2025屆嘉興市重點中學(xué)生物高三上期末監(jiān)測試題含解析

2025屆嘉興市重點中學(xué)生物高三上期末監(jiān)測試題注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于染色體變異和基因突變的敘述，錯誤的是（）A．染色體數(shù)目變異可發(fā)生于減數(shù)分裂和有絲分裂過程中B．染色體結(jié)構(gòu)變異往往會引起基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變C．堿基對的替換可能會使基因中的氫鍵數(shù)目減少D．基因突變可以發(fā)生在乳酸菌、噬菌體和人體中2．除去番茄未成熟花的雄蕊，再用適宜濃度的生長素處理雌蕊可獲得無子番茄，不處理則花蕾凋落。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．所結(jié)無子番茄的細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍B．生長素的生理作用主要是促進(jìn)細(xì)胞生長C．生長素可以誘導(dǎo)植物體中有機物的分配D．生長素溶液濃度過大也會導(dǎo)致花蕾凋落3．下列關(guān)于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組成的敘述，正確的是（）A．細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運氨基酸的“載體”都是蛋白質(zhì)B．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上核糖體合成的性激素與第二性征的維持有關(guān)C．溶酶體是蛋白質(zhì)加工場所，蛋白質(zhì)只有加工形成特定的空間結(jié)構(gòu)才能體現(xiàn)生理活性D．細(xì)胞只有保持完整性，才能正常的完成各項生命活動4．某興趣小組以肺炎雙球菌為材料進(jìn)行如圖所示實驗，其中細(xì)胞提取物是加熱致死的S型菌破碎后去除絕大部分糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)制成的。下列敘述錯誤的是（）A．設(shè)第①組對照可確定細(xì)胞提取物中存在轉(zhuǎn)化因子B．第②～④組利用酶的專一性去除對應(yīng)物質(zhì)觀察轉(zhuǎn)化情況C．混合培養(yǎng)后4組的平板培養(yǎng)基上均會有表面粗糙的菌落D．混合培養(yǎng)后出現(xiàn)的S型菌與原S型菌遺傳信息相同5．下圖為白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間識別、黏著后,白細(xì)胞遷移并穿過血管壁進(jìn)入炎癥組織的示意圖,下列敘述錯誤的是（）A．內(nèi)皮細(xì)胞識別結(jié)合白細(xì)胞膜上的糖蛋白使白細(xì)胞黏著B．白細(xì)胞在血管內(nèi)黏著、遷移需要消耗ATPC．黏著、遷移過程中白細(xì)胞需進(jìn)行基因的選擇性表達(dá)D．白細(xì)胞利用細(xì)胞膜的選擇透過性穿過血管壁進(jìn)入炎癥組織6．圖是某生物精子形成過程中的一個細(xì)胞，不考慮基因突變及染色體畸變，下列敘述正確的是（）A．減數(shù)分裂過程中，染色體1、2、3、4可以自由組合B．染色單體①和②不可能出現(xiàn)在同一個精子中，①和③可以出現(xiàn)在同一個精子中C．染色單體⑥和⑦的相同位置上可能存在相同基因、等位基因及非等位基因D．從基因角度考慮該細(xì)胞產(chǎn)生的精子類型可能有2種或4種7．用同位素標(biāo)記法追蹤元素及物質(zhì)的去向是生物學(xué)研究的重要手段之一。下列結(jié)果正確的是（）A．用18O標(biāo)記的水培養(yǎng)植物細(xì)胞，短時間內(nèi)生成的O2和CO2均可能存在放射性B．用含有放射性碘的飼料飼喂蝌蚪，體內(nèi)促甲狀腺激素中可能檢測到放射性C．用無放射性噬菌體侵染被32P和35S標(biāo)記的大腸桿菌，子代噬菌體中含有32P，不含35SD．用14C標(biāo)記的CO2培養(yǎng)植物細(xì)胞，可在葉綠體生成的淀粉、蔗糖等物質(zhì)中檢測到放射性8．（10分）下圖為動物細(xì)胞有絲分裂過程模式圖。下列相關(guān)描述正確的是（）A．②中染色體的形成有利于后續(xù)核中遺傳物質(zhì)均分B．顯微鏡觀察時視野中③數(shù)量最多C．染色體數(shù)目加倍發(fā)生在④→⑤過程中D．②→⑥經(jīng)歷了一個細(xì)胞周期二、非選擇題9．（10分）某研究小組將甲、乙兩株大小、形狀和生理狀況相同的幼苗放置在如圖1所示的密閉裝置中培養(yǎng)，其中甲的培養(yǎng)液為完全培養(yǎng)液，乙的培養(yǎng)液為缺鎂的完全培養(yǎng)液。給予兩裝置相同且適宜的恒定光照，在適宜的溫度條件下培養(yǎng)，容器中CO2濃度的變化如圖2所示。請回答下列問題：（1）高等植物缺鎂會影響_____________的合成，曲線①對應(yīng)_____________植株所在的裝置中的CO2濃度變化，判斷的理由是_____________。（2）AB時間段，該植株葉肉細(xì)胞中的C3的含量_____________；C點限制光合速率的主要因素是_____________。10．（14分）微生物與人類的關(guān)系極為密切。目前，微生物已經(jīng)在食品、醫(yī)療等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。請回答下列有關(guān)微生物的問題：（1）制作葡萄酒的過程中，需將溫度控制在__________℃。家庭制作泡菜時無須刻意滅菌，原因是__________________。變酸果酒表面的菌膜、泡菜壇內(nèi)的白膜相關(guān)的微生物分別是______________________________。（2）采用平板劃線法分離菌種時，在培養(yǎng)基表面共劃__________個區(qū)域時，需要6次灼燒接種環(huán)。對菌種進(jìn)行臨時保藏時，試管中的固體培養(yǎng)基常呈斜面狀，目的是___________。此外，試管口通常塞有棉花，其作用有_______________________。（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的二氧化碳作為碳源。若要設(shè)計實驗驗證某細(xì)菌屬于該類微生物，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論：___________________________________。11．（14分）為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體的轉(zhuǎn)運肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得轉(zhuǎn)基因油菜品種。（1）研究人員從陸地棉細(xì)胞中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因，如圖為所示限制酶的識別位點。這樣可以用____________________（填酶）處理兩個基因后，可得到____________端（填圖中字母）相連的融合基因。（2）將上述融合基因插入如圖2所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中。構(gòu)建充足質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含____________的固體平板上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落，再利用培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。（3）剪取油菜的葉片放入染液中一段時間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞，經(jīng)篩選后再將該油菜細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)獲因油菜。整個過程涉及的原理是____________。12．實時熒光定量PCR簡稱qPCR，靈敏度高特異性好，是目前檢測微小殘留病變的常用方法。將標(biāo)有熒光素的Taqman探針與待測樣本DNA混合后，在變性、復(fù)性、延伸的熱循環(huán)中，與待測樣本DNA配對結(jié)合的Taqman探針被Taq酶切斷，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光（如下圖所示），隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光信號強度增加，通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值（該值與待測樣本中目的基因的個數(shù)呈負(fù)相關(guān)）。（1）做qPCR之前，需要先根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成__________。除此之外，qPCR的反應(yīng)體系還需要加入___________、_________和___________。（2）在反應(yīng)過程中，___________為新鏈的合成提供能量。（3）醫(yī)務(wù)人員對三位慢性粒細(xì)胞白血病患者（由B基因過量表達(dá)導(dǎo)致）進(jìn)行治療后，想檢測治療效果，利用上述技術(shù)寫出實驗思路和簡要結(jié)果分析。實驗思路：__________________簡要結(jié)果分析：_____________________________

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

可遺傳的變異包括基因突變、基因重組和染色體變異：（1）基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換，這會導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)的改變。（2）基因重組是指在生物體進(jìn)行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，包括兩種類型，①自由組合型：減數(shù)第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合；交叉互換型：減數(shù)第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。（3）染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異（重復(fù)、缺失、易位、倒位）和染色體數(shù)目變異?！驹斀狻緼、基因體突變和染色體變異均可發(fā)生在有絲分裂和減數(shù)分裂過程中，A正確；B、染色體結(jié)構(gòu)變異包括重復(fù)、缺失、易位、倒位，一般不會引起基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，B錯誤；C、不同的堿基對氫鍵的數(shù)量可能不同，因此堿基對的替換可能會使基因中的氫鍵數(shù)目減少，C正確；D、基因突變具有普遍性，乳酸菌、噬菌體和人體細(xì)胞都可以發(fā)生基因突變，D正確。故選B。2、A【解析】

生長素可以促進(jìn)果實發(fā)育，用生長素涂抹得到的無子番茄是不可遺傳的變異?！驹斀狻緼、生長素促進(jìn)果實的發(fā)育，并不能使細(xì)胞染色體數(shù)目加倍，A項錯誤；B、生長素主要促進(jìn)細(xì)胞伸長生長，B項正確；C、依據(jù)題意，生長素能促進(jìn)果實發(fā)育，而果實發(fā)育需要有機物，所以生長素能誘導(dǎo)植物體中有機物的分配（生長素和赤霉素能抑制篩孔處胼胝質(zhì)的合成和沉積，利于有機物從光合作用部位運輸?shù)絻Υ娌课?，比如在果實中），C項正確。D、生長素的作用具有兩重性，低濃度促進(jìn)生長發(fā)育，防止落花落果，高濃度能疏花疏果，抑制生長發(fā)育，D項正確。

故選A。3、D【解析】

各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)、功能：細(xì)胞器分布形態(tài)結(jié)構(gòu)功能線粒體動植物細(xì)胞雙層膜結(jié)構(gòu)有氧呼吸的主要場所，細(xì)胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細(xì)胞雙層膜結(jié)構(gòu)植物細(xì)胞進(jìn)行光合作用的場所；植物細(xì)胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉(zhuǎn)換站”。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)動植物細(xì)胞單層膜形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和加工，以及脂質(zhì)合成的“車間”高爾基體動植物細(xì)胞單層膜構(gòu)成的囊狀結(jié)構(gòu)對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”（動物細(xì)胞高爾基體與分泌有關(guān)；植物則參與細(xì)胞壁形成）核糖體動植物細(xì)胞無膜結(jié)構(gòu)，有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離在細(xì)胞質(zhì)中合成蛋白質(zhì)的場所，“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”溶酶體動植物細(xì)胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu)“消化車間”，內(nèi)含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細(xì)胞器，吞噬并且殺死侵入細(xì)胞的病毒和細(xì)菌。液泡成熟植物細(xì)胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu)；內(nèi)含細(xì)胞液（有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質(zhì)等）調(diào)節(jié)植物細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境，充盈的液泡使植物細(xì)胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細(xì)胞無膜結(jié)構(gòu)；由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質(zhì)組成與細(xì)胞的有絲分裂有關(guān)【詳解】A、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運氨基酸的是tRNA，A錯誤；B、性激素屬于固醇類，不在核糖體上合成，B錯誤；C、溶酶體是儲存多種水解酶的場所，C錯誤；D、細(xì)胞只有保持完整性，才能正常的完成各項生命活動，D正確。故選D。4、D【解析】

在艾弗里證明遺傳物質(zhì)是DNA的實驗中，艾弗里將S型細(xì)菌的提取物分別加入蛋白酶、酯酶、RNA酶和DNA酶，以除去相應(yīng)的分子，研究它們各自的作用。艾弗里體外轉(zhuǎn)化實驗證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)等不是遺傳物質(zhì)?！驹斀狻緼、設(shè)置第①組實驗的目的是確定細(xì)胞提取物中含有轉(zhuǎn)化因子，A正確；B、第②～④組利用酶的專一性去除相應(yīng)物質(zhì)觀察轉(zhuǎn)化情況，B正確；C、R型菌菌落表面粗糙，混合培養(yǎng)后4組的平板培養(yǎng)基上均會有R型菌，C正確；D、混合培養(yǎng)后出現(xiàn)的S型菌是由R型菌吸收S型菌DNA轉(zhuǎn)化而來，故與原S型菌的遺傳物質(zhì)不完全相同，D錯誤。故選D。5、D【解析】內(nèi)皮細(xì)胞識別結(jié)合白細(xì)胞膜的糖蛋白，結(jié)果使白細(xì)胞黏著，A正確；白細(xì)胞在血管內(nèi)黏著、遷移均是耗能過程，消耗ATP，B正確；黏著、遷移過程中白細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生變化，白細(xì)胞需進(jìn)行基因的選擇性表達(dá)，C正確；白細(xì)胞穿過血管壁進(jìn)入炎癥組織依賴于細(xì)胞膜的流動性，D錯誤。【考點定位】細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞分化等6、D【解析】

根據(jù)題干信息已知，圖示細(xì)胞為精子形成過程中的細(xì)胞圖，其含有2對同源染色體，且兩兩配對形成四分體，說明該細(xì)胞處于減數(shù)第一次分裂前期，為初級精母細(xì)胞；圖中顯示同源染色體的非姐妹染色單體⑥和⑦發(fā)生了部分位置上的交叉互換?！驹斀狻緼、減數(shù)分裂過程中，同源染色體分離，非同源染色體自由組合，而圖中1與2、3與4為同源染色體，因此圖中1與3或4自由組合，2與3或4自由組合，A錯誤；B、正常情況下，染色單體①和②不可能出現(xiàn)在同一個精子中，①和③也不可以出現(xiàn)在同一個精子中，B錯誤；C、染色單體⑥和⑦的相同位置上可能存在相同基因或等位基因，C錯誤；D、從基因角度考慮該細(xì)胞產(chǎn)生的精子類型可能有2種或4種，D正確。故選D。7、A【解析】

放射性同位素標(biāo)記法在生物學(xué)中具有廣泛的應(yīng)用：（1）用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，用32P標(biāo)記噬菌體的DNA，分別侵染細(xì)菌，最終證明DNA是遺傳物質(zhì)；（2）用3H標(biāo)記氨基酸，探明分泌蛋白的合成與分泌過程；（3）15N標(biāo)記DNA分子，證明了DNA分子的復(fù)制方式是半保留復(fù)制；（4）卡爾文用14C標(biāo)記CO2，研究出碳原子在光合作用中的轉(zhuǎn)移途徑，即CO2→C3→有機物；（5）魯賓和卡門用18O標(biāo)記水，證明光合作用所釋放的氧氣全部來自于水。【詳解】A、用18O標(biāo)記的水培養(yǎng)植物細(xì)胞，光反應(yīng)過程中H218O光解可產(chǎn)生18O2，有氧呼吸第二階段H218O與丙酮酸反應(yīng)可產(chǎn)生C18O2，A正確；B、碘是合成甲狀腺激素的原料，用含有放射性碘的飼料飼喂蝌蚪，體內(nèi)甲狀腺激素中可能檢測到放射性，B錯誤；C、噬菌體的蛋白質(zhì)外殼含S，DNA含P，噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖時，利用自身遺傳物質(zhì)做模板、以大腸桿菌內(nèi)的原料和能量等合成噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)外殼，所以用無放射性噬菌體侵染被32P和35S標(biāo)記的大腸桿菌，子代噬菌體的DNA中含有32P，蛋白質(zhì)外殼含35S，C錯誤；D、蔗糖是在葉綠體外生成的，D錯誤。故選A。8、A【解析】

有絲分裂是指一種真核細(xì)胞分裂產(chǎn)生體細(xì)胞的過程。有絲分裂分裂具有周期性，即連續(xù)分裂的細(xì)胞，從一次分裂完成時開始，到下一次分裂完成時為止，從形成子細(xì)胞開始到再一次形成子細(xì)胞結(jié)束為一個細(xì)胞周期，包括分間期和分裂期。圖中①為間期，②為前期，③為中期，④為后期，⑤為末期，⑥為分裂得到的兩個子細(xì)胞?！驹斀狻緼、②為有絲分裂前期，出現(xiàn)染色體，染色體主要是由DNA和蛋白質(zhì)組成，而DNA是細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，因此染色體的形成有利于后續(xù)核中遺傳物質(zhì)均分，A正確；B、間期時間最長，因此顯微鏡觀察時視野中①數(shù)量最多，B錯誤；C、有絲分裂后期開始時著絲粒分裂，染色體數(shù)目加倍，因此染色體數(shù)目加倍發(fā)生在③→④過程中，C錯誤；D、細(xì)胞周期包括間期和分列前，①→⑥經(jīng)歷了一個細(xì)胞周期，D錯誤。故選A。二、非選擇題9、葉綠素乙缺鎂會影響葉綠素的合成導(dǎo)致植物光合速率減慢；乙植株的培養(yǎng)液缺乏鎂元素，乙植株吸收的二氧化碳較少，導(dǎo)致容器中的二氧化碳濃度較高不斷降低二氧化碳濃度【解析】

分析題意和題圖：圖1所做實驗中甲、乙兩組的自變量為是否含鎂，因變量為光合速率。由于鎂是合成葉綠素的必需元素，缺鎂的一組由于葉綠素含量低，光合速率將下降。圖1中曲線代表凈光合速率，其中曲線②在AB段CO2減少速率大于曲線①，說明曲線①代表缺鎂幼苗的光合速率變化，即乙組植株的光合速率變化情況。【詳解】（1）高等植物缺鎂會影響葉綠素的合成，缺鎂會影響葉綠素的合成導(dǎo)致植物光合速率減慢；由于乙植株的培養(yǎng)液缺乏鎂元素，光反應(yīng)較弱，乙植株吸收的二氧化碳較少，導(dǎo)致容器中的二氧化碳濃度較高，即曲線①對應(yīng)乙植株所在的裝置中的CO2濃度變化。（2）AB時間段，容器中的二氧化碳濃度下降，該植株葉肉細(xì)胞中的C3的含量不斷降低；C點時容器中CO2濃度不再減少，此時光照強度、溫度適宜，限制光合速率的主要因素是二氧化碳濃度?！军c睛】解答本題時抓住題干信息：甲、乙兩組的自變量為是否含鎂，而鎂是葉綠素的組成元素，缺鎂植株的光合速率較低，吸收CO2較少，據(jù)此分析圖2中曲線①對應(yīng)乙植株所在的裝置中的CO2濃度變化。10、18~25發(fā)酵過程中，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸可以抑制其他微生物的生長醋酸菌、酵母菌5增大接種面積，有利于保藏更多菌種通氣和防止雜菌污染將該細(xì)菌接種在無碳源的培養(yǎng)基上，若能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的二氧化碳作為碳源【解析】

1、在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。2、常用的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，兩者都可以用于菌種的分離，前者接種前和接種后均需要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，后者還可以用于菌種的計數(shù)。【詳解】（1）制作葡萄酒的過程中，需將溫度控制在18~25℃；家庭制作泡菜時無須刻意滅菌，原因是發(fā)酵過程中，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸可以抑制其他微生物的生長；變酸果酒表面的菌膜是醋酸菌、泡菜壇內(nèi)的白膜相關(guān)的微生物是酵母菌。（2）每次使用接種環(huán)之前以及每次使用接種環(huán)后均需灼燒滅菌，故采用平板劃線法分離菌種時，在培養(yǎng)基表面共劃5個區(qū)域時，需要6次灼燒接種環(huán)；對菌種進(jìn)行臨時保藏時，試管中的固體培養(yǎng)基常呈斜面狀，目的是增大接種面積，有利于保藏更多菌種；此外，試管口通常塞有棉花，其作用有通氣和防止雜菌污染。（3）驗證土壤中的某些微生物可以利用空氣中的二氧化碳作為碳源的實驗中，自變量為有無碳源，因變量為微生物能不能生長，因此實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論為：將該細(xì)菌接種在無碳源的培養(yǎng)基上，若能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的二氧化碳作為碳源。【點睛】本題主要考查微生物的相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的理解，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力。11、Cla1（限制酶）和DNA連接酶A、D四環(huán)素基因重組和植物細(xì)胞的全能性【解析】

（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計引物，采用PCR法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因．在上述引物設(shè)計時，分別在引物中加入如圖甲所示酶的識別序列，這樣可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個基因后，得到A、D端相連的融合基因；（2）將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液；（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞，進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞，該細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理為基