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文檔簡介
制備疫苗實驗報告實驗題目:制備流感病毒疫苗摘要:本實驗旨在制備一種流感病毒疫苗。實驗流程包括病毒培養(yǎng)、收集病毒、滅活病毒、分離病毒抗原、熒光親和試驗、混合誘導試驗、制備并測試疫苗。實驗數據顯示,制備出的疫苗成功地誘導了小鼠的免疫系統(tǒng)產生了抗體,并且能夠保護小鼠免受感染。關鍵詞:流感病毒疫苗,抗原,熒光親和試驗,混合誘導試驗,免疫系統(tǒng),小鼠實驗流程:1.病毒培養(yǎng)選用已知毒力血清型的H1N1甲型流感病毒株A/California/04/2009(H1N1)進行培養(yǎng)。將病毒接種于含10%牛血清的DMEM(Dulbecco修正的Eagle培養(yǎng)基)中,放入蒸發(fā)器中。2.收集病毒當病毒感染培養(yǎng)皿中的孔變得富含病毒時,將培養(yǎng)皿放入15mL離心管,并離心20分鐘,以1500g的速度,在4℃下進行。將上清液轉移到新的15mL離心管中,丟棄沉淀。將上清液在4℃冰箱保存。3.滅活病毒將病毒上清液放入離心管中,使用Betapropiolactone(BPL)對其進行滅活。標準滅活時間為2小時,以確保病毒完全失活。滅活后將液體在4℃冰箱保存。4.分離病毒抗原使用金標抗體分離柱所帶的親和柱將滅活后的病毒上清液中與位點反應的抗原物質分離出來。將分離得到的抗原在4℃冰箱存儲。5.熒光親和試驗用熒光探針標記所提純的抗原,在細胞中與標準參照樣品反應,觀察熒光信號變化。確定標柱和臨床樣品之間的包容性。6.混合誘導試驗把制備的病毒抗原和輔料混合好,以不同的質量比例制備2L和3L的試樣,對其進行清晰度、pH值、氧化還原指標的檢測。7.制備并測試疫苗將以不同比例混合的制劑用于免疫實驗。用小鼠進行免疫,觀察小鼠體內是否產生抗體。測試疫苗的效力。實驗參數:病毒血清型:H1N1甲型流感病毒株A/California/04/2009(H1N1)病毒接種培養(yǎng)基:DMEM(Dulbecco修正的Eagle培養(yǎng)基)中,含10%牛血清病毒抗原檢測方法:熒光親和試驗疫苗中質量比例:2L和3L的試樣,不同的質量比例制備小鼠免疫方法:小鼠皮下注射實驗注意點:1.實驗時需要佩戴防護口罩和手套,防止病毒傳播。2.病毒滅活時需要進行充分的降溫和攪拌,以確保病毒完全失活,避免傳染給實驗人員。3.制備疫苗液時需注意必須加盡量少的余量,一旦加多則會造成疫苗升華,導致浪費。4.疫苗應放在4℃冰箱保存,保持穩(wěn)定性和活性。實驗數據分析:根據實驗結果,成功制備出了一種高質量的流感病毒疫苗。根據熒光親和試驗結果,制備的病毒抗原具有較高的純度和穩(wěn)定性。根據混合誘導試驗,確定質量比例為2L和3L的試樣,不同的質量比例制備。接著用制備的疫苗對小鼠進行免疫試驗,小鼠體內產生的抗體的水平也是較高的。這表明制備的疫苗具有良好的免疫效果。結論:本實驗制備出的流感病毒疫苗,具有良好的熒光親和性和
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