動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體

2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體人-鼠(想像圖)資料:1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。那么，如何實(shí)現(xiàn)人—鼠細(xì)胞的融合？動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)、融合雜合的細(xì)胞有絲分裂2個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合雜合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂分化發(fā)育愈傷組織雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。物理法化學(xué)法生物法（離心、振動(dòng)、電刺激）聚乙二醇（PEG）

滅活的病毒（滅活的仙臺(tái)病毒）(一)動(dòng)物細(xì)胞融合融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱(chēng)為雜交細(xì)胞。2、原理：與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，即細(xì)胞膜的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)方式1、概念：滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞（細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性）生物法：滅活的病毒（P52生物技術(shù)資料卡）總結(jié)：比較植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理融合前處理誘導(dǎo)方法用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性用纖維素酶、果膠酶去壁，并使細(xì)胞分散用胰蛋白酶使細(xì)胞分散物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)、生物方法獲得部分或完整植株主要用于制備單克隆抗體4、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn)史告訴我們：科學(xué)技術(shù)是不斷發(fā)展的。那么，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞融合有什么意義呢？打破生殖隔離，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能；廣泛應(yīng)用多個(gè)學(xué)科領(lǐng)域；重要用途：制備單克隆抗體。

回顧1、抗體的化學(xué)本質(zhì)？2、抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？3、抗體的作用特點(diǎn)？4、抗體的分布？（二）單克隆抗體的制備1、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法再?gòu)膭?dòng)物血清中分離抗體該法制備抗體的不足：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。輸入漿細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)

某抗體

某抗原

由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱(chēng)為單克隆抗體。創(chuàng)始人：米爾斯坦一個(gè)B淋巴細(xì)胞：只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖雜交瘤細(xì)胞既能分泌一種特異性抗體又能無(wú)限增殖1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒設(shè)想：思考與探究：如何獲得大量化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？B淋巴細(xì)胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞在具有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性克隆上述雜交細(xì)胞單克隆抗體的制備過(guò)程分開(kāi)不同雜交細(xì)胞，克隆專(zhuān)一抗體，檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性單克隆抗體注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)單克隆抗體結(jié)合單克隆抗體的制備過(guò)程，思考以下問(wèn)題：1、（只考慮兩兩融合）融合細(xì)胞幾種類(lèi)型？2、本過(guò)程中進(jìn)行了兩次篩選，目的分別是什么？第1次篩選要淘汰哪些細(xì)胞？3、本過(guò)程利用的那些技術(shù)？4、雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？單克隆抗體的應(yīng)用信息特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、純度高、靈敏度高，產(chǎn)量大、容易標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。①診斷疾?。ㄗR(shí)別作用，如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用②用于治療疾病和運(yùn)載藥物（主要用于癌癥治療，如單克隆抗體+藥物=“生物導(dǎo)彈”）優(yōu)點(diǎn)：位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小有夢(mèng)想，才會(huì)有創(chuàng)造！

已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例有很多，如人—小鼠、人—兔、人—雞、鼠—兔、雞—鼠等上百種融合細(xì)胞。甚至已成功完成了酵母菌—雞、人—胡蘿卜等細(xì)胞的融合。

想了解更多信息，可通過(guò)網(wǎng)絡(luò)、電視、雜志等途徑關(guān)注細(xì)胞融合和單克隆抗體的最新信息。生物種間雜交想像圖單克隆抗體B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體多種雜交細(xì)胞1、該過(guò)程中用到了兩種技術(shù)小結(jié)單克隆抗體的制備過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技