)。研究發(fā)現(xiàn)，GD患者甲狀腺細(xì)胞表面表達(dá)大量細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1），導(dǎo)致甲狀腺腫大?？蒲腥藛T通過制備單克隆抗體，對治療GD進(jìn)行了嘗試。（1）用ICAM-1作為抗原多次免疫若干只小鼠，目的是_______。幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入到多孔培養(yǎng)板的不同孔中，然后向多孔培養(yǎng)板中加入_______進(jìn)行檢測。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出陽性反應(yīng)最強(qiáng)的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠N。（2）培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞時需要定期更換培養(yǎng)液，目的是防止_______。融合前將部分骨髓瘤細(xì)胞置于篩選雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后，若培養(yǎng)基中_______，說明該培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求。（3）取小鼠N的脾臟細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，然后用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有分裂能力的細(xì)胞。將獲得的上述細(xì)胞在多孔培養(yǎng)板上進(jìn)行培養(yǎng)，然后進(jìn)一步檢測，從中選擇_______，將其植入小鼠腹腔中克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實(shí)驗(yàn)用抗體?！即鸢浮剑?）①.使小鼠產(chǎn)生能分泌抗ICAM-1抗體的B淋巴細(xì)胞②.ICAM-1（2）①.細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害②.無骨髓瘤細(xì)胞生長（3）產(chǎn)生抗ICAM-1抗體的雜交瘤細(xì)胞〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。（1）用ICAM-1作為抗原多次免疫若干只小鼠，目的是使小鼠產(chǎn)生能分泌抗ICAM-1抗體的B淋巴細(xì)胞，在多孔培養(yǎng)板中加入ICAM-1，通過血清中抗體對ICAM-1的特異性反應(yīng)以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出抗原-抗體反應(yīng)最強(qiáng)的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠M。（2）培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞時需要定期更換培養(yǎng)液，目的是防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害，實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞置于5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)，融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中無骨髓瘤細(xì)胞生長，說明培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求。（3）取小鼠M的脾臟細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，與實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成的雜交瘤細(xì)胞具有無限增殖能力。將獲得的上述細(xì)胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM-1檢測，從中選擇能大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體的雜交瘤細(xì)胞，植入小鼠腹腔中進(jìn)行克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實(shí)驗(yàn)用抗體。24.組織纖維溶酶原激活物（t-PA）能高效降解血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。臨床使用發(fā)現(xiàn)t-PA有誘發(fā)顱內(nèi)出血的副作用，為此研究人員通過蛋白質(zhì)工程將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸（密碼子UCU），獲得了副作用顯著降低的改良t-PA.下圖為利用重疊延伸PCR技術(shù)改造t-PA基因和構(gòu)建相應(yīng)的表達(dá)載體的過程。（1）研究人員通過重疊延伸PCR技術(shù)對天然的t-PA基因進(jìn)行序列改造，先利用引物________進(jìn)行PCR1，獲得產(chǎn)物1；再通過PCR2，獲得產(chǎn)物2；重疊延伸后利用引物________進(jìn)行PCR3，獲得大量改良t-PA基因。（2）研究表明，t-PA蛋白第84位氨基酸相應(yīng)基因的模板鏈（圖中t-PA基因的上鏈）的堿基序列是ACA，則誘變引物b中該突變位點(diǎn)的堿基是________。將改良t-PA基因用限制酶切后得到如上圖所示的片段，那么質(zhì)粒pCLY11需用限制酶________切割，才能與改良t-PA基因高效連接。（3）質(zhì)粒pCLY11中的lacZ表達(dá)產(chǎn)物可以將X-gal分解為半乳糖和深藍(lán)色物質(zhì)，從而使所在的菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，反之則為白色。將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含有________的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，含重組質(zhì)粒的大腸桿菌所長出的菌落呈________色?！即鸢浮剑?）①.a、b②.a、d（2）①.G②.XmaⅠ、BglⅡ（3）①.新霉素和X-gal②.白〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指通過物理化學(xué)與生物化學(xué)等技術(shù)了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能，并借助計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)、基因定點(diǎn)誘變和重組DNA技術(shù)改造基因，以定向改造天然蛋白質(zhì)，甚至創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì)的技術(shù)。蛋白質(zhì)工程的一般過程是：根據(jù)新蛋白質(zhì)預(yù)期功能設(shè)計(jì)相關(guān)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→設(shè)計(jì)對應(yīng)的氨基酸序列→合成可產(chǎn)生新蛋白質(zhì)的相關(guān)脫氧核苷酸序列→利用基因工程技術(shù)合成新的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。（1）圖中信息顯示，引物b和引物c可以互補(bǔ)配對，會導(dǎo)致引物失效，因此，如果PCR1和PCR2同時進(jìn)行，無法達(dá)到預(yù)期目的，因此先利用引物a、b進(jìn)行進(jìn)行PCR1，獲得產(chǎn)物1；再通過PCR2，獲得產(chǎn)物2；重疊延伸后利用引物a、d從兩端進(jìn)行擴(kuò)增，獲得大量改良t-PA基因。（2）已知t-PA蛋白第84位是半胱氨酸，相應(yīng)的基因模板鏈（圖中t-PA基因的上鏈）上的堿基序列是ACA，則半胱氨酸的密碼子為UGU，而絲氨酸的密碼子是UCU，由此可知，若要將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，則t-PA基因上鏈第84位發(fā)生堿基替換為ACA→AGA，圖中顯示引物b與t-PA基因的下鏈互補(bǔ)，故其中相應(yīng)部位的堿基與上鏈相同，即該部位的堿基是G，引物c與t-PA基因的上鏈互補(bǔ)，故其中相應(yīng)部位的堿基與下鏈相同，即該部位的堿基是C，由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，而只能從3’端延伸DNA鏈，因此PCR中需要加入合適的引物來完成子鏈的延伸。根據(jù)圖中目的基因兩端的黏性末端以及各種限制酶的切割位點(diǎn)可知，在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割質(zhì)粒，才能與目的基因t-PA改良基因高效連接。（3）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，其中的新霉素抗性基因沒有被破壞，因此可以根據(jù)對新霉素的抗性將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，即新霉素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，作用是便于篩選出成功導(dǎo)入質(zhì)粒（普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒）的大腸桿菌。此外在培養(yǎng)基上還要加入X-gal，培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞應(yīng)該包含兩種類型：一類是導(dǎo)入普通質(zhì)粒的大腸桿菌，這類大腸桿菌細(xì)胞因?yàn)楹衜lacZ基因而呈藍(lán)色；另一類是導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，因?yàn)槠渲械膍lacZ基因在構(gòu)建重組質(zhì)粒時被破壞，則該細(xì)菌表現(xiàn)為白色。因此需選擇呈白色的菌落，進(jìn)一步培養(yǎng)、檢測和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌。25.聚羥基脂肪酸酯（PHA）是一種可降解的生物大分子，常用來制備環(huán)保塑料包裝袋，研究人員通過構(gòu)建受溫度控制的大腸桿菌表達(dá)體系來生產(chǎn)PHA.為實(shí)現(xiàn)通過溫度控制工程菌合成所需的蛋白質(zhì)，科研人員利用下圖方案，構(gòu)建了相關(guān)的基因表達(dá)載體，然后將其導(dǎo)入大腸桿菌，獲得相應(yīng)的工程菌。（1）圖1所示的基因表達(dá)載體中，RFP基因和GFP基因?qū)儆赺_____；啟動子M和啟動子R的類型雖然不同，但是二者都能與_____結(jié)合，啟動基因的轉(zhuǎn)錄。（2）據(jù)圖1分析，當(dāng)培養(yǎng)溫度為30°C時，該工程菌表達(dá)的基因是____。（3）PHA的合成過程中，可由單體分子3HB和4HB隨機(jī)聚合形成隨機(jī)聚合物；也可以先形成3HB聚合體和4HB聚合體，再形成分段共聚物（如圖2所示），其中分段共聚物形式的PHA品質(zhì)更佳。為應(yīng)用工程菌大規(guī)模生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)PHA，研究人員對圖1所示的方案進(jìn)行改造，一方面將GFP基因替換為A酶基因，將RFP基因替換為B酶基因，同時構(gòu)建上游連接著________的X酶基因的表達(dá)載體，然后將其共同導(dǎo)入大腸桿菌，獲得可以合成PHA的工程菌。用該工程菌發(fā)酵24小時，若要獲得3HB比例為25%的分段共聚物，需要將發(fā)酵條件控制為________?！即鸢浮剑?）①.目的基因②.RNA聚合酶（2）C基因和GFP基因（3）①.持續(xù)表達(dá)啟動子②.30℃發(fā)酵6小時，37℃發(fā)酵18小時〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的篩選與獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。目的基因的檢測與鑒定。（1）圖1中，GFP基因編碼綠色熒光蛋白，RFP基因編碼紅色熒光蛋白，屬于目的基因。啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，緊挨轉(zhuǎn)錄的起始位點(diǎn)，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出人類需要的蛋白質(zhì)。（2）圖1中，當(dāng)培養(yǎng)溫度為30°C時，C基因編碼的C蛋白形成二聚體，抑制啟動子R，使F基因無法表達(dá)出F蛋白，進(jìn)而解除F蛋白對啟動子N的抑制，使其發(fā)生轉(zhuǎn)錄促進(jìn)GFP基因編碼綠色熒光蛋白，即當(dāng)培養(yǎng)溫度為30°C時，該工程菌表達(dá)的基因是C基因和GFP基因。（3）4HB由B酶催化合成，3HB由A酶催化合成，再經(jīng)X酶催化合成分段共聚物，要想發(fā)酵24小時，獲得3HB比例為25%的分段共聚物。對圖1所示的方案進(jìn)行改造：將GFP基因替換為A酶基因，RFP基因替換為B酶基因，加入持續(xù)表達(dá)啟動子連接的X酶基因構(gòu)建表達(dá)載體并導(dǎo)入大腸桿菌，獲得工程菌，將接種后的培養(yǎng)基在30℃發(fā)酵6小時，C基因編碼的C蛋白形成二聚體，抑制啟動子R，使F基因無法表達(dá)出F蛋白，進(jìn)而解除F蛋白對啟動子N的抑制，使其發(fā)生轉(zhuǎn)錄促進(jìn)A酶基因編碼A酶，A酶催化葡萄糖形成3HB。隨后切換至37℃發(fā)酵18小時，C蛋白形成二聚體結(jié)構(gòu)改變，解除對啟動子R的抑制，F(xiàn)基因表達(dá)出F蛋白，B酶基因表達(dá)出B酶，B酶催化葡萄糖形成4HB，同時F蛋白抑制啟動子N，抑制A酶基因表達(dá)，最后經(jīng)X酶催化形成C蛋白形成二聚體。山東日照市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期中考試試題注意事項(xiàng)：1.答題前，考生將自己的姓名、考生號、座號填寫在相應(yīng)位置，認(rèn)真核對條形碼上的姓名、考生號和座號，并將條形碼粘貼在指定位置上。2.選擇題〖答案〗必須使用2B鉛筆（按填涂樣例）正確填涂，非選擇題〖答案〗必須使用0.5毫米黑色簽字筆書寫，繪圖時，可用2B鉛筆作答，字跡工整、筆跡清楚。3.請按照題號在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的〖答案〗無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。保持卡面清潔，不折疊、不破損。－、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有－個選項(xiàng)符合題目要求。1.腐乳是我國古代勞動人民創(chuàng)造出的一種經(jīng)過微生物發(fā)酵制作的大豆食品。下列敘述錯誤的是（）A.腌制腐乳的鹵湯中加入的一定濃度的酒精能夠起到滅菌作用B.若制作過程中溫度過低會導(dǎo)致毛霉菌絲不易進(jìn)入豆腐塊深層C.微生物產(chǎn)生酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸D.腐乳的風(fēng)味因豆腐含水量、發(fā)酵條件以及輔料的不同而不同〖答案〗A〖祥解〗影響腐乳的風(fēng)味和質(zhì)量的因素是鹽的用量，酒的用量，發(fā)酵溫度，發(fā)酵時間等；鹽的濃度過低，不足以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高，會影響腐乳的口味。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過腌制并配入各種輔料，使蛋白酶作用緩慢，促進(jìn)其他生化反應(yīng)，生成腐乳的香氣。【詳析】A、腐乳制作時，鹵湯中加酒精可以抑制微生物的生長，起消毒的作用，A錯誤；B、溫度為15～18℃適合毛霉生長，溫度過低，毛霉的菌絲生長緩慢，不易進(jìn)入豆腐塊的深層，B正確；C、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，C正確；D、因豆腐的含水量、發(fā)酵條件及加輔料的不同，可制成不同風(fēng)味的腐乳，D正確。故選A。2.圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細(xì)菌，能夠在土壤中獨(dú)立固定氮?dú)??？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中圓褐固氮菌的分離、計(jì)數(shù)和鑒定，并將之用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。下列說法正確的是（）A.選擇培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基不需要加碳源和氮源B.為促進(jìn)圓褐固氮菌的生長，需將培養(yǎng)基pH調(diào)至酸性C.通過計(jì)算可知每克土壤中的固氮菌數(shù)約為1.8×108個D.將種子與自生固氮菌拌種后播種，可減少化肥使用〖答案〗D〖祥解〗微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、依題意，圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細(xì)菌，能夠在土壤中獨(dú)立固定氮?dú)?。因此，選擇培養(yǎng)圓褐固氮菌的培養(yǎng)基不需要加氮源，要加碳源，A錯誤；B、圓褐固氮菌是細(xì)菌，細(xì)菌適宜在中性或弱堿性條件下生存，因此，為促進(jìn)圓褐固氮菌的生長，需將培養(yǎng)基pH調(diào)至中性或弱堿性，B錯誤；C、每克土壤中的固氮菌數(shù)約為：個，C錯誤；D、依題意，圓褐固氮菌是一種異養(yǎng)型自生固氮細(xì)菌，能夠在土壤中獨(dú)立固定氮?dú)狻Ｒ虼?，將種子與自生固氮菌拌種后播種，可減少化肥使用，D正確。故選D。3.進(jìn)行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基組分及含量如下表所示。下列分析正確的是（）組分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂蒸餾水含量1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mLA.由表中成分可知，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.葡萄糖和瓊脂都可以為尿素分解菌提供碳源C.常用高壓蒸汽滅菌法對配制好的培養(yǎng)基滅菌D.只有尿素分解菌能夠在該選擇培養(yǎng)基上生長〖答案〗C〖祥解〗培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，篩選和分離微生物需要使用選擇培養(yǎng)基，微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作?！驹斘觥緼、根據(jù)表格成分可知，含有瓊脂，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，A錯誤；B、瓊脂一般不可以為尿素分解菌提供碳源，只起到凝固劑的作用，B錯誤；C、配制培養(yǎng)基需要采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，即在121℃、100kPa條件下處理15～30min,C正確；D、以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長出的不都是尿素分解菌，還有可能是自生固氮菌，D錯誤。故選C。4.啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成，其主要工藝流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.制麥時需浸泡大麥，加入脫落酸有利于淀粉酶的形成B.糖化后煮沸，主要是為了終止酶的作用并對糖漿滅菌C.圖中發(fā)酵階段，要始終保持嚴(yán)格的無菌、無氧的環(huán)境D.生產(chǎn)精釀啤酒需對發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行更徹底的過濾和消毒〖答案〗B〖祥解〗分析題圖，啤酒生產(chǎn)需經(jīng)過制麥、糖化、發(fā)酵等主要環(huán)節(jié)。酵母菌可進(jìn)行有氧呼吸獲得大量能量，從而快速繁殖，又可以進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2?！驹斘觥緼、浸泡大麥的目的是提高自由水/結(jié)合水的比例，進(jìn)而提高細(xì)胞代謝速率和淀粉酶的形成，而加入脫落酸促進(jìn)休眠，不利于淀粉酶的形成，A錯誤；B、糖化后煮沸，主要是為了終止酶的作用并對糖漿滅菌，B正確；C、為了縮短發(fā)酵時間，發(fā)酵初期應(yīng)適當(dāng)提供氧氣，有利于酵母菌有氧呼吸快速繁殖，C錯誤；D、生產(chǎn)精釀啤酒一般不添加食品添加劑，不進(jìn)行過濾和消毒處理等，D錯誤。故選B。5.“手指植物”是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出的瓶裝觀賞植物。下列敘述錯誤的是（）A.可用酒精、次氯酸鈉對生理狀況良好的外植體進(jìn)行消毒B.外植體接種時要注意插入方向且應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.脫分化過程需要在適宜的溫度和充足的光照條件下進(jìn)行D.該技術(shù)屬于無性繁殖，可保持觀賞植物的優(yōu)良遺傳特性〖答案〗C〖祥解〗使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等?！驹斘觥緼、在進(jìn)行組織培養(yǎng)時，可先后使用酒精、次氯酸鈉對生理狀況良好的外植體進(jìn)行消毒，以防止外植體表面的雜菌污染，A正確；B、外植體接種時要注意插入方向，防止形態(tài)學(xué)上下端顛倒，且應(yīng)在酒精燈火焰旁等無菌區(qū)域進(jìn)行，B正確；C、脫分化過程應(yīng)遮光，C錯誤；D、該技術(shù)屬于無性繁殖，可保持優(yōu)良品種的遺傳特性，D正確。故選C。6.研究發(fā)現(xiàn)，雪蓮次生代謝物對急性酒精肝損傷具有較好的防治作用，利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)雪蓮次生代謝物的大致流程如下圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.從雪蓮中提取的次生代謝物不是雪蓮生長所必需的B.圖中培養(yǎng)單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)所用的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基C.可將培養(yǎng)的細(xì)胞置于低滲溶液中漲破以提取次生代謝物D.利用該技術(shù)生產(chǎn)雪蓮次生代謝物不受季節(jié)和氣候的影響〖答案〗C〖祥解〗（1）次生代謝不是生物生長所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環(huán)境和時間條件下才合成，具有產(chǎn)量小，應(yīng)用廣泛的特點(diǎn)。（2）植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)，它不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制，因此對于社會、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義?！驹斘觥緼、初生代謝是生物生長和生存所必需的，次生代謝不是生物生長所必需的，A正確；B、圖中培養(yǎng)單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)體的目的為增加細(xì)胞數(shù)量，獲取大量雪蓮次生代謝物，因此該過程使用的是液體培養(yǎng)基，B正確；C、圖中細(xì)胞為植物細(xì)胞，由于細(xì)胞壁對細(xì)胞壁的支持保護(hù)作用，在低滲溶液中不會被漲破，C錯誤；D、植物細(xì)胞培養(yǎng)是在人工構(gòu)建的環(huán)境中進(jìn)行，因此使用該方法獲得次生代謝產(chǎn)物具有不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制等優(yōu)點(diǎn)，D正確。故選C。7.動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)之一。下列敘述錯誤的是（）A.將動物組織分散成單個細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程都需要95%氧氣和5%CO2的氣體條件C.培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等D.向培養(yǎng)的體細(xì)胞中轉(zhuǎn)入相關(guān)因子可能會使其轉(zhuǎn)化為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞〖答案〗B〖祥解〗動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體條件：95%空氣和5%CO2，取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斘觥緼、將動物組織分散成單個細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，A正確；B、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程都需要95%空氣和5%CO2的氣體條件，B錯誤；C、培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等，C正確；D、向培養(yǎng)的體細(xì)胞中轉(zhuǎn)入相關(guān)因子可能會使其轉(zhuǎn)化為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，D正確。故選B。8.研究人員將可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞注射到與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，經(jīng)培養(yǎng)最終得到了具有高比例胚胎干細(xì)胞的嵌合體猴，過程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.胚胎干細(xì)胞具有分化為獼猴體內(nèi)任何一種類型細(xì)胞的潛能B.胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織中C.需將供體獼猴的胚胎干細(xì)胞注入到桑葚胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部位D.嵌合體猴僅部分位置發(fā)出綠色熒光可能是基因重組的結(jié)果〖答案〗A〖祥解〗胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞，是高度未分化的細(xì)胞。如果進(jìn)行體外培養(yǎng)，能夠無限的增殖和分化。胚胎肝細(xì)胞還可以分化成多功能的細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞具有多能性，可以分化成多種組織的能力但是無法獨(dú)自發(fā)育成一個個體細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞被稱為一種“全能”細(xì)胞，可以分化成所有類型的細(xì)胞，并且攜帶生物體的全套遺傳信息?！驹斘觥緼、胚胎干細(xì)胞被稱為一種“全能”細(xì)胞，攜帶生物體的全套遺傳信息，具有分化成任何一種類型細(xì)胞的潛能，A正確；B、干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，B錯誤；C、需將供體獼猴的胚胎干細(xì)胞注入到囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部位，C錯誤；D、嵌合體猴中，由胚胎干細(xì)胞增殖分化形成的組織可發(fā)出綠色熒光，D錯誤。故選A。9.科研人員從供體母牛耳朵上采集細(xì)胞，注入到去核的卵母細(xì)胞中構(gòu)建成重構(gòu)胚，再將發(fā)育的胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)，最終獲得了克隆?！皦▔ā?。下列敘述錯誤的是（）A.進(jìn)行核移植前，通常需將采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到MⅡ期B.梯度離心法可在不穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下對卵母細(xì)胞去核C.Ca2+載體、乙醇等處理能使耳細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞發(fā)生融合D.克隆?！皦▔ā钡倪z傳物質(zhì)與供體牛的遺傳物質(zhì)并不完全相同〖答案〗C〖祥解〗動物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)?！驹斘觥緼、進(jìn)行核移植前，通常需將采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到MⅡ期，A正確；B、目前動物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用去核辦法有：梯度離心、紫外線短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等。這些方法是在不穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下對卵母細(xì)胞去核或使其中的DNA變性，B正確；C、Ca2+載體、乙醇等處理的目的是激活重構(gòu)胚，要使耳細(xì)胞和去核的卵母細(xì)胞發(fā)生融合，使用的是聚乙二醇融合法、電融合法雞滅活病毒誘導(dǎo)法，C錯誤；D、克隆牛“墾墾”的遺傳物質(zhì)與供體牛的遺傳物質(zhì)并不完全相同，原因是“墾墾”的核遺傳物質(zhì)來自供體牛，“墾墾”的質(zhì)遺傳物質(zhì)來自供體牛和卵母細(xì)胞，D正確。故選C。10.研究人員利用細(xì)胞工程和基因編輯技術(shù)成功培育出了孤雄小鼠，實(shí)現(xiàn)了哺乳動物的同性繁殖，操作流程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.上述實(shí)驗(yàn)說明精子轉(zhuǎn)化來的ahESC具有發(fā)育的全能性B.卵母細(xì)胞去除的“核”其實(shí)是紡錘體—染色體復(fù)合物C.基因編輯的目的是將ahESC的Y染色體變?yōu)閄染色體D.理論上最終得到孤雄小鼠的性染色體組成為XX或YY〖答案〗B〖祥解〗精子激活轉(zhuǎn)化成ahFSC，通過基因編輯技術(shù)獲得具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC，從而得到孤雄小鼠?！驹斘觥緼、上述實(shí)驗(yàn)說明精子轉(zhuǎn)化來的ahESC的細(xì)胞核具有發(fā)育的全能性，A錯誤；B、卵母細(xì)胞去除的“核”其實(shí)是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；C、精子激活轉(zhuǎn)化成ahFSC，通過基因編輯技術(shù)獲得具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC，沒有改變?nèi)旧w，C錯誤；D、理論上孤雄小鼠是由去核細(xì)胞、精子（X或Y）、具卵細(xì)胞細(xì)胞核的ahESC（X或Y）組成，性染色體組成為XX、XY或YY，D錯誤。故選B。11.杜泊羊生長速度快，肉質(zhì)好?？蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工程實(shí)現(xiàn)了杜泊羊的快速繁殖，其主要流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.采集的精子需要在體外進(jìn)行獲能處理，才能獲得受精能力B.可以使用免疫抑制劑來降低代孕羊?qū)χ踩肱咛サ呐懦夥磻?yīng)C.用分割針將原腸胚均分后再進(jìn)行移植可以提高胚胎的利用率D.操作時要用激素對當(dāng)?shù)仄胀ㄑ蜻M(jìn)行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理〖答案〗A〖祥解〗體外受精主要操作步驟（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：方法一：對小型動物一般用促性腺激素處理，使其排出更多的卵子，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。方法二：對大型動物是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞，在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精（或從剛屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞）（2）精子的采集和獲能：在體外受精前，要對精子進(jìn)行獲能處理。獲能方法：培養(yǎng)法和化學(xué)法。（3）受精：獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程?！驹斘觥緼、采集的精子需要在體外進(jìn)行獲能處理，使其產(chǎn)生相應(yīng)的生理變化，才能獲得受精能力，A正確；B、受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此不需要注射免疫抑制劑，B錯誤；C、用分割針將桑葚胚或者囊胚均分后再進(jìn)行移植可以提高胚胎的利用率，C錯誤；D、操作時要用激素對當(dāng)?shù)仄胀ㄑ蜻M(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對杜泊母羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理，D錯誤。故選A。12.下表為常用的限制性內(nèi)切核酸酶（限制酶）及其識別序列和切割位點(diǎn)，由此推斷下列敘述錯誤的是（）限制酶名稱識別序列和切割位點(diǎn)限制酶名稱識別序列和切割位點(diǎn)BamHⅠG↓GATCCSmaⅠCCC↓GGGHindⅡGTY↓RACSau3AⅠ↓GATC注：Y為C或T，R為A或G。A.能被BamHI識別并切割的DNA也能被Sau3AI識別和切割B.經(jīng)HindⅡ、SmaI切割后的片段可以由T4DNA連接酶連接C.有些限制酶的識別序列只有一種，有些限制酶識別序列有多種D.經(jīng)BamHI、Sau3AI切割后連接形成的片段不能被BamHI識別〖答案〗D〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種?！驹斘觥緼、Sau3AI和BamHI切割位點(diǎn)和識別核苷酸序列相同，能被BamHI識別并切割的DNA也能被Sau3AI識別和切割，A正確；B、HindⅡ、SmaI切割后形成的是平末端，T4DNA連接酶可以連接具有平末端的DNA片段，B正確；C、有些限制酶的識別序列只有一種，有些限制酶識別序列有多種，如HindⅡ限制酶的識別序列為GTY↓RAC，其中Y＝C或T，R＝A或G，說明其識別序列不只一種，C正確；D、BamHI切割G↓GATCC，Sau3AI切割↓GATC，故二者切割后產(chǎn)生的黏性末端是相同的，因此二者切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠相連，連接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AI切割，但是BamHI不一定能切割，D錯誤。故選D。13.某同學(xué)利用洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)。下列敘述錯誤的是（）A.也可以選擇豬肝、雞血等作為實(shí)驗(yàn)材料，提取方法可能稍有不同B.將洋蔥研磨液過濾后，置于4℃冰箱中幾分鐘后，DNA出現(xiàn)在沉淀物中C.向DNA提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后，出現(xiàn)的白色絲狀物為DNAD.鑒定時，先將絲狀物溶于2mol/LNaCl溶液，再加入二苯胺并進(jìn)行沸水浴加熱〖答案〗B〖祥解〗（1）DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色；（2）DNA粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)中，不同操作步驟中加水的作用不同，破碎細(xì)胞獲取含DNA的濾液時，加蒸餾水的目的是使血細(xì)胞漲破；出去濾液中的雜質(zhì)時，加蒸餾水的目的是降低NaCl溶液濃度使DNA析出?！驹斘觥緼、不同類型的生物材料（如植物細(xì)胞、動物細(xì)胞、微生物）中DNA的提取過程雖有相似之處，但也存在差異。例如，使用雞血作為實(shí)驗(yàn)材料時，通常利用紅細(xì)胞破裂釋放出的DNA進(jìn)行提取，而不需要研磨和去除細(xì)胞壁的過程，A正確；B、在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，通常首先通過研磨和加入適量的洗滌劑與食鹽溶液來釋放細(xì)胞中的DNA，并破壞細(xì)胞膜和其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)。然后，在此混合液中DNA會溶解在溶液中，并隨同蛋白質(zhì)、多糖等其他物質(zhì)一起存在。DNA在一定濃度的NaCl溶液中溶解度較高，所以初步處理后的濾液經(jīng)過離心或靜置后，DNA不會形成沉淀，而是在溶液中，B錯誤；C、在DNA提取過程中，當(dāng)加入高濃度酒精后，DNA會因不溶于酒精而析出，形成白色的絮狀或絲狀沉淀，這就是粗提取得到的DNA，C正確；D、鑒定DNA時，常用的方法之一就是二苯胺顯色反應(yīng)，需要將DNA樣品溶解在適當(dāng)?shù)腘aCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，在沸水中加熱后，若存在DNA，則反應(yīng)液會變?yōu)樗{(lán)色，D正確。故選B。14.蘋果切開后顏色會加深的現(xiàn)象稱為“褐變”?！昂肿儭笔怯捎诙喾友趸复呋喾宇愇镔|(zhì)生成棕色色素所致，培育抗褐變轉(zhuǎn)基因蘋果的操作流程如圖。下列敘述正確的是（）A.圖中的目的基因?yàn)槎喾友趸富?，?biāo)記基因?yàn)榭敲顾乜剐曰駼.目的基因的表達(dá)依賴上游的啟動子，標(biāo)記基因表達(dá)則不需要啟動子C.步驟③是獲得轉(zhuǎn)基因蘋果的核心工作，常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.可通過PCR技術(shù)檢測蘋果的染色體DNA上是否成功插入了目的基因〖答案〗D〖祥解〗題圖分析：過程①為構(gòu)建目的基因表達(dá)的載體，過程②為獲取受體細(xì)胞，過程③為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，過程④為脫分化，過程⑤為再分化。【詳析】A、要想獲得抗褐變的轉(zhuǎn)基因蘋果，應(yīng)以抑制多酚氧化酶表達(dá)的基因作為目的基因，同時以卡那霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，A錯誤；B、啟動子的作用是驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄，目的基因的表達(dá)依賴上游的啟動子，標(biāo)記基因表達(dá)也需要啟動子，B錯誤；C、過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟，C錯誤；D、檢測蘋果的染色體DNA上是否成功插入了目的基因可利用PCR技術(shù)，D正確。故選D。15.生物技術(shù)的安全性和倫理問題是社會關(guān)注的熱點(diǎn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.某些轉(zhuǎn)基因食品中的DNA會與人體細(xì)胞的DNA發(fā)生基因重組B.將α‐淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物，可防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播C.生殖性克隆是利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞D.試管嬰兒必需的技術(shù)有體外受精、植入前的遺傳學(xué)診斷和胚胎移植等〖答案〗B〖祥解〗（1）轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。（2）中國政府：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對治療性克隆人?！驹斘觥緼、一般轉(zhuǎn)基因食品中的DNA不會與人體細(xì)胞的DNA發(fā)生基因重組，A錯誤；B、將α-淀粉酶基因與目的基因轉(zhuǎn)入植物中，由于α-淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏而使花粉失活，因此可以防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播，B正確；C、生殖性克隆是通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個體，C錯誤；D、試管嬰兒對植入前胚胎一般不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，而設(shè)計(jì)試管嬰兒往往為了避免后代患某種遺傳病，需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，故試管嬰兒必需的技術(shù)有體外受精和胚胎移植等，D錯誤。故選B。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個或多個選項(xiàng)符合題目要求，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.雙層平板法是先在培養(yǎng)皿中倒入底層固體培養(yǎng)基，凝固后形成底層平板；再倒入由宿主細(xì)菌、噬菌體以及瓊脂含量較低的培養(yǎng)基組成的混合液，形成上層平板。培養(yǎng)一段時間后，在上層平板上觀察到由于噬菌體侵染周圍細(xì)菌而形成的空斑，即噬菌斑（通常一個噬菌斑來自一個噬菌體），根據(jù)噬菌斑的