溶血性鏈球菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)吿

溶血性鏈球菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)吿 一、生物學(xué)特性 （1）種類和細(xì)菌分型 鏈球菌屬（Streptococcus)細(xì)菌是化膿性球菌中常見的另一大類革蘭陽性球菌，排列呈雙或長短不一的鏈狀。目前有69個(gè)種和亞種，廣泛分布于自然界、人及動(dòng)物糞便和健康人的鼻咽部，大多數(shù)為正常菌群，并不致病。病原性鏈球菌主要引起人類的各種化膿性炎癥，還可引起人類肺炎、猩紅熱等重要疾病。鏈球菌屬中對人類致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌。 鏈球菌的分類常用下列三種原則。 1.溶血現(xiàn)象分類鏈球菌在血瓊脂平板培養(yǎng)基上生長繁殖后，按產(chǎn)生溶血與否及其溶血現(xiàn)象分為3類。 （1）甲型溶血性鏈球菌(α-hemolyticstreptococcus):菌落周圍有1~2mm寬的草綠色溶血環(huán)，稱甲型溶血或α溶血，因而這類細(xì)菌被稱為草綠色鏈球菌(Viridansstreptococ—ci)。α-溶血環(huán)中的紅細(xì)胞并未完全溶解，這類鏈球菌多為機(jī)會(huì)致病菌。 （2）乙型溶血性鏈球菌(β-hemolyticstreptococcus)：菌落周圍形成一個(gè)2~4mm寬、界限分明、完全透明的無色溶血環(huán),稱乙型溶血或β溶血，β溶血環(huán)中的紅細(xì)胞完全溶解，因而這類鏈球菌亦稱為溶血性鏈球菌（Streptococcushemolytic）。溶血性鏈球菌致病力強(qiáng)，常引起人類和動(dòng)物的多種疾病。 （3）丙型鏈球菌（γ-streptococcus)：不產(chǎn)生溶血素，菌落周圍無溶血環(huán)，因而亦稱不溶血性鏈球菌（streptococcusanhemolyticus)。一般不致病，常存于乳類制品和糞便中。 2.抗原結(jié)構(gòu)分類根據(jù)鏈球菌細(xì)胞壁中抗原結(jié)構(gòu)(C多糖抗原）的不同，運(yùn)用血清學(xué)方法可分成A?H、K?V20個(gè)群。對人致病的鏈球菌菌株中,90%左右屬A群，其他群少見。同一群的鏈球菌又可分若干型。例如A群根據(jù)其M抗原不同，可分成約100個(gè)型；B群分4個(gè)型；C群分13個(gè)型等。鏈球菌的群別與其溶血性之間無平行關(guān)系，但對人類致病的A群鏈球菌對數(shù)呈現(xiàn)乙型溶血。 3.生化反應(yīng)分類對一些不具有群特異性的鏈球菌(如肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌等），需用生化反應(yīng)、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)和對氧的需要進(jìn)行分類。如按對氧的需要可分為需氧、兼性厭氧和厭氧性鏈球菌三類。前兩類對人有致病性，厭氧性鏈球菌主要為口、消化道、泌尿生殖道中的正常菌群,在特定條件下致病。 (二)來源 鏈球菌屬于厚壁菌門的一個(gè)屬。這些細(xì)菌在細(xì)胞分裂時(shí)總是沿一個(gè)軸，所以通常成對或者鏈狀的，因?yàn)檫@些特征，他們被稱作“鏈球菌”，區(qū)別于可以沿多個(gè)軸分裂而形成一團(tuán)細(xì)胞的“葡萄球菌”（Staphylococcus）。鏈球菌屬包含了很多個(gè)種，其中多數(shù)是在人和動(dòng)物表皮、呼吸道等處的共生菌（Commensalflora）,有對人類有益的菌種如嗜熱鏈球菌(Streptococcusthermophilus)，但其中也有相當(dāng)多的數(shù)量的致病菌種。 (三)傳染性 患者和帶菌者是主要傳染源。 (四)傳播途徑 溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣，存在于水、空氣、塵埃、糞便及健康人和動(dòng)物的口腔、鼻腔、咽喉中，通過直接接觸、空氣飛沫傳播或通過皮膚、黏膜傷口或產(chǎn)道等處傳播。被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會(huì)對人類造成感染。上呼吸道感染患者，人畜化膿性感染部位常成為食品污染的污染源。A群鏈球菌引起的疾病約占人類鏈球菌感染的90%，其感染源為病人和帶菌者。 (五)易感性 人群普遍容易感染，感染后人體可以產(chǎn)生抗菌免疫和抗毒素免疫。 (六)潛伏期 猩紅熱潛伏期為2?12d，多數(shù)為2?5d。起病多急驟,以發(fā)熱、咽峽炎和皮疹為主要臨床表現(xiàn)。 (七)劑置-效應(yīng)關(guān)系 鏈球菌感染的發(fā)病模式與嚴(yán)重程度因不同地區(qū)而異，不同血清型的致病性和臨床癥狀各不相同，且同一血清型在不同情況下也會(huì)有不同表現(xiàn)。人員是否引起溶血性鏈球菌的感染，與鏈球菌的感染劑量及鏈球菌的型別、人員的個(gè)體差異有關(guān)，目前尚未檢索到溶血性鏈球菌對人準(zhǔn)確感染劑量的報(bào)告。 (八)致病性 溶血性鏈球菌的致病性與其產(chǎn)生的毒素及其侵襲性酶有關(guān)。主要有以下幾種致病物質(zhì)及所致疾病。 1．致病物質(zhì) （1）鏈球菌溶血素溶血素有O和S兩種。O為含有一SH的蛋白質(zhì)，具有抗原性；S為小分子多肽，分子量較小，故無抗原性。 （2）致熱外毒素曾稱紅疹毒素或猩紅熱毒素，是人類猩紅熱的主要毒性物質(zhì)，會(huì)引起局部或全身紅疹、發(fā)熱、疼痛、惡心、嘔吐、周身不適。 （3）透明質(zhì)酸酶又稱擴(kuò)散因子，能分解細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸,故能增加細(xì)菌的侵襲力，使病菌易在組織中擴(kuò)散。 （4）鏈激酶又稱鏈球菌纖維蛋白溶酶，能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，具有增強(qiáng)細(xì)菌在組織中的擴(kuò)散作用。該酶耐熱，l00℃50min仍可保持活性。 （5）鏈道酶又稱鏈球菌DNA酶，能使膿液稀薄，促進(jìn)病菌擴(kuò)散。 （6）殺白細(xì)胞素能使白細(xì)胞失去動(dòng)力，變成球形，最后膨脹破裂。 2.所致疾病 鏈球菌引起人類多種疾患，大致可分成化膿性、中毒性和變態(tài)反應(yīng)性三類。（1）化膿性感染如局部皮膚及皮下組織感染(丹毒、淋巴管炎、蜂窩組織炎、癰、膿皰瘡等）和其他系統(tǒng)感染(化膿性扁桃體炎、咽炎、鼻竇炎、中耳炎及產(chǎn)褥熱等)。（2）中毒性感染如猩紅熱、鏈球菌毒性休克綜合征。（3）變態(tài)反應(yīng)性疾病如風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎等。 (九)變異性 從現(xiàn)有的科研論文和有關(guān)報(bào)道檢索中可知，鏈球菌存在菌落形態(tài)變異。 (十)環(huán)境中的穩(wěn)定性 溶血性鏈球菌在塵埃中無日光照射時(shí)可生存數(shù)日，在干燥塵埃中可生存數(shù)月，廣泛分布于自然界，從水、塵埃、乳汁、健康人的鼻咽部、人及動(dòng)物糞便中皆可檢出。 (十一)藥物敏感性 溶血性鏈球菌對青霉素、紅霉素、氣霉素、四環(huán)素和磺胺藥極敏感，極少有耐藥株發(fā)現(xiàn)。青霉素是鏈球菌感染的首選藥物。 (十二)消毒劑敏感性 溶血性鏈球菌的抵抗力一般不強(qiáng)，對常用消毒劑敏感。 (十三）物理滅活 溶血性鏈球菌抵抗力一般不強(qiáng)，不耐熱,60℃30min即被殺死。 (十四)在宿主體外存活 在普通瓊脂平板及肉湯培養(yǎng)基中生長不好，需在培養(yǎng)基中加入血液或組織液方能生長。對人類有致病作用的鏈球菌還需在培養(yǎng)基中加入多種生長因子。10％CO2可促進(jìn)鏈球菌生長及溶血作用。多數(shù)有致病作用的溶血性鏈球菌的最適生長溫度為37℃，需氧或兼性厭氧。 (十五）與其他生物和環(huán)境的交互作用 鏈球菌普遍存在于各種動(dòng)物體內(nèi)。它們大多數(shù)(但不是全部)是宿主特異型的，不同的菌株感染不同種的動(dòng)物。能夠感染豬的主要菌株是豬鏈球菌（Streptococcussuis）。這種鏈球菌在豬群中普遍存在，養(yǎng)豬的地方幾乎都有。 (十六)預(yù)防和治療方案 患者、隱性感染者、恢復(fù)期帶菌者是乙型溶血性鏈球菌感染的傳染源。對病人和帶菌者應(yīng)及時(shí)治療，以減少傳播機(jī)會(huì)。對于空氣、器械、敷料等應(yīng)注意消毒處理。具體的防治原則如下。 （1）對乙型溶血性鏈球菌引起的呼吸道、皮膚感染應(yīng)早期診斷、早期治療，可有效防止風(fēng)濕熱或急性腎小球腎炎等并發(fā)癥的發(fā)生。青霉素G是治療的首選藥物，劑量要給足。紅霉素可作為替補(bǔ)藥物。 （2）對患風(fēng)濕熱的患者應(yīng)及時(shí)給予藥物治療。每3?4周靜脈輸入青霉素G，或每日口服青霉素G.對于患過風(fēng)濕熱的兒童，治療要持續(xù)一年左右。這是由于風(fēng)濕熱初次發(fā)作，極少引起心臟的嚴(yán)重?fù)p傷。而患風(fēng)濕熱的人對乙型溶血性鏈球菌極易感，反復(fù)發(fā)作的風(fēng)濕熱對心臟可造成嚴(yán)重的損傷，導(dǎo)致風(fēng)濕性心臟病， （3）及時(shí)徹底治療乙型溶血性鏈球菌感染所致的急性腎小球腎炎，抗生素對已經(jīng)形成慢性的腎小球腎炎（或風(fēng)濕性心臟病)療效不佳。因此，及時(shí)、徹底清除急性期感染患者體內(nèi)的鏈球菌是十分必要的。足夠劑量的青霉素G或紅霉索治療1Od,—般可收到良好的效果。 二、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評估與控制 (一)實(shí)驗(yàn)室感染性因子的種類、來源和危害 1.感染性因子的種類溶血性鏈球菌的致病性與其產(chǎn)生的毒素及其侵襲性酶有關(guān)，主要有鏈球菌溶血性、致熱外毒素、透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、鏈道酶、殺白細(xì)胞素等多種致病因子。根據(jù)其生物學(xué)特性和本中心實(shí)驗(yàn)室檢測能力范圍，本實(shí)驗(yàn)室可能的感染因子為溶血性鏈球菌病原體本身。 2.感染性因子的來源 （1）食品、一次性使用衛(wèi)生用品、消毒產(chǎn)品（用于醫(yī)院消毒的消毒劑、消毒器械和衛(wèi)生用品等）、公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)空氣、公共場所和醫(yī)院空氣樣品，以及突發(fā)公共衛(wèi)生事件采集的疑似病例咽拭子和鼻咽拭子，創(chuàng)口感染處膿性分泌物等標(biāo)本。 （2）樣本采集和檢測過程涉及的所有實(shí)驗(yàn)場所。 （3）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)過程操作中可能產(chǎn)生的含病原體的氣溶膠。 （4）實(shí)驗(yàn)室相關(guān)工作人員自身呼吸道感染。 3.感染性因子可能造成的危害 （1）被污染的實(shí)驗(yàn)器材、器皿等對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。 （2）實(shí)驗(yàn)室廢棄物對環(huán)境造成污染。 （3）實(shí)驗(yàn)人員暴露后感染。 （4）實(shí)驗(yàn)室檢測活動(dòng)工作中，各種原因?qū)е碌囊后w飛濺或微滴濺出及氣溶膠對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。 （5）實(shí)驗(yàn)室人員自身呼吸道感染，造成人員間接觸感染。 實(shí)驗(yàn)室工作中因氣溶膠的直接吸入感染、被含有溶血性鏈球菌污染了的針頭及其他銳器刺破皮膚、實(shí)驗(yàn)操作時(shí)各種原因?qū)е碌囊后w飛濺或微滴濺出造成直接接觸感染是較可能的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染方式。 (二)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別與風(fēng)險(xiǎn)控制 1.實(shí)驗(yàn)方法 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別未采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測；使用新的或變更的國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前，未經(jīng)技術(shù)確認(rèn)，可能存在安全風(fēng)險(xiǎn)。 （2）風(fēng)險(xiǎn)控制措施盡量采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測，或使用經(jīng)過充分驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)方法；在使用新的或變更的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，必須經(jīng)過嚴(yán)格的技術(shù)確認(rèn)。 2.樣品采集 （1）鼻咽拭子的采集 ①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材PV螺旋蓋采樣管、采樣消毒棉簽、一次性培養(yǎng)皿等。 ②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別呼吸道標(biāo)本中可能存在感染性病原體，在鼻咽拭子采集過程中，由于被采者的反射性咳嗽，可形成小顆粒氣溶膠；工作人員采樣不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位，均可導(dǎo)致氣溶膠吸入、樣本液滴污染環(huán)境和檢測人員。 ③風(fēng)險(xiǎn)控制措施采集鼻咽拭子時(shí)采樣人員應(yīng)戴手套、口罩，必要時(shí)佩戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)口罩；采樣動(dòng)作輕柔，采樣容器盡量使用外螺旋蓋塑料管；發(fā)生污染時(shí)應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理。采集過程中使用過的廢棄物必須使用高效消毒液浸泡或髙溫高壓滅菌后集中處理，集中存放于中心指定的醫(yī)療廢棄物室。 （2）創(chuàng)口感染處膿性分泌物的采集 ①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材PV螺旋蓋采樣管、一次性培養(yǎng)皿、采樣消毒棉簽。 ②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別創(chuàng)口感染的膿性分泌物中可能存在感染性病原體，采集過程存在樣本滴落濺出，工作人員采樣不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位，導(dǎo)致環(huán)境污染和人員感染。 ③風(fēng)險(xiǎn)控制措施采集膿性分泌物時(shí)采樣人員應(yīng)戴手套、口罩；采樣動(dòng)作輕柔，采樣容器盡量使用外螺旋蓋塑料管；發(fā)生污染時(shí)應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理。 （3）食品和食品包裝材料樣品采集 ①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材散裝樣品需用剪刀或鑷子、不銹鋼扣蓋飯盒、螺旋蓋塑料采樣罐、預(yù)包裝食品視產(chǎn)品本身包裝而定。 ②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別食品和食品包裝材料樣品中可能存在感染性病原體，采樣人員采樣不規(guī)范、盛裝容器密合不嚴(yán)、玻璃容器意外破損等，可導(dǎo)致樣品濺灑、溢出、滲漏而污染環(huán)境；剪刀、鑷子的使用不當(dāng)，導(dǎo)致存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。 ③風(fēng)險(xiǎn)控制措施食品和食品包裝材料等樣品采集容器必須防水、防漏，容器外面要包裹足量的吸收性材料，以便容器打破或泄漏時(shí)，能吸收溢出的所有液體。在使用剪刀、鑷子、玻璃容器等銳器時(shí)必須規(guī)范操作，做好防護(hù)，防止刺傷或劃傷。 （4）集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)空氣，醫(yī)院空氣、公共場所空氣采集 ①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材六級(jí)篩孔撞擊式微生物采樣器、血平板等。 ②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)、醫(yī)院手術(shù)室等空氣標(biāo)本中可能存在溶血性鏈球菌等感染性病原體，使用六級(jí)篩孔撞擊式微生物采樣器采集空標(biāo)本的過程中，工作人員采樣不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位，導(dǎo)致存在采樣人員吸入氣溶膠感染的隱患。 ③風(fēng)險(xiǎn)控制措施采集上述空氣標(biāo)本時(shí)，采樣人員需要穿戴防護(hù)服、口罩、帽子、手套等防護(hù)樣品，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)要求規(guī)范采樣。 （5）一次性使用衛(wèi)生和醫(yī)療用品、消毒產(chǎn)品(用于醫(yī)院消毒的消毒劑、消毒器械和衛(wèi)生用品等）、醫(yī)療器械等樣品 ①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材滅菌規(guī)格板、采樣棉拭子、螺旋蓋塑料采樣容器、剪刀或鑷子、玻璃試管或瓶、一次性使用衛(wèi)生和醫(yī)療用品、消毒滅菌產(chǎn)品依據(jù)本身包裝而定。 ②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別一次性使用衛(wèi)生和醫(yī)療用品、消毒產(chǎn)品（用于醫(yī)院消毒的消毒劑、消毒器械和衛(wèi)生用品等）、醫(yī)療器械等樣品采集時(shí)，剪刀、鑷子的使用不當(dāng)，存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。采樣人員采樣不規(guī)范、盛裝容器密合不嚴(yán)、玻璃容器意外破損等，可導(dǎo)致樣品濺灑、溢出、滲漏而污染環(huán)境。 ③風(fēng)險(xiǎn)控制措施樣品采集容器必須防水、防漏，容器外面要包裹足量的吸收性材料，以便容器打破或泄漏時(shí)，能吸收溢出的所有液體。在使用剪刀、鑷子、玻璃容器等銳器時(shí)必須規(guī)范操作，做好防護(hù)，防止刺傷或劃傷。 3.樣品的包裝和運(yùn)送 （1）主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材真空密封采血管、外螺旋蓋玻璃瓶、微生物氣溶膠采樣器、聚乙烯材料密封采樣管、95千帕樣品運(yùn)輸罐、B類標(biāo)本運(yùn)輸箱（UN3373冷藏箱）、運(yùn)送車輛。 （2）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別盛樣容器不堅(jiān)固、密合不嚴(yán)，有可能存在樣品濺灑、溢出、滲漏；使用不合格運(yùn)輸包裝進(jìn)行樣本運(yùn)送，存在玻璃容器或包裝容器意外破損從而刺傷或劃傷采送樣人員的隱患。 （3）風(fēng)險(xiǎn)控制措施盛裝樣品容器必須堅(jiān)固，不易破碎，密合性好，盡可能選用塑料制品，采樣后必須檢査容器的密合性。樣品嚴(yán)格按照B類要求包裝和運(yùn)送，由采樣人員專車運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。 4.樣品接收和前處理 （1）主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材剪刀、鑷子、振蕩器、均質(zhì)器、均質(zhì)袋、離心機(jī)、生物安全柜、潔凈工作臺(tái)。 （2）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別樣品管理員未按實(shí)驗(yàn)室《樣品管理程序》(XJK/CX32)要求接收樣品；打開膿性分泌物、鼻咽拭子等感染性樣品包裝時(shí)容器意外破碎或傾倒等，可能造成感染性物質(zhì)濺出，污染操作者的手、操作臺(tái)面、器物表面及地面。對食品等固形物樣品進(jìn)行剪切時(shí)，操作不慎發(fā)生手剪傷；均質(zhì)器均質(zhì)樣本時(shí)發(fā)生均質(zhì)袋破裂，離心操作時(shí)發(fā)生離心管破裂、現(xiàn)場空氣溶血性鏈球菌采樣血培養(yǎng)皿意外打開等意外情況。 （3）風(fēng)險(xiǎn)控制措施 ①樣品接收必須在專用的區(qū)域進(jìn)行，合同評審人員和實(shí)驗(yàn)室收樣人員嚴(yán)格按照《樣品管理程序》(XJK/CX32)要求交接樣品，不得擅自打開樣品包裝，收樣后及時(shí)洗手。 ②開始檢測前，必須做好個(gè)人防護(hù)，對盛裝呼吸道分泌物等感染性材料樣品的容器，必須在生物安全柜中緩慢打開，食品、一次性使用衛(wèi)生和醫(yī)療用品、消毒產(chǎn)品標(biāo)本必須在潔凈工作室內(nèi)打開，開啟容器管口的動(dòng)作輕緩，不能對著操作者。現(xiàn)場采集的空氣樣本必須輕拿輕放，防止蓋子打開或被打碎。 ③對食品等固體物樣品取樣，要小心使用剪刀和鑷子，盡可能剪取食物的可食部分，以防止樣品均質(zhì)時(shí)堅(jiān)硬物質(zhì)刺破均質(zhì)袋,造成樣液濺灑。對含有感染性的樣品離心振蕩時(shí),必須將離心蓋封嚴(yán)實(shí)，并關(guān)上離心機(jī)蓋。 ④實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備應(yīng)急藥箱，發(fā)生手剪傷等意外事件時(shí)，應(yīng)立即進(jìn)行消毒包扎處理。 ⑤當(dāng)發(fā)生離心管或均質(zhì)袋意外破裂、濺出時(shí)，及時(shí)對所有涉及污染的部位進(jìn)行消毒處理，同時(shí)按《二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與管理》“實(shí)驗(yàn)室意外事故的處置”章節(jié)處置。 5.樣本檢測過程 （1）主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材旋渦振蕩器、離心機(jī)、生物安全柜、培養(yǎng)箱、細(xì)菌鑒定和藥敏測試儀(ATB儀）、生物安全柜、凈化工作臺(tái)、顯微鏡、移液器及吸液頭、接種環(huán)、培養(yǎng)皿等。 （2）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別 ①對食品和食品包裝材料、膿性分泌物、鼻咽拭子、一次性使用衛(wèi)生和醫(yī)療用品、消毒產(chǎn)品、醫(yī)療器械、各類空氣等樣品進(jìn)行溶血性鏈球菌菌株分離鑒定、生化試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)均涉及活菌操作。在樣品移取、劃線分離、涂片染色、離心等檢驗(yàn)操作過程中的各個(gè)環(huán)節(jié)都可能產(chǎn)生感染性的微生物氣溶膠，因而存在氣溶膠直接吸入而被感染的隱患。 ②實(shí)驗(yàn)過程中玻璃器材意外破碎或滲漏、離心操作時(shí)離心管意外破裂等事故，導(dǎo)致液體濺出污染設(shè)備表面或工作臺(tái)面等環(huán)境，間接污染操作者的皮膚和黏膜。 ③實(shí)驗(yàn)過程中未正確使用銳器、玻璃實(shí)驗(yàn)器材意外破碎等，意外割傷和刺傷實(shí)驗(yàn)室工作人員。 （3）風(fēng)險(xiǎn)控制措施 ①開展檢測時(shí)檢測人員應(yīng)按照二級(jí)生物安全防護(hù)要求做好自身防護(hù)措施，若接觸傳染性大的病原微生物，工作人員應(yīng)戴防護(hù)眼鏡，必要時(shí)戴雙層（兩副）手套以增加保護(hù)。 ②進(jìn)行食品、水樣、一次性使用衛(wèi)生和醫(yī)療用品、消毒產(chǎn)品、醫(yī)療器械等樣品制備，均質(zhì)等操作時(shí)，應(yīng)在潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行；膿液分泌物、鼻咽拭子等具有感染性的材料的操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，不得移到生物安全柜外；進(jìn)行活菌操作時(shí)，應(yīng)在安全柜工作臺(tái)面上放置一塊浸有消毒液的紗布或吸有消毒液的紙，避免感染性物質(zhì)的擴(kuò)散。涉及高濃度或大體積的感染性的材料離心操作時(shí)，應(yīng)選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機(jī)離心。必須保證潔凈實(shí)驗(yàn)室和生物安全柜處于正常運(yùn)行狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對桌面、臺(tái)面及時(shí)進(jìn)行消毒處理。 ③必須使用移液器或吸球移取樣液，旋蓋和移液操作的動(dòng)作要輕緩，所有吸管應(yīng)用棉塞，移液頭盡可能使用帶濾芯的，以減少對移液器或吸球的污染。 ④使用直徑2?3mm且完全封閉、手柄的長度小于6cm的接種環(huán)分離細(xì)菌，盡可能使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),避免在酒精燈的明火上加熱從而引起感染性物質(zhì)的爆濺。 ⑤盡可能以塑料器皿代替玻璃器皿，若必須使用玻璃器皿，只能用實(shí)驗(yàn)室級(jí)玻璃（硼硅酸鹽），且任何破碎或有裂紋的器皿都應(yīng)丟棄。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片、玻璃碎片等銳器。嚴(yán)禁用帶有注射針頭的注射器吸液，更不可當(dāng)吸管用，用過的銳器應(yīng)直接放入利器盒，消毒后廢棄。 ⑥在任何可能導(dǎo)致潛在的傳染性物質(zhì)濺出的操作過程中，應(yīng)保護(hù)好面部、眼睛和嘴；發(fā)生液體濺出、溢出等事故，明顯暴露于傳染源時(shí)，應(yīng)立即向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告，及時(shí)處理并對事故的發(fā)生與處理作記錄，必要時(shí)進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察、治療，保留書面記錄。 6.菌株使用、保存和運(yùn)輸 （1）主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材接種針（環(huán)）、菌株保存管、生物安全柜、95千帕樣品運(yùn)輸罐、B類標(biāo)本運(yùn)輸箱（UN3373冷藏箱）、運(yùn)送車輛。 （2）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別 ①工作人員陽性菌株的保菌操作不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位、半固體或磁珠管等保菌容器意外破損、磁珠掉落等會(huì)導(dǎo)致病原菌污染實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員? ②溶血性鏈球菌使用和保存未按照《菌（毒）種管理規(guī)程》（XJK/CX37)要求實(shí)施管理，存在菌株被惡意使用及污染環(huán)境等生物安全隱患。 ③溶血性鏈球菌陽性菌株的上送等運(yùn)輸過程中如使用不合格包裝進(jìn)行運(yùn)輸，容器密封不嚴(yán)，可能導(dǎo)致運(yùn)輸過程中包裝容器意外破損，從而產(chǎn)生病原體的擴(kuò)散。 （3）風(fēng)險(xiǎn)控制措施 ①溶血性鏈球菌分離純化及保菌操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，若發(fā)生半固體管或磁珠管破損、磁珠掉落時(shí)，應(yīng)立刻對所涉及的器物進(jìn)行消毒處理，并按《二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與管理》中“意外事故處理辦法”章節(jié)規(guī)范處置。 ②溶血性鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的使用、保存嚴(yán)格按照《菌（毒）種管理規(guī)程》（XXJK/CX37)要求進(jìn)行操作，實(shí)行雙人雙鎖保管，嚴(yán)防菌株被惡意使用而造成生物危害。 ③對于溶血性鏈球菌陽性菌株的上送，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行B類運(yùn)輸包裝（同“樣品采集”),攜帶“可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸許可證”，并由專車運(yùn)送，由專業(yè)人員全程護(hù)送。 7．實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒 （1）主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材70%?75%的酒精、施康清洗消毒液Ⅰ。 （2）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別工作完畢后，若不及時(shí)對工作臺(tái)面，生物安全柜進(jìn)行消毒，則有可能會(huì)對下次操作人員造成污染或感染。 （3）風(fēng)險(xiǎn)控制措施工作完畢后，及時(shí)對檢測所涉及的工作臺(tái)面，地面和生物安全柜進(jìn)行消毒，使用稀釋100倍的施康清洗消毒液Ⅰ擦拭，用消毒液清潔后要干燥20min以上。生物安全柜用70％?75％的酒精擦拭消毒。待實(shí)驗(yàn)和消毒完畢后，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，并正確用肥皂和流水洗手。 8.廢棄物處置 （1）主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材醫(yī)療廢棄物專用袋、硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、高壓滅菌器。 （2）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別 ①樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測過程產(chǎn)生的感染性廢棄物如膿性分泌物、鼻咽拭子、病原菌的培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌種、毒種保存液及所有實(shí)驗(yàn)過程涉及的用品，釋放前未按照規(guī)范要求處理，導(dǎo)致人員感染或致病因子外泄而污染環(huán)境。 ②樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測過程產(chǎn)生的被污染的損傷性廢棄物，如一次性使用采血用具、載玻片、玻璃試管、玻璃安瓿、培養(yǎng)皿等未按照要求規(guī)范處理，存在意外刺傷或劃傷工作人員的隱患。 （3）風(fēng)險(xiǎn)控制措施實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理應(yīng)遵循《醫(yī)療廢棄物管理?xiàng)l例》《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢棄物管理辦法》《醫(yī)療廢物專用包裝袋、容器和警示標(biāo)志標(biāo)準(zhǔn)》等相關(guān)法規(guī)要求，嚴(yán)格執(zhí)行分類收集，規(guī)范處置。所有損傷性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識(shí)的硬質(zhì)、防漏、防銳器刺破的專用利器盒中；所有感染性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識(shí)的醫(yī)療廢物專用包裝袋中。使用高效消毒液浸泡或高溫高壓滅菌后集中處理,集中存放至中心指定的醫(yī)療廢棄室，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門收集、集中處置。同時(shí)，做好廢棄物處置交接記錄，所有相關(guān)記錄應(yīng)定期整理歸檔。 (三）實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動(dòng)中其他風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)防控制措施 1.電力 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別溶血性鏈球菌的分離和鑒定對溫度有明確要求,實(shí)驗(yàn)過程中突然間隙斷電或電力供應(yīng)不穩(wěn)定會(huì)對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性帶來一定的影響。實(shí)驗(yàn)室沒有布置雙路供電或者相關(guān)儀器未配備不間斷電源，當(dāng)電力供應(yīng)發(fā)生故障時(shí),可導(dǎo)致設(shè)備突然停止工作、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)被迫終止等所帶來的相關(guān)安全風(fēng)險(xiǎn)。預(yù)防控制措施盡可能在實(shí)驗(yàn)室布置雙路供電，若客觀條件受限制，對溶血性鏈球菌檢測所用關(guān)鍵儀器應(yīng)配備應(yīng)急電源（UPS),避免實(shí)驗(yàn)室由斷電可能引發(fā)的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，確保檢測工作順利進(jìn)行。 2.電氣操作 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及電氣操作，包括實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)的電氣設(shè)備的啟動(dòng)、關(guān)閉、安裝和維修；設(shè)備層內(nèi)UPS、空調(diào)機(jī)組等電氣設(shè)備的啟動(dòng)，關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過程可能產(chǎn)生觸電、電擊、造成電氣故障等風(fēng)險(xiǎn)。 （2）預(yù)防控制措施 ①電氣設(shè)備的設(shè)計(jì)及制造符合枏關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)若有380V電源插座，則需明確標(biāo)識(shí)，并由有資質(zhì)的專業(yè)人員進(jìn)行操作。 ②新的、改裝過的或修理過的電氣設(shè)備在未經(jīng)合格的人員（如有資質(zhì)的電工）完成電氣安全測試和設(shè)備符合安全使用要求之前，不允許使用。 ③電氣設(shè)備使用人員接受正確操作的培訓(xùn)，操作方式不降低電氣安全性。電氣設(shè)備使用人員要定期檢査設(shè)備可能引起電氣故障之破損。只有合格的人員可從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工作. ④采取措施對設(shè)備去污染，以減少維護(hù)人員感染的風(fēng)險(xiǎn)。 3.實(shí)驗(yàn)室給排水設(shè)施設(shè)備 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室含有給排水的設(shè)施設(shè)備，包括位于工作區(qū)和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。水管道意外破裂、排水管道阻塞可能導(dǎo)致感染性材料溢出，有污染實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。 （2）風(fēng)險(xiǎn)控制措施實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有染菌物及器具，必須先經(jīng)高壓滅菌或含氯消毒劑浸泡消毒后洗滌，洗消產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池消毒處理，嚴(yán)禁直接排放。至少每月監(jiān)測糞大腸菌群，定期檢査實(shí)驗(yàn)室給排水管道各接口的密封性，及時(shí)發(fā)現(xiàn)安全隱患。 4.實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位可能造成密封不嚴(yán)，當(dāng)感染性材料溢出時(shí)，有污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。 （2）預(yù)防控制措施所有管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位嚴(yán)格密封，定期進(jìn)行檢査檢測。避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。 5.主要檢測儀器設(shè)備 （1）細(xì)菌鑒定和藥敏測試儀（ATB儀）、顯微鏡、培養(yǎng)箱等設(shè)備 ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別對疑似溶血性鏈球菌的鑒定時(shí),使用顯微鏡、ATB儀進(jìn)行生化鑒定及藥敏試驗(yàn)，若設(shè)備使用時(shí)不按操作規(guī)程進(jìn)行，存在病原體濺出、滲漏而污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境和人的隱患。 ②預(yù)防控制措施嚴(yán)格按照ATB儀、顯微鏡等設(shè)備操作規(guī)程規(guī)程規(guī)范操作和維護(hù)，每次使用完畢后對設(shè)備箱體及可能污染的實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行消毒。 （2）離心機(jī) ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別在分離血清、濃縮菌液過程中會(huì)使用到離心機(jī)，離心過程中可能會(huì)發(fā)生離心管破裂、離心管蓋脫落、離心轉(zhuǎn)子和離心腔被污染的風(fēng)險(xiǎn)^。 ②預(yù)防控制措施離心時(shí)配備耐離心壓力的且?guī)菪苌w的離心管，離心前做好平衡，選擇正確的離心速度和離心力。規(guī)范正確操作，定期維護(hù)，確保離心機(jī)性能正常，每次做好使用記錄，定期進(jìn)行功能檢查。 6.生物安全設(shè)施設(shè)備 （1）生物安全柜 ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別進(jìn)行溶血性鏈球菌大量活菌的操作必須在生物安全柜中進(jìn)行，否則易污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境而造成實(shí)驗(yàn)人員感染。安全柜操作過程中沒有按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說明書進(jìn)行正確操作、維護(hù)，使其氣溶膠防護(hù)效果明顯降低或消失，失去安全防護(hù)效果。若長時(shí)間使用或未及時(shí)更換HEPA過濾膜，會(huì)使其功能喪失，造成工作窗口氣流速度降低或流向紊亂。生物安全柜使用后未按要求徹底消毒處理，或造成使用和維護(hù)人員間接接觸感染。設(shè)備長期關(guān)停，將會(huì)使部分電器元件老化從而失去正常功能。 ②預(yù)防控制措施正確選配生物安全柜，操作人員應(yīng)接受想換的操作、維護(hù)培訓(xùn)，日常操作和維護(hù)嚴(yán)格按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說明書進(jìn)行。每年請有檢測資質(zhì)的服務(wù)機(jī)構(gòu)對生物安全柜進(jìn)行風(fēng)速、氣流、塵埃粒子、紫外線強(qiáng)度等關(guān)鍵要素檢測，確保其正常性能。一但生物安全柜的使用造成污染，及時(shí)消毒。 （2）高壓滅菌器 ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別溶血性鏈球菌檢測過程中被病原菌污染的玻璃、耐高壓的實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)廢棄物要進(jìn)行高壓滅菌消毒才可移出實(shí)驗(yàn)室，沒有正確配備高壓滅菌，存在氣溶膠污染環(huán)境的隱患。在高壓消毒時(shí)，如果沒有按照壓力滅菌器的操作規(guī)程或使用說明書進(jìn)行操作、維護(hù)，可能使高壓滅菌器效果明顯降低或失效，失去去污染與無害化的作用。若長時(shí)間使用又不定期檢測滅菌效果，對其滅菌效果無從考證，可能產(chǎn)生功能缺損，存在滅菌不徹底從而引起污染的隱患。壓力鍋長期關(guān)停期間，如內(nèi)部水分不及時(shí)排干，將會(huì)使內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。 ②預(yù)防控制措施采用下排式高壓滅菌器，防止氣溶膠污染。操作人員持證上崗，規(guī)范正確操作，定期維護(hù)，確保高壓滅菌器正常性能,定期檢定、核查，做好使用記錄。對壓力滅菌器按照WS310.3《醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第3部分：清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，每次監(jiān)測化學(xué)指示物，監(jiān)控記錄溫度、壓力、時(shí)間等滅菌參數(shù)，每周進(jìn)行生物監(jiān)測，以保證滅菌質(zhì)量。 （3）個(gè)人防護(hù)用品 ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室不提供足夠數(shù)量的、符合質(zhì)量要求的防護(hù)服、防護(hù)眼罩、一次性乳膠手套、口罩和覆蓋足背的防滑鞋等，使用大小不合適的個(gè)人防護(hù)用品，個(gè)人防護(hù)用品穿戴、脫卸的程序、方法不符合要求，均可能造成人員感染或污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。 ②預(yù)防控制措施選擇正規(guī)、符合質(zhì)量要求的防護(hù)用品，使用前進(jìn)行必要的培訓(xùn)，按照規(guī)定的程序正確使用、脫卸。 （4）應(yīng)急救治設(shè)施和用品 ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室若沒有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品，或配備的急救用品種類不全、不合適或過期，這導(dǎo)致急用是無法發(fā)揮作用。 ②風(fēng)險(xiǎn)控制措施在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)正確配置洗眼器，確保功能正常。配備的75%乙醇、碘附或其他消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)并在有效期內(nèi)使用，專人負(fù)責(zé)管理，定期維護(hù)、清理、更新。 （5）消毒滅菌劑 ①主要風(fēng)階點(diǎn)識(shí)別消毒劑產(chǎn)品無生產(chǎn)許可證、過期、配制方法或濃度不正確、種類選擇不合理，將會(huì)導(dǎo)致消毒效果降低、生物滅活能力降低或?qū)ξ锲犯g性增加、對皮膚造成刺激等問題。 ②預(yù)防控制措施選擇符合國家標(biāo)準(zhǔn)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，選擇合適的消毒劑，按照規(guī)定的消毒方法、消毒時(shí)間、消毒濃度（劑量）進(jìn)行消毒，避免使用過期產(chǎn)品；消毒過程中消毒人員應(yīng)做好必要的個(gè)體防護(hù)，防止發(fā)生意外。根據(jù)溶血性鏈球菌生物學(xué)特點(diǎn)，選用70%?75%酒精和稀釋10?25倍、50?100倍、200倍的施康消毒劑I（主要成分為次氯酸鈉）作為實(shí)驗(yàn)室常用消毒劑。 7.管理體系的風(fēng)險(xiǎn) （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別管理體系（包括應(yīng)急預(yù)案）是否健全和完善，是否符合實(shí)際管理要求，程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和操作規(guī)程是否科學(xué)和具有可操作性，是能否確保生物安全的主要因素。如果組織結(jié)構(gòu)不健全、設(shè)置不合理，體系文件與實(shí)際工作不匹配，以及部門職責(zé)不清或銜接不當(dāng)?shù)龋投伎赡軒戆踩L(fēng)險(xiǎn)。 （2）預(yù)防控制措施定期開展對管理體系的評審，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)修正、完善，以確保生物安全管理體系持續(xù)有效運(yùn)行. （四）工作人員的風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)防控制措施 1.人員數(shù)量和素質(zhì) （1）人員數(shù)量 ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別人員過少會(huì)因缺少相互提示監(jiān)督或因工作量增大而導(dǎo)致搡作過程中工作失誤增加，風(fēng)險(xiǎn)增加。② 預(yù)防控制措施采樣和檢測人員數(shù)量應(yīng)與工作量相匹配,盡量有2名工作人員同時(shí)進(jìn)行采樣和檢測工作。 （2）人員結(jié)構(gòu) ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室檢測人員職稱分布不合理，新進(jìn)人員沒有高資歷人員帶教操作，不能很好應(yīng)對意外亊件，風(fēng)險(xiǎn)增加。 ②預(yù)防控制措施實(shí)臉室檢測人員年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合理，新進(jìn)人員應(yīng)由高資歷人員帶教或監(jiān)督操作， （3）職業(yè)操守 ①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別溶血性鏈球菌檢測存在較大的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，若責(zé)任心不強(qiáng)的人員參與該項(xiàng)工作，則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會(huì)安定的可能性較大。 ②預(yù)防控制措施加強(qiáng)職業(yè)道徳教育，培養(yǎng)工作責(zé)任心。 2.健康管理 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。若實(shí)驗(yàn)室檢測相關(guān)人員出現(xiàn)呼吸道感染癥狀、機(jī)體免疫力低下或其他不適合工作的狀況，職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)增加。 （2）預(yù)防控制措施建立健康申報(bào)制度，遇有人員出現(xiàn)呼吸道感染癥狀、機(jī)體免疫力底下及其他不適合工作的情況時(shí)，應(yīng)及時(shí)向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告并暫停工作；裸露皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等應(yīng)用防水材料嚴(yán)密覆蓋。如接觸物的傳染性大，應(yīng)加強(qiáng)感染防護(hù)。 3.人員資質(zhì) （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別檢測人員不具備衛(wèi)生檢測相關(guān)學(xué)歷教育背景，不熟悉溶血性鏈球菌檢測方法及操作規(guī)范，執(zhí)行相關(guān)的專業(yè)知識(shí)培養(yǎng)和考核，并未獲得上崗證，無法保證工作質(zhì)量和安全。 （2）預(yù)防控制措施檢測人員必須是檢驗(yàn)或相關(guān)專業(yè)畢業(yè)，經(jīng)過上崗培訓(xùn)和在崗持續(xù)培訓(xùn)，持證上崗。 4.生物安全培訓(xùn)要求 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別檢測人員，輔助人員，后勘保障人員，進(jìn)修實(shí)習(xí)人員上崗前沒有接受嚴(yán)格的生物安全，以及相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易造成生物安全事故的發(fā)生。 （2）預(yù)防控制措施檢測人員、輔助人員，后勤保障人員毎年參加本中心組織的生物安全知識(shí)或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。上崗前熟練掌握生物安全儀器設(shè)備、設(shè)施操作技術(shù)，具備相關(guān)的安全防護(hù)能力。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員參與實(shí)臉活動(dòng)前必須進(jìn)行生物安全知識(shí)的培訓(xùn)，在帶教老師的監(jiān)督下工作。 5.應(yīng)急事件處理能力 （1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)臉人員上崗前沒有接受實(shí)驗(yàn)室意外亊故處理、職業(yè)暴露后預(yù)防等突發(fā)亊件處置的培訓(xùn)，一且發(fā)生意外亊件，就不能有效地進(jìn)行早期處理和控制生物安全亊件。 （2）預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照《實(shí)驗(yàn)室意外亊故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度》和《病原傲生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案》中規(guī)定的要求進(jìn)行應(yīng)急亊件的處置，報(bào)告和記錄。 (五）實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動(dòng)中的風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)防控制措施 1.主要的實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動(dòng) （1）實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員對實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的維護(hù)、維修、鑒定/校準(zhǔn)、檢測驗(yàn)證（如主要設(shè)施設(shè)備的檢測驗(yàn)證)和更換(如高效過濾器等的更換）等。 （2）實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員對實(shí)驗(yàn)室及公共環(huán)境的保沽、實(shí)驗(yàn)器材的清洗消毒。 （3）實(shí)驗(yàn)室外人員參觀實(shí)驗(yàn)室和上級(jí)部門對實(shí)驗(yàn)室的檢査。 （4）任何其他人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)外的行為。 2.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別 （1）上述人員進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室從事相關(guān)活動(dòng)，特別是不慎打翻、打破標(biāo)本管或損壞儀器零部件等情況，對能會(huì)引起實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險(xiǎn)。 （2）實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過程中某些人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室參觀，存在影響實(shí)驗(yàn)活動(dòng)正常運(yùn)行或者導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞的風(fēng)險(xiǎn)。 3.預(yù)防控制措施 （1）實(shí)行人員準(zhǔn)入、登記制度。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室從事檢測活動(dòng)前，必須先進(jìn)行生物安全和實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度的培訓(xùn)。若中心實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員確需進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)活動(dòng)，或上級(jí)部門需要進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢査，應(yīng)有中心實(shí)驗(yàn)室人員陪同。 （2）實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員必須要有相應(yīng)的專業(yè)知識(shí)應(yīng)對其進(jìn)行生物安全培訓(xùn)，提供安全指南，實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)協(xié)助、指導(dǎo)和規(guī)范進(jìn)入人員在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的活動(dòng)并對其安全行為進(jìn)行監(jiān)督，進(jìn)入人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)管理規(guī)定，以確保人員和環(huán)境安全。 （3）進(jìn)入人員未經(jīng)許可絕對不能私自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有標(biāo)志的危險(xiǎn)品，決不能將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實(shí)驗(yàn)區(qū)。 （4）在生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備維護(hù)維修過程中，若發(fā)生意外事件，應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人根據(jù)造成的事故進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估，采取應(yīng)對措施。 （5）當(dāng)需要更換HEPA過濾膜或高效過濾器時(shí),應(yīng)先對高效過濾器，HEPA過濾膜等作原位消毒后，專業(yè)人員才進(jìn)行更換。 （6）為確保自己和他人的安全，禁止未穿防護(hù)服的人員隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域。同時(shí)也禁止穿防護(hù)服的人員走出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域。 （7）對實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、設(shè)備進(jìn)行維護(hù)工作時(shí)動(dòng)作輕柔，避免產(chǎn)生氣溶膠。 （8）離開實(shí)驗(yàn)室前，必須正確洗手。 (六)被誤用和惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)與預(yù)防控制措施 1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別 陽性標(biāo)本未明確標(biāo)識(shí)并未實(shí)施雙人雙鎖管理，實(shí)驗(yàn)活動(dòng)結(jié)束后不及時(shí)消毒操作場所，工作人員在不知情的情況下可能誤用標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備等，導(dǎo)致人員感染和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染、人員受傷或設(shè)施設(shè)備損壞等事故。 2.預(yù)防控制措施 （1）實(shí)行嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。 （2）所有獲得批準(zhǔn)進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室工作的人員，必須嚴(yán)格按規(guī)程操作實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備，以及其他一切實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，不得私自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何不熟悉物品。 （3）發(fā)生事故時(shí)必須及時(shí)報(bào)告并作必要的處理和記錄。 （4）實(shí)驗(yàn)所用材料和試劑等必須有明確的標(biāo)識(shí)。 （5）陽性標(biāo)本嚴(yán)格實(shí)施雙人雙鎖管理，上送的陽性標(biāo)本必須經(jīng)中心蓋章批準(zhǔn)，攜帶“可感染人類的高級(jí)致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸許可證”，由專車運(yùn)送，并由專業(yè)人員全程護(hù)送。 (七)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示 鏈球菌屬的感染曾經(jīng)是全球最常見的實(shí)驗(yàn)室感染。1969年、1976年曾報(bào)道67起、78起、占實(shí)驗(yàn)室感染的2.3%和2.0%。因此，工作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室相關(guān)規(guī)定，做好個(gè)人防護(hù)和規(guī)范操作，防止職業(yè)暴露。 三、實(shí)驗(yàn)室理化因素風(fēng)險(xiǎn)評估及安全防護(hù)措施 （一）紫外線 1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傳遞窗、生物安全柜、BSL-2實(shí)驗(yàn)室均使用紫外線燈進(jìn)行物體表面消毒。紫外線波長為250?280nm,主要影響眼晴和皮膚，引起急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼疾病，還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線燈開啟時(shí)人員在不知情的情況下進(jìn)入可受到傷害。 2.安全防護(hù)措施在實(shí)驗(yàn)室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特別是眼部。生物安全柜表面固定紫外線危害的標(biāo)識(shí)，提醒實(shí)驗(yàn)人員小心紫外線危害。在進(jìn)行紫外線消毒時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員盡量遠(yuǎn)離消毒區(qū)域，基本可以規(guī)避紫外線對人體的危害。 （二）輻射 1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別輻射源或輻射事故可以間接導(dǎo)致病原微生物屏障系統(tǒng)的破壞，增加實(shí)驗(yàn)人員被病原微生物感染的風(fēng)險(xiǎn)。 2.安全防護(hù)措施實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遠(yuǎn)離輻射源，如果無法避開，則應(yīng)采取物理隔離措施，防止輻射源對檢測工作和人員健康產(chǎn)生影響。本中心實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部和周邊建筑群均沒有輻射源，所以輻射風(fēng)險(xiǎn)基本不用考慮。 （三）施康清洗消毒劑Ⅰ 1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別施康淸洗消毒劑I屬于含氯消毒劑，有效氯的含量為4.55%-5.55%，次氯酸鈉為主要?dú)⒕蜃?。含氯的消毒液?huì)殘留在空氣中不揮發(fā)，長期使用會(huì)使人感到頭疼、惡心，剌激黏膜，對于有體質(zhì)過敏的人，還容易引發(fā)過敏、哮喘疾病等。高濃度的含氯消毐劑對人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的刺激作用?？墒谷肆鳒I、咳嗽，并刺激皮膚和黏膜，嚴(yán)重者可發(fā)生氯氣中毒。急性中毒者出現(xiàn)躁動(dòng)、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀，甚至因窒息而死。 2.安全防護(hù)措施按照使用說明，根據(jù)消毒對象不同而配制不同的稀釋倍數(shù)，避免使用不必要的髙濃度的消毒液，稀釋和使用時(shí)戴好手套，消毒后可及時(shí)開窗通風(fēng)，基本可規(guī)避消毒液對人體的危害。 （四）其他 1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的照明和聲音（生物安全柜等）有可能因強(qiáng)光和噪聲對人員造成損害。 2.安全防護(hù)措施 對實(shí)驗(yàn)室的照明和聲音等參數(shù)進(jìn)行檢測，確保合格，避免強(qiáng)光和噪聲對人員的損害。 四、實(shí)驗(yàn)室火災(zāi)風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)防控制措施 （一）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別 （1）超負(fù)荷用電，電線過長。 （2）電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，例如電纜的絕緣層破舊或損壞。 （3）用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)火災(zāi)。 （4）儀器設(shè)備在不使用時(shí)未關(guān)閉電源。 （5）使用的儀器設(shè)備不是專為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)。 （6）易燃、易煤品處理、保存不當(dāng)?shù)取?（7）不相容化學(xué)品沒有正確隔離。 （8）在易燃物品和蒸氣附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。 （9）通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。 （二）預(yù)防控制措施 實(shí)驗(yàn)室采取以下預(yù)防控制措施避免火災(zāi)發(fā)生，保證發(fā)生火災(zāi)后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室。 （1）定期檢查電器插座，電線絕緣層是否完好，保證用電負(fù)荷，對易燃易爆等危險(xiǎn)品進(jìn)行有效區(qū)域隔離。 （2）實(shí)驗(yàn)室配備滅火器。放置在易取的地點(diǎn)，擺放部位張貼滅火器標(biāo)識(shí)，該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi)，幫助人員撤離火場；對滅火器進(jìn)行定期檢查和維護(hù)，確保其有效使用。 （3）實(shí)驗(yàn)室須裝設(shè)應(yīng)急燈，所有出口都有黑暗中可見的“緊急出口”標(biāo)識(shí)。當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時(shí)，實(shí)驗(yàn)室所有出口的鎖必須處于開啟狀態(tài)，出口設(shè)計(jì)保證在不經(jīng)過高危險(xiǎn)區(qū)域就能逃脫，所有出口都能通向一個(gè)開放的空間。 （4）走廊、流通區(qū)域不得放置障礙物，不受人員流動(dòng)和滅火設(shè)備移動(dòng)的影響。 （5）在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話標(biāo)識(shí)。實(shí)驗(yàn)室每年對工作人員進(jìn)行消防知識(shí)培訓(xùn)，包括消防器材的使用，火災(zāi)發(fā)生時(shí)的應(yīng)急行動(dòng)等。 五、自然災(zāi)害風(fēng)險(xiǎn)評估與安全防護(hù)措施 自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。 (―)水災(zāi) 1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別水災(zāi)可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性材料隨水外溢。 2.安全防護(hù)措施 （1）在安全手冊中制訂《實(shí)驗(yàn)室緊急事件應(yīng)急預(yù)案》，并對所有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)。 （2）實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生水災(zāi)報(bào)警時(shí)，應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性物質(zhì)和人員的轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、中心主任根據(jù)條件及時(shí)采取對策，第一時(shí)間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護(hù)措施，并在受過訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員陪同下，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室完成菌毒種和人員的安全轉(zhuǎn)移。 (二)地震 1.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別發(fā)生地震等自然災(zāi)害會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞。導(dǎo)致人員傷害和實(shí)驗(yàn)室感染性材料外溢的風(fēng)險(xiǎn)。 2.安全防護(hù)措施實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取措施降低自然災(zāi)害帶來的風(fēng)險(xiǎn)，保證災(zāi)害發(fā)生后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室，減少對人員和環(huán)境的影響。發(fā)生地震后，首先設(shè)立距實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)20m范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次，對封鎖區(qū)進(jìn)行消毒，然后由專業(yè)人員在做好個(gè)人防護(hù)的前提下對實(shí)驗(yàn)內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理，清理到樣品保存地點(diǎn)。如果保藏樣品的容器沒有被破壞，可把它安全轉(zhuǎn)移到其他安全的實(shí)驗(yàn)室存放：如果保藏樣品的容器已被破壞和發(fā)生外溢，應(yīng)立即用可靠方法進(jìn)行徹底消毒滅菌。 六、生物安全及其他緊急事件（事故）處理預(yù)案 (―)實(shí)驗(yàn)室生物安全事件(事故)處理措施 （1）當(dāng)生物安全柜或潔凈實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)持續(xù)正壓時(shí)，室內(nèi)人員應(yīng)立即停止操作，通知運(yùn)行保障人員采取措施恢復(fù)負(fù)壓。如果不能及時(shí)恢復(fù)和保持負(fù)壓，應(yīng)停止實(shí)驗(yàn)，按規(guī)程退出。發(fā)生此類事故或發(fā)生意外停電,造成具有傳染性物質(zhì)暴露潛在危險(xiǎn)的事故和污染時(shí)，工作人員除了采取緊急措施外，立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人，組織對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。 （2）離心過程中離心管破裂時(shí)，應(yīng)馬上關(guān)閉電源，讓離心機(jī)停止工作，并靜止30min。然后緩慢打開離心機(jī)蓋，將離心杯平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，用1%的次氯酸鈉消毒液灌入離心杯腔體中消毒30min，然后棄去消毒液和離心管碎片，將離心杯清洗后擦干。 （3）發(fā)生污染物潑濺或溢出時(shí)，立即用清潔布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上10-25倍稀釋的施康消毒液，作用至少30min方可清理全部污染物，用消毒劑擦拭污染區(qū)域。所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如發(fā)生大范圍污染物擴(kuò)散事故時(shí)，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場。待其查清情況，確定消毒方案，組織對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。 （4）發(fā)生空氣污染時(shí)可采用低溫蒸汽甲醛氣體消毒。甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。 （二）其他緊急事件（事故）處理措施 在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救助人員。應(yīng)事先告訴他們哪些實(shí)驗(yàn)室有潛在的感染性物質(zhì)，讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室人員要熟悉緊急撤離的情況及緊急撤離的路線標(biāo)識(shí)，在實(shí)驗(yàn)室發(fā)生不可控制的火災(zāi)、水災(zāi)、爆炸或其他危險(xiǎn)情況時(shí)，為確保工作人員的安全，要進(jìn)行緊急撤離。所有實(shí)驗(yàn)室人員需了解緊急撤離的行動(dòng)計(jì)劃、撤離計(jì)劃和緊急撤離的集合地點(diǎn)，每年至少參加一次緊急撤離演習(xí)，包括急救設(shè)備使用和采取相應(yīng)急救措施。 （三）生物安全及其他緊急事件（事故）報(bào)告和記錄 （1）發(fā)生生物安全及其他緊急事件時(shí)，在緊急處理的同時(shí)必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會(huì)報(bào)告。 （2）對于生物安全事件必須進(jìn)行登記，記錄發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及詳細(xì)經(jīng)過、處理方法等。 七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險(xiǎn)管理 （一）生物安全風(fēng)險(xiǎn)評估依據(jù)標(biāo)準(zhǔn) 風(fēng)險(xiǎn)評估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風(fēng)險(xiǎn)控制措施、安全操作規(guī)程等均應(yīng)以國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)、世界衛(wèi)生組織、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織等機(jī)構(gòu)或行業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南、標(biāo)準(zhǔn)等為依據(jù)。 （二）危險(xiǎn)發(fā)生的概率評估（見表7-10）表7-10 溶血性鏈球菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危險(xiǎn)發(fā)生的概率評估序號(hào)潛在危險(xiǎn)因素危害程度發(fā)生概率固有風(fēng)險(xiǎn)措施合理性殘留風(fēng)險(xiǎn)風(fēng)險(xiǎn)可控程度1樣品運(yùn)輸過程中容器意外側(cè)翻、泄露、破裂造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控2樣品的接收、開啟及加樣等常規(guī)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中產(chǎn)生的氣溶膠高度較大可能高度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控3離心、加樣等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中意外事故造成盛裝標(biāo)本容器破裂、溢出瞬間產(chǎn)生的氣溶膠高度可能高度合理高風(fēng)險(xiǎn)可控4檢測未經(jīng)滅活的樣品對儀器與環(huán)境造成的污染中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控5標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料、設(shè)施設(shè)備等被誤用的風(fēng)險(xiǎn)中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控6陽性標(biāo)本被惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)高度較小可能高度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控7實(shí)驗(yàn)器材未經(jīng)規(guī)范消毒造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控8廢棄物處理不當(dāng)造成病原微生物擴(kuò)散中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控9滅菌裝置不符合要求，滅菌不徹底造成污染中度較小可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控10檢測人員和工勤人員被銳器誤傷造成職業(yè)暴露高度可能高度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控11檢測人員個(gè)人防護(hù)不當(dāng)造成的病原微生物擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控12非檢測人員、進(jìn)修實(shí)習(xí)等外來人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的不當(dāng)