山東省日照農(nóng)業(yè)學(xué)校2025屆生物高三第一學(xué)期期末考試模擬試題含解析

山東省日照農(nóng)業(yè)學(xué)校2025屆生物高三第一學(xué)期期末考試模擬試題考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關(guān)核酸的敘述正確的是（）A．發(fā)菜的遺傳物質(zhì)有DNA和RNA兩種B．人體細(xì)胞內(nèi)的DNA和轉(zhuǎn)運(yùn)RNA中均含有堿基對C．洋蔥根尖細(xì)胞的葉綠體和線粒體中均含有少量DNAD．RNA合成時，RNA聚合酶與基因的起始密碼子相結(jié)合2．植物光合作用的作用光譜是通過測量光合作用對不同波長光的反應(yīng)（如O2的釋放）來繪制的。下列敘述錯誤的是（）A．類胡蘿卜素在紅光區(qū)吸收的光能可用于光反應(yīng)中ATP的合成B．葉綠素的吸收光譜可通過測量其對不同波長光的吸收值來繪制C．光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示D．葉片在640～660nm波長光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的3．將人的紅細(xì)胞移入低滲溶液后，很快吸水膨脹而溶血，而水生動物的卵母細(xì)胞在低滲溶液中不膨脹。后來科學(xué)家從人的紅細(xì)胞的細(xì)胞膜上成功分離出一種具有通道作用的蛋白質(zhì)——水通道蛋白，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．水分子從低滲溶液單方向進(jìn)入高滲溶液中B．人的紅細(xì)胞與水生動物的卵母細(xì)胞的吸水方式相同C．人的紅細(xì)胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴(kuò)散吸收水的速率D．紅細(xì)胞吸水膨脹是因?yàn)榻M成細(xì)胞膜的磷脂和蛋白質(zhì)分子都具有流動性4．下為能量流經(jīng)某生態(tài)系統(tǒng)中第二營養(yǎng)級的示意圖（單位J/cm2·a），下列說法正確的是（）A．圖中B表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量是80B．該生態(tài)系統(tǒng)第一營養(yǎng)級同化的能量至少為400C．能量由第二營養(yǎng)級到第三營養(yǎng)級的傳遞效率是20%D．畜牧業(yè)中，放養(yǎng)與圈養(yǎng)相比，可提高圖中C/B的比值5．種粒少而小的狗尾巴草經(jīng)過人類長時間的馴化，逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)樗氪?、籽粒飽滿的小米，小米具有很高的營養(yǎng)價值。下列有關(guān)說法正確的是A．沒有人工馴化，狗尾巴草種群中不會出現(xiàn)穗大基因B．小米和狗尾巴草性狀差異較大，故二者不屬于同一物種C．人工馴化過程中，直接受選擇的是狗尾巴草的基因型D．人工馴化會使狗尾巴草的種群基因頻率發(fā)生定向改變6．下列關(guān)于細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是（）A．動物細(xì)胞培養(yǎng)中，需定期更換培養(yǎng)液，以防止培養(yǎng)過程中的雜菌污染B．人工種子制備中，需向人工薄膜內(nèi)添加植物激素，以促進(jìn)愈傷組織發(fā)育C．胚胎移植中，需向受體注射免疫抑制劑，以避免受體對植入胚胎產(chǎn)生排斥反應(yīng)D．胚胎干細(xì)胞可在飼養(yǎng)層細(xì)胞上進(jìn)行培養(yǎng)，從而維持其分裂而不分化的狀態(tài)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）回答下列（一）、（二）小題：（一）開發(fā)山楂果醋恰好讓山楂中的有機(jī)酸豐富了果醋的酸味，同時也彌補(bǔ)生食山楂酸味大的缺陷，具體釀制山楂果醋分為以下三個階段，請將具體過程補(bǔ)充完整。（1）制備山楂果原汁：選成熟的山楂果，在清水沖洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。將山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵：由于山楂果原汁_______，故發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以獲得酒精含量較高的果酒。果汁中加入活化的________后，在適宜環(huán)境下發(fā)酵一段時間，當(dāng)發(fā)酵液中停止_______，發(fā)酵完畢待過濾，或發(fā)酵至_______，上清液即為果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸發(fā)酵：將醋化醋桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后，經(jīng)檢查菌體生長正常并無雜菌污染后接種于山楂酒-水中進(jìn)行發(fā)酵，整個發(fā)酵過程需要通入_______。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，其目的是調(diào)味和_______，以防止果醋被發(fā)酵分解。（二）下圖為轉(zhuǎn)基因抗蟲煙草的培育流程，①②③④表示過程，其中②表示利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞。回答下列相關(guān)問題：（1）在①過程構(gòu)建重組質(zhì)粒時，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使兩者形成粘性末端用于拼接，這種方法的明顯缺點(diǎn)是目的基因和質(zhì)粒________（答出2點(diǎn)即可）。另外，影響拼接效率的主要因素，除以上缺點(diǎn)和鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素外，還有_______（答出2點(diǎn)即可）。（2）在②過程中，將圖示重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時可用______處理農(nóng)桿菌，以提高轉(zhuǎn)化效率。操作之后，需要特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進(jìn)行篩選，其原因是_______，最終篩選到的對象在相應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的存活情況是________。（3）在③過程常通過調(diào)節(jié)_______的適當(dāng)配比，從愈傷組織誘導(dǎo)出芽和根的_____，并由此再生出新植株。獲得轉(zhuǎn)基因煙草后，再通過[④]_______過程實(shí)現(xiàn)多個世代組織培養(yǎng)。8．（10分）回答下列（一）（二）小題（一）回答下列與果酒和果醋的制作的有關(guān)問題：（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發(fā)酵產(chǎn)物，即將__________氧化成乙醇，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過_________時，酵母菌就會死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將____________氧化而來的。如能獲得醋化醋桿菌的菌種，可先在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)繁殖。用300mL的錐形瓶并用___________振蕩培養(yǎng)48小時后，再接種到發(fā)酵瓶中。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發(fā)酵瓶裝量不能超過________。開始時，酵母菌的____________會使發(fā)酵瓶出現(xiàn)負(fù)壓，若這種負(fù)壓情況持續(xù)3天以上，必須加入___________，使發(fā)酵盡快發(fā)生。（二）某研究小組欲利用抗病毒基因，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育抗病毒玫瑰。圖1和圖2分別表示出了抗病毒基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點(diǎn)和抗生素抗性基因（PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)；amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因）。請回答：（1）為獲得大量抗病毒基因，且保證形成重組質(zhì)粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用________________________________分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，再與經(jīng)過______________處理的_________（A．有amp和tetB．有amp，無tetC．無amp，有tetD．無amp和tet）農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入農(nóng)桿菌。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的玫瑰細(xì)胞，使目的基因?qū)朊倒寮?xì)胞中。（2）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細(xì)胞的試管放在搖床上，進(jìn)行____________________獲得胚性細(xì)胞，進(jìn)而培育成抗蟲玫瑰。（3）這種借助基因工程方法，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，再通過這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是______________。（4）當(dāng)前多地過度開發(fā)旅游造成生態(tài)環(huán)境的破壞，為減緩生態(tài)環(huán)境的破壞，可發(fā)展_______工程，并在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和________________。9．（10分）近年來，在處理富營養(yǎng)化水體的污水過程中，與化學(xué)、物理除氮方法比較，目前認(rèn)為微生物反硝化去除氮素污染更為經(jīng)濟(jì)有效?？蒲泄ぷ髡卟捎没蚬こ碳夹g(shù)構(gòu)建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，進(jìn)行了相關(guān)研究。請回答問題。（1）微生物的反硝化作用，是氮循環(huán)中一個重要的生物過程。亞硝酸鹽還原酶（Nir）是該過程的關(guān)鍵酶，是由野生菌株YP4的反硝化基因（nirS）轉(zhuǎn)錄后，再翻譯出具有___________作用的蛋白質(zhì)。（1）工程菌的構(gòu)建①研究者利用NCBI數(shù)據(jù)庫查到nirS基因的堿基序列，設(shè)計引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增nirS基因。PCR技術(shù)利用了___________的原理，使用耐高溫Taq酶而未使用普通DNA聚合酶的主要原因是______________________。②研究者用HindⅢ和BamHI兩種限制酶處理nirS基因與p質(zhì)粒，在_______________酶的作用下進(jìn)行體外連接，用連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5，在含慶大霉素的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)并提取質(zhì)粒，如果用HindⅢ和BamHI雙酶切，得到兩個片斷電泳結(jié)果分別與_______________電泳結(jié)果基本一致，說明獲得重組質(zhì)粒pYP4S。③將pYP4S轉(zhuǎn)化到野生菌株YP4中形成工程菌YP4S，培養(yǎng)后進(jìn)行PCR鑒定。為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計引物進(jìn)行PCR鑒定。圖1所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時應(yīng)選擇的最佳一對引物組合是_________。某學(xué)生錯選了圖中的另外一對引物組合，擴(kuò)增出長度為1．1kb的片段，原因是_______________。（3）檢測工程菌YP4S除氮的效能①工程菌株YP4S在已滅菌的模擬污水中培養(yǎng)36h后，檢測結(jié)果如圖1。結(jié)果表明___________________。②要進(jìn)一步證明工程菌對含氮污水治理更有效，應(yīng)___________________________。10．（10分）菊花很美，但其害蟲較多，利用基因工程培育抗蟲菊花是害蟲防治的有效手段。胰蛋白酶抑制劑能干擾昆蟲的代謝，引起昆蟲死亡，但對人體無害?？茖W(xué)家將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因（Pin﹣Ⅱ）通過農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花細(xì)胞，培育成了抗蟲菊花。圖1表示含目的基因的DNA分子，圖2表示質(zhì)粒，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，復(fù)制原點(diǎn)是質(zhì)粒DNA復(fù)制的起點(diǎn)，使其能在受體細(xì)胞中存在和遺傳。箭頭表示識別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點(diǎn)。請回答下列有關(guān)問題：（1）上述基因工程中，受體細(xì)胞是______________，屬于__________（填“動物”“植物”或“微生物”）基因工程。（2）為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用_______________（限制酶）作用于含目的基因的DNA和質(zhì)粒，然后在___________的作用下形成重組質(zhì)粒。（3）用農(nóng)桿菌感染時，應(yīng)優(yōu)先選用菊花___________（填“受傷的”或“完好的”）葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是_________________________________。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞會表現(xiàn)為______________________________。（4）用轉(zhuǎn)基因菊花葉片喂養(yǎng)某種菊花害蟲，發(fā)現(xiàn)害蟲死亡率顯著增加。試從分子水平寫出轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因菊花的葉片細(xì)胞的不同點(diǎn)：___________________________________。11．（15分）如圖甲表示某豆科植物種子萌發(fā)過程中CO2釋放和O2吸收速率的變化趨勢；圖乙表示該豆科植物葉肉細(xì)胞中C3的相對含量在夏季某天24h內(nèi)（有一段時間烏云遮蔽）的變化趨勢；請據(jù)圖回答：（1）圖甲中，在12-24h期間，萌發(fā)種子的呼吸方式主要是_________________，判斷的依據(jù)是___________________；第48h后，萌發(fā)種子O2吸收速率超過CO2釋放速率，其原因是細(xì)胞呼吸的底物中可能還有___________等物質(zhì)。（2）圖乙中，葉肉細(xì)胞進(jìn)行光合作用的區(qū)間是曲線_________段對應(yīng)的時間，烏云消失的時間可能是曲線上_______點(diǎn)對應(yīng)的時刻。與F點(diǎn)相比，G點(diǎn)葉綠體中NADPH的含量較____（填“高”或“低”）。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

1、除少數(shù)病毒外，生物的遺傳物質(zhì)是DNA。2、發(fā)菜為原核生物?！驹斀狻緼、發(fā)菜的遺傳物質(zhì)是DNA，A錯誤；B、人體細(xì)胞內(nèi)的DNA分子中堿基成對存在，轉(zhuǎn)運(yùn)RNA中含有部分堿基對，B正確；C、洋蔥根尖細(xì)胞中無葉綠體，C錯誤；D、轉(zhuǎn)錄時RNA聚合酶與基因的某一部位相結(jié)合，起始密碼子位于mRNA上，D錯誤。故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查DNA和RNA在生物體內(nèi)的存在部位、結(jié)構(gòu)以及RNA的合成，考查對基礎(chǔ)知識的理解和歸納。2、A【解析】

葉綠體中的色素主要有葉綠素和類胡蘿卜素，葉綠體又分為葉綠素a和葉綠素b，類胡蘿卜素又分為胡蘿卜素和葉黃素。光合作用中葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光；類胡蘿卜素主要吸收藍(lán)紫光?！驹斀狻緼、類胡蘿卜素只吸收藍(lán)紫光，基本不吸收紅光，所以不能利用紅光的能量合成ATP，A錯誤；B、葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光，其吸收光譜可通過測量其對不同波長光的吸收值來繪制，B正確；C、由于光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP能用于暗反應(yīng)，暗反應(yīng)要吸收CO2，所以光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示，C正確；D、根據(jù)吸收光譜可知，葉片在640～660nm波長（紅光區(qū)域）光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的，D正確。故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查葉綠體色素種類和作用、光合作用的相關(guān)知識，識記光反應(yīng)的過程和各種色素對不同光的吸收是解答該題的關(guān)鍵。3、C【解析】

據(jù)題意可知，水生動物的卵母細(xì)胞在低滲溶液不膨脹。而紅細(xì)胞細(xì)胞膜上有一種水通道蛋白，在低滲溶液中，很快吸水膨脹而溶血，說明水的吸收與水通道蛋白有關(guān)?！驹斀狻緼、水分子的進(jìn)出是雙方向的，但總體是低滲溶液進(jìn)入高滲溶液中，A錯誤；B、人的紅細(xì)胞吸水與水生動物的卵母細(xì)胞的吸水方式不同，B錯誤；C、人的紅細(xì)胞存在水通道蛋白介導(dǎo)的協(xié)助擴(kuò)散，在低滲溶液中很快就吸水漲破，可知人的紅細(xì)胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴(kuò)散吸收水的速率，C正確；D、紅細(xì)胞吸水膨脹是因?yàn)榇嬖谒ǖ赖鞍捉閷?dǎo)的協(xié)助擴(kuò)散，D錯誤。故選C。4、B【解析】

分析題圖：圖示表示能量流經(jīng)某生態(tài)系統(tǒng)第二營養(yǎng)級的示意圖，其中A表示該營養(yǎng)級攝入的能量；B表示該營養(yǎng)級同化的能量；C表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量；D表示呼吸作用中以熱能的形式散失的能量；E表示糞便中的能量?！驹斀狻緼、圖中B表示該營養(yǎng)級同化的能量，即第二營養(yǎng)級同化的能量是80J/cm2?a，A錯誤；

B、圖中B表示該營養(yǎng)級同化的能量，即第二營養(yǎng)級同化的能量是80J/cm2?a，按能量最高傳遞效率20%計算，第一營養(yǎng)級同化的能量至少為80÷20%=400J/cm2?a，B正確；

C、由于第三營養(yǎng)級能量只知道攝入量，不知道同化量，不能計算能量由第二營養(yǎng)級到第三營養(yǎng)級的傳遞效率，C錯誤；

D、B表示該營養(yǎng)級同化的能量，C表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量，放養(yǎng)自身呼吸消耗較多，畜牧業(yè)中，圈養(yǎng)與放養(yǎng)相比，可提高圖中C/B的比值，D錯誤。

故選B。5、D【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的基本觀點(diǎn)：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料；自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進(jìn)化的方向；隔離是新物種形成的必要條件?！驹斀狻緼、若不經(jīng)人工馴養(yǎng)，狗尾巴草種群中也可能會出現(xiàn)穗大基因，A錯誤；B、小米和狗尾巴草性狀差異較大，但不存在生殖隔離，故二者屬于同一物種，B錯誤；C、人工馴化過程中，直接受選擇的是狗尾巴草的表現(xiàn)型，C錯誤；D、人工馴化會使狗尾巴草的種群基因頻率發(fā)生定向改變，D正確。故選D。6、D【解析】

1、動物培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）適宜的溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。2、胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造?！驹斀狻緼、動物細(xì)胞培養(yǎng)中，需定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物，A錯誤；B、人工種子是以胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下能夠萌發(fā)長成幼苗，不需要添加植物激素，B錯誤；C、受體對移入子宮的外來胚胎，基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，不需要向受體注射免疫抑制劑，C錯誤；D、胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】本題考查了細(xì)胞工程、胚胎工程的有關(guān)知識，要求考生能夠識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，識記胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)，掌握胚胎移植的生理基礎(chǔ)，并結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題。二、綜合題：本大題共4小題7、之后果膠酶（和果膠甲酯酶）含糖量較低干酵母（懸液）出現(xiàn)氣泡酵母下沉無菌空氣/氧氣抑制雜菌反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度、反應(yīng)時間氯化鈣CaCl2不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活，在含青霉素培養(yǎng)基上死亡營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑/植物激素項端分生組織繼代培養(yǎng)【解析】

1.釀酒和制醋是最古老的生物技術(shù)。與酒和醋的生產(chǎn)有關(guān)的微生物分別是酵母菌和醋桿菌，它們各有不同的菌種。菌種的不同，所產(chǎn)生的酒和醋的風(fēng)味也不同。本實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖進(jìn)行酒精發(fā)酵(乙醇發(fā)酵)的產(chǎn)物。酵母菌只有在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵，即將葡萄糖氧化成乙醇，而且當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應(yīng)式如下。醋桿菌在有氧條件下才能將乙醇氧化為醋酸，醋桿菌所產(chǎn)生的醋酸可使培養(yǎng)液中醋酸的含量高達(dá)13%。2.基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．【詳解】（一）（1）制備山楂果原汁通常選成熟的山楂果，為了避免雜菌污染，通常在用清水沖洗山楂果之后去梗。將山楂果切片并去籽，為了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果膠酶（和果膠甲酯酶）處理，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵時通常需要在發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以彌補(bǔ)山楂果原汁含糖量較低的不足，同時也是為了滿足酵母菌發(fā)酵需要的底物量，從而獲得酒精含量較高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（懸液）后，置于適宜環(huán)境下進(jìn)行發(fā)酵，由于酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，所以在發(fā)酵過程中會有氣泡產(chǎn)生，當(dāng)發(fā)酵液中不再出現(xiàn)氣泡時，意味著發(fā)酵完成，然后過濾獲得果酒；也可發(fā)酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即為果酒。（3）醋酸發(fā)酵中，由于醋化醋桿菌在有氧氣的條件下將酒精變?yōu)闉橐胰?，進(jìn)而變?yōu)橐掖?，所以整個發(fā)酵過程需要通入無菌空氣/氧氣。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，食鹽起到了調(diào)味和抑制雜菌的作用，進(jìn)而防止果醋被其他微生物發(fā)酵分解。（二）（1）①為構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，則兩者會出現(xiàn)相同的粘性末端從而使得拼接變得容易，但這種方法存在明顯的缺點(diǎn)是在拼接時會出現(xiàn)反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化等情況。影響拼接效率的因素主要有鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素，除此外，還有且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度和反應(yīng)時間也會影響拼接的效率。（2）②過程為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程，將圖示重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時，為了提高導(dǎo)入的成功率，可用氯化鈣CaCl2處理農(nóng)桿菌，以提高轉(zhuǎn)化效率。因?yàn)閷?dǎo)入的成功率較低，也就是說，并不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒，可能有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，或者沒有導(dǎo)入成功，所以需要在特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進(jìn)行篩選，由于圖中重組質(zhì)粒上含有標(biāo)記基因四環(huán)素抗性基因，而抗青霉素的基因被破壞，為了篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，需要將待篩選的農(nóng)桿菌分別接種在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基和含青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，最終篩選到成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在相應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的存活情況是在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活，在含青霉素培養(yǎng)基上死亡。（3）③過程為再分化成植株的過程，該過程中需要通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑/植物激素的適當(dāng)配比，從而實(shí)現(xiàn)由愈傷組織誘導(dǎo)出芽和根的項端分生組織的目的，并由此再生出新植株。獲得轉(zhuǎn)基因煙草后，再通過[④]繼代培養(yǎng)過程實(shí)現(xiàn)多個世代組織培養(yǎng)，從而實(shí)現(xiàn)了轉(zhuǎn)基因煙草的擴(kuò)大培養(yǎng)。【點(diǎn)睛】熟知果酒、果醋的制作原理以及基因工程的基本原理和操作要點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵，辨圖分析能力是本題考查的主要能力。8、葡萄糖16%乙醇搖床2/3需氧呼吸（或有氧呼吸）酵母SmaI和PstICaCl2D液體懸浮培養(yǎng)植物細(xì)胞工程生態(tài)（旅游）生態(tài)效益【解析】

釀酒和制醋是最古老的生物技術(shù)，至今已經(jīng)有五六千年的歷史。與酒與醋的生產(chǎn)有關(guān)的微生物，分別是酵母菌（真菌）和醋桿菌（細(xì)菌），它們各有不同的菌種，菌種的不同，所產(chǎn)生的酒和醋的風(fēng)味也不同。釀酒所用的原料是葡萄或其它果汁，酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。果醋的制作是以果酒為原料，利用醋化醋桿菌，將酒精氧化成醋酸的過程?；蚬こ淌仟M義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按照一定的程序進(jìn)行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱（宿主）細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個方面?！驹斀狻浚ㄒ唬?）酵母菌是兼性厭氧型生物，在無氧條件下可將葡萄糖氧化成乙醇。乙醇對酵母菌的生長不利，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。醋桿菌是好氧型生物，在有氧條件下將乙醇氧化成醋酸。液體培養(yǎng)可擴(kuò)增菌種，常用搖床振蕩提高溶氧量以及菌和營養(yǎng)物質(zhì)的接觸。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發(fā)酵瓶裝量不能超過2/3，否則溢出易染菌。酵母菌的需氧呼吸（或有氧呼吸）會消耗瓶內(nèi)的O2，而CO2易溶于水，因此發(fā)酵瓶出現(xiàn)負(fù)壓。使發(fā)酵盡快發(fā)生，必須增加菌種的量，使酵母菌快速進(jìn)行厭氧呼吸。（二）（1）AluI會破壞目的基因，使用兩種不同的限制性核酸內(nèi)切酶（Sma和Pst）可防止質(zhì)粒自連，且能保證目的基因接入方向唯一。重組DNA分子中的標(biāo)記基因?yàn)閍mpr，再與經(jīng)過CaCl2處理(使其成為感受態(tài)細(xì)胞)的無ampr和tet的農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入農(nóng)桿菌。（2）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細(xì)胞的試管放在搖床上，這種培養(yǎng)稱為液體懸浮培養(yǎng)。（3）從細(xì)胞和基因的角度，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，再通過將這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是植物細(xì)胞工程技術(shù)。（4）生態(tài)旅游工程生態(tài)（旅游）工程是指不消耗、不破壞當(dāng)?shù)刈匀宦糜钨Y源，旅游設(shè)施盡量生態(tài)化，促進(jìn)地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展。的可以減緩生態(tài)環(huán)境的破壞。發(fā)展生態(tài)旅游工程，可減緩生態(tài)環(huán)境的破壞。在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效益?！军c(diǎn)睛】熟悉微生物的培養(yǎng)以及基因工程的原理及過程是解答本題的關(guān)鍵。9、催化DNA復(fù)制PCR過程中DNA在高溫下解鏈，這樣的高溫下，普通的DNA聚合酶的生物活性喪失DNA連接p質(zhì)粒和插入片段（目的基因）乙和丙目的基因反向連接工程菌株除氮效果優(yōu)于野生菌Ⅰ．工程菌YP4S與野生菌分別處理實(shí)際污水36hⅡ．檢測除氮率【解析】

分析題干可知：目前認(rèn)為微生物反硝化去除氮素污染更為經(jīng)濟(jì)有效，科研工作者采用基因工程技術(shù)構(gòu)建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，故需依據(jù)基因工程的相關(guān)原理進(jìn)行分析作答?！驹斀狻浚?）亞硝酸鹽還原酶（Nir）是該過程的關(guān)鍵酶，酶是經(jīng)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程形成的有催化作用的蛋白質(zhì)。（1）①PCR技術(shù)依據(jù)的原理是DNA分子的復(fù)制；因PCR過程中DNA解旋是在在高溫下進(jìn)行的（90-95℃），這樣的高溫下，普通的DNA聚合酶的生物活性喪失，故在PCR技術(shù)中應(yīng)采用使用耐高溫的Taq酶。②連接兩個DNA片段所用的酶是DNA連接酶；因?qū)嶒?yàn)中nirS基因與p質(zhì)粒是分別用HindⅢ和BamHI兩種限制酶處理的，故若再用HindⅢ和BamHI雙酶切之后，得到兩個片斷電泳結(jié)果分別與p質(zhì)粒和插入片段（nirS基因）電泳結(jié)果基本一致，可說明獲得重組質(zhì)粒pYP4S。③PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合，沿相反方向合成子鏈，結(jié)合目的基因的插入位置可知，PCR鑒定時應(yīng)選擇的最佳一對引物組合是乙和丙；若某學(xué)生錯選了圖中的另外一對引物組合（甲和乙），只有反向連接后才能擴(kuò)增出長度為1．1kb的片段（1＋0.1kb）。（3）①圖1結(jié)果表明，無論是總氮還是NH4＋、NO3—的去除率，工程菌株除氮效果優(yōu)于野生菌。②因圖1是工程菌株YP4S在已滅菌的模擬污水中的處理結(jié)果，故要進(jìn)一步證明工程菌對含氮污水治理更有效，應(yīng)用工程菌YP4S與野生菌分別處理實(shí)際污水36h，檢測除氮率?！军c(diǎn)睛】解答本題需要透徹理解基因工程的基本工具、PCR技術(shù)的原理，并能讀懂實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)分析，進(jìn)而分析作答。10、菊花細(xì)胞植物EcoRI和PstIDNA連接酶受傷的葉片傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞不抗氨芐青霉素，抗新霉素比較轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因兩種菊花的葉片細(xì)胞，轉(zhuǎn)基因菊花細(xì)胞中含有胰蛋白酶抑制劑基因、胰蛋白酶抑制劑的mRNA、胰蛋白酶抑制劑【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）該基因工程需要將胰蛋白酶抑制劑基因?qū)刖栈?xì)胞，使菊花具有抗蟲性，所以受體細(xì)胞是菊花細(xì)胞，屬于植物基因工程。（2）目的基因的兩端含有EcoRI、TthIIII、PstI三種限制酶的酶切位點(diǎn)，為了避免目的基因自身環(huán)化，不能只用EcoRI這一種限制酶進(jìn)行切割，若用EcoRI和TthIIII切割目的基因，相應(yīng)的在對質(zhì)粒進(jìn)行切割時會將復(fù)制原點(diǎn)切去，因此、為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstI作用于含目的基因的DNA和質(zhì)粒，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒。（3）用農(nóng)桿菌感染時，應(yīng)優(yōu)先選