生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱

第頁生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱一、實(shí)驗(yàn)要求與目的：能熟練使用生化實(shí)驗(yàn)中的儀器設(shè)備，掌握生化研究的基本方法和具備操作。通過系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)操作，培養(yǎng)學(xué)生的獨(dú)立思考，分析、觀察和解決問題的能力。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：

（1）、糖的旋光性；2學(xué)時(shí)。

了解糖的旋光性。學(xué)習(xí)利用旋光儀測(cè)定糖溶液濃度的方法。

（2）、3，5－二硝基水楊酸比色定糖法；3學(xué)時(shí)。

了解3，5－二硝基水楊酸比色定糖法的原理與基本操作，掌握使用721型分光光度計(jì)的方法。

（3）、考馬斯亮蘭法測(cè)定蛋白質(zhì)含量3學(xué)時(shí)。

了解考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的原理和方法。

（4）、氨基酸紙上層析；3學(xué)時(shí)。

了解分配層析的原理，掌握氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)。

（5）、醋酸纖維薄膜電泳技術(shù)分離血清蛋白；3學(xué)時(shí)。

掌握醋酸薄膜電泳的原理和操作，定量測(cè)定人血清中各種蛋白質(zhì)的相對(duì)百分含量。

*（6）、微量凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量；

了解微量凱氏定氮法的原理，掌握微量凱氏定氮法的操作技術(shù)，包括標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨含氮量的測(cè)定、未知樣品的消化、蒸餾、滴定及其含氮量的計(jì)算等。

（7）、酪蛋白的制備3學(xué)時(shí)

學(xué)習(xí)從牛乳中制備酪蛋白的原理和方法。（8）、索氏脂肪抽提法測(cè)定脂肪酸的含量；5學(xué)時(shí)。

了解和掌握粗脂肪提取的原理和測(cè)定方法，熟悉和掌握重量分析的基本操作，包括樣品的處理、定量轉(zhuǎn)移、烘干、恒重等。

（9）、酸價(jià)的測(cè)定；3學(xué)時(shí)。

初步掌握測(cè)定油脂酸價(jià)的原理及方法，了解測(cè)定酸價(jià)的實(shí)際意義。

（10）、pH對(duì)酶活力的影響；2學(xué)時(shí)。

了解并掌握pH對(duì)酶活力穩(wěn)定性的影響的原理和相應(yīng)儀器設(shè)備的使用。

（11）、溫度對(duì)酶活力的影響；3學(xué)時(shí)。

通過檢驗(yàn)?zāi)揪厶敲冈诓煌瑴囟认卤睾蟮氖Ｓ嗷盍Γ私鉁囟葘?duì)酶活力穩(wěn)定性影響的原理。

*（12）、微生物木聚糖酶的制備、分離及酶學(xué)性質(zhì)測(cè)定。7學(xué)時(shí)。

系統(tǒng)了解酶的生產(chǎn)，酶的分離以及酶學(xué)性質(zhì)（最適溫度、最適pH、穩(wěn)定性等）測(cè)定原理和方法。

*（13）、電泳技術(shù)

了解電泳的原理，掌握電泳的基本操作技術(shù)，了解聚丙烯酰銨電泳，SDS－電泳的操作技術(shù)等。

*（14）、蛋白酶的活力和比活力測(cè)定

了解測(cè)定酶反應(yīng)速度的基本方法，并了解其重要意義。掌握蛋白酶活力、比活力的原理和方法，深入了解酶的活力及比活力的概念。

*（15）、動(dòng)物組織核糖核酸及脫氧核糖核酸的制備及測(cè)定

了解和掌握用苯酚法及鹽溶液法從動(dòng)物組織提取核酸含量的定糖法（地衣酚法和二苯胺法）及定磷法（抗壞血酸法）的原理和操作技術(shù)。練習(xí)從動(dòng)物組織提取RNA和DNA，并測(cè)定它們的含水量。

*為選做實(shí)驗(yàn)

三、各專業(yè)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目安排

實(shí)驗(yàn)總時(shí)數(shù)為30學(xué)時(shí)。

實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：除選做實(shí)驗(yàn)外，其余都做，并根據(jù)教學(xué)進(jìn)度，開一些選做實(shí)驗(yàn)。

四、實(shí)驗(yàn)教學(xué)的教材

采用本教研室編的《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)講義》和南京大學(xué)生物化學(xué)系袁玉蓀、朱婉華、陳鈞輝編的《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，高等教育出版社。五、實(shí)驗(yàn)教學(xué)的組織

自學(xué)《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》中有關(guān)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的指導(dǎo)材料；在教師指導(dǎo)下進(jìn)行集中學(xué)習(xí)，熟悉設(shè)備、儀器的使用方法；實(shí)驗(yàn)小組人數(shù)安排為2人，學(xué)生可自行分工，實(shí)驗(yàn)操作過程由老師指導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)操作后在教師認(rèn)可時(shí)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)才可登記在記錄本上。經(jīng)教師簽字后實(shí)驗(yàn)操作才能結(jié)束，教師認(rèn)為實(shí)據(jù)不合要求的，必須重做；實(shí)驗(yàn)報(bào)告在實(shí)驗(yàn)