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文檔簡介
云南省建水縣四校2025屆高三生物第一學期期末學業(yè)水平測試模擬試題注意事項1.考試結束后,請將本試卷和答題卡一并交回.2.答題前,請務必將自己的姓名、準考證號用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置.3.請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符.4.作答選擇題,必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑;如需改動,請用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案.作答非選擇題,必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律無效.5.如需作圖,須用2B鉛筆繪、寫清楚,線條、符號等須加黑、加粗.一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.研究表明,當癌細胞對微環(huán)境中的信號作出反應時,它們就會進入高度可塑狀態(tài),在這種狀態(tài)下,它們很容易轉化為另一種類型的細胞。近日,研究人員利用上皮——間質(zhì)轉化,誘導小鼠乳腺癌細胞轉化為無害的脂肪細胞,并且該脂肪細胞不再恢復到乳腺癌細胞。下列相關敘述中,錯誤的是()A.乳腺癌細胞與脂肪細胞的基因表達情況不同B.與脂肪細胞相比,乳腺癌細胞膜上的糖蛋白較少,易擴散轉移C.與乳腺癌細胞相比,脂肪細胞的細胞核較大,細胞代謝旺盛D.可用蘇丹Ⅲ染液檢測乳腺癌細胞是否成功轉化成脂肪細胞2.某農(nóng)戶在其庭院中種植了谷類、蔬菜和牧草,栽培了蘑菇,養(yǎng)殖了家畜和家禽,還建有一沼氣池,構成了一個人工生態(tài)系統(tǒng)。下列關于該庭院生態(tài)工程的敘述,正確的是()A.分解者的代謝產(chǎn)物都可作為生產(chǎn)者的肥料B.生產(chǎn)者的代謝產(chǎn)物都可作為勞動者的食物C.勞動者的有機排出物可作為分解者的原料D.分解者及其代謝產(chǎn)物不能作為消費者的飼料3.ATP是細胞的能量“通貨”。下列關于ATP的敘述,正確的是()A.ATP有2個磷酸鍵,其儲存的能量來自呼吸作用和光合作用B.ATP在細胞內(nèi)含量少,但可直接為大多數(shù)生命活動供能C.ATP與ADP相互轉化的速率與細胞代謝強度無關D.ATP在細胞內(nèi)合成,在細胞外不能水解供能4.2019年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎頒給了研究細胞對氧氣的感應和適應機制的三位科學家。研究表明,HIF是普遍存在于人和哺乳動物細胞內(nèi)的一種蛋白質(zhì).在正常氧氣條件下,HIF會迅速分解;當細胞缺氧時.HIF會與促紅細胞生成素(EPO)基因的低氧應答元件(非編碼蛋白質(zhì)序列)結合,使EPO基因表達加快.促進EPO的合成。HIF的產(chǎn)生過程及其對EPO基因的調(diào)控如圖所示,下列分析正確的是()A.過程①和過程②在低氧環(huán)境中才能夠進行B.HII-的含量與細胞內(nèi)的氧氣含量呈正相關C.細胞在正常氧氣環(huán)境中EPO基因不能表達D.EPO含量增加會促進細胞中HIF含量下降5.某研究性學習小組進行果酒、果醋發(fā)酵實驗。下列相關敘述正確的是A.先供氧進行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵B.果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵C.適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率,抑制雜菌繁殖D.與人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好6.研究發(fā)現(xiàn)協(xié)助物質(zhì)進出細胞的轉運蛋白包括載體蛋白和通道蛋白,且載體蛋白協(xié)助物質(zhì)進出細胞時可能消耗能量,也可能不消耗能量,而通道蛋白協(xié)助物質(zhì)進出細胞時不消耗能量。下列有關物質(zhì)進出細胞的方式敘述,不合理的是()A.無轉運蛋白參與的物質(zhì)進出細胞方式都是自由擴散B.Na+不能通過通道蛋白的協(xié)助逆濃度梯度運出細胞C.在主動運輸中協(xié)助物質(zhì)進出細胞的蛋白質(zhì)是載體蛋白D.物質(zhì)依靠通道蛋白進出細胞的方式屬于被動運輸二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)某地農(nóng)田退耕后,經(jīng)歷“草→灌木→樹林”的演替過程,下圖表示該地幾種生物間的食物關系。請回答下列問題:(1)上述演替案例中,最早出現(xiàn)的草本植物是____________(填“一年生”或“多年生”)雜草;研究者擬采用樣方法調(diào)在當?shù)啬称烁r(nóng)田某種雜草的種群密度。取樣的關鍵是要做到___________,不能摻入主觀因素,因此常用_____________法選取樣方。(2)調(diào)查發(fā)現(xiàn),某一時期鷹捕食鼠較捕食蛇和兔的多,根據(jù)“收割理論”分析,其原因是_____________;其意義是________________。根據(jù)“精明的捕食者”策略推測,鷹的捕食特點是_____________。(3)若蛇的數(shù)量大量減少,鷹的食物結構中蛇由占1/5減少為占1/10,則鷹的種群數(shù)量約為原來的_____________倍。(其他條件不變,能量傳遞效率均按10%計算,結果用分數(shù)表示)8.(10分)十九大提出“綠水青山就是金山銀山”,某市政府為了實現(xiàn)這一目標,開展了一系列環(huán)保工作。請回答下列有關問題:(1)為了治理城市河道,用混凝土將部分地區(qū)的河道整體包埋起來。結果事與愿違,城市河流水質(zhì)惡化,水生動物接近絕跡,原因是河道土壤中的_______________(填生態(tài)系統(tǒng)的組成成分)失去了理想的生存環(huán)境,河水中的有機物大量累積造成了水質(zhì)惡化。(2)退耕還林,退耕農(nóng)田→草本植物→灌木→喬木。該群落演替類型為____________。演替過程中,農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)比森林生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性低,原因是______________________。(3)邀請生態(tài)學家對該市某水生生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結構和能量流動情況進行調(diào)查分析,得到了如圖所示的食物網(wǎng)。①生態(tài)學家要調(diào)查太陽魚的種群密度,應采用_______________的方法,該方法所得的結果往往比真實數(shù)值要大,原因是_____________________________________。②鱸魚每增重1kg,則最多需要消耗________kg浮游植物。太陽魚的價格一般要低于鱸魚價格,從圖中的營養(yǎng)結構及能量流動規(guī)律分析,原因是______________________________。9.(10分)某昆蟲(XY型性別決定)的體色和眼色分別由等位基因A(a)和B(b)控制,其中有一對基因位于性染色體上,現(xiàn)有多只黑身紅眼雄昆蟲與多只相同基因型的黃身紅眼雌昆蟲隨機交配(假定每對昆蟲子代數(shù)目相同),F(xiàn)1全為黃身,其中雄性全為紅眼,雌性紅眼:白眼=5:1,讓F1中紅眼雌雄個體隨機交配,F(xiàn)2的表現(xiàn)型及比例如下表。(不考慮突變)性別黃身紅眼黃身白眼黑身紅眼黑身白眼雌性51/1609/16017/1603/160雄性60/16020/160(1)該昆蟲的紅眼和白眼中,顯性性狀是________,眼色基因位于________染色體上。(2)親本中的雄昆蟲基因型及其比例為__________________。設計測交實驗來驗證親本雌昆蟲的基因型,并用遺傳圖解表示______。(3)F2中的黃身紅眼雌昆蟲有________種基因型,其中雙雜合子所占比例是________。10.(10分)甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌,研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇胁⒊晒Ρ磉_?;卮鹣铝袉栴}。(1)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有_____、__________(答出兩種)。(2)要使膠原蛋白基因在甲醇酵母菌中表達,需要先構建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞,原因是_________________和_________________。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這一特點的優(yōu)點在于_____________,甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結構與人的幾乎完全相同,從細胞結構的角度分析,其原因可能是_______。(4)在構建基因表達載體時,用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是______________。11.(15分)人們將某藥物蛋白基因(M基因)導入煙草中,使煙草變成批量生產(chǎn)藥物蛋白的工廠,將煙草這種人類健康的殺手,變成人類健康的“保護神”?;卮鹣铝袉栴}。(1)根據(jù)M基因的有關信息,如_____(答出2點即可),我們可以從基因文庫中獲得M基因。(2)M基因進入煙草細胞的載體可以稱之為“分子運輸車”。具備_____(答出2點即可)等條件才能充當“分子運輸車”。將M基因?qū)霟煵菁毎容^經(jīng)濟和有效的方法是___________。(3)利用PCR技術擴增M基因的前提,是要有一段_____,以便合成引物,使反應體系中的M基因解鏈為單鏈的條件是______;在PCR反應中使用TaqDNA聚合酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是___________。(4)上述過程中構建的基因工程表達載體,若只含有M基因是不可以完成任務的,原因是___________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解析】
本題考查癌細胞特點、細胞分化、脂肪檢測等相關知識。癌細胞與正常細胞不同,有無限增殖、可轉化和易轉移三大特點,能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。【詳解】A、乳腺癌細胞和脂肪細胞是兩種不同類型的細胞,基因表達情況是不同的,A正確;B、乳腺癌細胞表面糖蛋白較少,細胞粘著性低,易擴散轉移,B正確;C、乳腺癌細胞由于細胞不斷進行復制,細胞核內(nèi)的轉錄處于活躍狀態(tài),染色質(zhì)都處于松散狀態(tài),故細胞核較大,細胞代謝旺盛,C錯誤;D、蘇丹Ⅲ染液可以檢測細胞中的脂肪含量與分布,可以用于區(qū)分乳腺癌細胞和脂肪細胞,D正確;故選C。2、C【解析】
生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者是基石,可以為消費者和分解者提供有機物和能量,分解者可以將有機物分解成無機物,消費者可以加快生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)和能量流動.【詳解】A、代謝產(chǎn)物是指新陳代謝中的中間產(chǎn)物(如微生物代謝中產(chǎn)生的抗生素)和最終代謝產(chǎn)物(如水和二氧化碳),A選項中“都是”不對,如水,A錯誤;B、生產(chǎn)者的代謝產(chǎn)物如二氧化碳不能作為人的食物,B錯誤;C、人的有機排出物主要是糞便,可作為分解者的原料,C正確;D、題干中的一部分分解者可以作為消費者的飼料,如蘑菇可以被人食用,D錯誤。故選C?!军c睛】本題主要考查生態(tài)系統(tǒng)的結構,意在加深學生組成成分的識記與理解。3、B【解析】
1、ATP與ADP的相互轉化的反應式為:(1molATP水解釋放30.54KJ能量),方程從左到右時能量代表釋放的能量,用于一切生命活動;方程從右到左時能量代表轉移的能量,動物中為呼吸作用轉移的能量,而植物中來自光合作用和呼吸作用。2、ATP在生命活動中的作用和意義:ATP是絕大多數(shù)生命活動所需能量的直接來源.ATP是生物體內(nèi)直接提供可利用能量的物質(zhì),是細胞內(nèi)能量轉換的“中轉站”,各種形式的能量轉換都是以ATP為中心環(huán)節(jié)的,因此ATP中的能量可以直接轉換成其他各種形式的能量,用于各項生命活動。【詳解】A、ATP含有2個高能磷酸鍵,1個普通磷酸鍵,A錯誤;B、ATP在細胞內(nèi)含量少,但可直接為大多數(shù)生命活動供能,是細胞生命活動的直接能源物質(zhì),B正確;C、細胞代謝強度越大,ATP與ADP相互轉化的速率越快,C錯誤;D、ATP可以在細胞外水解可以供能,只要高能磷酸鍵斷裂就可以釋放能量供能,D錯誤。故選B。【點睛】本題考查ATP在生命活動中作用、ATP和ADP相互轉化的過程,要求考生識記ATP化學結構特點,掌握ATP和ADP相互轉化的過程以及ATP的作用,能結合所學的知識準確判斷各選項。4、D【解析】
基因表達是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程,基因表達產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)?;虮磉_包括轉錄和翻譯。轉錄過程由RNA聚合酶進行,以DNA為模板,產(chǎn)物為RNA。RNA聚合酶沿著一段DNA移動,留下新合成的RNA鏈。翻譯過程是以信使RNA(mRNA)為模板,指導合成蛋白質(zhì)的過程。促紅細胞生成素(EPO)又稱紅細胞刺激因子、促紅素,是一種人體內(nèi)源性糖蛋白激素,可刺激紅細胞生成。【詳解】A、過程①為轉錄,過程②為翻譯,均不需要在低氧環(huán)境中進行,A錯誤;B、正常氧氣條件下,HIF會迅速分解;當細胞缺氧時.HIF會與促紅細胞生成素(EPO)基因的低氧應答元件(非編碼蛋白質(zhì)序列)結合,因此HII-的含量與細胞巾的氧氣含量呈負相關,B錯誤;C、EPO為促紅細胞生成素細胞,在正常氧氣環(huán)境中EPO基因表達,在低氧環(huán)境下EPO基因表達加快,以適應低氧的環(huán)境,C錯誤;D、EPO含量增加會促進紅細胞運輸氧氣,細胞逐漸提高甚至恢復正常氧氣的狀態(tài),而在正常氧氣條件下,HIF分解,因此EPO含量增加會促進HIF含量下降,D正確。故選D。5、C【解析】
本題考查發(fā)酵技術的應用,考查對果酒、果醋制作原理的理解和識記。明確果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵原理、過程的不同是解答本題的關鍵?!驹斀狻看姿峋谟醒醯臈l件下可把酒精轉化為醋酸,應先隔絕空氣進行果酒發(fā)酵,然后供氧進行果醋發(fā)酵,A項錯誤;果酒發(fā)酵所需的最適溫度為18~25℃,果醋發(fā)酵所需的最適溫度為30~35℃,B項錯誤;適當加大接種量可以使目的菌種快速繁殖,提高發(fā)酵速率,抑制雜菌繁殖,C項正確;與人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品雜質(zhì)較多,品質(zhì)較差,D項錯誤。【點睛】果酒制作和果醋制作的比較:果酒制作果醋制作菌種酵母菌醋酸菌菌種來源附著在葡萄皮上的野生型酵母菌變酸酒表面的菌膜發(fā)酵過程有氧條件下,酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖:C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O;無氧條件下,酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精:C6H12O6→2C2H5OH+2CO2氧氣、糖源充足時:C6H12O6+2O2→2CH3COOH+2CO2+2H2O;缺少糖源、氧氣充足時:C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O溫度一般酒精發(fā)酵18~25℃,繁殖最適為20℃左右最適為30~35℃氣體前期:需氧,后期:無氧需要充足的氧氣時間10~12天7~8天6、A【解析】
1、小分子物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞胶吞攸c:名稱運輸方向載體能量實例自由擴散(簡單擴散)高濃度低濃度不需不需水、CO2、O2、甘油,苯、酒精等協(xié)助擴散(易化擴散)高濃度低濃度需要不需紅細胞吸收葡萄糖主動運輸?shù)蜐舛雀邼舛刃枰枰∧c絨毛上皮細胞吸收氨基酸、葡萄糖等2、大分子的運輸方式:胞吞和胞吐:大分子物質(zhì)進出細胞的方式,不需要載體,但需要能量,體現(xiàn)了細胞膜的流動性?!驹斀狻緼、無轉運蛋白參與的物質(zhì)進出細胞方式有自由擴散和胞吞、胞吐,A錯誤;B、Na+通過載體蛋白的協(xié)助逆濃度梯度運出細胞,通道蛋白只能進行順濃度梯度運輸,B正確;C、在主動運輸中協(xié)助物質(zhì)進出細胞的蛋白質(zhì)是載體蛋白,C正確;D、物質(zhì)依靠通道蛋白進出細胞的方式是協(xié)助擴散,屬于被動運輸,D正確。故選A。二、綜合題:本大題共4小題7、一年生隨機取樣五點取樣(等距取樣)鼠的種群數(shù)量多于蛇和兔的,捕食者往往捕食個體數(shù)量多的物種,這樣就會避免出現(xiàn)一種或少數(shù)幾種生物在生態(tài)系統(tǒng)中占絕對優(yōu)勢的局面有利于增加物種多樣性、維持生態(tài)平衡不過度捕食獵物28/19【解析】
(1)次生演替過程中,最早出現(xiàn)的草本植物是一年生雜草;采用樣方法調(diào)查種群密度時,取樣的關鍵是要做到隨機取樣,在某片地塊上取樣常用五點取樣法或等距取樣法選取樣方。(2)根據(jù)“收割理論”,當鷹捕食鼠、蛇和兔時,鼠的種群數(shù)量多于蛇和兔的,捕食者往往捕食個體數(shù)量多的物種,這樣就會避免出現(xiàn)一種或少數(shù)幾種生物在生態(tài)系統(tǒng)中占絕對優(yōu)勢的局面,這有利于增加物種多樣性、維持生態(tài)平衡。根據(jù)“精明的捕食者”策略,鷹捕食時不會過度捕食獵物。(3)據(jù)題意,[(1/5)×10×10×10+(4/5)×10×10]÷[(1/10)×10×10×10+(9/10)×10×10]=28/19,則鷹的種群數(shù)量約為原來的28/19倍?!军c睛】本題主要考查共同進化、種群密度的調(diào)查、群落演替和生態(tài)系統(tǒng)的能量流動等,考查學生的理解能力和綜合運用能力。8、分解者次生演替農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)組分較少,食物網(wǎng)較簡單,自我調(diào)節(jié)能力弱標志重捕法第一次被捕捉的動物被標記釋放后,第二次被捕捉的難度增大104太陽魚在食物鏈中所處的營養(yǎng)級低于鱸魚,飼養(yǎng)過程中需要的能量投入較鱸魚少,飼養(yǎng)成本低【解析】
1、生態(tài)系統(tǒng)的結構包括:生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和食物鏈、食物網(wǎng)。2、生態(tài)系統(tǒng)的三大功能包括物質(zhì)循環(huán)、能量流動和信息傳遞。3、在群落演替過程中,物種種類增多,生態(tài)系統(tǒng)的結構變得復雜,自我調(diào)節(jié)能力強,所以抵抗力穩(wěn)定性增強?!驹斀狻浚?)河水中的有機物大量積累導致水質(zhì)惡化,說明該城市河流生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)出現(xiàn)了問題,在生態(tài)系統(tǒng)中,可將有機物分解為無機物的組成成分為分解者。(2)棄耕農(nóng)田上發(fā)生的演替屬于次生演替;與森林生態(tài)系統(tǒng)相比,農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)組分較少,食物網(wǎng)較簡單,自我調(diào)節(jié)能力弱,其抵抗力穩(wěn)定性較弱。(3)①太陽魚屬于活動能力強、活動范圍較大的動物,因此調(diào)查其種群密度常采用標志重捕法。標志重捕法的計算公式是:被調(diào)查的種群數(shù)量=(第一次捕捉并標記的個體數(shù)量×第二次捕捉的個體數(shù)量)/第二次捕捉的個體中帶有標記的個體數(shù)量,由于第一次被捕捉的動物被標記釋放后,第二次被捕捉的難度增大,則計算出的種群數(shù)量要比實際偏大。②按照最長的食物鏈(浮游植物→浮游動物→雙翅目幼蟲→太陽魚→鱸魚)和最低的傳遞效率(10%)計算,鱸魚每增重1kg,需要消耗1kg×10×10×10×10=104kg的浮游植物。由于太陽魚在食物鏈中所處的營養(yǎng)級低于鱸魚,在獲取能量的過程中散失的較少,飼養(yǎng)成本低,故太陽魚價格一般低于鱸魚?!军c睛】本題綜合考查種群、群落和生態(tài)系統(tǒng)的知識,難點是分析出標志重捕法的誤差計算和能量流動過程中的計算。9、紅眼X、YaaXBYB:aaXbYB=2:1420/51【解析】
題意分析,親本黑身和黃身個體雜交,F(xiàn)1全為黃身,說明黃身對黑身為顯性,結合子二代的性狀表現(xiàn)可知控制體色的基因位于常染色體上,結合題目信息(某昆蟲(XY型性別決定)的體色和眼色分別由等位基因A(a)和B(b)控制,其中有一對基因位于性染色體上)可知控制眼色的基因位于性染色體上,親本全為紅眼,而后代中出現(xiàn)白眼,說明紅眼對白眼為顯性,且相關基因位于性染色體上,結合題意中的子一代中的雄性個體全表現(xiàn)為紅眼可知B(b)基因位于X、Y的同源區(qū)域,則親本的基因型為:父本基因型:2aaXBYB:1aaXbYB;母本基因型:AAXBXb?!驹斀狻浚?)由分析可知,該昆蟲的性狀表現(xiàn)為,紅眼對白眼為顯性,且眼色基因[B(b)]位于X、Y染色體上。(2)由中F1雌性紅眼:白眼=5:1,可知,親本中的雄性個體不是一種基因型,父本紅眼的基因型為XBYB和XbYB,而且只有滿足aaXBYB:aaXbYB=2:1時,子代中的雌性個體才會出現(xiàn)上述的比例。親本中雌性昆蟲的基因型為AAXBXb,為了驗證親本雌昆蟲的基因型,需要設計測交實驗,用黑身白眼的雄性個體(aaXbYb)與該雌性個體進行雜交,遺傳圖解如下:(3)由分析可知,親本中父本基因型:2aaXBYB:1aaXbYB;母本基因型:AAXBXb,F(xiàn)1均為Aa,其中雄性:1AaXBYB:1AaXbYB,雌性:2XBXB:3XBXb:1XbXb;取F1紅眼雌雄個體隨機交配,則F2中的黃身紅眼雌昆蟲的基因型為(1AA:2Aa)×(7XBXB:10XBXb),顯然有2×2=4種基因型,其中雙雜合子的比例是2/3×10/17=20/51?!军c睛】熟知伴性遺傳和常染色體遺傳的特性并能利用該特性進行基因位置的判斷是解答本題的關鍵!學會用分離定律的思路解答自由組合定律的計算問題是解答本題的另一關鍵!10、從基因文庫中獲取人工合成目的基因無表達所需的啟動子目的基因無復制原點(目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在)便于目的蛋白的分離和純化甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接【解析】
基因工程是狹義的遺傳工程,基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細胞中穩(wěn)定高效地表達。為了實現(xiàn)基因工程的目標,通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素,并按照一定的程序進行操作,它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成,重組DNA導入受體細胞也稱(宿主)細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面。基因表達載體的構建(即目的基因與運載體結合)是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其構建目的是使目的基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用?!驹斀狻浚?)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲?。康幕蛐蛄形粗?、人工合成(目的基因序列已知)。(2)單獨的目的基因容易丟失,且目的基因的表達需要啟動子和終止子,目的基因的復制需要復制原點,因此要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達,需要先構建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這樣分泌到細胞外的蛋白主要是我們需要的目的蛋白,這一特點的優(yōu)點在于便于目的蛋白的分離和純化。甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結構與人的幾乎完全相同,從細胞結構的角度分析,其原因可能是甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對表達出的蛋白質(zhì)進行進一步的加工、運輸。(4)用一種酶切質(zhì)粒和目的基因,可能會引起質(zhì)粒或目的基因自身環(huán)化。在構建基因表達載體時,
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