acl溶液實(shí)驗(yàn)報(bào)告

acl溶液實(shí)驗(yàn)報(bào)告ACL溶液實(shí)驗(yàn)報(bào)告引言：ACL（AcidCellulaseLiquid）是一種基于酸性菌株的纖維素酶制劑，可以分解纖維素，改善動(dòng)物消化吸收，促進(jìn)生長。本實(shí)驗(yàn)旨在研究ACL溶液的酶學(xué)特性。實(shí)驗(yàn)流程：1.培養(yǎng)酸性菌株1.1.選取適當(dāng)?shù)乃嵝跃?，并在LB瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)。1.2.將預(yù)培養(yǎng)的菌液接種至ACM（AcidCellulaseMedium）培養(yǎng)液中，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。1.3.收獲發(fā)酵液，進(jìn)行對(duì)數(shù)增長統(tǒng)計(jì)。2.制備ACL溶液2.1.將發(fā)酵液經(jīng)過離心分離得到菌體和菌液，將菌體用0.9%的生理鹽水洗凈并磨碎制備菌漿。2.2.將菌漿加入蒸餾水中進(jìn)行打漿，制備原料物。2.3.在制備原料物中加入2%的穩(wěn)定劑、1%的保濕劑，并進(jìn)行均質(zhì)處理。3.測定ACL酶學(xué)參數(shù)3.1.確定適宜的pH值：在一定溫度（40℃）下，分別將ACL溶液的pH值調(diào)整至4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0進(jìn)行酶活測定，記錄每個(gè)pH值下的相應(yīng)酶活。3.2.確定適宜的溫度：在適宜的pH值下，分別將ACL溶液在10℃、20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃進(jìn)行酶活測定，記錄每個(gè)溫度下的相應(yīng)酶活。3.3.確定反應(yīng)時(shí)間：在適宜的pH值和溫度下，分別將ACL溶液反應(yīng)10、20、30、40、50、60分鐘，記錄反應(yīng)時(shí)間下的相應(yīng)酶活。4.測定ACL酶活度4.1.準(zhǔn)備試樣：取0.5g谷殼（或木屑）樣品，加入10ml的磷酸鹽緩沖液pH5.0，振蕩10分鐘后過濾。4.2.合適的酶量：將10ml磷酸鹽緩沖液pH5.0和1ml制備的ACL溶液混合，分別取2ml加入10ml含有0.5g谷殼（或木屑）的磷酸鹽緩沖液pH5.0中，反應(yīng)1h。4.3.酶去除處理：將反應(yīng)液加入沸水中加熱5分鐘，加入10ml磷酸鹽緩沖液pH5.0，離心后取上清液待用。4.4.目標(biāo)酶測定：在1ml樣品中加入4ml帶有MerckVET-20檢測劑的10%Na2CO3溶液，放置5分鐘后讀取吸光度UV值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.pH值的影響：在40℃下，不同pH值對(duì)ACL酶活的影響如圖1所示。圖1：不同pH值下ACL酶活的變化由圖1可以看出，隨著pH值的上升，ACL酶活表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢。當(dāng)pH值為6.0時(shí)，酶活達(dá)到最大值，為4.986U/mL。2.溫度的影響：在pH值為6.0下，不同溫度對(duì)ACL酶活的影響如圖2所示。圖2：不同溫度下ACL酶活的變化由圖2可以看出，在pH值為6.0的條件下，隨著溫度的升高，ACL酶活呈現(xiàn)逐漸增強(qiáng)的趨勢，在40℃時(shí)表現(xiàn)出最大的酶活，達(dá)到11.249U/mL。3.反應(yīng)時(shí)間的影響：在pH值為6.0、溫度為40℃下，不同反應(yīng)時(shí)間對(duì)ACL酶活的影響如圖3所示。圖3：不同反應(yīng)時(shí)間下ACL酶活的變化由圖3可以看出，在pH值為6.0、溫度為40℃下，反應(yīng)時(shí)間的增加可以增強(qiáng)ACL酶活的表現(xiàn)。當(dāng)反應(yīng)時(shí)間為40min時(shí)，酶活表現(xiàn)出最大值，為14.69U/mL。4.ACL酶活度在適當(dāng)?shù)拿噶亢头磻?yīng)時(shí)間下，ACL酶活度為8.101U/g。結(jié)論：1.在ACL酶的最適條件下，酶活為4.986U/mL，最適pH為6.0，最適溫度為40℃，反應(yīng)40min時(shí)表現(xiàn)出最佳的酶活。2.ACL酶可以針對(duì)谷殼（或木屑）等纖維素物質(zhì)進(jìn)行分解，ACL酶的酶活度為8.101U/g。注意點(diǎn)：1.實(shí)驗(yàn)過程中要保持無菌環(huán)境。2.在實(shí)驗(yàn)前，要先測定ACL溶液的酶活濃度。3.在制備