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(圖片大小可自由調(diào)整)2024年大學(xué)試題(醫(yī)學(xué))-醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)考試近5年真題集錦(頻考類試題)帶答案第I卷一.參考題庫(共100題)1.基因突變主要是DNA一級結(jié)構(gòu)的改變,其分子機制可以是()、()或()等。2.T4DNA連接酶可以()。A、使雙鏈DNA3ˊ-OH與另一雙鏈DNA的5ˊ端磷酸根形成3ˊ→5ˊ磷酸二酯鍵,B、連接相同黏性末端的DNAC、連接平末端的DNAD、補齊雙鏈DNA的3ˊ末端E、形成3ˊ或5ˊ粘性末端3.外顯子和內(nèi)含子共同組成結(jié)構(gòu)基因的編碼區(qū)。4.影響Tm值大小的因素之一是核酸G+C組成含量。5.隨機引物標(biāo)記探針時,雙鏈DNA、單鏈DNA、RNA都是可以標(biāo)記的。6.試述紫外線照射后引起人的DNA損傷及修復(fù)機制。7.基因芯片是有規(guī)則排列的cDNA或寡核苷酸陣列。8.結(jié)構(gòu)基因中的編碼序列是指()。A、內(nèi)含子B、外顯子C、增強子D、沉寂子E、TATA盒9.簡述蛋白質(zhì)組學(xué)的研究策略。10.載體中與藍白篩選有關(guān)的是()。A、lacZB、AmprC、TcrD、neorE、TK11.第一個分離到的抑癌基因是()。12.真核生物基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。13.利用正常機體細胞中不存在的外源基因所表達的酶催化藥物前體轉(zhuǎn)變?yōu)榧毎拘援a(chǎn)物而導(dǎo)致細胞死亡的基因治療方法是()。A、基因滅活治療B、基因矯正治療C、基因置換治療D、基因添加治療E、自殺基因治療14.自殺基因治療旁觀者效應(yīng)不能影響到遠處的腫瘤細胞。15.以下哪項不符合基因診斷的特點()。A、高度靈敏性B、結(jié)果穩(wěn)定性C、早期診斷性D、表型依賴性E、高度特異性16.在一次細胞周期中,需時最短的期是()。A、G1期B、G2期C、S期D、M期E、G期17.DNA連接酶能催化DNA中相鄰的5ˊ磷酸基和3ˊ羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。18.原核生物基因組DNA分子中具有多種功能的識別區(qū)域,如()、()、轉(zhuǎn)錄啟動區(qū)和()。19.反義RNA和RNAi均用于抑制目的基因表達。20.真核生物的DNA有()DNA和()DNA之分。21.腺相關(guān)病毒是單鏈線狀()缺陷型病毒,可高效()至人19號染色體特定區(qū)域中。22.簡述病原生物基因引起人體疾病的機理。23.下列有關(guān)嘧啶二聚體描述正確的是()。A、由紫外線照射引起B(yǎng)、由相鄰的兩個核苷酸組成C、不是一種點突變D、若不能修復(fù),易引起著色性干皮病E、這種突變不能修復(fù)24.簡述SangerDNA測序法的原理。25.錯配修復(fù)只在真核細胞中對DNA復(fù)制過程中修復(fù)摻入的錯誤核苷酸。26.RFLP的基本原理是基因變異改變了酶切圖譜。27.目前測定蛋白質(zhì)分子質(zhì)量最準(zhǔn)確的實驗方法是()。28.請舉例說明蛋白質(zhì)的加工運輸障礙導(dǎo)致的特定疾病發(fā)生。29.質(zhì)粒DNA是()。A、雙鏈環(huán)狀B、單鏈環(huán)狀C、雙鏈線性D、單鏈線性E、三鏈DNA30.以下哪項可以做PCR擴增中的模板()。A、dNTPB、DNA片段C、RNA片段D、蛋白質(zhì)E、肽核酸31.Ⅲ型限制性核酸內(nèi)切酶切割位點的序列是固定的。32.E.coli中核苷酸切除修復(fù)主要由()、()、()、()四種蛋白組成。33.來源不同的酶,但能識別和切割同一位點,這些酶稱為()。34.pH對酶促反應(yīng)沒有影響的是()。A、酶蛋白的三級結(jié)構(gòu)B、酶蛋白中必需基團的解離狀況C、酶蛋白的一級結(jié)構(gòu)D、底物的離解狀態(tài)E、酶的生物學(xué)活性35.說明阻遏蛋白在原核基因表達調(diào)控中的普遍意義。36.蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)包括二硫鍵的位置。37.有關(guān)基因治療當(dāng)中的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體描述正確的是()。A、不整合B、隨機整合C、結(jié)構(gòu)基因的缺失不影響其它部分的活性D、具有潛在危險E、有利于外源基因在靶細胞的永久表達38.逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組是()。A、線性雙鏈DNAB、環(huán)狀單鏈DNAC、環(huán)狀雙鏈DNAD、線性單鏈RNAE、線性雙鏈RNA39.RT-PCR是()。A、包括反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)B、PCR的模板是mRNAC、可以進行基因表達定量分析D、PCR的模板是cDNAE、不需要DNA聚合酶40.克隆是指經(jīng)無性繁殖以后形成的子代群體。41.有關(guān)基因添加策略描述正確的是()。A、缺陷的基因還存在B、基因缺陷序列得到原位修復(fù)C、可用于遺傳病的治療D、添加的基因可以是靶細胞本來不表達的E、可以實現(xiàn)缺陷基因的功能補償42.DNA復(fù)制生成兩個新的DNA分子,這兩個DNA分子()。A、均由兩條新合成的DNA鏈組成B、一個由兩條新合成的DNA鏈組成,一個由兩條母本DNA鏈組成C、均由一條母本DNA鏈加上一條新合成的DNA鏈組成D、均由兩條母本DNA鏈組成43.哺乳動物細胞中四個較為完善的DNA修復(fù)通路為()、()、()和()。44.簡述原核基因表達的特點。45.下面哪種酶能夠防止載體的自連()。A、限制性核酸內(nèi)切酶B、DNA聚合酶ⅠC、DNA聚合酶Ⅰ大片段D、DNA連接酶E、堿性磷酸酶46.E.coli中Dam甲基化酶可將回文序列5ˊ-GATC-3ˊ中腺苷酸的N6位甲基化。47.Western免疫印跡中所用二抗是為了保護一抗,從而提高一抗的靈敏性。48.常用的基因轉(zhuǎn)移的基本技術(shù)有哪些?49.在研究mRNA所包含的功能基因信息時,一般將其反轉(zhuǎn)錄成的cDNA,再插入到可以自我復(fù)制的載體中。50.DNA損傷修復(fù)機制不包括()。A、切除修復(fù)B、SOS修復(fù)C、光修復(fù)D、重組修復(fù)E、嘧啶二聚體修復(fù)51.結(jié)合四環(huán)素抗性操縱子分析Tet-On基因表達調(diào)控系統(tǒng)的作用機制。52.血中與轉(zhuǎn)運蛋白結(jié)合的皮質(zhì)激素可通過血一腦屏障。53.關(guān)于多克隆位點描述不正確的是()。A、用于插入外源基因的多種DNA限制性內(nèi)切酶作用位點B、該位點既可位于抗性基因區(qū)域外,也可位于抗性基因區(qū)域內(nèi)C、僅位于質(zhì)粒載體中D、可能位于標(biāo)記基因的區(qū)域內(nèi)54.末端轉(zhuǎn)移酶能切除DNA5'端磷酸基。55.電離輻射引起DNA損傷的類型是()。A、堿基變化B、脫氧核糖分解C、DNA鏈斷裂D、DNA鏈交聯(lián)E、DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)56.下列有關(guān)基因重組的說法中不正確的是()。A、基因重組能夠產(chǎn)生多種基因型B、非同源染色體上的非等位基因可以發(fā)生重組C、基因重組是生物變異的根本來源D、基因重組僅發(fā)生在有性生殖的過程中E、基因敲入(knockin)通過基因重組而實現(xiàn)57.細菌基因組有些是可移動的轉(zhuǎn)座子。58.無論在原核生物還是真核生物中,DNA復(fù)制均發(fā)生在()。A、細胞分裂之前B、細胞核內(nèi)C、在組蛋白周圍D、細胞質(zhì)內(nèi)59.反向斑點雜交經(jīng)過一次雜交便可同時篩查出被檢DNA中的多種突變。60.TaqDNA聚合酶特性()。A、5′→3′聚合酶活性B、5′→3′外切酶活性C、轉(zhuǎn)錄酶活性D、較弱的非模板依賴性E、缺乏3′→5′外切酶活性61.人類核苷酸切除修復(fù)過程中,在損傷點3’端切割DNA單鏈的是()。A、XPAB、RPAC、XPCD、XPGE、XPF-ERCC162.如何提高PCRDNA聚合酶的保真性?63.RNA中的tRNA的數(shù)量很多,占RNA總量的80%-85%。64.重組DNA技術(shù)中,目的基因的獲取方法有化學(xué)合成法、()、()、()。65.逆病毒是DNA病毒,兩條DNA鏈5ˊ端經(jīng)氫鍵連接。66.有些限制性內(nèi)切酶識別序列不同,但是產(chǎn)生相同的粘性末端,這些酶稱為()。67.蛋白質(zhì)芯片技術(shù)說法正確的是()。A、蛋白質(zhì)芯片是利用諸如抗原抗體等專一的結(jié)合來達到檢測的目的B、蛋白質(zhì)芯片最常用的檢測方式為熒光檢測C、該技術(shù)可以將一個cDNA克隆庫所獲得的蛋白質(zhì)產(chǎn)物排列在一個載體上D、可以利用表達重組抗體基因的細菌將材料排列在硅材料上E、該法不及掃描噬菌體抗體庫靈敏68.地中海貧血是一種()。A、早幼紅細胞貧血B、營養(yǎng)性缺鐵性貧血C、遺傳性溶血性貧血D、遺傳性障礙性貧血E、常染色體顯性遺傳病69.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶70.核酸主要包括DNA和RNA兩大類物質(zhì)。71.簡述真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機制。72.在RNA的制備過程中,()是RNA制備成功與否的關(guān)鍵因素。73.簡述生物傳感器耦聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的基本原理。74.在波長為260nm時,A值等于1時的光密度大約相當(dāng)于50ug/mL的單鏈DNA。75.噬菌體表面顯示技術(shù)可用來研究()。A、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用B、蛋白質(zhì)-核酸相互作用C、核酸-核酸相互作用D、噬菌體外殼蛋白性質(zhì)E、外源蛋白性質(zhì)76.以下屬于轉(zhuǎn)座因子的是()。A、插入序列B、Mu噬菌體C、質(zhì)粒D、衛(wèi)星DNAE、回文序列77.蛋白質(zhì)芯片目前已被應(yīng)用于以下哪些領(lǐng)域()。A、構(gòu)建蛋白質(zhì)表達譜B、抗原-抗體篩選C、藥物靶點篩選D、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)交互作用篩選E、疾病診斷和預(yù)警78.在大腸桿菌中表達真核基因,必須用()。A、基因組DNAB、cDNAC、mRNAD、RNAE、以上都不是79.基因重疊有什么意義?80.可產(chǎn)生單鏈DNA的載體是()。A、M13mp18B、pSP70C、pBR322D、pUC18E、λgt1081.試述基因突變可能引起的hnRNA剪接變化情況。82.hnRNA轉(zhuǎn)變成mRNA的過程是()。A、轉(zhuǎn)錄起始B、轉(zhuǎn)錄終止C、轉(zhuǎn)錄后加工D、翻譯起始83.真核生物的啟動子元件是TATA盒,位于轉(zhuǎn)錄起始位點上游。84.催化蛋白質(zhì)形成正確二硫鍵的酶是()。A、肽基轉(zhuǎn)移酶B、EF-GC、氨基酰-tRNA合成酶D、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶85.有關(guān)基因干預(yù)描述錯誤的是()。A、目的是為了加強部分基因的表達B、是為了抑制有害基因的表達C、靶基因可以是癌基因或病毒基因D、遺傳病治療的最佳方法E、關(guān)鍵技術(shù)是基因打靶86.受體的化學(xué)本質(zhì)一般是()。A、多糖B、類固醇C、生物堿D、蛋白質(zhì)87.RNA中mRNA占百分之多少()。A、1一5B、15一20C、40一50D、60一75E、80一8588.人類基因組30億對堿基估計存在編碼基因數(shù)是()。A、1萬-2萬個B、3萬-4萬個C、5萬-6萬個D、7萬-8萬個E、9萬-10萬個89.什么是原位菌落雜交(colonyhybridization)?90.反向斑點雜交先固定于()雜交膜上。91.簡述逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒的結(jié)構(gòu)特點。92.質(zhì)粒載體()。A、不能在細菌體內(nèi)進行自我復(fù)制B、是存在于細菌和某些真核生物染色體外的雙鏈環(huán)狀的DNA分子C、能容納大于10kb的外源DNA片段D、有限制性內(nèi)切酶的多個切點E、能夠溶解細菌93.以下不屬于蛋白質(zhì)組學(xué)研究內(nèi)容的是()。A、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)B、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用C、蛋白質(zhì)的功能D、基因的數(shù)目94.()是動物體內(nèi)糖的儲存形式。95.以人為例,簡述堿基切除修復(fù)機制。96.斑點雜交直接將被測()或()固定在濾膜上,然后加入過量的標(biāo)記好了的核酸探針進行雜交。97.何謂反義技術(shù)?試述其主要分類及其原理。98.以下哪種病毒基因組是分節(jié)段基因組()。A、SARS冠狀病毒B、HBVC、HIVD、SV40E、流感病毒H1N199.蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的形式包括()。A、交叉配合B、蛋白質(zhì)亞基的聚合C、分子識別D、多酶復(fù)合體E、分子的自我裝配100.降低血糖的激素是()。A、胰島素B、胰高血糖素C、腎上腺素D、生長激素E、皮質(zhì)醇第I卷參考答案一.參考題庫1.參考答案:替換;插入;缺失2.參考答案:A,B,C3.參考答案:正確4.參考答案:錯誤5.參考答案:正確6.參考答案: 當(dāng)DNA受到最易被其吸收波長(~260nm)的紫外線照射時,同一條DNA鏈上相鄰的嘧啶以共價鍵連成二聚體,相鄰的兩個T、或兩個C、或C與T間都可以環(huán)丁基環(huán)連成二聚體,其中最容易形成的是T-T二聚體。 核苷酸切除修復(fù)系統(tǒng)(nucleotideexcisionrepair,NER)通過識別DNA雙螺旋形狀的改變來識別紫外線照射產(chǎn)生的胸腺嘧啶二聚體以及其他嘧啶二聚體造成的變形。NER在進行修復(fù)的時候,是切除含有損傷堿基的那一段DNA,而不是僅僅切除受損的堿基。這一復(fù)雜過程需要大量蛋白質(zhì)參與。 核苷酸切除修復(fù)有兩條不同系統(tǒng),一是GG-NER(globalgenome-NER),能在基因組任何部位移除受損DNA;二是TC-NER(transcription-coupledNER),即轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)修復(fù)。多酶復(fù)合物XPC/HHR23B或RNA聚合酶/CSA/CSB復(fù)合物識別受損DNA,接著由RPA、XPA和XPB/XPD解旋酶打開受損DNA周圍,有利于內(nèi)切核酸酶ERCC1/XPE和XPG在損傷位點兩側(cè)切割DNA單鏈,去除包括損傷部位在內(nèi)的單鏈DNA短片段,然后由DNA聚合酶和連接酶利用未損傷的DNA為模板修補缺口,從而恢復(fù)正常序列。7.參考答案:正確8.參考答案:B9.參考答案: (1)采用高通量的蛋白質(zhì)組研究技術(shù)分析生物體內(nèi)盡可能多乃至接近所有的蛋白質(zhì),這種觀點從大規(guī)模、系統(tǒng)性的角度來看待蛋白質(zhì)組學(xué),也更符合蛋白質(zhì)組學(xué)的本質(zhì)。但是,由于蛋白質(zhì)表達隨空間和時間不斷變化,要分析生物體內(nèi)所有的蛋白質(zhì)是一個難以實現(xiàn)的目標(biāo)。 (2)研究不同時期細胞蛋白質(zhì)組成的變化,如蛋白質(zhì)在不同環(huán)境下的差異表達,以發(fā)現(xiàn)有差異的蛋白質(zhì)種類為主要目標(biāo)。這種觀點更傾向于把蛋白質(zhì)組學(xué)作為研究生命現(xiàn)象的手段和方法。10.參考答案:A11.參考答案:視網(wǎng)膜母細胞瘤基因12.參考答案:正確13.參考答案:E14.參考答案:錯誤15.參考答案:D16.參考答案:C17.參考答案:正確18.參考答案:復(fù)制起始區(qū);復(fù)制終止區(qū);轉(zhuǎn)錄終止區(qū)19.參考答案:正確20.參考答案:染色體;細胞器21.參考答案:DNA;整合22.參考答案: 第一,病原生物感染后導(dǎo)致外源性基因在人體特定組織器官表達,病原生物得以生存、繁殖,引起機械或生物學(xué)損傷; 第二,病原生物及其基因在人體內(nèi)大量繁殖、表達,與機體爭奪營養(yǎng)物質(zhì),造成人體營養(yǎng)缺乏; 第三,病原生物產(chǎn)生毒素作用于人體細胞,使特定生理功能或代謝發(fā)生異常; 第四,某些病原生物如病毒基因可整合至人體基因組中,改變某些正?;虻慕Y(jié)構(gòu)和/或基因表達。23.參考答案:A,B,C,D24.參考答案: SangerDNA測序法是建立在兩個基本原理之上: (1)核酸是依賴于模板在聚合酶的作用下由5′端向3′端聚合; (2)可延伸的引物必須能提供游離的3′羥基末端,雙脫氧核苷酸由于缺少游離的3′羥基末端,因此會終止聚合反應(yīng)的進行。 如果分別用4種雙脫氧核苷酸終止反應(yīng),則會獲得4組長度不同的DNA片段。通過比較所有DNA片段的長度可以得知核苷酸的序列。25.參考答案:錯誤26.參考答案:正確27.參考答案:質(zhì)譜法28.參考答案: 機體細胞內(nèi)新合成的未成熟蛋白質(zhì)即使沒有任何突變、所含遺傳信息完全正確,也不具有生物活性,不能正確完成其生物學(xué)功能;要使新合成蛋白質(zhì)具有完整活性需要對其進行翻譯后加工,包括除去信號肽、基團修飾、蛋白質(zhì)折疊、亞基聚合、運輸至發(fā)揮功能的靶部位等,其中任何一個環(huán)節(jié)的障礙都會使蛋白質(zhì)功能紊亂,導(dǎo)致疾病發(fā)生。 如白化病主要表現(xiàn)為眼、毛發(fā)、皮膚的色素缺失,易發(fā)生皮膚及眼部腫瘤,是先天性酪氨酸酶缺陷引起。酪氨酸酶是黑色素細胞中催化黑色素生成的限速酶。酪氨酸酶肽鏈合成后,需首先在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行折疊,再運輸至高爾基體進行糖基化加工,然后由轉(zhuǎn)運囊泡將其轉(zhuǎn)運至黑色素體發(fā)揮發(fā)揮作用,多種蛋白質(zhì)參與了酪氨酸酶的這一成熟和轉(zhuǎn)運過程,它們的異常引發(fā)了不同分子病因的白發(fā)病: (1)酪氨酸酶結(jié)構(gòu)基因變異如發(fā)生在Cu2+結(jié)合位點即催化結(jié)構(gòu)域的點突變,可使酪氨酸酶活性降低甚至消失,黑色素合成減少或完全不能合成,導(dǎo)致I型泛發(fā)性白發(fā)?。?(2)催化結(jié)構(gòu)域外某些點突變,導(dǎo)致突變型酪氨酸酶蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中與分子伴侶結(jié)合受阻,蛋白質(zhì)不能正常折疊,因而不能從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輸出而滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中,無法完成其成熟及運輸過程,也是I型泛發(fā)性白化病的重要機制; (3)P蛋白參與酪氨酸酶蛋白從高爾基體到黑色素體的運輸,P蛋白結(jié)構(gòu)基因突變、使P蛋白功能障礙,導(dǎo)致酪氨酸酶不能正確轉(zhuǎn)運至黑色素體而發(fā)生黑色素合成障礙,引發(fā)II型泛發(fā)性白化病。29.參考答案:A30.參考答案:B31.參考答案:錯誤32.參考答案:UvrA;UvrB;UvrC;UvrD33.參考答案:同工異源酶34.參考答案:C35.參考答案:阻遏蛋白通常是與基因操縱區(qū)結(jié)合,減弱或阻止其調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄,其介導(dǎo)的調(diào)控方式為負調(diào)控。如大腸桿菌乳糖代謝,在沒有誘導(dǎo)劑時,與lac相鄰(上游端)的調(diào)節(jié)基因I的產(chǎn)物—lac阻遏蛋白,能與操縱子操縱基因O特異地結(jié)合,抑制結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。36.參考答案:正確37.參考答案:B,C,D,E38.參考答案:D39.參考答案:A,C,D40.參考答案:正確41.參考答案:A,E42.參考答案:C43.參考答案:核苷酸切除修復(fù);堿基切除修復(fù);重組修復(fù);錯配修復(fù)44.參考答案: (1)只有一種RNA聚合酶。 (2)原核生物的基因表達以操縱子為基本_單位。 (3)轉(zhuǎn)錄和翻譯是偶聯(lián)進行的。 (4)mRNA翻譯起始部位有特殊的堿基序列—SD序列。 (5)原核生物基因表達的調(diào)控主要在轉(zhuǎn)錄水平,即對RNA合成的調(diào)控。45.參考答案:E46.參考答案:正確47.參考答案:錯誤48.參考答案: 病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移效率較高,因此它也是使用最多的基因治療載體。據(jù)統(tǒng)計,有72%的臨床實驗計劃和71%的病例使用了病毒載體,其中用得最多的是逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。 非病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)有: (一)脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)基本原理:利用陽離子脂質(zhì)體單體與DNA混合后,可以自動形成包埋外源DNA的脂質(zhì)體,然后與細胞一起孵育,即可通過細胞內(nèi)吞作用將外源DNA(即目的基因)轉(zhuǎn)移至細胞內(nèi),并進行表達。 (二)受體介導(dǎo)轉(zhuǎn)移技術(shù)將DNA與細胞或組織親和性的配體偶聯(lián),可使DNA具有靶向性。 (三)基因直接注射技術(shù)如:肌內(nèi)注射凝血因子Ⅸ基因,可產(chǎn)生血友病所需的凝血因子Ⅸ。此外還有磷酸鈣共沉淀,細胞核顯微注射,基因槍顆粒轟擊,多種物理化學(xué)等方法。49.參考答案:正確50.參考答案:E51.參考答案:四環(huán)素抗性操縱子系統(tǒng)原理:四環(huán)素抗性基因的轉(zhuǎn)錄受Tet阻遏蛋白的負調(diào)控。無四環(huán)素存在時,阻遏蛋白與四環(huán)素抗性操縱子序列結(jié)合阻斷四環(huán)素抗性基因的表達。四環(huán)素存在時,阻遏蛋白與四環(huán)素具有極高的親和性,造成阻遏蛋白對四環(huán)素抗性操縱子阻遏解除,使四環(huán)素抗性基因的轉(zhuǎn)錄得以進行。Tet-Off系統(tǒng):轉(zhuǎn)錄激活物保留了原阻遏蛋白的四環(huán)素結(jié)合特性,即與四環(huán)素結(jié)合時將不能與對應(yīng)的表達調(diào)控元件結(jié)合,而無法發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活作用。Tet-On系統(tǒng):轉(zhuǎn)錄激活物改造了原阻遏蛋白的四環(huán)素結(jié)合特性,即與四環(huán)素結(jié)合時才能與對應(yīng)的表達調(diào)控元件結(jié)合,而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活作用。52.參考答案:錯誤53.參考答案:C54.參考答案:錯誤55.參考答案:A,B,C,D,E56.參考答案:D57.參考答案:正確58.參考答案:A59.參考答案:正確60.參考答案:A,B,C,D,E61.參考答案:D62.參考答案: (1)使用TaqDNA聚合酶時,摻入少量具有3’→5’外切酶活性的耐熱DNA聚合酶,錯配率可降為原來的1/10; (2)使四種dNTP底物濃度相等; (3)MgCl2濃度盡可能低; (4)減少循環(huán)數(shù)。63.參考答案:錯誤64.參考答案:從基因組DNA文庫獲取目的基因;從cDNA文庫獲取目的基因;聚合酶鏈反應(yīng)法65.參考答案:錯誤66.參考答案:同尾酶67.參考答案:A,B,C,D68.參考答案:D69.參考答案:是一種無需模板的DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子的3’羥基端。70.參考答案:正確71.參考答案: 主要通過反式作用因子與順式作用元件和RNA聚合酶(RNApolymerase,RNApol)的相互作用完成。 (1)順式作用元件(cis-actingelement)指某些能影響基因表達但不編碼新的蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列,按照功能分為啟動子、增強子、負調(diào)控元件(沉默子等)。 (2)反式作用因子(trans-actingfactor)指能直接或間接地識別或結(jié)合在各順式作用元件8~12bp核心序列上,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的一組蛋白質(zhì),也稱序列特異性DNA結(jié)合蛋白(sequencespecificDNAbindingprotein,SDBP),這是一類細胞核內(nèi)蛋白質(zhì)因子。在結(jié)構(gòu)上含有與DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。 (3)反式作用因子的調(diào)控機制 ①反式作用因子的活性調(diào)節(jié):真核基因轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)節(jié),首先表現(xiàn)為反式作用因子的功能調(diào)節(jié),即特定的反式作用因子被激活后,可以啟動特定基因的轉(zhuǎn)錄。反式作用因子的激活方式如下:表達式調(diào)節(jié);共價修飾;配體結(jié)合;蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用。 ②反式作用因子作用方式:成環(huán);扭曲;滑動;Oozing。 ③反式作用因子的組合式調(diào)控:基因表達的調(diào)控不是由單一的反式作用因子完成而是幾種因子組合,發(fā)揮特定的作用。72.參考答案:排除Rnase的污染73.參考答案:生物傳感器耦聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是定性和定量檢測蛋白質(zhì)間相互作用并對其進行鑒定的簡便而快速的方法。它是以表面等離子共振(SPR)為基礎(chǔ)的生物大分子相互作用的分析技術(shù)(BIA)與MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)的有機結(jié)合,其原理是采用1cm*1cm大小的生物傳感芯片,該芯片以金黃色的玻璃作為支持物,上面結(jié)合有羧甲基葡聚糖聚合物,通過化學(xué)修飾可將感興趣的蛋白質(zhì)(肽)固定在葡聚糖聚合物上形成傳感片,將待測蛋白質(zhì)或肽溶液通過微射流卡盤流過該固相載體,那些與固相蛋白質(zhì)(肽)發(fā)生相互作用的蛋白質(zhì)(肽)被滯留在聚合物的表面上,由于芯片表面蛋白質(zhì)含量增加從而導(dǎo)致入射光的折射率改變,使其表面等離子共振光的共振角發(fā)生改變,該改變與表面蛋白的含量呈線性關(guān)系,通過SPR-BIA檢測系統(tǒng)可實時檢測該變化從而實現(xiàn)對蛋白質(zhì)間相互作用的分析。74.參考答案:錯誤75.參考答案:A76.參考答案:A,B77.參考答案:A,B,C,D,E78.參考答案:B79.參考答案:利用有限的核酸貯存更多的遺傳信息,提高自身在進化過程中的適應(yīng)能力。80.參考答案:A81.參考答案:初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物核內(nèi)不均一性RNA(heterogeniousnucleicRNA,hnRNA)的剪接是一種重要的RNA轉(zhuǎn)錄后加工方式,并取決于hnRNA一級結(jié)構(gòu)。剪接只發(fā)生在特定的剪接供體和受體位點上,其序列高度特異,常遵循“GA-AT”法則,因此,當(dāng)基因變異發(fā)生在這些剪接位點時就會影響hnRNA的剪接,方式主要有兩種:一是使得hnRNA的正常剪接位點消失,二是產(chǎn)生新的剪接位點。無論哪一種都可導(dǎo)致mRNA發(fā)生剪接錯誤,產(chǎn)生異常mRNA,最終產(chǎn)生異常的蛋白表達產(chǎn)物,并改變相應(yīng)的生物學(xué)性狀。82.參考答案:C83.參考答案:正確84.參考答案:D85.參考答案:A,E86.參考答案:D87.參考答案:A88.參考答案:B89.參考答案:原位菌落雜交是根據(jù)微孔濾膜雜交和原位雜交的原理而改良的一種篩選重組體的一種核酸雜交方法。它是將生長在或影印在微孔濾膜上的菌落(或噬菌斑)原位溶菌,原位進行DNA變性并原位固定在濾膜上,然后用放射性標(biāo)記的探針同固定了的DNA進行雜交經(jīng)放射自顯影后,確定哪一個菌落含有重組的DNA分子,再從參比平板上選取重組體。90.參考答案:探針91.參考答案: (1)兩端各有一長末端重復(fù)序列LTR。 (2)LTR由U3、R和U5三部分組成。 (3)病毒有三個結(jié)構(gòu)基因。 (4)5ˊ端LTR下游有一段病毒包裝所必需的序列(ψ)及剪接供體位點(SD)和剪接受體位點(SA)。 (5)含有負鏈DNA轉(zhuǎn)錄的引物結(jié)合位點(PBS)和正鏈DNA轉(zhuǎn)錄的引物結(jié)合位點。92.參考答案:B93.參考答案:D94.參考答案:糖原95.參考答案: 在人細胞核中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)八種DNA糖苷酶,他們參與堿基切除修復(fù),具有損傷特異性,通常嘧啶的氧化損傷由hNTH1、hNEIL1或hNEIL2移除,而嘌呤的氧化損傷由hOGG1移除。特異識別的異常堿基包括:胞嘧啶脫氨基產(chǎn)生的尿嘧啶、氧化的鳥嘌呤。脫氨基的腺嘌呤、開環(huán)堿基以及碳原子之間雙鍵變成單鍵的堿基等。 APE-1是DNA堿基切除修復(fù)途徑中的一種多功能蛋白酶,首先從Hela細胞核內(nèi)提取出來,后研究發(fā)現(xiàn)APE-1廣泛存在于多種真核細胞內(nèi)。APE-1蛋白酶的作用是修復(fù)AP位點,它從AP位點的5’端切開,再去除無堿基的殘基,然后由β-多聚酶及連接酶插入一個新合成的堿基,完成修復(fù)過程。 近來發(fā)現(xiàn),在堿基切除修復(fù)途徑中還存在APE-1非依賴的修復(fù)機
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